饮水机出水微生物污染状况调查

目的了解饮水机出水物生物污染状况.方法检测33台饮水机饮用前桶内纯净水、饮用3天后、饮用7天后冷、热水出水细菌总数、大肠菌群、致病菌、霉菌和酵母菌.结果饮用前桶内纯净水、饮用3天后冷、热水出水、饮用7天后冷、热水出水的超标率分别为15.2%,45.5%、12.1%、69.7%和21.2%,尤以细菌总数、霉菌和酵母菌超标明显.7天冷水出水超标率明显高于3天冷水出水,P＜0.05.结论饮水机冷水出水微生物污染严重,且随饮用时间延长,超标率不断增高.     

葡萄球菌肠毒素B对人肝癌和肺癌传代细胞株细胞增殖的影响

目的探讨葡萄球菌肠毒素B(SEB)对人肝癌传代细胞株SMMC7721和人肺癌传代细胞株D6细胞增殖的抑制作用.方法采用MTT比色法,检测不同浓度和作用时间的SEB对人肝癌传代细胞株SMMC7721和人肺癌传代细胞株D6增殖的抑制作用.结果应用不同浓度的SEB3d后,对SMMC7721细胞和D6细胞的增殖均产生抑制作用;5、10、20ng/ml的SEB均能抑制SMMC7721细胞和D6细胞的体外增殖,抑制的程度与SEB的浓度、作用时间有关.结论葡萄球菌肠毒素B对人肝癌传代细胞株SMMC7721和人肺癌传代细胞株D6能产生一定的增殖抑制作用.     

浙江省安吉县农村3个自然村的社区康复现状

目的：采用问卷调查方式，对浙江省安吉县农村社区康复进行调查，以了解该地区社区康复的现状。方法：调查于2005—07／08进行。采用随机抽样方法，抽取浙江省安吉县3个自然村中37户有残疾者的家庭，进行入户问卷调查。问卷是按照1988年制订的《中国残疾人抽样调查残疾标准》的要求，结合当地农村卫生事业的现状设计的．主要调查的项目有：致残原因、残疾类型、自身所承担的康复治疗费用、所能享受的社区康复服务资源和患者的康复服务的需要等内容。同时以当地卫生局、民政机构和卫生院等为对象，调查当地卫生资源状况。结果：①调查结果显示，当地农村社区的残疾以肢体残疾为主（占67．6％），主要是意外事故所致（占51．4％）；所承担的康复治疗费用以自费为主（占70．3％）；18．9％的残疾者在县级以上医院进行过康复训练和治疗，有73．0％残疾者愿意选择在农村社区进行康复训练和治疗；59、5％的残疾者家庭感觉康复服务费用太高，有35．1％的家庭可以承受。②当地有医务卫生工作人员1270名，其中专业康复医生6名，经过一定康复知识培训的38名，当地具备初步从事康复条件的乡卫生院（所）及医院8座（21，1％），配备完整的社区康复医疗设施和人员的乡卫生院（所）为零。结论：安吉县农村社区康复的服务与患者的需要还存在一定的差距，服务水平低与费用高是目前当地农村社区康复的主要矛盾。     

重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白D9N的表达、纯化及生物学活性的研究

 目的表达、纯化重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白D9N(rSEB-D9N),了解表达产物rSEB-D9N的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和肿瘤生长抑制作用。方法不同浓度IPTG诱导SEB-D9N突变体原核表达系统pET32a-SEB-D9N-E.coliBL21DE3表达rSEB-D9N,经Ni-NTA亲和层析法纯化rSEB-D9N,10%SDS-PAGE和高效液相色谱检测其纯度。以Vero细胞为靶细胞,进行rSEB-D9N的细胞毒性作用,并计算TCID₅₀值。采用MTT法分别检测不同浓度的rSEB-D9N促人淋巴细胞增殖及抑制KB及MCF-7癌细胞株生长的作用。流式细胞术检测rSEB-D9N刺激人淋巴细胞后CD3、CD4、CD8的表达。结果rSEB-D9N表达产量约占细菌总蛋白30%,纯化后获得纯度为90.48%的rSEB-D9N。rSEB和rSEB-D9N对Vero细胞的TCID₅₀值分别为3.12,8.85μg,10.0,20.0mg·L^-1的rSEB-D9N具有显著的促PBMC增殖的作用(P<0.05),且主要上调CD3,CD4和CD8的表达。5.0～20.0mg·L^-1rSEB-D9N作用的PBMC上清对KB和MCF-7细胞生长均可产生明显抑制作用(P<0.05)。结论获得并纯化了重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白(rSEB-D9N),其细胞毒性作用有所降低,但促人淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用仍较强,可作为研制升白细胞、抗肿瘤相关药物的候选突变体。     

病理尸检渗透病理教学防范医疗纠纷

随着社会经济的发展及人们就医观念的改变，对医疗服务的要求越来越高。但伴随着医疗体制改革的不断深化，现行医疗体制存在的问题越来越突出，加上社会因素、舆论导向等的影响，在医疗体制中集中表现为医疗纠纷数量不断上升，纠纷造成的恶性事件也时有发生，已严重干扰了现有的医疗秩序，甚至危及到医务人员的人身安全。尽管其发生的原因有极其深刻的社会因素和复杂的其他因素，     

葡萄球菌肠毒素A基因原核表达系统的构建及其表达产物的鉴定

 目的：构建葡萄球菌肠毒素A（SEA）基因原核表达系统，了解重组表达产物rSEA促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长的作用。方法：采用高保真PCR从金黄色葡萄球菌ATCC13565株DNA中扩增全长SEA基因片段，T-A克隆后测序，构建SEA基因原核表达系统pET32a-SEA-E.coliBL21DE3。采用SDS-PAGE检测rSEA表达量，Ni-NTA亲和层析法提纯rSEA。采用TCID₅₀法测定rSEA对Vero细胞的细胞毒性并计算TCIC₅₀值。采用MTT比色法分别检测不同浓度rSEA体外对小鼠脾细胞、人外周血单个核细胞（PBMC）的促增殖作用以及对HepG2细胞（人肝癌细胞）、HeLa细胞（人宫颈癌上皮细胞）的生长抑制作用。结果: 与公布的相关序列比较，所克隆的SEA基因核苷酸序列相似性为100%。rSEA表达量约为细菌总蛋白的25%。rSEA对Vero细胞的TCIC₅₀为3.14 μg。1.0-20.0 mg/L的rSEA对小鼠脾细胞和人PBMC均有明显的促增殖作用（P<0.05）。5.0-20.0 mg/L rSEA作用的人PBMC上清均能有效地抑制HepG2细胞和HeLa细胞生长（P<0.05）。结论:成功地构建了rSEA原核表达系统。rSEA仍然具有生物学活性。所建立的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用的检测方法，为以后减毒rSEA突变体的筛选奠定了基础。     

浙江农村居民艾滋病预防知识调查

积极、广泛开展健康教育，普及艾滋病预防知识，尤其在农村，是艾滋病防治工作中的重要环节。为了解我省农村居民对艾滋病预防知识的知晓情况，我们于2006年7～8月，利用大学生暑期“三下乡”社会实践活动，分别对我省沿海地区和经济欠发达地区农村居民，进行了艾滋病预防知识知晓情况的调查，现将调查结果总结如下。     

重组抗原LTB-UreB-HpaA对幽门螺杆菌感染小鼠的免疫保护性及内置佐剂LTB的免疫增强作用(英文)

目的构建大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)和幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)、幽门螺杆菌粘附素A(HpaA)的融合基因ltBureBhpaA及其原核表达系统,鉴定重组表达产物rLTBUreBHpaA的免疫原性、佐剂活性及对Hp感染小鼠的保护作用。方法采用连接引物PCR构建ltBureBhpaA融合基因,TA克隆后测序。采用pET42a质粒及其宿主菌E.coliBL21DE3亚克隆构建原核表达系统pET42altBureBhpaAE.coliBL21DE3,并用不同浓度IPTG诱导表达。SDSPAGE用于检测rLTBUreBHpaA的表达及其产量,免疫双扩散试验及Western印迹法检测rLTBUreBHpaA抗原性和免疫反应性。建立牛GM1的ELISA(GM1ELISA)检测重组蛋白中rLTB的佐剂活性。采用HpSS1株BaLb/C小鼠感染模型,检测rLTBUreBHpaA的免疫保护作用。结果ltBureBhpaA核苷酸序列与各原始基因序列完全相同。不同浓度的IPTG均可诱导pET42altBureBhpaAE.coliBL21DE3表达rLTBUreBHpaA,其产量约为细菌总蛋白的15%。rLTBUreBHpaA家兔抗血清的双扩效价为1∶8。商品化兔抗Hp全菌抗体、兔抗UreB或HpaA均能识别rLTBUreBHpaA并与之结合。GM1ELISA结果证实rLTBUreBHpaA仍具有结合牛GM1的活性。rLTBUreBHpaA(200μg/每只小鼠)免疫后,可使小鼠100%免于HpSS1株的感染。10μgrLTB与rUreB或rHpa共同免疫小鼠,可使保护率分别从66.7%提高至81.8%和83.3%。结论本研究成功地构建了ltBureBhpaA融合基因及其原核表达系统。目的表达产物rLTBUreBHpaA有良好的免疫原性、佐剂活性及免疫保护效果,具有作为Hp基因工程疫苗的应用前景。     

线粒体损伤在创伤弧菌诱导树突状细胞凋亡中的作用

 目的：探讨线粒体损伤在创伤弧菌（Vibrio vulnificus,Vv）诱导树突状细胞（dendritic cell,DC）凋亡过程中的作用及其可能机制。方法：建立Vv 1.1758与DC2.4细胞混合培养模型。采用扫描电镜和透射电镜观察创伤弧菌侵入细胞方式和细胞线粒体病变情况。荧光探针DCFH-DA和Fluo-8/AM分别检测侵入细胞内活性氧（ROS）和Ca2+离子水平。流式细胞术检测细胞线粒体膜电位和细胞凋亡情况。采用Western blotting检测NF-κB p65和TNF-α蛋白的表达。结果：Vv 1.1758可诱导DC2.4细胞凋亡。Vv 1.1758以菌体一端与细胞表面结合的方式侵入细胞,侵入细胞的线粒体有明显病变,细胞内ROS和Ca2+水平升高,线粒体膜电位降低。共培育1 h,NF-κB p65蛋白即开始升高,5 h达高峰,6 h稍有下降;TNF-α蛋白则在共培育2 h开始增高,6 h达高峰。结论：线粒体损伤在Vv诱导DC凋亡中发挥作用,其作用机制可能与细胞内ROS和Ca2+水平升高、线粒体膜电位降低有关,NF-κB p65和TNF-α可能是细胞凋亡过程中的重要信号分子。     

浙江省安吉县农村3个自然村的社区康复现状

目的:采用问卷调查方式,对浙江省安吉县农村社区康复进行调查,以了解该地区社区康复的现状。方法:调查于2005-07/08进行。采用随机抽样方法,抽取浙江省安吉县3个自然村中37户有残疾者的家庭,进行入户问卷调查。问卷是按照1988年制订的《中国残疾人抽样调查残疾标准》的要求,结合当地农村卫生事业的现状设计的,主要调查的项目有:致残原因、残疾类型、自身所承担的康复治疗费用、所能享受的社区康复服务资源和患者的康复服务的需要等内容。同时以当地卫生局、民政机构和卫生院等为对象,调查当地卫生资源状况。结果:①调查结果显示,当地农村社区的残疾以肢体残疾为主(占67.6%),主要是意外事故所致(占51.4%);所承担的康复治疗费用以自费为主(占70.3%);18.9%的残疾者在县级以上医院进行过康复训练和治疗,有73.0%残疾者愿意选择在农村社区进行康复训练和治疗;59.5%的残疾者家庭感觉康复服务费用太高,有35.1%的家庭可以承受。②当地有医务卫生工作人员1270名,其中专业康复医生6名,经过一定康复知识培训的38名,当地具备初步从事康复条件的乡卫生院(所)及医院8座(21.1%),配备完整的社区康复医疗设施和人员的乡卫生院(所)为零。结论:安吉县农村社区康复的服务与患者的需要还存在一定的差距,服务水平低与费用高是目前当地农村社区康复的主要矛盾。