Investigation of basement membrane proteins in a case of granular cell ameloblastoma

Granular cell ameloblastoma is a rare,benign neoplasm of the odontogenic epithelium.A case of massive granular cell ameloblastoma in a 44-year-old Thai female is reported.Histopathological features displayed a follicular type of ameloblastoma with an accumulation of granular cells residing within the tumor follicles.After treatment by partial mandibulectomy,the patient showed a good prognosis without recurrence in a 2-year follow-up.To characterize the granular cells in ameloblastoma,we examined the expression of basement membrane(BM) proteins,including collagen type IV,laminins 1 and 5 and fibronectin using immunohistochemistry.Except for the granular cells,the tumor cells demonstrated a similar expression of BM proteins compared to follicular and plexiform ameloblastomas in our previous study,whereas the granular cells showed strong positivity to laminins 1 and 5 and fibronectin.The increased fibronectin expression in granular cells suggests a possibility of age-related transformation of granular cells in ameloblastoma.     

内质网应激分子在慢性氟中毒大鼠成釉细胞中的表达

目的 研究不同浓度的氟化物对大鼠成釉细胞内质网应激分子表达的作用,探讨氟牙症形成的机制.方法 选择30只Wistar大鼠,随机分成A、B、C3组,并分别饮用氟浓度为0、75、150mg/L的自来水,8周后处死动物,并制备下颌切牙切片,通过HE染色、免疫组化、透射电镜、TUNEL检测等实验方法,观察3组大鼠成釉细胞内质网应激分子的表达及细胞凋亡情况.结果 随着氟浓度的升高,内质网应激分子GRP78 A组为阳性表达,B、C组为强阳性表达（F=27.42,P＜0.05）;XBP-1 A组为弱阳性表达,B组为阳性表达,C组为强阳性表达（F=139.7,P＜0.05）;Caspase-12 A组为弱阳性表达,B组为阳性表达,C组为强阳性表达（F=43.91,P＜0.05）;CHOP A组为阴性表达,B组为阳性表达,C组为强阳性表达（F=19.61,P＜0.05）;TUNEL检测显示氟浓度为150mg/L组成釉细胞凋亡数量显著高于75mg/L组和自来水组（F=124.02,P＜0.05）.利用MetaMorph显微图像分析软件对结果进行分析,用spss13.0软件包进行统计处理.结论 大鼠饮用高浓度的氟化水可激活内质网应激分子,导致成釉细胞产生内质网应激,并最终诱导细胞发生凋亡.     

骨保护素在犬恒牙胚发育中的表达及意义

目的：探讨犬乳恒牙替挟过程中骨保护素在犬恒牙胚发育中的表达及意义。方法：分别对乳牙期、替牙期、恒牙期本地犬取牙胚及其周围组织，制备石蜡切片，进行HE染色和牙胚内OPG的免疫组化染色，用彩色病理图像分析系统分析各组染色强度灰度值。结果：乳牙期、替牙期犬牙胚的成牙本质细胞OPG的免疫纽化强度明显高于另外一组，成釉细胞中也有阳性信号。结论：OPG可能参与恒牙胚的形成和发育。     

氟对小鼠成釉细胞Nrf2表达及核浆分布的影响

目的:探讨氟对小鼠成釉细胞Nrf2基因表达、蛋白质生成及蛋白核浆分布的影响。方法:采用不同浓度NaF(0. 25,0. 50,1. 00,2. 00,4. 00 mmol/L)分别作用成釉细胞24 h;同时采用叔丁基对苯二酚(tBHQ,50 mmol/L)预处理成釉细胞12 h后再采用不同浓度NaF(0. 25,0. 50,1. 00,2. 00,4. 00 mmol/L)作用24 h。用RT-PCR和Western Blot检测细胞Nrf2 mRNA和蛋白表达水平以及蛋白核浆分布情况。结果:与对照组比较,单独染氟组小鼠成釉细胞Nrf2 mRNA表达逐渐升高,其中1. 00 mmol/L和4. 00 mmol/L单染氟组Nrf2 mRNA表达显著升高(P<0. 05)。大部分单染氟组Nrf2核蛋白和浆蛋白表达上调,其中1. 00 mmol/L和2. 00 mmol/L单染氟组Nrf2核蛋白上调明显(P<0. 05),0. 25 mmol/L和2. 00 mmol/L的单染氟组Nrf2浆蛋白表达显著升高(P<0. 05)。tBHQ预处理后,与同剂量单独染氟组比较,除1. 00 mmol/L剂量,其他组Nrf2 mRNA相对表达量均显著升高(P<0. 05)。除4. 00 mmol/L剂量,各剂量组Nrf2核蛋白及浆蛋白的表达量均显著增多(P<0. 05)。在0. 25,1. 00,2. 00 mmol/L的剂量条件下,tBHQ处理组核浆比值与tBHQ对照组相比明显上升(P<0. 05)。结论:氟在一定的剂量条件下,可激活小鼠成釉细胞Nrf2信号因子,上调其基因及蛋白质表达,促进蛋白核转位。     

成釉细胞纤维瘤中BRAF突变基因的检测

目的:检测BRAF基因在成釉细胞纤维瘤(ameloblastic fibroma, AF)中的突变情况,进一步分析该突变与AF的临床表现之间的关系,以期为寻求AF的靶向治疗提供新方法。方法:收集2002年1月至2015年12月期间北京大学口腔医院诊断为AF的病例16例。AF石蜡包埋组织经切片后进行苏木精伊红染色,由两名病理科专家确认病例选取的准确性,按照DNA提取试剂盒使用说明提取组织DNA。对BRAF V600E位点进行PCR扩增,采用直接测序的方法进行BRAF V600E的突变检测,并进一步分析16例AF的临床资料。结果:16例AF患者中包括7例男性,9例女性;3例发生于上颌,13例发生于下颌;入院年龄为2~67岁(中位年龄14.5岁)。病变常表现为无痛性肿胀,生长缓慢。16例AF均携带BRAF基因突变,突变率为100%(16/16), 均为15号外显子上V600E突变型(c.1799T>A),导致在氨基酸水平上由缬氨酸变为谷氨酸,从而使胸腺嘧啶转化为腺苷酸。现有病例表明BRAF突变与AF的年龄、性别、发病部位和复发等无相关性。结论:AF中存在BRAF V600E位点的高突变率,提示BRAF V600E突变可能成为AF发生发展的关键事件,同时为AF患者应用BRAF抑制剂进行靶向治疗提供了一定的理论支持,其病理学意义有待进一步研究。     

成釉细胞纤维牙肉瘤1例

患者男性,20岁。因左下后牙疼痛伴牙龈及左颊肿胀2月而入院。体检:左右面部不对称,左面部膨隆,开口度2.5cm。双合诊发现左颊下颌骨升支有一中等硬度不活动、边界清楚的肿块,大小5cm×3cm×3cm,口内触诊有压痛,下颌升支骨板已消失,|7松动Ⅲ°。冠周可见白色肉芽组织。双侧腮腺、颌下腺导管口无红肿、无异常分泌物,双颌下未触及肿大淋巴结。X线片见左下颌升支颌骨有不规则边界不清的透射区,其中并见阻射区。临床诊断:左下颌骨肉瘤。患者行左侧下颌骨及肿瘤切除术。病理检查:左下颌骨切除标本,下颌升支骨质破坏,可见4cm×3cm×2cm大小肿物,穿…     

阻遏蛋白β-TrCP在小鼠牙胚不同发育时期的表达与意义

目的观察Sonic hedgehog（shh）信号转导通路的阻遏蛋白β- TrCP在小鼠牙胚发育不同时期的表达情况，探讨β- TrCP在晚期牙胚发育中的作用与意义。方法取不同发育时期的鼠胚、乳鼠鼠头标本，用标记生物素链亲和素LsAB法观察β- TrCP蛋白在不同发育时期牙胚组织的表达情况。结果β- TrCP在胚胎10.5、13.5、14.5、16.5、18.5 d的小鼠牙胚上皮层与间充质层，以及出生后0、3、6 d的小鼠成釉细胞与成牙本质细胞胞浆呈特征性表达。结论β- TrCP在正常发育小鼠牙胚及成釉细胞与成牙本质细胞特征性表达，提示β- TrCP在牙胚发育中维持/限定shh信号通路的正常信号转导具有重要意义。     

成釉细胞纤维肉瘤的临床病理特征(附4例报告)

成釉细胞纤维肉瘤是一种少见的牙源性肿瘤。本文报告4例。结合文献总结其临床特征、组织病理学改变、诊断与鉴别诊断要点、组织来源及生物学行为。     

中间层细胞增殖与凋亡在釉质形成中的作用

目的检测小鼠牙釉质形成过程中中间层细胞的增殖与凋亡的表达情况,探讨细胞增殖与凋亡在釉质形成过程中的作用。方法制备出生后1、3、5、7、9、15和17天发育阶段的BALA/C小鼠牙胚的石蜡标本,采用SP免疫组织化学技术及原位末端标记法观察中间层细胞及成釉细胞分化各阶段细胞增殖及凋亡的表达情况。结果釉质形成早期,中间层细胞、成釉细胞均呈PCNA阳性表达,且两者在同期表达强弱程度上具有一致性,随着牙冠发育的完成,PCNA的表达减弱;凋亡在分化各期的成釉细胞中皆有表达,尤其在成熟期成釉细胞中表达明显增强,中间层细胞中可散见凋亡现象。结论细胞增殖与凋亡是牙齿正常发育所必需的重要调控机制,中间层细胞与成釉细胞间的增殖与凋亡在时空表达强弱程度变化上具有一致性,具有一定"量"的变化相关性,提示中间层细胞在釉质形态的正常发育过程中起到一定的调控作用。