胸腺注射供体脾细胞诱导移植心免疫耐受的实验研究

本实验采用大鼠腹部心脏移植模型，在移植前21天将供体脾细胞分别注射到受体的胸腺、脾脏、静脉、皮下，然后行异位心脏移植，术后1周每日腹腔注射环孢素A（CsA）10mg／kg。胸腺注射供体脾细胞联合应用CsA组移植心平均存活时间较其它组显著延长，受体对供体靶细胞没有出现细胞介导的细胞毒作用．结果表明：胸腺注射洪体脾细胞联合应用CsA能成功诱导免疫耐受，胸腺内特异性T细胞克隆消除可能与免疫耐受的形式有关．     

供体淋巴细胞与FK506联合应用对小鼠移植物存活的影响

目的：探讨ＦＫ５０６ 对小鼠心脏移植模型移植物存活的影响。方法：胸腺内注射供体小鼠淋巴细胞（ＩＴＬ）,同时短期（１ 周）应用ＦＫ５０６,检测移植物的存活时间。结果：单纯胸腺内注射供体小鼠淋巴细胞对移植物存活无明显影响,移植前１８ ｄ 在受体胸腺内注射供体淋巴细胞２×１０５ 个,自ＩＴＬ前１ ｄ 开始应用ＦＫ５０６（３ ｍｇ·ｋｇ－ １·ｄ－１）１ 周,则可在移植时不再用免疫抑制剂的情况下,使移植物生存时间由（７－０±０－７） ｄ 延长到（２７－８ ±１３－４） ｄ。结论：胸腺内注射供体淋巴细胞同时短期应用ＦＫ５０６ 能诱导小鼠产生对供体的免疫耐受     

不同处理对大鼠移植心脏存活时间的影响

目的 观察供体脾细胞(SPC)与环磷酰胺(CP)联合预处理对大鼠移植心脏存活时间的影响.方法 应用大鼠颈部心脏移植模型,实验分为对照组(未干预组)、CsA组、SPC CP组.CsA组心脏移植后予环孢霉素A(CsA)10 mg/kg,SPC CP组采用供体SPC和CP预处理移植受体,然后行大鼠颈部心脏移植术.观察移植心脏存活情况及组织病理变化.结果 对照组、CsA组、SPC CP组移植心脏存活时间分别为(7.2±2.4)、(15.8±4.3)、(30.4±10.7)天;组织病理检查显示,经SPC PC预处理的移植心脏排斥反应明显减弱.结论 SPC和CP预处理可以诱导受体对移植物的免疫耐受,延长移植心脏的存活期,效果优于CsA.     

CTLA4-Ig联合骨髓细胞诱导小鼠心脏移植耐受

目的:探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白(Cytotoxic T Lymphocyte Antigen 4-immunoglobulin,CTLA4-Ig)与供体骨髓细胞联合应用诱导器官移植免疫耐受的可行性.方法:应用小鼠腹部心脏移植模型,实验组小鼠术中输注供体骨髓细胞,术后腹腔注射CTLA4-Ig.观察移植心脏存活时间,并进行病理分析,检测迟发性超敏反应(Delayed Type Hypersensitivity,DTH).后期进行供体来源的皮肤移植并观察存活时间.结果:实验组移植心脏存活时间较对照组显著延长,达(79.3±23.7)d;排斥反应减轻,并产生了供体抗原特异性的免疫低反应性;后期进行的皮肤移植实验中,供体来源的皮肤存活时间也显著延长,达(23.0±3.1)d.结论:CTLA4-Ig与骨髓细胞联合应用可以显著延长移植物存活时间,诱导实体器官移植免疫耐受.两者具有明显的协同作用.     

心胸腺联合移植结合胸腺内注射供体胸腺细胞诱导大鼠同种异体心脏移植免疫耐受

目的：研究供体胸腺细胞经胸腺注射对大鼠心脏及胸腺移植的影响。方法：将SD大鼠的胸腺细胞注入Wistar大鼠胸腺内，2周后行心脏及心胸腺联合移植（SD→Wistar），观察移植心存活时间和病理排斥反应，检测血中及移植心中IL-2及IL-4水平。结果：单纯心脏移植及心胸腺联合移植在环孢素短期（7d及14d）应用下，可延长移植心及胸腺的存活时间，但不能诱导耐受；经胸腺注射供体胸腺细胞后，行单纯心脏移植及心胸腺联合移植，在短期环孢素作用下，移植心及胸腺均获长期存活；在移植物长期存活组IL-4保持较高水平，而IL-2处于较低水平。结论：经胸腺注射胸腺细胞可以诱导对同种异体心脏及胸腺的耐受；胸腺移植有利于耐受的诱导和维持。     

胸腺内注射异基因脾细胞诱导移植心免疫耐受的实验研究

目的通过大鼠同种异体心脏异位移植,探讨胸腺内注射异基因脾细胞对移植心的影响.方法用供体脾细胞(SC)在心脏移植前21d预处理受体鼠,术后1周每日腹腔注射环孢素A(CsA)10mg/kg.检测移植心存活时间、混合淋巴细胞反应(MLR)及细胞介导的细胞毒试验(CML).结果胸腺注射脾细胞抗原联合短期应用CsA组的移植心平均存活时间较其他组显著延长(P＜0.05),移植心耐受的受体鼠中MLR增殖活跃,产生免疫耐受的受体鼠的T细胞对供体鼠的靶细胞无明显的细胞毒作用.结论胸腺内注射供体脾细胞抗原预处理受体同时联合短期应用CsA,可诱导产生移植心脏的免疫耐受,且诱导移植耐受的抗原量以2.5×107脾细胞为好.     

环孢霉素和供体脾细胞门静脉接种延长小鼠心脏移植存活

目的探讨同种异系抗原门静脉接种和环孢霉素A(CsA)对同种异系间小鼠心脏移植存活期的影响。方法无菌条件下取出NIH/q新生小鼠(出生24 h内)的心脏,行BALB/C小鼠耳后皮下移植。移植前1周,预先用NIH/q小鼠脾细胞或用与供、受体无关的C57BL/6小鼠脾细胞行受体小鼠门静脉或腔静脉接种,同时给予小剂量CsA(4 mg/kg·b.w.喂服(术前7 d~术后5 d)。观察各组移植物的存活时间。结果供体脾细胞门静脉接种加CsA组移植物存活时间为(31.00±3.23)d,较其他各组显著延长(n=6,P<0.05);单纯门静脉接种组和单纯CsA组移植物存活时间分别为(16.11±1.97)和(18.50±2.59)d,较对照组[(11.71±1.50)d]显著延长(P<0.05);供体脾细胞经腔静脉接种以及与供、受体无关的C57BL/6小鼠脾细胞门静脉接种对移植物存活时间无显著影响(P>0.05)。结论供体脾细胞门静脉接种和CsA对延长同种异系小鼠心脏移植存活时间有协同作用,其作用具有抗原特异性。     

照射与非照射方法诱导小鼠皮肤移植耐受

目的：比较不同方法诱导移植耐受的效果,探讨有临床应用前景的非照射耐受诱导方法。方法：分别以主要组织相容性抗原（ｍａｊｏｒｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｃｏｍｐｌｅｘ,ＭＨＣ）完全不同的雄性ＢＡＬＢ／ｃ和雌性Ｃ５７ＢＬ／６小鼠作为皮肤移植的供体和受体,移植前对受体小鼠单独或联合应用５Ｇｙ全身照射、０．１ｍｌ抗淋巴细胞血清注射、３×１０７供体骨髓细胞静脉输注、每千克体重１５０ｍｇ环磷酰胺腹腔注射。结果：各实验组的皮肤移植物存活时间均较对照组明显延长,混合淋巴细胞反应和迟发型超敏反应也表现为供体特异性降低。移植前应用抗淋巴细胞血清、骨髓输注和皮肤移植后注射环磷酰胺可以延长移植物存活时间,平均存活２３．６ｄ,取得与全身照射后输入供体骨髓相似的耐受诱导效果（平均２０．４ｄ）。结论：采用比较温和的非照射的预处理方法,在不应用免疫抑制剂的情况下,也可获得一定程度的免疫耐受,达到延长移植物存活的目的。     

供者特异性抗原诱导免疫耐受的实验研究

目的 比较不同特异性抗原和不同输注途径诱导免疫耐受的强度及探讨春可能机理。方法 建立大鼠颈部异位心脏移植模型,采用供体特异性全血、供体特异性脾细胞和骨髓细胞（DSBM）,通过外周、门静脉和胸腺三种不同途径输注以诱导免疫耐受的产生和维持。结果 供体特异性抗原诱导免疫耐受以DSBM及通过胸腺接种途径效果最佳。结论 供者特异性抗原能诱导受体免疫耐受并促进移植物存活,可望成为较理想的临床免疫耐受诱导方法。     

大黄素在小鼠皮肤移植中的免疫抑制作用的实验研究

目的：研究大黄素对小鼠皮肤移植的免疫抑制作用,探讨其可能的作用机制。方法：建立小鼠C57BL／6→BALB／c异体皮肤移植模型。以大黄素和环孢素A（CsA）分别灌胃,观察不同药物及药物浓度对小鼠皮肤移植物存活时间的影响。采用ELISA法检测大黄素和CsA对皮肤移植小鼠血浆IL-2表达水平的影响,组织学观察不同药物浓度对移植物病理变化的影响。结果：大黄素显著降低小鼠血浆内IL-2的浓度,同时伴有移植物的存活时间的延长,组织学观察发现大黄素可以减轻移植排斥反应的强度,其作用表现出量效依赖性,并与CsA具有协同性。结论：大黄素能够减轻C57BL／6→BALB／c异体皮肤移植的排斥反应强度,其作用机制可能与抑制IL-2的分泌有关。     

CD25mAb及联合供体脾细胞诱导心脏移植免疫低反应性

目的观察静脉应用CD25mAb及联合应用供体脾细胞对移植心脏生存时间的影响。方法建立大鼠异位心脏移植模型，术中应用CD25mAb及联合应用供体脾细胞。术后通过腹壁触诊判断移植心脏存活情况。结果CD25mAb组移植心脏生存时间为12．10±4．04天，与未用药组（8．5±2．42天）相比差异有显著性意义（P〈0．05）。CD25mAb＋供体脾细胞组移植心脏生存时间为12．80±3．61天，与单独应用CD25mAb组相比没有明显差异（P〉0．05），但比单独用脾细胞组（8.40±3．50天，P〈0．05）和未用药组有明显延长（P〈0．05）。结论静脉应用CD25mAb及联合应用供体脾细胞均可以延长移植心脏生存时间。     

大剂量地塞米松治疗多烯紫杉醇外渗性皮肤损伤的实验研究

目的探讨大剂量地塞米松治疗多烯紫杉醇外渗性皮肤损伤的疗效。方法30只大鼠右后腿皮下建立多烯紫杉醇外渗性模型，随机分为三组：大剂量激素组每只鼠立即于尾静脉注射地塞米松5mg/kg体重，qd×6天；小剂量激素组注射地塞米松0．5mg/kg体重，qd×6天；生理盐水对照组用等容积的生理盐水代替地塞米松于每只鼠的尾静脉注射，也连用6天。观察各组大鼠外渗性皮损发生率、损伤面积大小和皮疹愈合时间。结果大剂量地塞米松治疗组的皮损发生率为20％，显著低于小剂量激素组和对照组（二者均为100％）（P〈0．05）；大剂量地塞米松治疗组皮损面积为996．36±311．07mm^2，显著小于小剂量激素组和对照组（二者分别为3135．23±475．29mm^2和3069．75±517．06mm^2）（P〈0．01）；大剂量地塞米松治疗组皮损愈合时间为10．36±2．41天，显著短于小剂量激素组和对照组（二者分别为25．00±4．37天和24．12±3．46天）（P〈0．01）。 结论大剂量地塞米松治疗可显著减少多烯紫杉醇外渗性皮肤损伤的发生，减轻皮损程度，缩短皮损的愈合时间。     

2，2’，4，4’-四溴联苯醚对SD大鼠生殖发育的影响

目的探讨2,2’,4,4’-四溴联苯醚（2,2’,4,4’tetrabromodiphenyl ethers,PBDE-47）对SD大鼠生殖发育的影响。方法PBDE-47设3个剂量组（1、5、10ms／kg．bw）,大豆油为溶剂对照组,对出生后第10d的清洁级（CL级）SD大鼠进行染毒。在大鼠出生后第10d、30d和60d分别进行体重、身长和尾长的检测。在大鼠2月龄时,捕杀大鼠,测定睾丸、附睾、子宫和卵巢脏器系数;同时利用气相色谱．质谱联用仪检测血清中PBDE-47浓度;利用放射性免疫法对血清中睾酮（testosterone,Ts）和雌二醇（estradiol,E2）进行检测。结果出生后第10d、30d和60d的大鼠体重、身长和尾长与同期对照组相比较,差异无显著性（P〉0．05）。SD大鼠2月龄时,与对照组比较,5、10ms／kg染毒组血清PBDE-47水平仍较高,差异有统计学意义（P〈0．05）;与对照组比较,5、10ms／kg染毒组卵巢脏器系数较高,差异有统计学意义（P〈0．05）;各染毒组睾丸、附睾和子宫脏器系数与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;5、10mS／kg染毒组血清Ts水平分别为（7．83±1．10）ng／ml、（9．41±0．08）ns／ml,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）;各染毒组血清E2水平分别为（31．004-12．00）ps／ml、（38．50±11．50）pg／ml、（44．67±3．79）ps／ml,显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论出生后第10d一次性经口暴露于一定剂量的PBDE-47对大鼠生殖发育具有一定的影响。     

肌注不同剂量环孢霉素A抑制大鼠角膜移植的免疫排斥反应

目的：探讨环孢霉素A不同剂量对大鼠角膜移植免疫排斥反应的影响。方法：以Wistar大鼠为供体,Lewis大鼠为受体建立角膜移植实验模型。将33只Lewis大鼠（33眼）随机分为A、B、C3组,每组11只。A组术后肌注CsA【1mg,（kg·d）】,B组给予CsA【10mg／（kg·d）】,C组给予等量不含药物的PBS,每次100ul,3次/d,连续用药10d。术后判断植片排斥情况,比较3组角膜植片的平均存活时间和新生血管评分。术后10d,病理组织学检查角膜的结构变化,并进行T细胞增殖实验,观察各组间T细胞增殖情况。结果：A、B组植片发生排斥反应的时间明显延迟,A组植片平均存活时间为（12．5±0．43）d,B组为（58±18．79）d,C组为（9±0．45）d,3组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。B组术后各时间点角膜新生血管的生长明显低于C组（P〈0．05）。A组与c组除第6天外,其余时间点无统计学意义。A、B组角膜植片中炎性细胞和新生血管较c组减少。角膜A、B组T细胞增殖量明显低于C组（P〈0．05）。结论：10mg／（kg·d）CsA能够有效抑制大鼠角膜移植术后免疫排斥的发生。     

他克莫司与环孢霉素治疗单纯性V型狼疮性肾炎的疗效比较

目的比较他克莫司（Tacrolimus,TL）与环孢霉素（Cyclosporine,CsA）联合激素治疗单纯性V型狼疮性肾炎的疗效及安全性。方法选择本院确诊为V型狼疮性肾炎的35例患者,比较同期激素联合TL[0.07-0.08mg/（kg·d）,n=17例]与激素联合CsA[3-5mg／（kg·d）,n=18例]治疗6个月的疗效。主要观察治疗前后SLE-DAI、尿蛋白、血清白蛋白、血清补体C3、anti-dsDNA和ANA阳性率的变化,以及治疗前后的完全缓解率、部分缓解率。结果CsA或TL治疗后,治疗指标均出现明显的改善,其中,6个月治疗效果更为明显。治疗3个月TL组与CsA组有效率分别为77.7％和58.8％,经比较两组差异无统计学意义（P〉0.05）,但是,3个月TL治疗组在降低SLE-DAI、24h蛋白尿和增加血清白蛋白方面疗效比CsA组更明显（P〈0.05）。治疗6个月TL组有效率及治疗指标的改善均较好于CsA组,但差异无统计学意义（P〉0.05）。TL组无严重副作用出现。结论TL联合激素治疗单纯性V型狼疮性肾炎是有效和安全的。与CsA相比,TL可迅速缓解单纯性V型狼疮性肾炎患者蛋白尿和LN狼疮的活动。     

重组hIL-10诱导皮肤移植家兔T细胞凋亡的探讨

目的 探讨重组hIL-10诱导皮肤移植家兔与外周血T细胞凋亡的关系。方法 将18只受体家兔随机分成重组hIL-10实验组(低剂量5μg/kg/d;高剂量10μg/kg/d),CsA阳性对照组（低剂量5mg/kg/d;高剂量10mg/kg/d）,hIL-10+ CsA联合组（5μg + 5mg kg/d）,生理盐水阴性对照组（1ml/d）共6组,每组3只;供体18只。实验组及对照组均在术前1d及术后9d持续肌肉注射药物。并观察各组移植术后皮片情况。 流式细胞术检测各组家兔术后1、4、7、14d外周血T细胞凋亡率的变化。用ELISA法检测家兔术后1、4、7、14d血清中细胞因子IL-2的变化。结果 重组hIL-10具有诱导外周T细胞凋亡,下调外周血T细胞所诱导的IL-2水平,并可延长皮肤移植存活时间,其作用呈剂量依赖性;重组hIL-10与免疫抑制剂CsA联用,显示二者具有协同效应。结论 重组hIL-10对家兔皮肤移植排斥有抑制作用,延长移植皮片存活时间,其机制可能是通过诱导外周血T细胞凋亡,下调外周血IL-2水平,实现免疫抑制或诱导免疫耐受有关。     

马齿苋水提取物抗炎作用研究

观察马齿苋水提取物（ WEPO）的抗炎作用,为其临床应用提供实验依据。方法：昆明种小鼠50只,随机分为空白对照组,WEPO 大、中、小剂量组（20g/kg,10g/kg,5g/kg）和阿司匹林200mg/kg组。采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法,以小鼠耳肿胀度为指标,评价WEPO 的抗炎作用。结果：WEPO大、中、小剂量组小鼠耳肿胀度分别为1．51±0．38mg,1．95±0．48mg和2．61±0．77mg,显著低于空白对照组4．70±0．68mg,差异有统计学意义（P＜0．01）,WEPO大剂量组与阿司匹林组耳肿胀度（2．22±0．58mg）比较,差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论：马齿苋水提取物有明显的抗炎作用且呈剂量依赖性。     

不同剂量氨甲环酸对心脏瓣膜术患者血液的保护作用

目的比较低、中、高三种不同剂量氨甲环酸对心脏瓣膜手术患者的血液保护效果。方法2009年2月至2010年2月,择期行心脏瓣膜手术患者150例,随机分成3组：低剂量组（n=49）,负荷量10m／kg,维持量2mg／（1kg·h）;中剂量组（n=51）,负荷剂量为15mg／kg,维持量为8mg／（kg·h）;高剂量组（n=50）,负荷剂量为30mg／kg,维持量为16mg／（kg·h）。记录术后胸管引流量,红细胞、血浆、血小板的使用情况,以及住院死亡和并发症发生率。结果低、中、高三组患者术后6h引流量[（324．90±196．05）vs．（303．73±185．03）vs．（255．31±121．81）ml]、24h引流量[（611．67±281．56）vs．（601．50±304．33）vs．（555．82±239．16）ml]和总引流量[（744．48±350．90）V8．（712．20±359．15）vs．（658．67±290．07）ml]比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。三种剂量下,异体红细胞、新鲜冰冻血浆、血小板的使用率及使用量亦无统计学差异（P〉0．05）。三组患者并发症发生率无统计学意义（P〉0．05）。结论低、中、高三种剂量的氨甲环酸对瓣膜手术患者术后出血、输血及术后并发症的影响无显著差异,术中推荐应用低剂量。     

丹参酮ⅡA磺酸钠对大剂量电离辐射小鼠生存率的影响

目的探讨丹参酮ⅡA磺酸钠（STS）对大剂量电离辐射小鼠生存率的影响。方法小鼠一次性接受11Gy的60Co照射,分为生理盐水对照组和50 mg/kg、75 mg/kg和100 mg/kg3个STS剂量组,于照射前1 h和照射后0.5 h和24 h腹腔注射生理盐水或STS。结果照射后小鼠停止生长,照射后第7天75 mg/kg组小鼠体质量（20.3±2.2 g）显著高于对照组（17.6±1.8 g）（P〈0.05）。小鼠的存活天数随STS注射剂量的增加依次为（9.5±1.5）d、（10.1±1.1）d、（10.5±1.2）d和（11.5±1.0）d。生存曲线分析显示,100 mg/kg组小鼠的生存率显著高于对照组和50 mg/kg组（均P〈0.01）。结论 100 mg/kg STS注射后明显提高了大剂量电离辐射暴露后小鼠的生存质量和生存率。     

小剂量氯胺酮在异位妊娠失血性休克病人麻醉诱导中的应用

目的：探讨小剂量氯胺酮用于异位妊娠破裂合并失血性休克病人全麻诱导时的循环情况。方法：异位妊娠破裂合并失血性休克女性患者60例,随机均分2组,Ⅰ组麻醉采用咪唑安定0.05 mg/kg,氯胺酮0.5 mg/kg,芬太尼0.005mg/kg,万可松0.1 mg/kg诱导插管;Ⅱ组麻醉采用咪唑安定0.05 mg/kg,芬太尼0.005 mg/kg,万可松0.1 mg/kg诱导插管。监测并记录麻醉诱导前、气管插管前的心率（HR）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）。结论：小剂量氯胺酮用于异位妊娠破裂合并失血性休克病人全麻诱导时,循环相对稳定,麻醉效果满意。