复方抗癌合剂的体外实验研究

目的：为了寻找效高、毒低的抗癌中草药,我所通过十余年的抗癌中草药筛选,将其中的十余种组成方剂。复方抗癌剂为三七、半枝莲半夏、白茅根、黄芪、柴胡、土茯苓、川芎、莪术、白花蛇舌草、桂枝等十余味中草药组成的复方水煎剂．方法：本文通过体外癌细胞杀伤实验,癌细胞集落形成抑制实验,MTT检测细胞毒性实验．结果：三项实验指标显示复方抗癌合剂对GLC肺癌细胞、SGC胃癌细胞、Hela宫颈鳞癌细胞均有明显的抑制杀伤效果,对肿瘤干细胞集落形成也有明显的抑制作用．MTT检测说明复方抗癌合剂的量效关系为阳性对照药长春新碱的l／l0,而复方抗癌合剂为水煮粗提液,今后可通过化学提纯有效成份,将大大提高其抗癌效果．     

抗大肠杆菌耐热性肠毒素ST1 McAb杂交瘤细胞系的建立及应用

目的 耐热性肠毒素ST1单克隆抗体制备及在感染性腹泻诊断中的应用。方法 应用基因工程菌株分泌的肠毒素制备ST1包涵体，免疫Balb／c小鼠，成功制备了3株特异性抗ST1的单克隆抗体细胞株，用其中1株McAb建立了检测ST1的双单克隆抗体夹心ELISA法。结果 检测52株从临床腹泻病人粪便中分离的大肠杆菌，检出ST1阳性率为26．92％，与ST1检测的经典方法乳鼠灌胃法符合率为96．15％。结论 该方法是一种简捷、灵敏和特异的检测方法，具有实际应用价值。     

浙贝母和平贝母中淀粉的结晶学、形态学和热性质研究及与马铃薯淀粉的比较

目的为了能够更加充分了解贝母属药用植物,通过各种分析方法对两种贝母——浙贝母和平贝母中所包含的淀粉的物理化学性质进行了研究。方法采用X射线衍射,扫描电子显微镜(SEM)以及热分析(TGA)的方法对两种贝母中淀粉的性质进行了比较。结果通过研究发现,两种贝母淀粉的晶体类型都为典型的B型,这与马铃薯淀粉的晶体类型是一致的。浙贝母和平贝母淀粉的结晶度分别为29.9%和20.1%,而马铃薯淀粉的结晶度为44.9%。从两种贝母淀粉的结晶度可以看出,平贝母淀粉中直链淀粉的量要高于浙贝母淀粉中直链淀粉的量。两种贝母淀粉的颗粒尺寸为5~40μm,而且他们都小于马铃薯淀粉的颗粒尺寸。两种贝母淀粉颗粒的形状是圆形的和椭圆形的。热稳定性表明由于植物来源的不同导致淀粉颗粒结构不同,从而热稳定性存在明显的差异。结论两种贝母淀粉由于来源不同,物理化学性质存在明显的差异。     

食管癌术后胸内吻合口瘘的非手术治疗

目的:探讨食管癌术后胸内吻合口瘘的非手术治疗的方法.方法:对 6例胸内吻合口瘘进行回顾性分析.结果:均痊 愈出院,无一例死亡.结论:对于胸内吻合口瘘,除要继续抗感染、营养支持外,还要综合处理.     

热休克蛋白70肿瘤多肽复合物抗胶质瘤免疫效应的研究

目的探讨从小鼠胶质瘤组织中提取的热休克蛋白70肿瘤肽复合物(HSP70-PC)及其抗胶质瘤免疫保护效应.方法自小鼠胶质母细胞瘤G422肿瘤组织提取HSP70-PC,小鼠分别以HSP70-PC(10μg/只)、细胞裂解液(10μg/只)免疫后分别在其颅内和皮下接种肿瘤,比较颅内荷瘤组与未免疫组的成瘤率及生存时间;皮下荷瘤组与未免疫组的成瘤率、肿瘤重量,并应用流式细胞仪技术测定小鼠心腔血中淋巴细胞百分比、CD3 CD8 和CD3 CD4 T淋巴细胞的百分比.结果颅内荷瘤组小鼠成瘤率为100%、100%、83.3%,平均生存期为(16.00±0.58)d、(18.70±1.33)d、(25.33±1.86)d;皮下荷瘤组小鼠成瘤率为100%、100%、33.3%,肿瘤重量为(6.00±1.67)g,(2.30±1.23)g,(0.12±0.20)g,流式细胞仪检测小鼠淋巴细胞群为(32.65±9.06)%、(51.30±7.72)%、(67.42±6)%;CD3 CD8 T淋巴细胞为(4.30±1.97)%、(7.06±2.20)%、(11.75±3.57)%;CD3 CD4 T淋巴细胞为(14.28±6.75)%、(17.17±5.04)%、(22.5±5.18)%.结论热休克蛋白70肿瘤肽复合物可诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应,延长小鼠生存期,具有明显的抗胶质瘤免疫保护作用.     

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2的原核表达、纯化及酶活检测

目的：以人类多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶2（ppGalNAc-12）为研究对象，利用载体pGEX-5X-3在大肠杆菌（E．Coli）BL21中原核表达其编码序列，并对表达产物进行纯化、复性及酶活检测。方法：首先利用PCR技术从克隆载体pDONR201-T2得到ppGalNAc-T2全长编码序列，将其亚克隆至原核表达载体pGEX-5X-3，形成重组表达质粒pGEX-5X-3／T2。重组质粒转化大肠杆菌DH5α，测序鉴定后转化BL21，异丙基硫代半乳糖（IPTG）诱导后，表达产物为主要以包涵体形式存在的融合蛋白。对其复性后用谷胱甘肽-琼脂糖（Glutathione-Sepharose）4B亲和层析柱进行纯化。然后根据ppGalNAc-T2的催化功能，设计底物，建立酶促反应体系，利用高效液相色谱（HPLC）进行酶活分析。结果：成功构建了原核表达重组载体pGEX-5X-3／T2，通过蛋白质电泳检测到分子量约为90 kD的融合蛋白的表达，利用亲和层析得到纯化的酶蛋白，并经Western印迹得以验证。反应后体系上柱洗脱后出现酶促反应的产物洗脱峰。结论：成功构建了重组表达载体pGEX-5X-3／T2，ppGalNAc-T2伞长编码序列被成功表达、纯化及复性，检测到具有酶活性。     

芒针配推拿辨证分期治疗肩周炎32例

目的：观察针刺配合推拿辨证分期治疗肩周炎的疗效。方法：应用毫针针刺配合推拿手法依据中医辨证分型结合西医分期对32例肩周炎患者治疗,观察疗效。结果：治疗32例患者,治愈26例占81．25％,好转5例占15．63％,未愈1例占3．13％,总有效率为96．88％。结论：依据中医辨证分型结合西医分期特点,应用芒针配合推拿治疗肩周炎疗效理想,值得临床推广。     

Rab10蛋白及其在肿瘤中的研究进展

Rab10蛋白作为Rab鸟苷三磷酸酶家族成员之一,不仅参与细胞内囊泡的形成、转运、锚定和融合过程,同时也影响肿瘤的发生发展.通过对Rab10在细胞内囊泡运输和肿瘤中的机制研究,可能为抗肿瘤治疗提供潜在的靶点和新思路.     

基于16S rRNA测序分析CRE定植对ICU患者肠道微生物的影响

目的 采用16S rRNA测序方法分析耐碳青霉烯类肠杆菌(CRE)定植对重症监护病房(ICU)患者肠道微生物的影响。 方法 收集ICU患者新鲜粪便或肛拭子标本, 接种于含有2 μg/mL厄他培南的MacConkey平板上培养。采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对菌株进行鉴定, 纸片扩散法对菌株进行药敏分析, 采用聚合酶链式反应(PCR)对初步筛查出的CRE菌株进行16S rDNA片段扩增, 采用微量肉汤稀释法进一步确定CRE。最后, 分别提取CRE定植组与非定植组患者的粪便或肛拭子标本基因组DNA在HiSeq平台进行16S rRNA测序分析。 结果 共收集ICU患者粪便或肛拭子标本241份, 其中CRE阳性标本17份。16S扩增子V3~V4区测序共分离到726 OTUs, CRE未定植组有631 OTUs, CRE定植组有480 OTUs, 两组间共有385 OTUs。这些共有OTUs绝大多数属于厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门、疣微菌门及放线菌门。在纲水平上, CRE定植前后γ-变形菌纲(W=193.000, P＜0.001, FDR=0.004)和互营养菌(W=37.500, P=0.001, FDR=0.018)相对丰度差异有统计学意义。在种水平上, 两组间肺炎克雷伯菌(W=195.000, P＜0.001)、解糖肠球菌(W=153.000, P=0.038)及弯曲杆菌(W=63.500, P=0.050)比较差异有统计学意义。未发现肠道CRE定植对ICU患者肠道微生物KEGG功能通路有显著影响。 结论 CRE定植会降低ICU患者肠道微生物的多样性, CRE定植组在肺炎克雷伯菌、解糖肠球菌及弯曲杆菌的丰度上与非定植组存在显著差异。     

基于代谢网络变化的中药整体效应评价方法研究

由于中医的“整体观”和中药复方的复杂非线形特征,采用常规药理指标时中药复方的效应进行评价存在着局限性,而现代医学越来越多地采用系统生物学方法对疾病和药物效应进行研究,使得两个医学体系在整体观和方法学上逐渐走向沟通、互补和融合,为中药复方整体效应评价方法的创新提供了契机。通过研究本文提出了采用系统生物学的策略和方法,基于疾病和药物干预下的系统代谢网络的整体性和动态性的变化评价中药整体效应,从而揭示中医“证”的内涵,解释中药复方对疾病的治疗作用,以及指导中药的安全用药。