比格犬经口给予雄黄和牛黄解毒片后血浆中砷化学态的研究

建立了比格犬血浆中4种砷化学态[三价无机砷As(Ⅲ)、五价无机砷As(Ⅴ)、一甲基砷(MMA)和二甲基砷(DMA)\]的液相色谱 氢化物发生 原子荧光(HPLC-HG-AFS)测定法,并用于比格犬灌胃给予牛黄解毒片和雄黄后血浆中砷化学态的比较研究。血浆样品经甲醇沉淀蛋白、上清液减压挥干浓缩、残渣以流动相复溶离心后,取上清液,采用Hamilton PRP-X 100阴离子交换色谱柱(250 mm×4.1 mm,10 μm),以15 mmol/L磷酸二氢钾(氢氧化钾溶液调至pH 5.9)为流动相,进行HPLC-HG-AFS分析,4种砷化学态在15 min内得到良好分离。6只比格犬随机双交叉单次经口给予雄黄(以砷元素计,相当于11 mg/kg)和牛黄解毒片(以砷元素计,相当于28 mg/kg),测得血浆中的主要砷化学态均为DMA,并有少量As(Ⅴ),未测得As(Ⅲ)或MMA。比格犬单次给药雄黄和牛黄解毒片后DMA的主要药代动力学参数：c_max分别为(14.7±4.2)和(57.0±32.0)ng/mL,t_max分别为(2.4±0.5)和(2.5±0.5)h,AUC_0-36 h分别为(151±13)和(636±418)ng·h/mL,t_1/2分别为(16.2±7.9)和(9.4±2.2)h。与雄黄相比,给药牛黄解毒片后DMA的c_max和AUC明显增加,而t _1/2显著减小,表明经牛黄解毒片配伍后,DMA的转化增加,而消除加快,说明牛黄解毒片复方配伍对砷的药代动力学行为有影响。     

布南色林片在中国健康志愿者体内的药代动力学

为了研究布南色林片单次给药后的中国健康志愿者体内的药代动力学,30例健康志愿者单次口服4 mg、8 mg和12 mg布南色林片后,采集60 h内动态血标本,采用LC-MS/MS测定血浆中布南色林的浓度,并用DAS 3.2.4软件对试验数据进行处理,计算药代动力学参数。单次口服4 mg、8 mg和12 mg布南色林片的主要药代动力学参数c_max分别为(539.61±388.74)、(1 190.39±736.51)和(1 637.34±481.45)ng/L,t_max分别为(1.00±0.47)、(1.38±0.79)和(1.43±0.94)h,t_1/2分别为(12.05±3.49)、(14.76±3.78)和(13.68±3.92)h,AUC_{0-60 h}分别为(4 692.21±3 041.75)、(7 964.42±3 988.07)和(9 648.22±2 565.07)ng·h/L,AUC_0-∞分别为(5 060.91±3 146.10)、(8 547.61±4 209.87)和(9 986.15±2 659.51)ng·h/L。可见,在4~12 mg给药剂量范围内,布南色林片的主要药代动力学参数的c_max、AUC_{0-60 h}、AUC_0-∞与剂量呈正相关。     

大鼠静脉注射康莱特注射液的药动学研究

目的：研究康莱特注射液在正常大鼠体内的药动学。方法：采用甘油三酯试剂盒检测康莱特注射液经尾iv后大鼠血清中外源性甘油三酯的浓度变化,外源性甘油三酯浓度为测定血样中甘油三酯扣除本底后的浓度,采用3P97药代软件计算药动学参数。C_max为实测值,AUC计算采用梯形法。结果：康莱特注射液10、5 mL/kg剂量的主要药动学参数：C_max分别为（8.532±1.031）、（5.418±0.764）mmol/L,AUC_0-t分别为（13.248±3.692）、（5.339±1.219）mmol/L?h,V_c分别为（1.030±0.131）、（0.756±0.150）L²/（kg·mol）,CL_s分别为（0.838±0.319）、（0.975±0.330）L²/（kg·mol·h）,t _1/2α 分别为（0.481±0.168）、（0.322±0.109）h,t _1/2β分别为（1.452±0.776）、（1.384±0.404）h。结论：康莱特注射液经尾iv给药后在大鼠体内的药动学过程经拟合为二室模型。     

枳实总黄酮提取物中柚皮苷和新橙皮苷的大鼠药代动力学

研究大鼠灌胃给予含相同剂量枳实总黄酮提取物、柚皮苷、新橙皮苷和柚皮苷-新橙皮苷后柚皮苷与新橙皮苷在大鼠体内的药代动力学。将SD大鼠随机分为4组,分别灌胃给予枳实总黄酮提取物（80 mg/kg）、柚皮苷（32 mg/kg）、新橙皮苷（27.2 mg/kg）、柚皮苷-新橙皮苷（柚皮苷32 mg/kg和新橙皮苷27.2 mg/kg）,利用葡萄糖醛酸酶对血样进行预处理,采用LC-MS/MS法测定血浆中总苷元柚皮素及橙皮素,间接比较4组中柚皮苷和新橙皮苷的药代动力学。结果表明,枳实总黄酮提取物组中柚皮素和橙皮素的AUC_0-t、c_max显著性高于柚皮苷单体组、新橙皮苷单体组,与柚皮苷-新橙皮苷组的主要药代动力学参数无显著性差异;柚皮苷-新橙皮苷组中柚皮素和橙皮素的AUC_0-t、c_max较柚皮苷单体组、新橙皮苷单体组均有所增加,但增加程度低于枳实总黄酮提取物组。大鼠灌胃给药后,枳实总黄酮提取物中柚皮苷与新橙皮苷存在相互促进吸收的作用,而枳实总黄酮提取物中其他成分协同促进两者的吸收。     

磷酸二甲啡烷在中国健康人体的口服药代动力学

采用LC-MS/MS研究单次及多次口服给药后磷酸二甲啡烷在中国健康受试者体内药代动力学特征。单剂量试验的12例受试者采用两周期、交叉设计,分别口服本品10 mg、40 mg,以及其余12例受试者单次口服20 mg后的药代动力学参数:AUC_{0-48 h}(11.81±14.46)、(52.60±96.01)、(34.70±29.59)ng·h/mL;t_1/2(12.11±2.54)、(12.16±2.01)、(12.77±1.27)h;c_max(0.965 3±0.817 8)、(3.150±3.451)、(2.167±1.650)ng/mL。多剂量试验的12例受试者接受单剂量20 mg后,开始每天3次服用磷酸二甲啡烷20 mg,连服至第8天晨采集血样的药代动力学参数:AUC_{0-48 h}(115.9±135.2)ng·h/mL;t_1/2(11.22±1.61)h;c_max(7.418±7.010)ng/mL;累积常数R_cmax为(3.14±1.34),R_AUC为(3.38±1.22)。置信区间法表明磷酸二甲啡烷在10~40 mg范围内,药代动力学参数与剂量无线性关系;多次给药后在体内存在蓄积;磷酸二甲啡烷在中国健康受试者中存在显著的个体差异。     

硝酸布康唑栓的人体药代动力学

研究单次及多次阴道给药后硝酸布康唑栓在中国健康女性体内的药代动力学特征。12名健康女性受试者依次进行硝酸布康唑栓低(0.05 g)、高(0.1 g)剂量单次给药以及高剂量(0.1 g)连续给药3 d和连续给药5 d药代动力学试验。受试者单次阴道给予0.05和0.1 g受试制剂后,布康唑的c_max分别为(0.895 0±0.261 0)、(1.740±0.511)ng/mL,AUC_{0-96 h}分别为(36.38±10.82)、(73.48±28.99)ng·h/mL,t_1/2分别为(23.0±4.4)、(21.5±5.9)h。结果表明:布康唑在0.05~0.1 g剂量范围内呈线性药代动力学特征。受试者连续3 d给予硝酸布康唑栓后,布康唑的血药浓度波动度(DF)为(0.54±0.27),累积常数Rc_max为(1.3±0.3),R_AUC0-τ为(1.4±0.3)。连续给药5 d后,布康唑的血药浓度DF为(0.64±0.25),累积常数Rc_max为(1.4±0.3),R_AUC0-τ为(1.6±0.2),在人体内的暴露量增加约60%。连续给药3 d与连续给药5 d的各项药动学参数均无显著性差异。     

基于LC-MS/MS 研究异夏佛塔苷在大鼠体内药代动力学及其绝对生物利用度

建立LC-MS/MS法测定大鼠血浆中异夏佛塔苷的浓度，研究异夏佛塔苷在大鼠体内的药代动力学特性及其绝对生物利用度。分别灌胃给药1.5、3.0、6.0 mg/kg和静脉注射异夏佛塔苷0.5 mg/kg后，建立LC-MS/MS分析方法测定大鼠血浆中异夏佛塔苷的含量，运用 DAS 3.0软件计算药代动力学参数。异夏佛塔苷在1.0~500.0 ng/mL内线性良好(r=0.997 6)，专属性、精密度和准确度、基质效应和提取回收率以及稳定性均符合生物样本分析要求。药代动力学参数显示:灌胃给药低、中、高3个剂量组，c_max分别为(109.34±22.87)、(259.84±95.35)、(499.26±288.09)ng/mL，AUC_0-t分别为(310.57±46.18)、(552.67±207.14)、(1 075.03±371.19)h·ng/mL，t_1/2分别为(2.36±0.22)、(2.91±0.19)、(3.04±0.86)h，t_max分别为(1.03±0.25)、(1.18±0.17)、(1.5±0.43)h，MRT_0-t分别为(11.33±1.53)、(11.27±1.09)、(8.29±0.76)h；静脉注射后，AUC_0-t为(1 536±421.3)h·ng/mL，t_1/2为(2.57±0.46)h，MRT_0-t为(9.55±2.37)h，绝对生物利用度分别为6.73%，5.99%，5.80%。结果表明，本研究所建立的LC-MS/MS分析方法可应用于异夏佛塔苷在大鼠体内的药代动力学特性研究。     

醋甲唑胺眼用混悬剂的家兔房水药动学

醋甲唑胺是一种碳酸酐酶抑制剂类的抗青光眼药物,其口服制剂被广泛应用于临床。为减少其全身不良反应,研究开发可局部给药的醋甲唑胺眼用混悬剂,并以醋甲唑胺口服片剂为对照,采用微透析技术研究其在家兔房水中的药动学。将药物在一定条件下球磨后,以一定浓度的卡波普940(处方1)或卡波普974(处方2)为助悬剂可以制得符合中国药典要求的均一、稳定的眼用混悬剂。家兔眼内药动学结果显示：处方1(含0.4%卡波普940)的药动学参数为：AUC=(109 838.3±28 081.26) ng·min/mL,c_max=(1 535.60±125.75) ng/mL,t_max=(50±8.66) min;处方2(含0.45%卡波普974)的药动学参数为：AUC=(116 803.1±21 015.71) ng·min/mL,c_max=(1 399.78±136.45) ng/mL,t_max=(30±0.00) min;市售醋甲唑胺片（尼目克司）的房水药动学参数为：AUC=(59 197.07±10 020.72) ng·min/mL,c_max=(313.96±6.57) ng/mL,t_max=(85±17.32) min。处方1和处方2的AUC分别是市售片剂的1.86倍和1.97倍(P<0.05)。结果表明,醋甲唑胺的眼用混悬剂可以显著提高药物在眼内的生物利用度,达到了局部用药制剂的设计要求。     

复方烟酸辛伐他汀双层缓释片的制备及Beagle犬体内药代动力学

以烟酸和辛伐他汀为模型药物制备复方双层缓释片,并评价其体外释放特性。采用双周期双交叉给药方案,LC-MS/MS法同时测定自制制剂和市售制剂中烟酸和辛伐他汀的血药浓度,对6只Beagle犬进行了药代动力学和生物利用度的初步研究。自制制剂和市售制剂给药后烟酸的c_max分别为（6.43±0.80）和（6.38±0.47）μg/mL,t_max分别为（2.80±1.00）和（2.50±1.00）h,AUC分别为（30.16±4.51）和（27.49±4.04） μg·h/mL;辛伐他汀的c_max分别为（38.65±1.71）和（40.54±2.33）ng/mL,t_max均为（1.50±0.40）h,AUC分别为（118.76±11.83）和（115.76±5.46）ng·h/mL。结果表明两种制剂中烟酸和辛伐他汀的AUC,c_max和t_max都等效,说明自制制剂和市售制剂在Beagle犬体内具有生物等效性。     

杜鹃素在大鼠体内的药动学研究

目的 研究杜鹃素在正常大鼠体内的药动学特征。方法 杜鹃素单剂量ig给予大鼠后,采用HPLC法测定给药后不同时间点大鼠血浆中的杜鹃素,通过DAS软件程序模拟计算,得出杜鹃素在大鼠体内相应的药动学参数。结果 杜鹃素在大鼠体内的药动学模型符合二室模型,主要药动学参数为：t_1/2α＝（0.33±0.10）h,t_1/2β＝（15.22±8.98）h,CL/F＝（14.89±3.45）L/(h?kg),C_max＝（1.61±0.14）mg/L,T_max＝（0.25±0.01）h,MRT_(0-t)＝（2.35±0.08）h,AUC_(0-t)＝（3.06±0.16）mg?h/L。结论 本研究建立的HPLC方法专属性强,简便、准确,可用于杜鹃素在大鼠体内的药动学研究;大鼠ig给予杜鹃素后,其在血浆中分布较快,半衰期较短。     

金钗石斛茎的化学成分研究

目的 对金钗石斛Dendrobium nobile茎的化学成分进行研究。方法 采用正相及反相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱及制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,根据波谱数据进行结构鉴定。结果 分离得到11个化合物,分别鉴定为石斛碱（1）、石斛醚碱（2）、邻苯二甲酸丁酯（3）、松脂素（4）、N-反式桂皮酸酰对羟基苯乙胺（5）、N-反式阿魏酸酰对羟基苯乙胺（穆坪马兜铃酰胺,6）、N-顺式阿魏酸酰对羟基苯乙胺（7）、N-反式香豆酰酪胺（8）、N-顺式香豆酰酪胺（9）、山药素III（10）、二氢松柏醇二氢对羟基桂皮酸酯（11）。结论 化合物3、5～9均为首次从该植物中分离获得,其中化合物9为首次从石斛属植物中分离获得。     

七花牌七灵宝软胶囊缓解体力疲劳功能评价

目的 对以三七提取物、黄芪提取物、灵芝提取物等为原辅料制成的保健食品七花牌七灵宝软胶囊,依据《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）进行缓解体力疲劳功能研究。方法 根据人口服推荐用量,设样品低、中、高剂量组分别为200、400、800 mg/kg（分别相当于人体推荐用量的5、10、20倍）,同时设一个阴性对照组,每组10只动物。分别ig 给予10、20、40 mg/mL的七灵宝软胶囊溶液,给药体积为20 mL/kg,对照组给予等体积的玉米胚芽油,每天1次,连续30 d。结果 该样品对小鼠的体质量增长无影响;具有延长小鼠的负重游泳时间的作用;能减少或抑制疲劳小鼠血清尿素氮的产生;具有促进小鼠的肝糖原储备的作用;能减少小鼠运动后的血乳酸曲线下面积。结论 七花牌七灵宝软胶囊具有缓解小鼠体力疲劳的作用。     

宋金元时期《灵枢经》流传情况初探

<灵枢经>古称<九卷>、<黄帝针经>,系<黄帝内经>的一部分.北宋时期到史崧本刊出之前的传本则多为<黄帝针经>或简称<针经>.对<灵枢经>在北宋、南宋及金元时期的流传情况进行了考查,并把金元时期医家著作中引用<灵枢经>及<针经>部分与现行史崧本<灵枢经>进行对照分析,认为<针经>自身可能有不同传本,今本<灵枢经>可能来自<针经>.     

实验动物四种病原体多重PCR方法的建立与应用

目的建立快速检测多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体和肺炎克雷伯杆菌4种实验动物病原体的多重PCR方法。方法根据Gen Bank基因设计出特异性引物;经过多重PCR的优化,特异性和敏感性的检测,建立多重PCR体系。应用该PCR体系检测人工感染样本和实验动物的气管分泌物,并与传统方法做对比。结果多重PCR扩增出多杀巴氏杆菌(356 bp)、支气管鲍特杆菌(237 bp)、支原体(266 bp)和肺炎克雷伯杆菌(142 bp)的目的条带。肺炎克雷伯杆菌敏感性为10 pg,多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体敏感性为1 pg,特异性检测未从其他病原菌中检测出目的条带。应用建立的多重PCR体系检测人工感染样本的不同组合,45只实验动物气管检测出15只多杀巴氏杆菌阳性,9只肺支原体阳性,但传统培养方法和血清学方法未检测出阳性标本。结论本文建立的多重PCR方法操作简单、快速、特异性强、灵敏度高,能够实现对多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体和肺炎克雷伯杆菌4种实验动物病原体的快速检测。     

葫芦科植物通用DNA条形码的筛选

目的 评价几个热点DNA条形码候选序列对葫芦科植物的鉴别能力。方法 使用ITS2、rbcL、matK和psbA-trnH序列的通用引物对葫芦科植物进行PCR扩增和测序,通过比较各序列的扩增和测序成功率、种内和种间的变异、barcoding gap,并采取相似性探索BLAST 1和最近距离Nearest Distance 方法评价不同序列的鉴别能力。结果 ITS2序列对葫芦科33个属、90个物种、182个样本进行分析,其鉴定成功率较高,在属水平为100.0%,在物种水平为88.5%;psbA-trnH序列对201个样本进行分析,其鉴定成功率在属水平为93.0%,在物种水平为73.1%,但其可以补充部分ITS2不能分析的物种区域。结论 ITS2和psbA-trnH是适合葫芦科植物鉴别的一个较好的DNA条形码序列组合。     

药物肠道代谢研究方法进展

肠道是口服药物的必经通道, 肠道中不仅存在着影响药物吸收的转运体, 还含有许多与药物代谢相关的酶, 包括消化道上皮细胞存在的结合酶和消化道菌丛产生的酶, 这些酶不同程度的影响着药物在体内的存在形式、吸收过程等。因此, 胃肠道对药物的有关代谢作用日益受到重视, 其研究方法也不断改进。现就目前药物在肠道中代谢的研究方法及其特点进行综述。     

KPC-2基因在克雷伯菌属中传播机制研究

目的 研究克雷伯菌属对亚胺培南耐药机制以及KPC-2基因在克雷伯菌属中传播机制。方法 收集四川大学华西医院两个阶段（2009～2010年和2012～2013年）分离的对亚胺培南耐药的克雷伯菌属细菌。琼脂稀释法测定亚胺培南最低抑菌浓度(MIC),CARB ChromID平板和改良Hodges试验检测碳青霉烯耐药表型,PCR检测细菌的KPC-2基因表达。质粒接合试验检测质粒传播性。随机引物扩增多态性DNA（RAPD）方法和肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应（ERIC-PCR）技术分别用于分析质粒和菌株的同源性。结果 第一阶段筛选并确证耐亚胺培南的3株产酸克雷伯菌首先获得碳青酶烯类抗生素耐药性,第二阶段筛选并确证耐亚胺培南的7株肺炎克雷伯菌出现相同的获得性耐药。PCR显示10株细菌均携带KPC-2型基因。质粒接合试验显示产酸克雷伯菌中携带KPC-2基因的质粒可以传递到受体菌,且与KPC-2基因阳性的肺炎克雷伯菌中携带的质粒具有同源性。ERIC-PCR结果显示7株KPC-2基因阳性的肺炎克雷伯菌具有同源性。结论 四川大学华西医院分离的对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌主要耐药机制是产生KPC-2型碳青霉烯酶。产酸克雷伯菌中携带KPC-2基因质粒,该质粒具有传递性且与肺炎克雷伯菌携带质粒相同。肺炎克雷伯菌中耐药株的传播形式为同一克隆传播,而在克雷伯菌属中不同菌种间耐药传播途径为同一质粒的水平传播。     

N-脂肪酰-N-三甲基壳聚糖的合成及其对蛇床子素的增溶作用

目的 合成2类两亲性壳聚糖（chitosan,CS）衍生物,自组装成聚合物胶束作为难溶性药物的新型递药载体。方法 先将CS与碘甲烷反应生成N-三甲基壳聚糖（trimethyl chitosan,TMC）,然后在TMC的氨基上引入长链脂肪酸（软脂酸和癸酸）,合成了两亲性的N-脂肪酰-N-三甲基壳聚糖（N-fatty acyl-N-Trimethyl chitosan,FA-TMC）衍生物。通过FT-IR、¹H-NMR和元素分析法,对衍生物的分子结构和N-位取代度进行表征,同时以疏水性药物蛇床子素（osthole,OST）为模型,探讨其胶束增溶特性。结果 实验合成了2类6种不同的新型CS衍生物,分析显示季胺化程度和脂肪酰基接枝率对FA-TMC的胶束性质有较大的影响;对于超声法制备的OST载药胶束,季胺化程度为62.00%、软脂酰基接枝率为13.37%的N-软脂酰-N-三甲基壳聚糖（N-palmitoyl-N-trimethyl chitosan,PA-TMC）和季胺化程度为43.06%、癸酰基接枝率为22.00%的N-癸酰-N-三甲基壳聚糖（N-caprinoyl-N-trimethyl chitosan,CA-TMC）的包封率分别为76.67%、79.11%,载药量分别为19.01%、19.08%,可使OST在水中的溶解度提高两个数量级。结论 FA-TMC是一种具有潜在应用价值的增溶载体,其在水中能自组装形成胶束,并对OST有明显的增溶作用,为OST制剂深入研究与应用奠定了基础。     

香砂平胃丸质量控制研究

目的 完善香砂平胃丸质量控制方法。方法 采用TLC法对其处方中木香、苍术、陈皮、甘草进行定性分析,其中木香、苍术用同一种方法提取、显色且点于同一板上使实验更简易、经济;采用HPLC法测定香砂平胃丸中厚朴酚、和厚朴酚的量,并进行方法学研究。结果 TLC鉴别方法能特征地鉴别木香、苍术、陈皮、甘草,斑点均清晰,阴性无干扰;厚朴酚在186.3～1 552.5 ng（r＝0.999 9）线性关系良好,平均加样回收率103.9%,RSD为0.35%;和厚朴酚在121.39～1 011.55 ng（r＝0.999 9）线性关系良好,平均加样回收率104.5%,RSD为0.28%。结论 TLC鉴别方法简单易行;HPLC测定方法专属性强、重现性良好,能够准确测定香砂平胃丸中厚朴酚、和厚朴酚的量。     

5种马鞭草科药用植物的抗补体活性

采用细胞溶血法考察了千解草(Pygmaeopremna herbacea)、白花灯笼(Clerodendrum fortunatum L.)、尖尾枫[Callicarpa longissima(Hemsl.)Merr.]、赪桐[Clerodendrum japonicum(Thunb.)Sweet]及臭茉莉(Clerodendrum philippinum Schauer var.simplex Moldenke)等5种马鞭草科药用植物提取物经典途径和旁路途径的抗补体活性。结果表明:千解草水提取物、白花灯笼水提取物和醇提取物、尖尾枫水提取物和醇提取物、赪桐醇提取物及臭茉莉醇提取物有较强的经典途径抗补体活性,对经典途径的抗补体活性(CH50)分别为0.092±0.008,0.074±0.008,0.088±0.006,0.134±0.017,0.123±0.010,0.380±0.080及0.200±0.015 g/L;仅千解草和尖尾枫水提取物及白花灯笼醇提取物具有旁路途径抗补体活性,对旁路途径的抗补体活性(AP50)分别为0.533±0.033,0.758±0.031和0.362±0.029 g/L。因此,5种植物均具有不同程度的抗补体活性,其中白花灯笼醇提取物抗补体活性最强。