c-Src在乳腺癌抗雌激素受体α治疗过程中的改变及其耐药机制的研究

目的：探讨原癌基因c-Src在乳腺癌抗雌激素受体α（estrogen receptor, ERα）治疗过程中的改变及其耐药机制的研究。方法：用雌激素受体阻滞剂三苯氧胺（Tamoxifen, TAM）长期治疗ERα阳性的MCF-7细胞而建立TAM耐药细胞 （TAM-R）。用免疫电泳的方法检测c-Src、ERα、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR) 在耐药细胞上的表达,用免疫沉淀的方法来检测这些分子间的相互作用,并用c-Src的抑制剂PP2阻断其磷酸化,来探讨对耐药的逆转。结果：TAM (10-7 M) 显著抑制对照组MCF-7细胞的生长(P<0.001),而不能抑制TAM-R细胞的生长。与对照组MCF-7细胞相比,c-Src、ERα、EGFR在TAM-R上的表达量没有改变,但是,c-Src磷酸化水平在耐药细胞上表达明显增高。并且在耐药细胞上,ERα与EGFR之间的相互结合明显增高,PP2可以明显阻断两分子间的相互作用。更重要的是, PP2可以逆转TAM-R细胞的耐药性,也就是TAM可以再次抑制该逆转细胞的生长。结论：c-Src是介导ERα与EGFR之间相互作用的关键分子,阻断这种相互作用可以重新获得对TAM治疗的敏感性。本研究提示c-Src抑制剂可以和TAM交替使用来提高乳腺癌的治疗效果。     

Tyrphostins AG1478对内分泌耐药乳腺癌细胞的作用

目的：研究表皮生长因子受体（EGFR）抑制剂对内分泌治疗耐药的激素依赖性乳腺癌细胞的作用,探讨EGFR抑制剂的应用前景.方法：选择雌激素受体（ER）阳性的乳腺癌细胞MCF-7,建立三苯氧胺（TAM）耐药的乳腺癌细胞（T-MCF-7）.研究EGFR抑制剂Tyrphostins AG1478对T-MCF-7细胞的作用,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法进行细胞生长抑制试验,流式细胞仪（FCM）检测细胞周期的影响,Western blot方法分析EGFR及其信号通路的改变.结果：MCF-7细胞在持续给予TAM（10-7mol/L）处理6个月后获得耐药细胞T-MCF-7.与MCF-7细胞相比,T-MCF-7对AG1478的敏感性增高.AG1478可使T-MCF-7细胞周期阻滞,增殖指数下降,凋亡率增加;对T-MCF-7细胞的EGFR和细胞外信号调节激酶（ERK1/2）蛋白水平无影响,但使其磷酸化-ERK1/2水平下降,降低了EGFR下游信号通路的活性水平.结论：激素依赖性乳腺癌细胞给予TAM长期处理后,更依赖于EGFR信号转导通路的作用.EGFR抑制剂可抑制EGFR信号通路的活性,提高乳腺癌内分泌治疗的效果.     

MCF10A-Er-Src诱导转化模型的构建

目的 构建能够被他莫西芬（tamoxifen,TAM）激活的MCF10A-Er-Src诱导转化模型.方法 利用PCR扩增法分别获得雌激素受体配体结合结构域序列（hbER）和Src序列,并将其分别插入到改造后的反转录病毒表达载体pMSCV-FLAG-HA中,构建ER-Src融合蛋白表达质粒.包装pMSCV-ER-Src-FLAG-HA重组反转录病毒,感染MCF10A,利用基因组PCR和Western blot法筛选能够稳定表达外源融合蛋白ER-Src的细胞系.利用免疫沉淀（IP）和Western blot法验证TAM对稳转细胞系的激活,并观察细胞形态变化.结果 构建的MCF10A-Er-Src细胞系能够稳定表达ER-Src融合蛋白.TAM能诱使Src第416位酪氨酸发生磷酸化,从而激活Src,使MCF10A-Er-Src发生转化.结论 成功获得能够被TAM诱导激活的MCF10A-Er-Src转化模型.     

Src酪氨酸激酶抑制剂对表皮生长因子诱导的肺腺癌细胞生长的作用及机制

目的 探讨Src酪氨酸激酶抑制剂对表皮生长因子（EGF）诱导的肺腺癌细胞生长浸润的作用及其机制。方法 选用PC-9和A549细胞进行培养,分别给予不同浓度的Src酪氨酸激酶抑制剂和EGF,利用MTT比色法和Boyden-chamber法检测PC-9和A549细胞增殖及浸润情况,台盼蓝染色检测细胞活力,蛋白质印迹检验Src蛋白的表达和磷酸化及其下游信号磷酸化情况。结果 抑制Src酪氨酸激酶可以在不影响细胞活力的情况下抑制PC-9和A549细胞的增殖浸润,EGF可以增强EGF受体（EGFR）、Src、促丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）及AKT的磷酸化,Src酪氨酸激酶抑制剂可以抑制这种磷酸化。结论 抑制Src酪氨酸激酶可以通过调节EGFR及其下游信号通路抑制肺腺癌细胞的增殖浸润。     

维甲酸受体α在乳腺癌细胞中的表达

研究维甲酸受体α（RARα）基因在乳腺癌细胞中的表达情况。用NorthernBlot、WesternBlot和免疫组化等方法。结果：RARα受体蛋白表达与其mRNA表达相一致，RARαmRNA表达在ER阳性乳腺癌细胞中比ER阴性的乳腺癌细胞高，RARα受体蛋白表达也是如此，RARαmRNA及RARα受体蛋白表达都与ER状况相关。结论：3种检测方法都具可信性，实际工作中可以因地制宜选用合适的检测手段为临床服务。     

他莫昔芬对人胃癌细胞增殖和丝氨酸蛋白酶抑制剂9表达的影响

目的：研究他莫昔芬（TAM）对胃癌细胞雌激素受体α、β（ERα和ERβ）的表达情况及对胃癌细胞增殖和丝氨酸蛋白酶抑制剂9（PI9）表达的影响。方法对前期筛选出的ERα表达阳性胃癌细胞株MNK45、SGC7901（PI9表达阳性）和ERβ表达阳性胃癌细胞株BGC823（PI9表达阴性）,采用免疫荧光化学法检测 TAM 对ERα和ERβ表达的影响,CCK8法检测 TAM 干预后胃癌细胞株的增殖情况,逆转录PCR观察TAM干预后PI9表达的变化。结果 ERα表达于MNK45和SGC7901细胞核上, ERβ表达于BGC823细胞核上,经TAM 干预后 ERα和 ERβ表达均无明显改变;TAM 在0．1～100．0μmol／L 时可明显抑制SGC7901、MNK45的细胞增殖,与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P＜0．05）,对BGC823和MNK28的细胞增殖无明显剂量依赖关系;TAM干预后SGC7901的PI9 mRNA的相对灰度值为（0．402±0．020）,MNK45的PI9 mRNA的相对灰度值为（0．359±0．048）,较阴性对照组灰度值均明显降低,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 TAM 对ERα和PI9阳性表达细胞的增殖抑制作用强于PI9阴性表达细胞,并呈较好的剂量依赖性;TAM 对胃癌的生长抑制作用可能与改善PI9介导的免疫耐受有关。     

雌激素受体相关受体α与雌激素受体在子宫内膜癌组织中的表达

目的雌激素受体（estrogen receptor,ER）α、β在子宫内膜癌的发生发展中起着非常重要的作用。有研究提示,雌激素受体相关受体α（estrogen receptor—related receptor α,ERRα）与ER竞争配体也参与子宫内膜癌的发生,但详细的机制尚不明了。文中研究的目的是检测ERRα和ERα、ERβ在子宫内膜癌中mRNA的表达水平,并探讨其关系。方法采用realtime TaqMan PCR定量的方法,检测37例子宫内膜癌组织（内膜癌组）、25例癌旁组织（癌旁组）以及20例正常子宫内膜（对照组）中ERRα和ER亚型mRNA的表达量。结果3组患者中所有受体均有表达,在内膜癌组中,ERα和ERβ表达水平较对照组明显下降（P〈0．05）,ERRα的表达水平明显升高（P〈0．05）。癌旁组患者的所有指标与癌组织和正常内膜组织相比均显著升高（P〈0．05）。结论子宫内膜癌组织中ERα、ERβ低表达,而ERRα相对高表达,癌旁组织中3种受体均为高表达,说明癌组织中部分ERα、ERβ失活,ERRa在内膜细胞向癌细胞进展过程中起着非常重要的调节作用。     

乳腺癌组织中c-erbB-2、ER和PR的表达及与预后的关系

目的 探讨c-erbB-2、雌激素受体(estrogen receptor,ER)和孕激素受体(progesterone receptor,PR)在乳腺癌组织中的表达及其与预后的临床意义。方法 采用免疫组织化学S P法检测193例乳腺癌组织中c erbB 2、ER及PR的表达。结果 c-erbB-2、ER及PR的阳性表达率分别为40.9%、62.0%和58.0%;其中c-erbB-2的阳性表达与组织病理学分型、临床分期、腋淋巴结转移有相关性,c-erbB-2阳性表达组的5年总生存率明显低于阴性表达组;ER与PR的表达呈显著正相关关系（P﹤0.01）,c-erbB-2与ER、PR之间的表达呈负相关（P﹤0.05）。结论 检测乳腺癌组织中c erbB 2和ER、PR的表达对乳腺癌患者治疗方案的制定和判断预后有重要意义。     

表皮生长因子受体转激活对氨诱导星形胶质细胞p38MAPK活化的影响

目的：探讨氨致星形胶质细胞p38MAPK活化与表皮生长因子受体（EGFR）转激活间的关系。方法以3 mmol／L氯化铵刺激原代培养的星形胶质细胞建立高血氨模型,EGFR选择性抑制剂AG1478,src选择性抑制剂PP1及基质金属蛋白酶选择性抑制剂GM6001分别于加入氯化铵前30 min加入,以检测上述信号分子在氨致星形胶质细胞p38MAPK活化中的作用。蛋白质免疫印迹检测p38MAPK的表达及活化,以蛋白质免疫共沉淀检测p38MAPK与EGFR间的相互作用。结果氨诱导的星形胶质细胞p38MAPK活化可被EGFR选择性抑制剂AG1478所阻断,亦可被src选择性抑制剂PP1所阻断,但不受基质金属蛋白酶选择性抑制剂GM6001的影响。对于EGFR－p38MAPK相互作用影响的研究也得出了类似的结果。结论氨刺激可通过EGFR转激活诱导星形胶质细胞p38MAPK的活化。     

反义寡核苷酸对子宫内膜癌细胞雌激素受体亚型α特异性调控的研究

目的:初步建立子宫内膜癌雌激素受体亚型α(estrogen receptor α, ERα)弱表达细胞模型,探讨ERα在子宫内膜癌发病机制中的作用,研究17β-雌二醇(17β-estradiol, E2)及三苯氧胺(tamoxifen, TAM)在子宫内膜癌发病过程中与ERα的关系。方法:设计针对ERα的反义寡核苷酸 (antisense oligodexyribonucleotides, AS-ODN),转染入子宫内膜癌HEC-1B细胞,Western blot 测定转染后细胞ERα的表达;检测转染反义寡核苷酸后E2和TAM对子宫内膜癌细胞生长影响的变化。结果: (1)针对ERα翻译启动区设计的反义寡核苷酸可以选择性下调ERα的表达。 (2) E2和TAM可以促进子宫内膜癌细胞系HEC-1B的生长。转染ERα-AS-ODN后可抑制E2对子宫内膜癌细胞HEC-1B的促生长作用,这种抑制作用以转染后的24,48及72 h尤为明显。转染ERα-AS-ODN可抑制TAM对子宫内膜癌细胞HEC-1B的促生长作用,这种抑制作用在转染后的48 h最为明显。结论: 初步建立了ERα弱表达的子宫内膜癌细胞模型。反义核酸技术可以作为一种有效的特异性下调子宫内膜癌细胞中ERα的实验手段。在HEC-1B细胞中,ERα抑制E2和TAM的促进子宫内膜癌细胞生长的作用。     

酒精诱发乳腺癌过程中 RNA 聚合酶Ⅲ依赖基因转录与雌激素受体α表达的关系

目的：探讨酒精诱发乳腺癌的分子机制。方法采用Realtime PCR方法分析酒精对雌激素受体α（ ERα）不同表达状况的乳腺细胞系、酒精联合雌激素MCF－7细胞系以及酒精对转染ERαsiRNA的MCF－7细胞系的RNA聚合酶Ⅲ依赖基因（tRNAs、5S rRNA）的转录水平。结果酒精对ER＋乳腺细胞系tRNAs、5S rRNA上调水平（7～8倍）明显高于ER－乳腺细胞系（2～3倍）（ P＜0.01）;酒精和雌激素联合处理对MCF－7细胞系tR-NAs、5S rRNA的转录水平的上调作用（12～14倍）明显高于酒精（7～8倍）或雌激素（2～3倍）单独作用组（ P＜0.01）;酒精对转染ERαsiRNA组MCF－7细胞系（2～3倍） tRNAs、5S rRNA的转录水平的上调作用明显低于未转染组（6～8倍）（P＜0.01）。结论酒精诱发乳腺癌过程中RNA聚合酶Ⅲ依赖基因转录水平的上调依赖于ERα的表达。     

乳腺癌新辅助化疗前后ER、PR、HER-2、EGFR、CK5/6的表达及预测化疗效果的意义

目的：观察乳腺癌新辅助化疗（neoadjuvant chemotherapy,NAC）前后雌激素受体（ER）,孕激素受体（PR）、人类表皮生长因子受体2（HER-2）、细胞角蛋白5/6（CK5/6）、表皮生长因子受体（EGFR）表达及对化疗疗效的预测价值.方法：收集82例确诊为乳腺浸润性导管癌的病例,临床Ⅱa～Ⅲb期,取NAC前后乳腺癌灶组织,应用免疫组织化学（IHC） Envision二步法检测ER、PR、HER-2、EGFR及CK5/6的表达水平,并将指标表达情况与化疗效果进行对比,评价其对化疗效果的预测价值.结果：7例患者化疗后达病理完全缓解（pCR）不能进行IHC检测,其余75例患者在NAC前后ER、PR、HER-2、EGFR、CK5/6的表达变化差异无统计学意义,完全缓解（CR）8例,部分缓解（PR）61例,客观有效率（CR＋ PR）84.1％ （69/82）,疾病稳定（SD）7例,无疾病进展（PD）病例;ER（＋）组与ER（-）组、PR（＋）组与PR（-）组化疗疗效差异具有统计学意义（P＜0.05）,但HER-2（＋）组与（-）组、EGFR（＋）组与EGFR（-）组、CK5/6（＋）组与CK5/6（-）组的化疗有效率差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论：NAC前后ER、PR、HER-2、EGFR及CK5/6表达变化对乳腺癌化疗效果判断的参考意义不大,NAC前ER、PR阳性的乳腺癌病人对化疗更敏感,二者可作为预测化疗疗效的指标.     

ROS／Src／JNK信号通路在香烟诱导气道上皮细胞黏液高分泌中的作用

目的 探讨在香烟诱导气道上皮细胞黏蛋白MUC5AC表达过程中Src/JNK信号通路的作用.方法 香烟抽提物预处理的人气道上皮A549细胞,分别以活性氧(ROS)清除剂DMTU、JNK特异性抑制剂SP600125及Src激酶抑制剂PP2干预.测定各组细胞中ROS的含量,采用RT-PCR、ELISA法观察细胞黏蛋白(MUC)5AC转录水平及培养上清液中MUC5AC蛋白水平的改变,以Western blot法检测细胞表皮生长因子受体(EGFR)的蛋白表达.结果 细胞暴露于不同浓度的香烟抽提物中,ROS的量呈浓度递增;ROS清除剂DMTU显著降低香烟所致的Src磷酸化;Src特异性抑制剂PP2处理组中的JNK磷酸化水平与对照组比较有明显下降,MUC5AC的表达水平也明显降低;JNK特异性抑制剂SP600125组中MUCSAC的蛋白表达和基因转录水平较对照组均明显降低.结论 ROS-Src-JNK信号通路可能参与A549上皮细胞中MUCSAC的表达调控.     

他莫昔芬对ER- GPER+乳腺癌细胞上皮间质转化的影响及机制

目的：探讨他莫昔芬（TAM）对雌激素受体（ER）阴性、G蛋白偶联雌激素受体（GPER）阳性乳腺癌细胞上皮间质转化（EMT）的影响。方法：以ER阴性（ER-）、GPER阳性（GPER+）乳腺癌MDA-MB-468细胞为研究对象,用TAM处理细胞,GPER特异性抑制剂G15抑制胞内GPER活性,siRNA干扰GPER蛋白表达,侵袭小室实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测ERα、GPER、Vimentin、E-cadherin及N-cadherin蛋白表达变化。结果：TAM（5 μmol/L）可明显增强MDA-MB-468细胞的侵袭能力（P＜0.01）;G15（10 μmol/L）预处理能显著抑制TAM诱导的细胞侵袭活动（P＜0.01）;GPER-siRNA可明显干扰MDA-MB-468细胞GPER蛋白表达（P＜0.01）;干扰GPER蛋白表达能有效抑制TAM诱导的细胞侵袭活动（P＜0.01）。TAM处理明显诱导Vimentin和N-cadherin蛋白表达上调（P＜0.01）,E-cadherin蛋白表达下调（P＜0.01）;G15预处理或干扰GPER蛋白表达均能抑制TAM的上述诱导作用（均P＜0.05）。结论：TAM能诱导ER- GPER+乳腺癌MDA-MB-468细胞EMT,其作用与其激活GPER有关。     

非小细胞肺癌奥希替尼耐药细胞株的建立与鉴定及耐药后对化疗的敏感性

目的：建立非小细胞肺癌奥希替尼耐药细胞株H1975AR,对亲本和耐药细胞株进行鉴定,探讨耐药机制。方法：在体外采用浓度递增的方法予奥希替尼处理诱导H1975细胞建立奥希替尼耐药细胞株H1975AR;光镜及Giemsa染色比较2种细胞形态学差异;第二代测序（next generation sequencing,NGS）检测表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）基因突变;磺酰罗丹明B（sulforthodamine B,SRB）法检测细胞增殖,评估细胞对EGFR?酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor,TKI）和化疗药的敏感性;分别予0、10、100、1 000 nmol/L奥希替尼处理6 h,Western blot法检测EGFR及下游增殖信号的变化。结果：①SRB法测得H1975AR的耐药指数为3 634.75,显示H1975AR是奥希替尼耐药细胞株;②耐药细胞株形态发生改变且核浆比增大;③与H1975相比,给予奥希替尼处理对H1975AR的p?EGFR和p?ERK抑制作用不明显,且相同的给药浓度对H1975AR的p?AKT抑制作用较弱,同时下调c?Met的表达;④H1975和H1975AR对第一代EGFR?TKI耐药,对顺铂和紫杉醇敏感。结论：H1975AR细胞EGFR C797S顺式突变的产生是奥希替尼主要耐药机制,并对顺铂和紫杉醇敏感。     

阻断酪氨酸蛋白激酶Src表达对蛋白磷酸酯酶2A活性和tau蛋白磷酸化的影响

研究细胞内酪氨酸蛋白激酶Src对蛋白磷酸酯酶2A（PP2A）酪氨酸307位点（Y307）磷酸化和活性以及tau蛋白磷酸化的影响，为阿尔茨海默病脑内PP2A活性下调和tau蛋白异常磷酸化机制提供实验依据。体外培养小鼠成神经瘤N2a细胞，转染特异性阻断Src表达的siRNA，检测转染不同时间点PP2A Y307的磷酸化水平、PP2A的活性以及tau蛋白在不同位点的磷酸化水平。     

凝溶胶蛋白抑制乳腺癌细胞MCF7／Her2增殖及迁移侵袭的作用

目的研究凝溶胶蛋白（gelsolin,GSN）对雌激素受体α（ERα）阳性、人表皮生长因子受体2（Her2）过表达乳腺癌细胞MCF7／Her2生长的作用。方法构建GSN的真核表达载体,并稳定转染MCF7／Her2细胞,以RT-PCR及WesternBlot鉴定得到稳定过表达GSN的乳腺癌细胞系McF7／Her2／GsN。以空载体转染的稳定表达细胞MCF7／Her2／V作对照,比较其细胞形态、增殖和迁移能力的改变;WesternBlot及RT-PCR检测Her2、组织金属蛋白酶抑制剂-3（TIMP3）表达和细胞外调节蛋白激酶（ERK）的活化,探索深层次的作用机制。结果MCF7／Her2稳定过表达GSN后,细胞形态改变且增殖及迁移、侵袭能力明显低于对照细胞;发现Her2表达下降,TIMP3的表达上调,而雌激素导致的MCF7／Her2细胞ERK活化增强被逆转。结论凝溶胶蛋白能降低Her2的表达,并通过下调ERK的活化及上调TIMP3的表达,抑制乳腺癌细胞MCF7／Her2增殖及迁移侵袭作用。     

瘦素干扰他莫昔芬抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖作用的机制

目的:检测乳腺癌细胞株MCF-7中瘦素受体(leptin receptor)的表达,并探讨瘦素(leptin,LEP)对他莫昔芬(tamox-ifen,TAM)抑制MCF-7细胞增殖的影响及机制。方法:用免疫荧光及Western blot法检测MCF-7细胞中瘦素受体的表达。以100 ng/ml的LEP及1 000 nmol/L的TAM同时处理MCF-7细胞,用MTT法检测LEP及TAM对细胞增殖的影响,并用West-ern blot及免疫荧光的方法检测作用前后雌激素受体(ERα)表达水平的变化。合成人雌激素反应元件(estrogen response ele-ment,ERE)的核心片段,并将其插入pGL3-promoter载体的多克隆位点,构建成含有ERE报告基因的质粒pERE-LUC,用脂质体转染的方法将该质粒瞬转到MCF-7细胞中,用LEP及TAM处理后检测荧光素酶的表达,以探讨其对ERα转录的影响。结果:MCF-7细胞呈瘦素受体的阳性表达。100 ng/ml的LEP能够削弱TAM对MCF-7细胞的增殖抑制作用,并能够通过上调ERα的转录及表达水平来干扰TAM对细胞增殖的抑制作用。结论:LEP能够干扰...     

PD153035对人多发性骨髓瘤细胞XG-1的诱导凋亡作用及机制

目的研究表皮生长因子受体(EGFR)在多发性骨髓瘤细胞增殖与生存中的作用及机制.方法采用EGFR抑制剂PD153035对多发性骨髓瘤细胞XG-1上的EGFR进行阻断.采用3H掺入法、MTT法和Annexin V染色检测细胞的增殖与凋亡情况,同时采用Western blot方法分析PD153035对STAT3磷酸化的影响.结果 PD153035可以使XG-1细胞增殖能力下降,并诱导XG-1细胞凋亡.而且PD153035还可以阻断HB-EGF诱导的STAT3的磷酸化,但对IL-6诱导的STAT3的磷酸化无阻断作用.结论 PD153035可以通过特异性阻断STAT3分子磷酸化,切断EGFR活化的转导通路,导致骨髓瘤细胞的增殖能力下降,并诱导其凋亡.     

HER3影响辐照诱导的Luminal A型乳腺癌细胞的迁移和侵袭

目的：探讨敲低人表皮生长因子受体?3（human epidermal growth factor receptor?3,HER3）表达及联合辐照对Luminal A型乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响及分子机制。方法：利用短发夹RNA（shRNA）稳定转染乳腺癌细胞MCF?7和ZR75?1,敲低HER3表达。蛋白免疫印迹实验（Western blot）检测细胞转染效率。将转染空病毒的对照组（shRNA?Control）与HER3敲低组（shRNA?HER3）细胞进行6?Gy X线辐照,细胞划痕实验及侵袭实验（Transwell assay）分析各组乳腺癌细胞迁移和侵袭能力。Western blot检测紧密连接蛋白Claudin?1的表达变化。结果：敲低HER3后,乳腺癌细胞MCF?7和ZR75?1内HER3蛋白表达水平明显降低。单纯辐照的乳腺癌细胞,迁移和侵袭能力增强,Claudin?1蛋白表达增加;而敲低HER3及联合辐照后,乳腺癌细胞迁移和侵袭能力降低,Claudin?1蛋白表达明显降低。结论：敲低HER3表达可以降低辐照诱导的luminal A型乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能通过下调紧密连接蛋白Claudin?1的表达而实现。