氟斑牙形成的分子机制研究进展

氟中毒（fluorosis）是由于通过饮水、食物和空气等途径长期摄入过量氟,导致人体中氟蓄积,从而引起以氟斑牙、氟骨症为主要特征的一种慢性全身性疾病。     

Bcl-2在成釉细胞分化、分泌过程中的表达研究

目的:检测凋亡调控抑制蛋白Bcl-2在成釉细胞分化、分泌过程中的表达,观察细胞超微结构的变化,探讨Bcl-2和细胞凋亡在该过程的可能作用。方法:制备出生后2、5、7、9、14 d不同发育阶段的BALB/C小鼠下颌第一磨牙牙胚标本,采用原位末端标记法(TUNEL法)和PV免疫组织化学技术观察成釉细胞分化、分泌和釉质发育完成各阶段细胞凋亡以及Bcl-2的表达情况;透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果:出生后第2～5天,小鼠下颌第一磨牙成釉细胞处于分化期,超微结构可见胞浆内有高尔基复合体和线粒体,并有细胞增生的核分裂;免疫组化结果显示Bcl-2阳性表达,TUNEL检测结果发现部分细胞胞核阳性表达,提示细胞凋亡的存在;出生后第7天,成釉细胞已开始分泌,可见新形成的釉质,胞核远基底排列,胞核附近可见大量线粒体,胞质内可见大量高尔基复合体和粗面内质网,胞浆呈Bcl-2强阳性表达,TUNEL检测结果发现少量细胞胞核阳性表达;出生后14 d,釉质发育完成,成釉细胞变短,间隙变大,细胞器数量减少,核膜逐渐不清,核糖体脱颗粒水肿,呈现凋亡征象,胞浆未见Bcl-2阳性表达。结论:细胞凋亡在釉质发育的各期皆有表达,Bcl-2作为凋亡抑制基因可能参与了成釉细胞的分化、分泌的调控。     

氟对体外培养大鼠成釉细胞 HAT-7细胞活性和对细胞内 Ca2+浓度的影响

目的:观察氟对体外培养的大鼠成釉细胞HAT-7细胞活性及细胞内Ca2+浓度的影响。方法:取对数生长期的HAT-7细胞,分别加入不同浓度的Na F培养液,培养24、48、72 h后,用CCK-8检测细胞的活性;流式细胞术分析氟对细胞凋亡的影响;激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子的浓度。结果:Na F浓度为0.4、0.8 mmol/L时,促进成釉细胞增殖;当Na F浓度大于1.6 mmol/L时,促进成釉细胞凋亡,Na F浓度为1.6 mmol/L时,细胞早期凋亡数量增加,激光共聚焦显微镜检测证实,1.6mmol/L Na F可以诱导大鼠成釉细胞内Ca2+浓度升高,Na F对HAT-7细胞的上述作用与浓度和作用时间呈正相关。结论:低浓度氟促进HAT-7细胞增殖,高浓度则抑制其增殖。Na F浓度超过1.6 mmol/L时,可诱导成釉细胞凋亡,并诱导成釉细胞内Ca2+浓度增加。     

Runx2在牙釉质形成中的作用研究

目的:研究小鼠成釉细胞中Runx2对釉成熟蛋白(Amelotin,AMTN)、成釉蛋白(Ameloblas-tin,AMBN)、牙成釉细胞相关蛋白(odontogenic ameloblast-asssociated protein,ODAM)基因表达的调控作用,为研究Runx 2在牙釉质形成中的作用奠定基础.方法:通...     

过量氟对大鼠HAT-7细胞系自噬的影响

目的:研究过量氟对大鼠HAT-7细胞系自噬的影响.方法:取大鼠HAT-7细胞,分别加入不同浓度的氟化钠培养液,培养48 h后,透射电子显微镜检测过量氟对大鼠成釉细胞自噬泡的影响,Western免疫印迹和定量反转录聚合酶链反应技术检测过量氟诱导大鼠成釉细胞内微管相关蛋白轻链(LC3)和Beclin 1表达的变化.选择40只Wistar大鼠,随机分为A、B、C、D 4组,进行免疫组织化学实验,检测饮水氟对大鼠自噬分子表达的影响.采用SPSS 13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:实验组自噬泡明显增多;Western免疫印迹及定量反转录聚合酶链反应结果显示,随着氟浓度的增加,HAT-7细胞自噬相关基因LC3和Beclin 1表达增加.回归分析结果显示,氟化钠与LC3及Beclin 1的表达有线性关系;大鼠体内免疫组织化学染色结果显示,实验组LC3以及Beclin 1为棕褐色,呈阳性表达.结论:过量氟诱导大鼠HAT-7细胞系自噬.     

不同浓度氟化物对体外培养成釉细胞活性的影响

目的建立大鼠成釉细胞原代培养技术,观察不同浓度氟化钠对成釉细胞活性的影响,为研究氟斑牙的形成提供依据。方法取10¹5 d的Wistar大鼠磨牙牙胚组织进行原代培养,通过酶消化法,分离培养成釉细胞。加入不同浓度(0、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4 mmol/L)的氟化钠作用于成釉细胞,分别培养24、48、72 h后,采用CCK-8法检测各组细胞的活性情况。结果①当氟化物浓度为0.4、0.8 mmol/L时,对成釉细胞的增殖有促进作用,且随着时间的增加而增强。②当氟化物浓度为1.6、3.2、6.4 mmol/L时,对成釉细胞的增殖有抑制作用,随着氟化钠浓度的增加,对细胞的抑制作用也逐渐增强,并且抑制作用随着时间的延长愈发明显。结论不同浓度的氟化物对体外培养成釉细胞的活性具有促进和抑制双向作用。     

细胞凋亡在大鼠切牙釉质形成中的意义

目的：研究细胞凋亡大鼠切牙釉质形成中的作用。方法：采用HE染色、免疫组织化学技术和原位末端细胞凋亡（TUNEL）,观察纯系Wistar大鼠切牙釉质形成过程中的细胞凋亡。结果：大鼠切牙可再现釉质形成的全过程。细胞凋亡在转换期、尤其在成熟期成釉细胞和中间层细胞明显,凋亡相关基因Bax蛋白的表达与TUNEL阳性细胞相关。结论：细胞凋亡及Bax基因参与了釉质形成的调控。     

大鼠牙胚耳皮下异位移植的发育组织学研究[英]／Mezadri TJ…／／Med Oral．

作者将钟状期晚期的牙胚移植入大鼠耳皮下，分析牙胚自身的发育潜能及其与植入位置间的关系。     

T-2毒素中毒大鼠切牙成釉细胞的形态观察研究

目的观察不同剂量T-2毒素作用下大鼠切牙成釉细胞的形态变化,探讨其对牙釉质形成的影响。方法选择60只SD大鼠,随机分为3组:对照组,实验组1和实验组2,T-2毒素灌胃剂量分别为0ng/gBW/d,100ng/gBW/d和200ng/gBW/d。4周后处死动物,沿大鼠右下切牙长轴做连续切片,HE染色法观察T-2毒素对成釉细胞形态的影响。结果肉眼观察染毒组大鼠切牙色淡黄,透光度和光泽不好。光镜下可见染毒组成釉细胞Tome’s突消失,细胞扭曲变形且可见细空泡,高剂量T-2毒素影响更明显。结论 T-2毒素可使大鼠切牙的分泌期和转换器的成釉细胞形态发生改变,进而使肉眼观呈现釉质发育不全的临床改变。     

上颌骨成釉细胞纤维瘤1例

患者,女,22岁,以“右面部肿胀2个月”为主诉于2012年6月21日入院。专科查体：右侧面部膨隆,右上颌前庭沟膨隆,右侧硬腭膨隆（图1）,压痛（-）,上颌牙齿列齐,无缺损,无活动,无张口受限,眼球活动及视力正常,双侧鼻腔通畅。