新辅助化疗后单操作孔腔镜肺叶切除加系统性淋巴结清扫术视频要点

正1技术背景介绍胸腔镜肺叶切除手术在国内开展已20余年。最初手术切口为3孔或4孔,经过多年技术改进及经验积累,手术切口还出现了单孔(又分为经胸、经剑突下、经腹入路)、两孔(也称单操作孔)等~([1-3])。术前新辅助化疗是指手术前所做的全身化疗,目的是使肿块缩小、及早杀灭转移细胞,以利于后续手术治疗,但也常常导致肺门区、纵隔区粘连,从而增加手术难度。新辅助化疗后的胸腔镜手术操作,     

原发性非小细胞肺癌患者外周血中Th17的检测及其临床意义

目的通过检测非小细胞癌(NSCLC)患者与健康对照组外周血中Th17细胞及相关因子的表达水平,探讨其在NSCLC中的临床意义。方法流式细胞术检测外周血中Th17细胞占CD4+T淋巴细胞的比例;RT-PCR检测外周血单个核细胞(PBMC)中IL-17及孤独核受体γt(RORγt)mRNA的表达水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测外周血浆中IL-17的水平。结果 NSCLC患者外周血Th17细胞占CD4+T淋巴细胞的比例较对照组显著升高(P<0.01);PBMC中IL-17及RORγt mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.01);外周血浆中IL-17的水平显著高于对照组(P<0.01)。不同病理类型之间Th17细胞比例、IL-17 mRNA及IL-17的表达水平无统计学差异(P>0.05)。Ⅲ期患者Th17细胞比例、IL-17 mRNA及IL-17的表达水平较Ⅰ^Ⅱ期患者显著增高(P<0.01)。结论 Th17细胞可能通过RORγt和IL-17参与NSCLC的发生,Th17相关指标对NSCLC的治疗及预后有指导意义。     

食管鳞癌患者血清p53抗体水平与组织分化的关系及术后动态变化

目的 探讨食管鳞癌患者血清p53抗体术前水平与肿瘤组织分化程度的关系及术后动态变化情况.方法 纳入行食管癌根治术的食管鳞癌患者86例为观察组,统计其肿瘤组织分化程度,于术前1d和术后7d、30 d、90 d、180 d检测血清p53抗体水平;纳入同期50例健康体检者为对照组,检测其血清p53抗体水平.结果 观察组血清p53抗体水平及阳性率均高于对照组,差异均具有统计学意义(均P＜0.05).肿瘤分化程度越高,p53抗体水平和阳性率越低(均P＜0.05).观察组血清p53抗体在术后30 d时下降,与术前1d及术后7d比较差异均具有统计学意义(均P＜0.05);术后90 d和180 d时该指标进一步下降,与对照组比较,差异均无统计学意义(均P ＞0.05).结论 检测血清p53抗体有助于判断食管鳞癌分化程度.食管癌根治术可降低血清p53抗体的表达.     

核因子κB的小干扰RNA防治自体移植静脉再狭窄的实验研究

目的 探讨核因子κB(NF-κB)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对大鼠自体静脉移植术后血管内膜增殖及相应炎性细胞因子表达的影响.方珐雄性Wistar大鼠80只,随机分为空白组(A组,n=10);自体静脉移植组(B组,n=18);空载体组(阴性质粒脂质体医用蛋白胶复合物转染移植静脉,C组,n=26)和基因转染组(NF-κB siRNA阳离子脂质体医用蛋白胶复合物转染自体移植静脉,D组,n=26).B、C及D组需制作大鼠自体颈外静脉--腹主动脉移植模型,每组4个时点(3,7,14,21 d),相应时间点取移植静脉观察病理形态学变化,免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA),PCR测定单核细胞趋化因子(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA含量,Western blot测定NF-κB p65蛋白的表达.结果 自体静脉移植术后,B、C和D组移植静脉血管桥均出现内膜增生变厚,新生内膜有大量PCNA阳性细胞,中膜平滑肌细胞增生活跃.术后3 d,B组和C组MCP-1mRNA及TNF-αmRNA表达水平明显高于A组(P<0.05),但D组水平明显低于C组(P<0.05).术后7 d,B、C组NF-κB p65蛋白表达水平明显高于A组(P<0.05),与C组相比,D组NF-κB p65蛋白水平明显降低(P<0.05).结论 NF-κB的基因表达产物和MCP-1mRNA、TNF-αmRNA的表达有一定相关性,自体静脉移植术后新生内膜增生及炎性细胞因子表达在不同时相点呈动态变化.转染NF-κB siRNA阳离子脂质体复合物可抑制NF-κB的表达,减少MCP-1及TNF-αmRNA的表达,从而抑制移植静脉内膜增生和VSMC增殖,减轻再狭窄.     

罗格列酮通过下调IGF-1表达抑制非小细胞肺癌淋巴转移并诱导凋亡

目的:探讨罗格列酮通过下调IGF-1的表达来抑制非小细胞肺癌的淋巴转移及诱导凋亡的机制.方法:采用Hoechst33342染色法检测罗格列酮对肺癌A549细胞凋亡的影响;采用免疫荧光化学法观察罗格列酮对肺癌A549细胞IGF-1的表达的影响;Western blot对下调后的IGF-1进行半定量分析;对结果进行统计学分析,采用均数±标准差的方式对数据进行描述,凋亡率和IGF-1的表达采用卡方检验.结果:罗格列酮诱导A549细胞凋亡呈浓度依赖性,浓度分别为0,10,20,30μM的罗格列酮处理48小时后凋亡率分别为0.012±0.033、0.105±0.177、0.388+0.201、0.437±0.189;罗格列酮下调IGF-1的表达,罗格列酮作用48小时后,可见处理组的荧光比空白组明显减弱.而阴性对照组未见特异性荧光表达;罗格列酮下调IGF-1的表达呈浓度依赖性,罗格列酮处理A549细胞48小时后,IGF-1的相对表达量分别为0.761±0.006、0.4101±0.0142、0.361355±0.006、0.209±0.018.结论:罗格列酮能够通过下调IGF-1的表达实现其对非小细胞肺癌淋巴转移及增殖的抑制作用,IGF-1可能是诱导肿瘤细胞凋亡及抑制其转移的关键位点.     

Polι基因在人肺癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的：检测DNA聚合酶ι（polymerase iota,Polι）基因在人肺癌组织、癌旁组织及正常肺组织中的表达,结合肺癌临床病理特征及预后分析Polι在肺癌发生、发展中的意义。方法：选取2001年1月至2003年8月在山东大学齐鲁医院胸外科行手术治疗的明确诊断为原发性肺癌的患者,应用免疫组化和RTPCR方法检测62例肺癌组织、30例癌旁组织和30例正常肺组织标本中Polι的表达水平,采用SPSS13.0软件对数据进行统计学分析。结果：人肺癌组织、癌旁组织和正常肺组织中Polι表达率分别为54.8%、333%和10.0%,不同类型肺癌组织中Polι表达无显著性差异（P>0.05）,随着肺癌分化程度升高,Polι表达下降（P<0.05）,Ⅲ期和Ⅳ期肺癌组织中Polι表达明显高于Ⅰ期和Ⅱ期（P＜0.05）,生存3年以下肺癌Polι表达明显高于3年以上者（P<0.05）,吸烟者Polι表达高于非吸烟者（P<0.05）。结论：Polι高表达在肺癌发生、发展中起到重要作用,可能作为肺癌生物学特征和预后判断的参考指标。     

CHFR基因CpG岛甲基化对食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究CHFR基因启动子甲基化状态与食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的关系。方法:分别用不同浓度(2、5、10μmol/L)5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理Eca109细胞,未经药物处理的细胞为对照组。甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测CHRF基因CpG岛的甲基化状态,RT-PCR检测CHFR mRNA的表达情况,MTT法及流式细胞术检测不同浓度5-Aza-CdR处理对Eca109细胞增殖及凋亡的影响。结果:对照组Eca109细胞CHFR CpG岛处于高甲基化状态,5-Aza-CdR处理后CHFR CpG岛可发生不同程度的剂量依赖性的去甲基化。对照组Eca109细胞无CHFR mRNA表达,5-Aza-CdR处理组(2、5、10μmol/L)CHFR mRNA相对表达量显著增加(0.174±0.010、0.221±0.013、0.356±0.014)。不同浓度5-Aza-CdR处理后,Eca109细胞增殖受到抑制[作用72 h时的抑制率分别为(30.87±0.74)%、(44.60±0.79)%、(56.67±0.35)%],细胞凋亡显著增加[(7.46±1.46)%、(16.27±1.61)%、(25.29±2.25)%vs(1.83±0.41)%,P<0.01]。结论:食管癌Eca109细胞经5-Aza-CdR处理后,CHFR基因CpG岛发生部分去甲基化,出现CHFRmRNA表达,并抑制Eca109细胞增殖和促进细胞凋亡。     

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对肺癌A-549细胞侵袭力的抑制作用

目的 探讨乙酰肝素酶(heparanase,HPSE )反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对人肺癌A-549细胞侵袭力的抑制作用.方法 设计合成互补于HPSE mRNA起始密码区的HPSE ASODN,以阳离子脂质体Lipofectin包埋后转染人肺癌A-549细胞进行培养,采用流式细胞分析技术和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺癌A-549细胞HPSE蛋白及其mRNA表达的变化;以Matrigel细胞侵袭试验对HPSE AS-ODN对肺癌A-549细胞侵袭的抑制进行检测.结果 ASODN各组与正常对照组和脂质体组比较及ASODN各组间比较HPSE mRNA和蛋白的表达及细胞侵袭力均受到明显抑制 (P<0.01);ASODN在终浓度为100、200、400 nmol/L时对肺癌A-549细胞侵袭力的抑制率分别为55.6%、82.3%和91.2%.结论 HPSE ASODN通过下调HPSE mRNA和蛋白的表达可显著抑制肺癌A-549细胞的侵袭力,并呈剂量依赖性.     

EGR-1蛋白在人肺鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的： 检测早期生长反应基因-1（early growth response gene-1, EGR-1）蛋白在肺鳞状细胞癌组织中的表达,探讨EGR-1蛋白表达与患者临床病理指标及预后的相关性。 方法： 收集2007年1月至2007年12月山东大学齐鲁医院肺鳞状细胞癌83例患者癌组织和癌旁肺组织标本,采用免疫组化SP法检测癌组织和癌旁肺组织中EGR-1蛋白的表达水平。分析EGR-1蛋白表达与患者临床病理指标之间的关系,Kaplan-Meier法计算患者的5年生存率,Log-rank法检验比较患者的生存差别,Cox回归多因素分析判定独立的预后因素。 结果： EGR-1蛋白在肺鳞状细胞癌组织中的表达水平显著低于癌旁肺组织\[（4.12±0.35) vs （6.90±4.58）, P<0.01\];EGR-1蛋白低表达与患者年龄（P=0.912）、性别（P=0.429）及肿瘤细胞分化程度（P=0.289）均无显著相关性,与吸烟史（P=0.025）、肿瘤大小（P=0.013）、淋巴结转移（P=0.003）及TNM分期（P=0028）显著相关。EGR-1蛋白低表达的患者,其术后5年总生存率显著低于EGR-1蛋白高表达的患者（2.6% vs 15.9%,P=0.04）;TNM分期（P=0.020）、EGR-1蛋白低表达（P=0.035）是判定肺鳞状细胞癌患者预后的独立因素。 结论: EGR-1蛋白在肺鳞状细胞癌组织中存在低表达,且与肿瘤进展及患者预后密切相关。