阻遏蛋白β-TrCP在小鼠牙胚不同发育时期的表达与意义

目的观察Sonic hedgehog（shh）信号转导通路的阻遏蛋白β- TrCP在小鼠牙胚发育不同时期的表达情况，探讨β- TrCP在晚期牙胚发育中的作用与意义。方法取不同发育时期的鼠胚、乳鼠鼠头标本，用标记生物素链亲和素LsAB法观察β- TrCP蛋白在不同发育时期牙胚组织的表达情况。结果β- TrCP在胚胎10.5、13.5、14.5、16.5、18.5 d的小鼠牙胚上皮层与间充质层，以及出生后0、3、6 d的小鼠成釉细胞与成牙本质细胞胞浆呈特征性表达。结论β- TrCP在正常发育小鼠牙胚及成釉细胞与成牙本质细胞特征性表达，提示β- TrCP在牙胚发育中维持/限定shh信号通路的正常信号转导具有重要意义。     

内质网应激分子在慢性氟中毒大鼠成釉细胞中的表达

目的 研究不同浓度的氟化物对大鼠成釉细胞内质网应激分子表达的作用,探讨氟牙症形成的机制.方法 选择30只Wistar大鼠,随机分成A、B、C3组,并分别饮用氟浓度为0、75、150mg/L的自来水,8周后处死动物,并制备下颌切牙切片,通过HE染色、免疫组化、透射电镜、TUNEL检测等实验方法,观察3组大鼠成釉细胞内质网应激分子的表达及细胞凋亡情况.结果 随着氟浓度的升高,内质网应激分子GRP78 A组为阳性表达,B、C组为强阳性表达（F=27.42,P＜0.05）;XBP-1 A组为弱阳性表达,B组为阳性表达,C组为强阳性表达（F=139.7,P＜0.05）;Caspase-12 A组为弱阳性表达,B组为阳性表达,C组为强阳性表达（F=43.91,P＜0.05）;CHOP A组为阴性表达,B组为阳性表达,C组为强阳性表达（F=19.61,P＜0.05）;TUNEL检测显示氟浓度为150mg/L组成釉细胞凋亡数量显著高于75mg/L组和自来水组（F=124.02,P＜0.05）.利用MetaMorph显微图像分析软件对结果进行分析,用spss13.0软件包进行统计处理.结论 大鼠饮用高浓度的氟化水可激活内质网应激分子,导致成釉细胞产生内质网应激,并最终诱导细胞发生凋亡.     

中间层细胞增殖与凋亡在釉质形成中的作用

目的检测小鼠牙釉质形成过程中中间层细胞的增殖与凋亡的表达情况,探讨细胞增殖与凋亡在釉质形成过程中的作用。方法制备出生后1、3、5、7、9、15和17天发育阶段的BALA/C小鼠牙胚的石蜡标本,采用SP免疫组织化学技术及原位末端标记法观察中间层细胞及成釉细胞分化各阶段细胞增殖及凋亡的表达情况。结果釉质形成早期,中间层细胞、成釉细胞均呈PCNA阳性表达,且两者在同期表达强弱程度上具有一致性,随着牙冠发育的完成,PCNA的表达减弱;凋亡在分化各期的成釉细胞中皆有表达,尤其在成熟期成釉细胞中表达明显增强,中间层细胞中可散见凋亡现象。结论细胞增殖与凋亡是牙齿正常发育所必需的重要调控机制,中间层细胞与成釉细胞间的增殖与凋亡在时空表达强弱程度变化上具有一致性,具有一定"量"的变化相关性,提示中间层细胞在釉质形态的正常发育过程中起到一定的调控作用。     

氟对小鼠成釉细胞凋亡及c-myc表达的影响

目的观察氟化物作用下小鼠切牙成釉细胞凋亡及c-myc的表达,初步探讨c-myc在氟牙症发生中的作用。方法建立小鼠氟牙症模型,利用原位末端标记法(TUNEL)检测成釉细胞凋亡发生的情况,并利用免疫组织化学技术检测成釉细胞内c-myc的表达。结果TUNEL检测结果显示实验组小鼠切牙成釉细胞在各期凋亡数量均增多,与对照组比较有差异;原癌基因c-myc在实验组成釉细胞的分泌期表达增强,分泌前期表达较弱;实验组和对照组比较有显著性差异。结论氟作用下细胞因子c-myc的表达失调可促进成釉细胞凋亡,产生氟牙症病理改变。     

成釉细胞纤维牙瘤的临床特点及治疗

成釉细胞纤维牙瘤是一种少见的牙源性肿瘤,多发生于20岁以下,男性多于女性,上下颌骨均可发生,多发生于下颌骨,生长缓慢,无自觉症状,常表现为颌面部的肿胀、牙齿迟萌。X线片常见单房改变,表现为边界清楚的囊性透射影,不易与牙源性肿瘤鉴别。组织学表现,软组织成分为牙源性上皮和胚胎性的结缔组织,类似成釉细胞纤维瘤的形态,硬组织成分为牙本质、釉质样组织,类似牙瘤。恶变可能性低,治疗方式为手术摘除,一般不易复发。该文结合我科收治的成釉细胞纤维牙瘤病例,探讨成釉细胞纤维牙瘤的临床特点及治疗与预后。     

Investigation of basement membrane proteins in a case of granular cell ameloblastoma

Granular cell ameloblastoma is a rare,benign neoplasm of the odontogenic epithelium.A case of massive granular cell ameloblastoma in a 44-year-old Thai female is reported.Histopathological features displayed a follicular type of ameloblastoma with an accumulation of granular cells residing within the tumor follicles.After treatment by partial mandibulectomy,the patient showed a good prognosis without recurrence in a 2-year follow-up.To characterize the granular cells in ameloblastoma,we examined the expression of basement membrane(BM) proteins,including collagen type IV,laminins 1 and 5 and fibronectin using immunohistochemistry.Except for the granular cells,the tumor cells demonstrated a similar expression of BM proteins compared to follicular and plexiform ameloblastomas in our previous study,whereas the granular cells showed strong positivity to laminins 1 and 5 and fibronectin.The increased fibronectin expression in granular cells suggests a possibility of age-related transformation of granular cells in ameloblastoma.     

过量氟诱导成釉细胞钙超载及细胞凋亡的实验研究

目的 研究过量氟对体外培养大鼠成釉细胞内钙超载及细胞凋亡的影响。方法 取大鼠成釉细胞系HAT-7细胞,分别加入不同浓度（0、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4 mmol·L^-1）的氟化钠培养液,培养48 h后,采用Cell Counting Kit 8（CCK-8）试剂盒检测各组细胞的活性,流式细胞术分析氟对细胞凋亡的影响,激光扫描共聚焦显微镜、Western blot试验和实时荧光定量聚合酶链反应技术检测过量氟诱导大鼠成釉细胞内Ca²⁺浓度和钙网蛋白表达的变化。结果 氟化钠浓度高于1.6 mmol·L^-1时,可抑制成釉细胞的活性,成釉细胞内Ca²⁺浓度升高,钙网蛋白表达上调,细胞早期凋亡数量增加,并且随着浓度的增加,细胞凋亡的数量也随之增加。结论 过量氟可引起成釉细胞内钙超载,诱导成釉细胞凋亡。     

钟状期成釉细胞的体外生长研究

目的:通过对乳牙牙胚成釉细胞的体外培养生长情况的研究,了解成釉细胞的生长和分化过程.方法:解剖分离因疾病原因引产遗弃的19周胎儿下颌骨,半侧固定后拍摄数字X线影像,连续切片HE染色;另半侧未固定的组织分离乳牙牙胚成釉器,胶原酶消化法制成细胞悬液,采用差速贴壁和无血清培养基选择性培养成釉细胞.培养的乳牙胚成釉细胞通过细胞角蛋白14免疫细胞染色鉴定,并以RT-PCR方法检测釉质基质蛋白的表达.结果:X线影像显示牙胚冠部有硬组织形成,组织学乳牙牙胚处于钟状期,可见分化的成釉细胞分泌大量细胞外基质,釉牙本质界处釉质已矿化.无血清培养基中牙源性上皮的生长分化良好,细胞角蛋白14染色阳性,RT-PCR显示有釉蛋白、釉原蛋白和成釉蛋白的表达.结论:采用无血清培养基可以选择性的培养乳牙胚钟状期成釉细胞,能够较好反映成釉细胞的生长分化状态.钟状期分化的成釉细胞进入细胞外基质分泌活跃期,并在釉牙本质界处最早出现釉质的矿化.     

细胞极性在牙发育中的研究进展

细胞极性是指由于极性蛋白复合物之间的相互协作或排斥，使细胞骨架、细胞器以及生物大分子等呈极性分布的特性。细胞各个部分实现不同生理功能需要细胞极性蛋白及分子的精密调控。细胞极性在牙发育中发挥着重要作用，特别对于成釉细胞和成牙本质细胞的分化和功能意义重大。文章就细胞极性及相关分子和通路在牙发育中的研究进展进行综述。     

整合素β1和层黏连蛋白受体1在小鼠牙发育不同阶段牙胚组织中的表达及其意义

研究小鼠磨牙发育不同阶段牙胚组织中整合素β1和层黏连蛋白受体1（LAMR1）的表达模式，探讨二者在小鼠磨牙牙胚组织发育过程中可能的作用机制及其意义。