核因子κB的小干扰RNA防治自体移植静脉再狭窄的实验研究

目的 探讨核因子κB(NF-κB)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对大鼠自体静脉移植术后血管内膜增殖及相应炎性细胞因子表达的影响.方珐雄性Wistar大鼠80只,随机分为空白组(A组,n=10);自体静脉移植组(B组,n=18);空载体组(阴性质粒脂质体医用蛋白胶复合物转染移植静脉,C组,n=26)和基因转染组(NF-κB siRNA阳离子脂质体医用蛋白胶复合物转染自体移植静脉,D组,n=26).B、C及D组需制作大鼠自体颈外静脉--腹主动脉移植模型,每组4个时点(3,7,14,21 d),相应时间点取移植静脉观察病理形态学变化,免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA),PCR测定单核细胞趋化因子(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA含量,Western blot测定NF-κB p65蛋白的表达.结果 自体静脉移植术后,B、C和D组移植静脉血管桥均出现内膜增生变厚,新生内膜有大量PCNA阳性细胞,中膜平滑肌细胞增生活跃.术后3 d,B组和C组MCP-1mRNA及TNF-αmRNA表达水平明显高于A组(P<0.05),但D组水平明显低于C组(P<0.05).术后7 d,B、C组NF-κB p65蛋白表达水平明显高于A组(P<0.05),与C组相比,D组NF-κB p65蛋白水平明显降低(P<0.05).结论 NF-κB的基因表达产物和MCP-1mRNA、TNF-αmRNA的表达有一定相关性,自体静脉移植术后新生内膜增生及炎性细胞因子表达在不同时相点呈动态变化.转染NF-κB siRNA阳离子脂质体复合物可抑制NF-κB的表达,减少MCP-1及TNF-αmRNA的表达,从而抑制移植静脉内膜增生和VSMC增殖,减轻再狭窄.     

脂质体转染NF-κB诱捕物寡核苷酸抑制大鼠静脉桥血管内膜增生

目的 探讨转染NF-κB诱捕物寡核苷酸(decoy ODN)对自体移植静脉内膜增生的影响.方法 制作20 只自体颈部动脉上静脉移植SD大鼠模型,无序ODN对照组、decoy ODN实验组各10 只.移植前,实验组移植静脉行脂质体包裹的NF-κB decoy ODN溶液浸泡转染,对照组行脂质体包裹的无序ODN溶液浸泡.移植术后4 周取出移植血管,利用病理学、凝胶电泳迁移率迟滞分析(EMSA)和RT-PCR 分别检测移植血管内膜厚度、管腔狭窄度、血管组织NF-κB转录活性和TNF-α mRNA 表达情况.结果 实验组移植血管内膜厚度、管腔狭窄度、NF-κB转录活性、TNF-α mRNA 表达较对照组明显减小或减少(均P＜0.01).结论 NF-κB decoy ODN可有效抑制静脉桥血管NF-κB的激活从而抑制移植静脉内膜的增生.     

洛伐他汀对TNF-α诱导人脐静脉内皮细胞MCP-1和IL-10表达的影响

目的：观察洛伐他汀(LVT)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVECs)后单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)和白细胞介素-10 (IL-10)表达的影响,探讨其抗动脉粥样硬化(AS)的可能机制。方法：体外常规培养HUVECs,分为对照组,用含10% FBS的RPMI 1640培养液培养;TNF-α处理组,用含10% FBS的RPMI 1640培养液+TNF-α (20 μg/L) 处理;应用活性氧检测试剂盒检测活性氧含量;LVT干预组,用含10% FBS的 RPMI 1640 培养液+TNF-α (20 μg/L)+LVT (10 μmol/L) 处理。实时定量RT-PCR方法检测各组细胞MCP-1和IL-10 mRNA的表达;Western blotting方法检测各组HUVECs内MCP-1、IL-10和NF-κB蛋白表达。结果：与对照组相比较,TNF-α处理组ROS含量明显增高 (P<0.05);与TNF-α处理组比较,LVT干预组ROS含量明显降低(P<0.05);与对照组比较,TNF-α处理组MCP-1和NF-κB mRNA及蛋白表达水平明显增高(P<0.05),而IL-10 mRNA和蛋白的表达水平明显降低(P<0.05);与TNF-α处理组比较,LVT干预组细胞MCP-1和NF-κB mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而IL-10 mRNA和蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。结论：LVT抑制HUVECs中TNF-α诱导的MCP-1 mRNA和蛋白上调,增强IL-10蛋白表达。LVT可能通过NF-κB途径对抗炎症反应从而防止AS的形成。
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核转录因子κB p65和骨桥蛋白在子宫内膜异位症中的表达及相关性研究

背景 目前子宫内膜异位症（EMs）的病因和发病机制尚不清楚,治疗措施有限,严重影响女性的身心健康。目的 探讨核转录因子κB（NF-κB）p65和骨桥蛋白（OPN）在EMs组织中的表达及二者的相关性。方法 收集2013年1-12月于宁夏医科大学总医院妇产科因EMs行手术的患者35例（病例组）,于术中或术后确诊,其中增生期17例,分泌期18例;收集同期行双侧输卵管结扎手术并经病理科诊断排除EMs的正常子宫内膜者30例作为对照（正常子宫内膜组）,其中增生期15例,分泌期15例。分别采用免疫组化SP法、RT-PCR法检测正常子宫内膜组、EMs在位内膜组和EMs异位内膜组NF-κB p65、OPN及其mRNA的表达。结果 NF-κB p65、OPN主要表达于子宫内膜腺上皮细胞的胞质中,极少数表达于间质细胞中。EMs在位、异位内膜组NF-κB p65和OPN表达高于正常子宫内膜组,EMs异位内膜组高于EMs在位内膜组（P＜0.05）。3组增生期及分泌期NF-κB p65的表达比较,差异无统计学意义（P＞0.05),EMs在位、异位内膜组分泌期OPN的表达均高于增生期（P＜0.05）;EMs在位内膜组和EMs异位内膜组中NF-κB 与OPN的表达均呈正相关（r在位=0.88,r异位=0.78,P＜0.05)。NF-κB p65、OPN mRNA在EMs在位、异位内膜组中的表达高于正常子宫内膜组,EMs异位内膜组高于EMs在位内膜组（P＜0.05）。结论 NF-κB p65、OPN及其mRNA在EMs患者在位、异位内膜组织的表达明显增强,并呈正相关,提示二者极有可能通过相互激活进而诱导EMs的发生、发展。     

罗格列酮联合顺铂对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的  探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂罗格列酮（ROZ）与顺铂联合应用对子宫内膜癌KLE细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法  构建子宫内膜癌裸鼠模型。成瘤后,将其随机分成6组：生理盐水对照组（A组）,顺铂1mg/kg（B组）,顺铂3mg/kg（C组）, ROZ 50mg/kg（D组）,顺铂1mg/kg＋ROZ 50mg/kg（E组）,顺铂3mg/kg＋ROZ 50mg/kg（F组）。顺铂采取隔天腹腔注射给药,ROZ采取每天灌胃给药。每隔3d测量肿瘤体积,观察药物对肿瘤生长的影响,绘制肿瘤生长曲线。实验第38天处死裸鼠,分离皮下移植瘤并称量其质量计算抑瘤率;免疫组化SP法检测种植瘤组织中核转录因子κB（ NF-κB）、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因（PTEN）蛋白的表达。结果  B、C、D、E、F组抑瘤率分别为：24.41% 、43.34%、49.67%、78.02%、84.78%,与A组比较差异均具有统计学意义（P<0.05）。E、F组抑制子宫内膜癌的作用强于B、C、D组。免疫组化结果显示PTEN表达增强, NF-κB表达减弱（P<0.05）。结论  ROZ、顺铂可抑制子宫内膜癌移植瘤生长,两者联合应用具有协同作用。     

自体血管移植后内膜增生与eNOS mRNA表达关系的实验研究

目的探讨自体血管移植后内膜增生的机制以及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和内膜增生的关系。方法建立自体动脉静脉血管搭桥模型,分成静脉组、游离动脉组和非游离动脉组,分别于移植后1-10周切取移植段血管,进行组织形态学检查观察内膜增生情况,以及运用原位杂交分子生物学方法检测血管壁eNOS mRNA的表达。结果静脉组内膜增生最为明显,而非游离动脉组无明显内膜增生。同一时间点静脉组eNOS mRNA表达信号明显低于游离动脉组（6周内）（P〈0.01）,而非游离动脉组eNOS mRNA表达信号与正常血管无差别。静脉组和游离动脉组血管壁eNOS mRNA表达与血管搭桥后内膜增生显著相关。结论静脉桥eNOS mRNA表达比动脉桥弱是静脉桥内膜增生明显的重要机制。     

蛋白激酶C-α在兔自体移植静脉中的表达

目的观察蛋白激酶C-α（PKC-α）在兔自体静脉移植中的动态表达,探讨其与移植血管内膜增生的关系。方法采用兔自体颈静脉移植模型,25只新西兰大白兔随机分为5组,其中手术Ⅰ～Ⅳ组分别于术后3,7,14,28d取材,假手术组（SO组）作为对照组。应用Real-TimePCR法、WesternBlot法分别检测各组中PKC-dmRNA及其蛋白的表达变化;应用免疫组织化学法检测各组平滑肌细胞中PKC-α的表达。结果与对照组比较,PKC-αmRNA及其蛋白在术后3d时,表达均明显升高（P〈0．01）,而后逐渐降至正常。免疫组织化学检测PKC-α结果与Weatern蛋白印迹法一致。结论PKC-α可能参与了自体静脉移植后的血管平滑肌增生过程中的信号转导。     

C-myc siRNA抑制大鼠自体移植静脉再狭窄的研究

目的静脉移植术后c-myc基因持续高表达是导致血管内膜增生进而再狭窄的原因之一。文中探讨通过局部给药方法给予针对c-myc基因的小分子干扰RNA(siRNA)对自体移植静脉内膜增生的影响。方法建立SD大鼠自体颈外静脉-颈总动脉移植模型。32只大鼠按移植静脉外膜局部给药不同处理方式方法分为未处理组(No treatment组)、凝胶组(Gel组)、无义序列组(scramble sequence group,SCR组)、c-myc RNA干扰组(C-myc siRNA组),于术后3周处死大鼠取移植静脉,光学显微镜下测量内膜厚度,免疫组化染色检测移植静脉增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、c-myc蛋白的表达,Q-RT-PCR检测移植静脉c-myc mRNA的含量。结果 C-myc siRNA组内膜厚度[(15.0±2.2)μm]显著低于No treatment组[(58.3±8.3)μm]、SCR组[(60.5±6.1)μm]和Gel组[(63.5±5.4)μm]。C-myc siRNA组静脉内膜区和中膜区PCNA阳性细胞率显著低于SCR组[分别为(8.4±2.2)%vs(68.5±5.0)%,P<0.05和(15.0±3.1)%vs(55.2±7.5)%,P<0.05],c-myc蛋白阳性细胞率C-myc siRNA组显著低于SCR组[(30.6±2.6)%vs(48.5±3.5)%,P<0.05]。C-myc siRNA组移植静脉中c-myc mRNA的表达相对量显著低于SCR组(0.48±0.05 vs 1.00±0.12,P<0.05)。结论C-myc siRNA能抑制移植静脉中平滑肌细胞的增殖,抑制内膜的增生,减轻移植静脉再狭窄程度。     

B7特异性RNA干扰对皮肤移植的影响

目的探讨RNA干扰技术阻断B7／CD28共刺激信号对小鼠异体皮肤移植排斥反应的影响。方法设计并合成B7特异性siRNA,在脂质体的介导下转染树突状细胞,转染后72h收集细胞,用蛋白印迹法检测B7-1、B7-2蛋白的表达。在小鼠异体皮肤移植前7d,经静脉将转染B7特异性siRNA的DC输入小鼠体内（DC转染组）,同时设立同种异体移植对照组、同系移植对照组、环孢素A（CsA）治疗组（术后每日皮下注射CsA5mg／kg）和未转染DC组（移植前输注未转染DC）,观察各组移植皮瓣的存活时间和排斥反应情况,并用MTT法检测混合淋巴细胞增殖反应,术后1个月观察迟发性超敏反应情况。结果Western Blot结果显示转染72h后,siRNA1对B7-1蛋白表达的抑制率为（77.2±6.26）％;siRNA2对B7-2蛋白表达的抑制率为（73.3±5.42）％。与同种异体移植对照组和未转染DC组比较,DC转染组移植皮瓣成活时间明显延长（P〈0.01）,组织排斥反应程度较轻,混合淋巴细胞反应和DTH反应显著降低（P〈0.01）。结论聊特异性siRNA可明显抑制树突细胞B7基因的表达,以阻断B7／CD28共刺激通路,抑制小鼠皮肤移植排斥反应,为进一步研究siRNA诱导免疫耐受提供了新方法。     

内皮型一氧化氮合酶基因转染在兔颈静脉移植血管桥中的表达

目的:研究腺病毒载体介导的人内皮型一氧化氮合成酶基因在兔自体移植颈静脉中的表达,寻找预防移植血管再狭窄的方法.方法:建立兔颈外静脉颈总动脉旁路移植模型,18只兔随机等分为3组,A:对照组,B:空载腺病毒液感染组,C:eNOS基因转染组.在兔颈外静脉颈总动脉旁路移植术中,分别应用空载腺病毒液或AdCMVeNOS血管桥内注入法感染移植静脉1 h.术后4 wk,应用多聚寡核苷酸探针原位检测方法检测外源性基因mRNA的表达;免疫组织化学染色方法检测eNOS蛋白的定位;HE及弹力纤维染色后,应用计算机图像分析系统检测移植静脉内膜、中膜增生情况.结果:人内皮型一氧化氮合成酶基因在自体移植静脉中表达出相应的mRNA和蛋白质;术后4wk,与对照组相比,空载腺病毒液感染组移植静脉内膜和中膜厚度无明显变化;eNOS基因转染组移植静脉内膜和中膜厚度分别减少42.3%,13.5%,内膜厚度/中膜厚度比值(I/M)减少34.6%.结论:腺病毒载体介导的人内皮型一氧化氮合成酶基因成功转染兔自体移植颈静脉中并有效表达,eNOS基因具有防治移植静脉内膜增生作用.     

不同剂量地塞米松对脓毒症小鼠肺组织糖皮质激素受体-α表达及肺损伤的影响

目的 观察不同剂量地塞米松(Dex)对脓毒症小鼠急性肺脏损伤的影响。方法 92只雄性昆明种小鼠随机分为假手术组(12只)、脓毒症组(20只)及Dex干预组(生理剂量组、应激剂量组和大剂量组,各20只)。采用盲肠结扎穿孔术复制脓毒症模型。术后24h时观察肺组织病理学改变,免疫组织化学法检测肺组织中糖皮质激素受体-α(GR-α)和核转录因子-κB(NF-κB)蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测肺组织中GR-α 和NF-κB mRNA的表达,酶联免疫吸附法测定血浆中TNF-α、IL-1β水平。 结果①与脓毒症组相比,Dex干预组肺损伤均有所减轻,但仅其中的生理剂量组和应激剂量组明显减轻(P均＜0.05)。②生理剂量组和应激剂量组肺组织GR-α蛋白的表达均高于脓毒症组(P均＜0.05)。③生理剂量组和应激剂量组肺组织GR-α mRNA表达水平高于脓毒症组和大剂量组(P＜0.05);Dex干预组肺组织NF-κB mRNA表达与脓毒症组相比,差异无统计学意义(P＞0.05 )。④生理剂量组和应激剂量组血浆TNF-α、IL-1β含量低于脓毒症组和大剂量组(P＜0.05)。结论 在脓毒症小鼠模型中,生理剂量和应激剂量Dex均可上调肺组织GR-α的表达,减轻炎症反应与肺损伤程度,其作用均明显优于大剂量Dex。     

类风湿关节炎患者骨代谢相关基因表达及信号通路的变化

［摘要］目的: 探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)患者骨代谢相关基因骨保护素、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)及核转录因子κB （NF κB）、骨形态发生蛋白（BMP）信号通路的表达。方法: 应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测 40例RA患者和32例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)中骨保护素、RANKL、NF κB p50、NF κB p52、NF κB p65、BMP 2、BMP 9 的mRNA表达水平,比较两组骨保护素/RANKL比值,并分析差异有统计学意义的指标与红细胞沉降率（ESR）、血清C 反应蛋白（CRP）和DAS28评分等疾病活动指标的相关性。另选取10例初发RA患者和10例健康对照者,检测其 PBMC 中NF κB p65 mRNA的水平。 结果： 与健康对照者相比,RA患者RANKL mRNA相对表达量明显上升(P<0.01),骨保护素/RANKL比值明显下降(P<0.01),NF κB p65 mRNA相对表达量明显下降(P<0.01),骨保护素、NF κB p50、NF κB p52、BMP 2及BMP 9的 mRNA相对表达量两组间差异无统计学意义,RANKL、NF κB p65、骨保护素/RANKL与血ESR、血清CRP和DAS28评分无相关性。与健康对照组相比,初发RA患者的NF κB p65 mRNA表达量增高(P<0.05)。结论： RA患者PBMC表达破骨指标增加,并可能通过NF κB信号通路影响骨代谢。     

NDRG2基因通过去泛素化酶Zc3h12d在NF-κB转导通路中的调控机制

目的：研究NDRG2基因与去泛素化酶Zc3h12d在NF-κB转导通路中的调控机制。方法：采用LPS刺激人支气管气道上皮16HBE细胞株来构建炎性刺激时气道黏液高分泌模型，用瞬时转染过表达NDRG2基因和Zc3h12d siRNA干扰下调16HBE细胞，将细胞分成LPS+瞬时转染过表达NDRG2组(A组)、LPS+瞬时转染过表达NDRG2+Zc3h12d siRNA组(B组)、LPS+瞬时转染Zc3h12d siRNA组(C组)、LPS+转染空白载体组(D组)，以未做任何处理的16HBE细胞作为对照组(E组)。反转录PCR检测气道黏蛋白(mucin，MUC)5AC mRNA的表达水平，ELISA法检测IL-1β、IL-6等炎症因子及MUC5AC的分泌水平，Western印迹检测Zc3h12d和NF-κB p65的分泌水平，激光共聚焦法检测16HBE细胞内MUC5AC表达。结果：与B组比较，A组炎症因子及MUC5AC表达明显减少，差异有统计学意义(P<0.05)；而B组与C组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。与D组比较，A组炎症因子及MUC5AC的表达明显降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)。D组与E组比较，LPS刺激后炎症因子及MUC5AC分泌增多，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论：NDRG2基因可以通过Zc3h12d而实现对NF-κB转导通路的调控。     

Toll样受体2/4-核因子κB信号通路在人结核分枝杆菌侵入小鼠树突细胞2.4中的作用

目的：研究人结核分枝杆菌侵入抗原提呈细胞后诱导树突细胞（DC）成熟的机制。方法：选择小鼠DC2.4细胞株为抗原提呈细胞的效应细胞,建立人结核分枝杆菌H37Rv株的细胞混合培养模型。在不同混合培养时段,采用实时荧光定量PCR检测DC2.4细胞Toll样受体2（TLR2）、TLR4 mRNA的表达量;蛋白质印迹法检测DC的核因子κB(NF-κB)p65蛋白的表达;免疫酶联吸附试验定量检测DC产生α肿瘤坏死因子（TNF-α）的水平;采用间接免疫荧光法和流式细胞术检测DC2.4表面CD80和CD86的表达情况。结果：H37Rv与DC2.4共培养2 h后开始有细菌侵入;共培养 6、8、10、12 h后,细菌侵入率分别为(37.9±5.6)%、(512±7.6)%、(57.2±8.9)%、(639±12.4)%;TLR2、TLR4 mRNA也开始增量,共培养10 h时达高峰,之后开始下降;共培养6 h时,NF-κB p65的表达量明显增高;TNF-α的表达量在共培养6 h开始上调,8 h时达高峰,随后逐渐下降;共培养6 h时,DC2.4表面CD80、CD86表达量明显增高。结论：人结核分枝杆菌侵入DC2.4时,通过激活TLR2/4-NF-κB信号通路,诱导DC成熟,提高其抗原提呈能力。     

载脂蛋白嵌合模拟肽通过NF-κB途径抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞炎症反应

目的：探讨载脂蛋白嵌合模拟肽Ac-hE-18A-NH2对氧化型低密度脂蛋白(oxidized LDL,ox-LDL)刺激下巨噬细
胞肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响及其作用机制。方法：Ox-LDL刺激RAW264.7巨噬细胞,
给予不同浓度的模拟肽Ac-hE-18A-NH2(1~100 μg/mL)干预,收集细胞,测定巨噬细胞TNF-α的分泌和mRNA表达水平。
Western印迹检测ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)及P-IκB蛋白浓度。EMSA检测核因
子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)活性。结果：Ox-LDL刺激使RAW264.7巨噬细胞TNF-α 分泌和mRNA表达明显增强,细
胞内胆固醇蓄积,促进IκB磷酸化,并激活NF-κB。Ac-hE-18A-NH2浓度依赖性地降低TNF-α 分泌及mRNA表达,上调
ABCA1 mRNA和蛋白的表达,减少细胞内胆固醇含量,抑制NF-κB活化,并抑制IκB磷酸化。相同的实验条件下及作
用浓度,D-4F对于TNF-α 分泌的抑制作用不如Ac-hE-18A-NH2。结论：Ac-hE-18A-NH2能抑制ox-LDL诱导的RAW264.7
巨噬细胞TNF-α分泌和mRNA表达,IκB/NF-κB-TNF-α信号通路是其中作用途径之一。Ac-hE-18A-NH2的抗炎作用优于
apoA-I模拟肽D-4F。     

瑞芬太尼改善异氟醚致新生大鼠神经毒性的机制

 目的  研究瑞芬太尼对异氟醚引起的新生大鼠海马神经毒性急性期和远期影响及其可能机制。方法  将出生7天的大鼠随机分成4组:对照组(Sham组)、异氟醚组(Iso组)、异氟醚+切开组(Iso+I组)及异氟醚+切开+瑞芬太尼组(Ref组),采用每天2 h连续3天的处理方式模拟临床多次麻醉暴露。在第3天麻醉结束后6 h取新鲜海马组织用Western blot检测NF-κB p65蛋白入核的比例,q-RT-PCR检测炎症因子IL-1β、IL-6和 TNF-α的mRNA的相对表达量;灌注取脑后用免疫荧光计数离子钙接头蛋白抗原分子-1 (ionized calcium binding adaptor molecule 1,IBA1)阳性细胞数量。大鼠在出生后的第65天进行被动回避实验,观察其学习与记忆能力。结果   与Sham组相比,Iso组和Iso+Ⅰ组NF-κB p65蛋白入核的比例显著增加,IL-1β与TNF-α的mRNA的表达量上调,而且这种神经毒性在幼鼠成年后表现为学习与记忆障碍,然而瑞芬太尼显著改善由异氟醚多次暴露所致的神经炎症反应及学习记忆障碍。结论   瑞芬太尼改善异氟醚致新生大鼠神经炎症反应,可能通过NF-κB p65通路发挥作用。     

脑舒明方对局灶性脑缺血大鼠NF-κB，TNF-α和IL-1β表达的影响

目的：探讨脑舒明方对脑缺血大鼠的影响。方法：采用大脑中动脉阻塞法复制大鼠中脑动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,将造模成功大鼠随机分为模型组(n=36)、脑舒明方低剂量组(n=36)、中剂量组 (n=36)及高剂量组(n=36),另设正常组(n=12)及假手术组(n=12)。每组分别于造模后3,7,14 d处死并检测相关指标, 参照Ayelet Levy 14分评分法进行神经功能损伤评分,采用免疫组织化学检测核转录因子(nuclear factor kappa-B,NF- κB)/p50,NF-κB/p65,肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和IL-1β的蛋白质表达;采用实时荧光定量PCR 检测NF-κB,TNF-α和IL-1β的mRNA表达。结果：与假手术组比较,各个时间点的MCAO模型组及脑舒明方各剂量组 大鼠炎性指标显著增强(均P<0.05或P<0.01),都有神经功能障碍,但随着时间推移炎症指标及神经功能障碍会逐渐改 善。用药治疗3,7,14 d时,分别与模型组比较,脑舒明方各剂量组大鼠的神经功能评分均得到改善,NF-κB/p50, NF-κB/p65,TNF-α和IL-1β的蛋白质表达,以及NF-κB,TNF-α和IL-1β的mRNA表达均降低,差异均有统计学意义(均 P<0.05或P<0.01)。结论：脑舒明方可减轻脑缺血大鼠的损伤。