细菌Ⅳ型分泌系统的研究进展

Ⅳ型分泌系统广泛分布于革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌中,编码各种结构性和功能性菌毛蛋白,在细菌的致病过程中发挥重要作用。近年来,随着多药耐药菌的不断出现,开发新药需求紧迫,而Ⅳ型菌毛的蛋白结构可作为临床抗菌治疗的新靶点,对于新药开发有重要意义。本文主要对Ⅳ型分泌系统进行阐述。     

2019年CHINET三级医院细菌耐药监测

目的监测国内主要地区医疗机构临床分离菌对抗菌药物的敏感性。方法对国内主要地区36所三级医院临床分离菌采用纸片扩散法或自动化仪器法按CHINET统一监测方案进行抗菌药物敏感性试验。按CLSI文件标准判断结果。结果收集2019年1-12月上述医院临床分离菌共249 758株,其中革兰阳性菌占29.0%,革兰阴性菌占71.0%。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和其他凝固酶阴性葡萄球菌(除假中间葡萄球菌和施氏葡萄球菌)中甲氧西林耐药株的检出率分别为31.4%、82.4%和78.3%。甲氧西林耐药株(MRSA、MRSE和MRCNS)对绝大多数抗菌药物的耐药率均显著高于甲氧西林敏感株(MSSA、MSSE和MSCNS)。MRSA中有92.6%的菌株对甲氧苄啶-磺胺甲噁唑敏感;MRSE中有89.0%的菌株对利福平敏感;未发现万古霉素耐药株。肠球菌属中粪肠球菌对多数测试抗菌药物的耐药率均显著低于屎肠球菌,两者中均有少数万古霉素耐药株。2019年儿童和成人中分离的肺炎链球菌中PSSP(95.2%和95.3%)所占比例较2018年有所上升,PISP和PRSP的检出率有所下降。除肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类的耐药率为27.6%外,肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,多数菌属的耐药率低于10%。2005-2019年15年的监测数据显示肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率呈持续上升趋势(3.0%和2.9%对25.3%和26.8%)。此外,不动杆菌属对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为73.6%和75.1%;铜绿假单胞菌对上述两药的耐药率分别为27.5%和23.5%。结论临床分离菌对常用抗菌药物的耐药率仍呈增长趋势,尤其是碳青霉烯类耐药革兰阴性杆菌。为应对严峻的全国细菌耐药形势,需各相关部门协作以遏制细菌耐药。     

血流感染金黄色葡萄球菌毒力基因、agr分型及生物膜形成能力调查*

摘要:目的探讨血液 来源金黃色葡萄球菌耐药性、毒力基因、agr 分型、生物膜形成能力,并比较甲氧西林敏感株与耐药株间的差异。方法收集2019年1月一2020年12月102株血液分离非重复金黃色葡萄球菌茵株,采用全自动微生物鉴定药敏分 析系统进行药物敏感性检测;采用PCR及多重PCR分析菌株毒力基因携带情况及agr基因多态性;采用96孔板结晶紫染色法检测生物膜形成能力。采用卡方检验和Fisher 精确概率法比较分析甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏 感金黃色葡萄球菌(MSSA)菌株间耐药性、毒力基因、agr 分型及生物膜形成能力的差异。结果102 株金黄色葡萄球菌中,43株为MRSA,59株为MSSA。毒力基因普遍表达葡萄黃质蛋白基因crtN(99.0%)、溶血素基因(hla 97. 1%、hlb 98. 0%、hld 96.1%),其次为表面因子CP8合成酶基因cap8H(34.3%)、中毒性休克综合征毒素-1基因tst( 21.6%),其中携带crtN/hla/hlb/hld 4种毒力基因组合的菌株最多(48株)。agr分型阳性率为97.1%,其中agr I型占56.9% ,agr I型占36.3%,agr I型占 4.9%,未检测出agt IV型,agr 未获分型3株。生物膜形成阳性共28株,其中12株可形成强生物膜。MRSA菌株对环丙沙星、四环素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、莫西沙星的耐药率高于MSSA菌株(P<0.05) ;MRSA菌株tst基因携带率高于MSSA (P<0.01) ,cap8H基因携带率低于MSSA(P<0.05),差异有统计学意义;MRSA菌株中agr I和agr I型各占46.51 %和48.84% ;MRSA菌株更倾向形成中等或弱生物膜,与MSSA菌株相比在生物膜形成能力上差异无统计学意义。结论临床分 离血流感 染金黄色葡萄球菌存在多种毒力基因、agr分型、生物膜形成能力,需加强监测。     

碳青霉烯耐药非产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的药物敏感性及分子特征分析

目的分析碳青霉烯耐药非产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae without producing carbapenemase,CRKPPC)的抗菌药物敏感性、β-内酰胺酶基因和外排泵基因的分布及外排泵抑制剂的抑制作用。方法收集2012—2014年我院碳青霉烯不敏感肺炎克雷伯菌108株,用Mastdiscs combi Carba plus纸片系统检测碳青霉烯酶表型。用微量肉汤稀释法测定CRKPPC菌株对抗菌药物的敏感性;用PCR和DNA测序技术检测β-内酰胺酶耐药基因,包括超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamase,ESBL)和质粒介导的头孢菌素酶(Amp C)编码基因及外排泵基因acr AB-tolC、kex D、kde A、kpn EF和kpn GH;外排泵抑制剂羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)和利血平抑制试验分析外排泵在碳青霉烯耐药中的作用;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析细菌外膜孔蛋白Omp K35和Omp K36的表达。结果碳青霉烯不敏感肺炎克雷伯菌菌株中有26株细菌为CRKPPC;这26株细菌对β-内酰胺类药物高度耐药,对阿米卡星、庆大霉素、左氧氟沙星和环丙沙星的耐药率均较高,但对替加环素、多黏菌素、头孢他啶/阿维巴坦和氨曲南/阿维巴坦等有很好的敏感性; blaCTX-M和blaSHV检出率依次为76.9%和57.7%;外膜孔蛋白Omp K35和Omp K36均有不同程度的缺失,缺失率分别为57.7%和19.2%;80%以上的细菌中存在acr AB-tolC、kex D、kde A、kpn EF和kpn GH基因; CCCP对碳青霉烯类药物具有显著的抑制作用,而利血平没有明显的抑制作用。结论替加环素、多黏菌素可以作为CRKPPC联合用药的基础药物。CRKPPC菌株中存在Amp C、ESBLs及不同程度的外膜孔蛋白Omp K35和Omp K36缺失,但外排泵对碳青霉烯类药物的外排作用是CRKPPC对碳青霉烯耐药的主要机制,外排泵抑制剂可能在这种细菌引起的感染治疗中有重要价值。     

自前列腺癌术后患者中段尿分离嗜CO_2粪肠球菌1株

正苛养性细菌(如嗜血杆菌等)的培养,一般依赖CO_2,而肠杆菌科细菌或肠球菌很少依赖CO_2。而嗜CO_2菌属的报道最早可追溯至1951年发现的嗜CO_2葡萄球菌~([1]),而后嗜CO_2大肠埃希菌~([2])、嗜CO_2奇异变形杆菌~([3])被相继报道引起尿路     

Vitek-2 Compact AST-GN13检测耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对左氧氟沙星药敏结果的准确性

目的 探讨Vitek-2Compact AST-GN13对耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌左氧氟沙星敏感性测定的准确性。方法 收集亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌50株,以E-Test法为参考方法,分别用Vitek-2Compact AST-GN13药敏卡和纸片扩散(K-B)法对收集菌株进行左氧氟沙星敏感性检测,并评价3种方法结果的符合性。结果 共收集亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌50株,E-Test法结果显示共有46株最低抑菌浓度(MIC)256mg/L,4株MIC=4mg/L;K-B法结果与E-Test法结果相符;Vitek-2Compact AST-GN13检测出现不同结果,其中4株菌株为敏感(≤2mg/L),36株为中介(4mg/L),10株为耐药(≥8mg/L)。K-B法与ETest法标准符合率(CA)为100%,Vitek-2Compact与E-Test法CA为20%,一般错误率为72%,严重错误率为8%。结论Vitek-2Compact AST-GN13检测耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对左氧氟沙星的敏感性时,可能会产生错误结果,日常工作中可采用E-Test与K-B法互为替代方法进行试验。     

慢性肾脏病伴心脑血管病患者凝血、抗凝及纤溶指标变化分析

摘要：目的?研究慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)伴心脑血管病患者凝血、抗凝及纤溶指标变化，为鉴别诊断肾脏病伴发心脑血管病提供参考依据。方法?收集2019年10月至2020年9月就诊于南京鼓楼医院肾脏科98例CKD患者血液样本，根据是否伴有心脑血管病分为2组：无心脑血管病(A组)31例，伴有心脑血管病(B组)67例。用凝固法检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)，用Clauss法检测纤维蛋白原(Fib)，用免疫比浊法检测D-二聚体(D-D)；用化学发光免疫测定法检测患者抗凝及纤溶指标，包括：血栓调节蛋白(TM)、凝血酶-抗凝血酶Ⅲ复合物(TAT)、纤溶酶-纤溶酶抑制剂复合物(PIC)、组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合物(t-PAIC)，统计分析两组间各指标的差异。ROC曲线分析有显著差异指标对CKD患者伴发心脑血管疾病的预测价值。结果?B组Fib、D-D、TM、TAT、PIC、t-PAIC水平显著高于A组(P<0.05)；两组间PT、APTT、TT水平差异无统计学意义(P>0.05)。Fib、D-D、TM、PIC预测CKD患者伴发心脑血管疾病的价值较高，ROC曲线下面积分别为0.742、0.858、0.927、0.738(P<0.05)。结论?CKD伴心脑血管病患者Fib、D-D、TM、TAT、PIC、t-PAIC水平有显著改变且Fib、D-D、TM、PIC对其有一定的预测价值。监测上述指标可以辅助临床诊断，减少CKD患者心脑血管事件发生。     

289株重症监护病房鲍曼不动杆菌耐药性分析

目的了解医院重症监护病房（ICU）鲍曼不动杆菌（ABA）对常用抗菌药物的耐药性,及耐药性的变化情况。方法采用纸片扩散（K-B）法检测本院ICU2008～2010年临床分离的289株鲍曼不动杆菌对11种抗菌药物的耐药性。结果 3年中11种抗菌药物中,头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南的耐药率分别从2008年的40.0%和46.7%上升到2010年的64.3%和82.6%。结论 ICU分离的ABA耐药性较高且呈上升趋势。     

2015—2021年CHINET链球菌属细菌耐药性监测

目的 了解2015—2021年国内主要地区医疗机构临床分离链球菌属细菌对抗菌药物的耐药性。方法 对国内主要地区51所医院临床分离的链球菌属采用纸片扩散法（K-B法）或E试验方法或自动化商业药敏测试系统，按CHINET统一监测方案进行抗菌药物敏感性试验，并按2022年CLSI折点标准统计分析总结。结果 2015—2021年共收集到89 684株链球菌属细菌，包括肺炎链球菌35 254株（39.3%）,β溶血链球菌42 563株（47.6%），草绿色链球菌11 767株（13.1%）。42563株β溶血链球菌中A群、B群以及未能鉴定分型的链球菌分别为39.8%、52.8%、7.4%。非脑脊液样本儿童患者分离的25 552株肺炎链球菌中青霉类敏感、中介、耐药（PSSP、PISP、PRSP）菌株的检出率分别为86.2%～97.7%、1.7%～6.5%和0.6%～7.3%，在成人患者7 997株中的检出率分别为92.0%～95.1%、3.8%～5.3%和1.4%～2.7%。脑脊液分离肺炎链球菌PRSP占比81.2%。无论是脑脊液或非脑脊液分离儿童和成人的肺炎链球菌对红霉素和克林霉素高度耐药，耐药...