钩端螺旋体澳洲群群特异性McAb的建立、鉴定及群特异性抗原检测

作者成功地获得4株分泌抗澳洲群钩瑞螺旋体的单克隆抗体(McAb)杂交瘤。其中2E_1株能与所选澳洲群的11个型的钩体都发生凝集反应,而不与澳洲群外的20群22个型的钩体、非致病性Patot Ⅰ株钩体和伊利尼细螺旋体3055株发生凝集反应。由此表明,2E_1 McAb具有澳洲群钩体的群特异性。用SDS-PAGE、免疫印迹法对澳洲型620株、赖型601株、七日热型156株、Patoc Ⅰ株及3055株外膜蛋白中McAb识别的抗原成分进行检测,结果2E_1 McAb能特异地识别澳洲型620株34kd外膜蛋白区带。其余3株McAb具有澳洲群钩体部分群特异性。     

PCR扩增52株钩体23S rRNA基因及其临床应用55例分析

采用犬型钩端螺旋体(以下简称钩体)Moulton株23SrRNA基因273-293位点和376—396位点的引物A和B,即5＇GATCTAATTCGCTGTAGCAGG~(3＇)及~(5＇)ACTTTCACCCTCTAT-GGTCGG~(3＇),对52株钩体进行PCR扩增。结果表明49型50株问号状钩体均发生特异性扩增,而双曲钩体patoc型PatocⅠ株及细螺旋illini型3055株钩体不出现特异性扩增。用引物A和B对1992年从井研、西昌两地收集的早期钩体病患者的早晚期血清进行PCR扩增,结果第一次血清55份(发病后1～5天),PCR阳性51例(92.72％),第二次血清55份(发病后6～60天),PCR阳性41例(74.55％)。由此表明PCR不仅可广泛用于钩体病的临床早期诊断,而且可用于检测不同病程患者血中钩体DNA。     

钩端螺旋体七日热群部分群特异McAb的建立与鉴定

经脾内注射七日热群七日热型钩体外膜抗原免疫BALB/c小鼠,取脾内细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选出两株抗七日热群钩体的McAb.显凝试验(MAT)表明,Af_2和Bb_2两株McAb均能与选用的七日热群9型钩体中的8型钩体发生凝集反应,但不与卡布那型钩体凝集,而选用的其他20群33型问号钩体,双曲钩体Patoc Ⅰ株和细螺旋体伊尼利型3055株均为MAT阴性,从而证明Af_2和Bb_2两株McAb具有七日热群部分群特异性.     

汉滩病毒感染SCID小鼠动物模型的建立

目的通过检测汉滩病毒(HTNV)76-118株感染SCID小鼠组织中的特异性病毒抗原、核酸的分布以及病理学变化,以建立汉滩病毒感染动物的评价体系。方法取汉滩病毒76-118株病毒液通过肌肉注射接种SCID小鼠,接种3 d后,取小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等组织,并分别利用ELISA法检测各组织中的病毒特异性抗原;利用q RT-PCR法检测各组织中的病毒RNA;利用HE染色法检测各组织中的病理学变化。结果SCID小鼠感染汉滩病毒后,用夹心ELISA法可在其心、肝、脾、肺、肾组织中检测到HTNV特异性抗原,平均P/N值分别为2.33、7.41、8.13、7.40、2.89,其中脾病毒抗原含量最高;以q RT-PCR法检测小鼠各脏器组织中的HTNV核酸,在实验组小鼠的心、肝、脾、肺、肾中均可检测到病毒核酸,与对照组相比,其相对量分别达到2~(2.11)、2~(6.23)、2~(8.21)、2~(5.26)、2~(3.79)倍,其中脾病毒核酸含量最多;HE染色法可见肝、脾、肺中伴有显著的病理学变化。结论成功检测了汉滩病毒感染SCID小鼠后组织中特异性抗原、核酸的分布以及病理学变化,从而为建立汉滩病毒感染动物的评价体系提供一种参考。     

用分子杂交技术分析不同毒力钩端螺旋体基因组DAN同源性

用~(32)P标记钩端螺旋体(钩体)基因组DNA,以Dot-blot和Southern-blot杂交法分析5株钩体DNA同源性。结果表明:问号钩体黄疸出血群赖型017株和601株及七日热群七日热型245株与双曲钩体patoc型Patoc I株、细螺旋体illini型3055株同源程度极低;3株问号钩体有不同程度同源;illini型3055株与各株同源性均低。     

~(125)碘标记载脂蛋白CⅢ在小鼠血浆中清除及体内分布的研究

用~(125)碘标记人载脂蛋白CⅢ对载脂蛋白CⅢ在小鼠血浆中的清除及体内的分布进行了研究。发现静脉注射~(125)碘标记人载脂蛋白CⅢ在小鼠血浆的分数清除率为0.19/h,血浆半寿期为3小时,肝脏是结合~(125)碘标记载脂蛋白CⅢ的主要器官。     

五株钩体外膜蛋白和脂多糖的SDS-PAGE、2D-PAGE图谱的比较研究

作者采用SDS-PAGE、2D-PAGE结合银染色法及免疫印迹技术对五株不同致病力钩体外膜蛋白和脂多糖作比较研兜。SDS-PAGE分析发现三株致病钩体外胰蛋白电泳图谱非常相似,与两株非致病性钩体电泳图谱无相关关系。强毒力017株外膜21.5kd区带的蛋白含量明显高于两株弱毒力钩体。2D-PAGE图谱差异更大,主要表现为pI的分布不同。用抗017株的McAb(LB_1)对五株外膜进行免疫印迹分析。该McAb主要识别三株致病性钩体共有的41kd抗原。三株致病性钩体外膜脂多糖电泳图谱与两株非致病钧体外膜脂多糖电泳图谱迥然不同。     

用分子杂交技术对17株钩端螺旋体基因组DNA同源性的研究

采用缺口平移及随机引物标记法制备出问号状钩体017株、双曲钩体Patoc Ⅰ株和细螺旋体illini型3055株3株不同属种钩体基因组DNA的~(32)P标记探针,用之分别与构端螺旋体属和细螺旋体属的5个血清群17株钩体DNA进行打点杂交。结果发现:此两属钩体间基因组DNA同源性极低;属内不同种间有较低同源性;问号状钩体中不同血清型之间有较高的同源性;赖型017株钩体DNA与不同群型的致病性钩体均有较高的同源性,表明该探针可作为广泛识别各致病性钩体的通用探针。     

感染过程中钩端螺旋体外膜蛋白抗原表达水平变化及其调控机制

目的：了解感染人巨噬细胞过程中问号钩端螺旋体（简称钩体）黄疸出血群赖型赖株主要外膜蛋白（OMP）抗原表达水平变化及其OmpR相关基因调控机制。 方法：采用生物信息学技术预测问号钩体赖株OmpR及其组氨酸激酶（HK）基因和结构功能域。采用实时荧光定量RT-PCR检测钩体感染人THP-1巨噬细胞前后钩体主要OMP编码基因mRNA水平的变化。采用HK胞外区多肽抗血清封闭试验及氯氰碘柳胺阻断试验,检测OmpR及其HK对感染过程中问号钩体OMP编码基因mRNA水平变化的影响。 结果：生物信息学分析结果显示,LB015和LB333可能是问号钩体赖株OmpR编码基因,LB014可能是其HK编码基因。问号钩体赖株感染THP-1细胞后,lipL21、lipL32、lipL41基因mRNA水平迅速并持续下降（P<0.01）,groEL、mce、loa22、ligB基因mRNA水平瞬时迅速升高（P<0.01）。氯氰碘柳胺或HK抗血清处理可使感染THP-1细胞而显著下降的问号钩体lipL21和lipL48基因mRNA水平明显回升（P<0.01）,氯氰碘柳胺处理可使感染THP-1细胞而显著升高的groEL、mce、loa22、ligB基因mRNA水平明显下降（P<0.01）。 结论：问号钩体赖株感染人巨噬细胞后主要OMP抗原表达水平发生明显变化。问号钩体赖株染色体中存在一组编码OmpR及其HK的基因,其主要功能可能是下调感染过程中部分OMP抗原表达水平。     

应用分子杂交对钩端螺旋体DNA同源性的研究

作者以~(32)P标记的黄疸出血群赖型017株钩体DNA为探针,分别与2个属5个血清群的6株钩体DNA进行分子杂交。结果表明,黄疸出血群赖型017株与同群、型的56601株同源性较高,与秋季群(56606株)、七日热群(56610株)次之,与双曲钩体patoc型Patoc Ⅰ株、细螺旋体属illini细螺旋体同源性很低;~(32)P标记的钩体DNA探针能检测四川地区流行的致病性钩体。     

长沙地区12万人口1985,1986两年死亡调查报告

本文报告长沙地区12万人口中1985,1986两年30岁以上死亡者共1494人;其主要死因为心血管疾病,脑中风、肿瘤次之。心血管疾病中,以肺源性心脏病死亡率最高,冠状动脉性心脏病次之。猝死111人,60岁以上者猝死率明显增加。     

IN MEMORIAM OF

My memory of Dr. Chung dates back to the summer of 1932, when I first met him at a medical ward round in Peking Union Medical College Hospital. Dr. Chung was then the resi- dent physician of the Department of Medicine. Hc was shortish in stature, took big strides, looked serious and spoke mandarin with a sou- them accent and English with an American accent. Later I learned that he wasi from Mei- xian County, Guangdong Province. The peo- ple from this county had long been known to bc industrious, enterprising and adventurous. But Chung was not born in Meixian. His fa- ther, a poor peasant, was forced to leave his native land to seek a living abroad. He sailed to the eastern (Partugese) part of Timore Island in the East Indies. Chung was born there in the year 1901. Being poor, he had to do child labor and could not afford to go to school until he was in his teens. A few years later he return- cd to his native county, Meixian, to attend mid- dle school. Afterwards he was awarded a scholarship to study in the School of Sciencc, Shanghai College. After he graduated, he entered PUMC in 1922 and received an M.D. in 1929. Dr. Chung spent a 4-year residency in different branches of internal medicine in the same institute. He finally chose tropical medicine as his field of specialization. In 1933 he married Dr. Li Yi-zhen in Guangzhou; at their wedding I had the honor of being one of the bestmen.     

利培酮治疗儿童首发精神分裂疾病临床观察

目的探讨利培酮治疗儿童首发精神分裂症或分裂样精神病的临床疗效、安全性和药物剂量。方法62例年龄<14岁的首发精神分裂疾病的病儿采用利培酮治疗8周,采用简明精神病评定量表(BPRS)评定疗效,不良反应量表(TESS)及实验室相应检查评定安全性及不良反应。结果本组病儿治疗总有效率为85%;不良反应主要为锥体外系反应及失眠;平均治疗剂量(3.26±0.88)mg/d。结论利培酮对于首发精神分裂症或分裂样精神病病儿的治疗安全、可靠,不良反应轻,病儿依从性高。     

超声检查对妇产科某些出血性疾病的诊断价值

目的：探讨引起阴道不规则流血各种疾病的超声诊断价值。方法：71 例阴道不规则流血病人均采用B超诊断仪经腹部对子宫、输卵管、卵巢等盆腔脏器进行多方位的探查，以获得有诊断价值的声像图。结果：导致阴道流血的各种疾病均有不同特点 的声像图表现。结论：根据声像图的特征，可对疾病做出正确判断,协助临床做到早期发现，早期诊治。     

前降钙素在小儿肺炎诊断中的临床价值

目的：研究前降钙素在小儿肺炎诊断中的临床价值。方法：选取2011-09—2013—09于我院住院治疗的小儿肺炎患者为研究对象,共114例,根据患儿诊断将其分为细菌性肺炎组（进一步划分为普通感染组与重症感染组）和病毒性肺炎组,并选取同期于我院儿童保健科就诊的健康儿童为对照组。比较细菌性肺炎组、病毒性肺炎组、对照组三组患儿前降钙素检测结果的阳性率及细菌性肺炎普通感染组与重症感染组前降钙素水平。结果：细菌感染组患儿前降钙素检查阳性率为83．61％,病毒感染组为13．21％,对照组为0．00％。细菌感染组患儿前降钙素检查结果阳性率明显高于病毒感染组、对照组,组间存在显著性差异（P〈0．05）。细菌性肺炎普通感染组、重症感染组前降钙素水平明显高于对照组,组间存在显著性差异（P〈0．05）;重症感染组前降钙素水平明显高于普通感染组,组间亦存在显著性差异（P〈0．05）。结论：血清前降钙素含量的高低对于鉴别小儿细菌性肺炎和病毒性肺炎具有重要的临床价值,且患儿前降钙素检测结果越高,一般细菌感染程度就越重。     

早期干预治疗在婴儿髋臼发育不良中的临床意义

目的 探讨早期干预治疗措施对髋臼发育不良（dysplasia the acetabulum,DA）恢复的有效性.方法 40例DA患儿随机分为对照组和治疗组各20例,治疗组早期（出生4周后）给予干预手段（采取屈髋外展操训练结合宽尿布片法治疗）,对照组无干预措施,超声定期观察髋关节恢复情况.结果 治疗组中2个月内DA 患儿恢复17例（85.0%）,高于对照组11例（55.0%）,差异有统计学意义（P〈0.05）;随访至病程3个月,治疗组恢复20例（100.0%）,对照组仅有14例（70.0%）,差异有统计学意义（P〈0.05）;6个月时对照组仍有3例未恢复正常.治疗组恢复效果的散点回归方程斜率4.0大于对照组斜率2.9,表明治疗组的恢复速度快于对照组.结论 早期干预措施能够促进DA患儿的尽早恢复.     

直肠癌组织中EB病毒的原位杂交检测

目的探讨EB病毒（EBV）感染与人直肠癌发生的关系。方法采用原位分子杂交技术,对100例人直肠癌组织标本中EBV编码小分子RNA（EBER）进行检测。结果100例直肠癌标本中癌细胞EBER均为阴性,有1例直肠癌组织间质中浸润的淋巴细胞EBER阳性。结论EBV感染与直肠癌的发生无明显相关性。     

应激大鼠室旁核神经元c-fos的表达

目的：为下丘脑室旁核参与应激反应提供形态学资料。方法：对铃声刺激大鼠为应激动物模型用免疫组织化学ABC法显示下丘脑室旁核神经元即早基因c-fos的表达。结果：铃声刺激使鼠室旁核神经元。尤其是小细胞亚核神经元c-fos表达显著增加。结论：下丘脑室旁核神经元在铃声刺激下处于活动状态。参与应激反应。     

环氧氯丙烷染毒大鼠肾上腺中儿茶酚胺含量的变化

应用反相离子对高效液相色谱(HPLC)法测定了大鼠环氧氯丙烷(EPI)染毒后肾上腺中儿茶酚胺:肾上腺素和去甲肾上腺素的含量变化,并观察了肾上腺重量的变化。随着EPI染毒剂量的增加,肾上腺中去甲肾上腺素含量变化不明显。肾上腺素在低剂量组增加,高剂量组与对照组比无明显增加。肾上腺重量则随EPI染毒剂量增加而明显增加。结果提示EPI染毒可致肾上腺增生肥大,使肾上腺素总的合成和分泌增加,并有一定的耗竭现象。     

L-DEPRENYL IN PREVENTION OF MPTP INDUCEDDEPLETION OF STRIATAL ENKEPHALINS IN MICE

Large dose MPTP treatment given to the mousecould bring about a reduction of methionine-enke-phalin (MEK) and leucineenkephalin (LEK) in themouse striatum. The average levels were reduced by7570 for MEK and 6670 for LEK as compared withthe controls. The monoamine oxidase B inhibitorLdeprenyl could prevent the MPTP-induced pepti-dergic neurotoxicity. Hence, MPTP-treated mousemay be a useful model to study peptides an.d Parkinson's disease.