铜绿假单胞菌噬菌体PaP3生物学特性的研究

目的测定铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的最佳感染复数、一步生长曲线和吸附K值及交叉吸附K值等基本生物学特性。方法按照感染复数（MOI）分别为0．0001、0．001、0．01、0．1、1和10加入噬菌体纯培养液和宿主菌，充分裂解细菌后，测定噬菌体滴度；以MOI=10的比例加入噬菌体及宿主菌，进行一步生长实验；纯化PaP3颗粒，免疫家兔，获得抗血清，通过中和反应实验测定PaP3和其抗血清之间的吸附反应常数K值。同时，利用抗血清交叉中和试验确定本室分离的三株噬菌体之间的血清学关系。结果当MOI=0．001时PaP3感染其宿主菌产生的子代噬菌体滴度最高；根据一步生长实验结果绘制一步生长曲线；通过血清交叉中和反应得出不同的吸附常数。结论PaP3最佳感染复数为0．001，感染宿主菌的潜伏期是20min，爆发期是60min，平均爆发量约为31，其抗血清反应的吸附常数K值为262。     

噬菌体基因组PaP1的鸟枪法测序及其生物信息学分析

目的对分离的铜绿假单胞菌噬菌体PaP1进行全基因组测序，并进行初步的生物信息学分析，为噬菌体的改造及其治疗奠定基础。方法采用鸟枪法随机测序和重叠群组装的策略对PaP1进行基因组测序，并通过EditSeq、开放读码框架（ORF）finder、GeneMark^TM、BPROM、FindTerm、Palindromes、Equicktandem及FAStRNA等软件对所获得的基因组序列的一般特征、蛋白质同源性序列及tRNA基因等进行分析和预测。结果PaP1基因组约为90000bp，其中最大重叠群为28249bp。在已获得序列中预测出120个ORFs、41个推定基因及9个簇集在5’末端的tRNA基因。在41个推定基因中，预测出编码DNA末端酶大亚单位、DNA解旋酶B亚单位、肽聚糖结合蛋白及3个尾丝蛋白等6个基因的功能。结论鸟枪法只能测出噬菌体基因组PaP1的部分序列，重复序列的存在是该基因组测序困难的原因。     

血管留置针封闭式引流治疗乳癌术后皮下积液

作者采用2005年1月～2006年12月自行设计的血管留置针封闭式引流治疗乳癌术后皮下积液，取得了很好的疗效，现总结如下。[第一段]     

先天性右上中叶肺缺如1例

患儿，女，6个月，因咳嗽2个月伴气促入院。患儿G3P3足月顺产，出生时哭声大，无窒息抢救史；出生后无气促、呼吸困难，喂奶无呛咳、呕吐，体重增加尚可；自出生至4个月大小，无咳嗽气促。2个月前患儿感冒后出现咳嗽，以阵咳为主伴气促，但无四周发组；近一个月患儿气促明显，否认异物吸入史。入院体查：神志清楚，精神稍倦，发育营养中等，呼吸略促、七次／分，无四周发组，气管右移，胸廓无畸形，右肺呼吸音很弱仅在右肺底可闻及，左肺呼吸音清晰，心脏向右移位，心率120次／分，节律齐，未闻及杂音；腹平较，肝脾肋下未们及四肢发育正常…     

曲米帕明与米帕明治疗抑郁症的对比

曲米帕明（男性２０例，女性１２例；年龄３６±５１２ａ）和米帕明（男性１９例，女性１３例；年龄３８±１１ａ）治疗６４例抑郁症。开始剂量均为５０ｍｇ／ｄ，１ｗｋ内加至１５０－３００ｍｇ／ｄ，共４ｗｋ。用ＨＡＭＤ量表评定。结果显示２组抗抑郁疗效相仿。ＨＡＭＤ总分及各因子分的减分２组间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。２组的主要不良反应为抗胆碱能症状，对心脏的影响曲米帕明似较米帕明为轻。     

同学聚会心事多

大学毕业五年了。五年的时间,可以让一个人改变很多。在校友会上,不知是谁提出,在北京工作的同学来一次同学聚会。此话一出,响应者甚多。于是,在一个阳光明媚的午后,我们在一位同学的家里举行了一个小型的聚会。在这次聚会上,大家感慨万千,唏嘘不已。     

父母离异子女精神卫生问题调查

目的 :了解父母离异后单亲家庭子女的精神卫生状况 ,探讨其预防措施。方法 :选择天津市和平区中小学中的 12个班级 486名学生进行调查。生活在单亲家庭中的青少年 49人 ,将其组成研究组 ,采用 1∶1配对的方法组成对照组。研究组和对照组使用自制的一般情况调查表、修订的艾森克个性问卷(EPQ)、自尊量表 (SES)、Achenbach氏儿童行为量表和自制的学习成绩评定表进行评定。结果 :研究组和对照组存在各种精神卫生问题分别占 98%及 14 3 % (P <0 0 1)。两组比较单亲组性格内向 (分别为 2 8 6% ,12 2 % )、外向 ( 3 8 8% ,18 4% ) ;自尊心强 ( 2 6 5 % ,14 3 % )、自尊心差 ( 2 6 5 % ,4 1% ) ;早熟( 4 0 8% ,6 1% )、冷漠 ( 4 2 9% ,2 1% )、交往不良 ( 3 4 7% ,4 1% )、敌意 ( 12 2 %、 2 1% )和违纪行为( 2 8 6% ,2 1% ) ,均显著高于双亲家庭子女组。结论 :单亲家庭子女存在较多的精神卫生问题 ,应有针对性的进行干预。     

细菌对噬菌体感染的抵抗

噬菌体对其宿主菌具有特异性感染力,反之,宿主菌对噬菌体的感染具有抵抗现象.根据噬菌体侵入宿主的不同阶段,可以将宿主菌对噬菌体的天然抵抗机制分为4个主要的类别吸附抑制,流产感染,限制-修饰系统和穿入阻滞.此外,还有源于噬菌体的抗性作用以及通过人工插入突变获得的广谱噬菌体抗性菌株等.     

铜绿假单胞菌外毒素A的表达、纯化与生物学活性研究

目的利用基因工程技术制备铜绿假单胞菌外毒素A(PE),为深入研究PE的致病机理和免疫防治奠定基础。方法应用PCR技术从铜绿假单胞菌基因组中扩增外毒素A全长结构基因,将其克降于原核表达载体pQE-31中,所构建的重组质粒经测序鉴定后转化大肠埃希菌JM109, IPTG诱导表达;制备融合蛋白包涵体,并采用Ni-NTA柱亲和层析、葡聚糖凝胶过滤和阴离子交换层析分离和纯化目的蛋白;采用透析法对纯化后的目的蛋白进行复性,MTT法测定复性后的重组PE对L929细胞、B16黑素瘤细胞的细胞毒活性。结果通过对PCR反应体系的优化,扩增到了PE全长结构基因。所构建的pQE-PE重组质粒经酶切及测序鉴定与设计序列一致;转化E.coli JM109后,IPTG诱导目的蛋白表达率约为25%;SDS-PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量(M_r)约为66×10~3,与理论预期值一致;破菌后电泳证实目的蛋白主要以包涵体形式表达。经亲和层析、葡聚糖凝胶过滤和阴离子交换层析后蛋白纯度大于95%。MTT法测得重组PE对L929细胞和B16黑素瘤细胞的半数抑制浓度(IC_(50)值)分别为2.13μg/ml、2.58μg/ml。结论通过对PE的表达纯化,获得了具有细胞毒活性的重组PE,为利用基因工程手段大量制备PE的工作奠定了基础。