癌基因及抗癌基因在实验性动脉粥样硬化斑块中的转录表达

癌基因及抗癌基因在实验性动脉粥样硬化斑块中的转录表达成都华西医科大学生物化学与分子生物学研究所６１００４１汪浩川，刘秉文，付明德，曾成林ＡＳ是一种以动脉ＳＭＣ和单核／巨噬细胞增殖为主的疾病。就其本质而言，它的发生与肿瘤有相似之处，可能是癌基因异常表达...     

人血清载脂蛋白AI免疫圆周扩散测定法的研究

介绍一种人血清apoAⅠ免疫圆周扩散测定法。用纯化人apoAⅠ免疫山羊制备抗血清。制成0.8％琼?糖抗体凝胶板,点样5μl,25℃扩散48h测量结果。方法简便可靠,特异性、重复性好,无需特殊仪器。最小检测量125ng, 测定范围27.5～220.0mg/dl,板内及板间重复的变异系数分别为2.2～4.8％和6.3％,样品回收率98.9～110.0％,测得血脂正常的成年人血清apoAⅠ含量为男120.8±17.6mg/dl(n=40),女123.6±15.9mg/dl(n=19)。     

内源性高甘油三酯血症者血浆脂蛋白中脂质和载脂蛋白...

Lipids and apolipoproteins in plasma VLDL, IDL, LDL, HDL2 and HDL3 isolated by one-step density gradient ultracentrifugation from 7 subjects with endogenous hypertriglyceridemia (HTG) and 4 normalipemics were determined. HTG VLDL was enriched with cholesterol, and its triglyceride (TG), phospholipid (PL) and apo CII, CIII contents (mg/100 mg protein) were significantly higher than those in normal VLDL. ApoE content in HTG VLDL was prone to increasing, and apoB100 content had no apparent difference from that in normal VLDL. Compared with normal HDL2 and HDL3, the contents of total cholesterol (TC), apoAI, CII, and CIII in HTG HDL2, and apoCII, CIII in HTG HDL3 decreased. HTG HDL2 and HDL3 were rich in TG. By analysis of distribution of these lipids and apolipoproteins in various plasma lipoproteins, it was found that the abnormal composition of VLDL and HDL in HTG seemed to be a result of transport of TC, PL, and apoCII, CIII from HDL to VLDL. There was a significantly positive correlation between TC and apoAI, CII, CIII in HDL respectively, which indicated that apoCII and CIII were also associated with the alteration of HDL cholesterol. It is suggested that the elevated plasma VLDL-TG concentration in endogenous hypertriglyceridemia may induce abnormal redistribution of lipid and apolipoprotein among apoCII plasma lipoproteins, and and CIII may play an important role in these changes.     

2型糖尿病患者载脂蛋白E基因多态性的研究

目的：探讨中国人2型糖尿病患者载脂蛋白E（apoE)基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系。方法：采用聚合酶链反应－限制性酶切片段长度多态性法，分别对74例2型糖尿病患者及191例血脂、血糖正常且无糖尿病史者的apoE基因型、空腹血脂及载脂蛋白AI、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ及E进行全面分析。结果：2型糖尿病患者的血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC），低密度脂蛋白胆固醇（LDLC），非高密度脂蛋白胆固醇（nHDLC),载脂蛋白B100、CⅡ、CⅢ、E水平及TG／HDLC比值较对照组显著升高（P＜0．01）；血清高密度脂蛋白胆固醇（HDLC），apoE/apoCⅢ比值显著降低（P＜0．05）。2型糖尿病组与对照组apoE基因频率分布无显著性差异（P＞0．05）。携带ε2等位基因组血清TG／HDLC比值较E3／3基因型显著降低；而携带ε4等位基因组血清apoAⅡ水平较E3／3基因型及携带ε2等位基因组显著升高（P＜0．001）。结论：2型糖尿病患者apoE基因多态性与血TG／HDLC及apoAⅡ有一定关联。     

人及小鼠肝细胞膜apoCⅢ受体（结合位点）的研究

２１人及小鼠肝细胞膜ａｐｏＣⅢ受体（结合位点）的研究方定志，刘秉文华西医科大学生物化学与分子生物学研究所生物化学与生物物理进展１９９３；２０（３）：１９９用￣（１２５）Ⅰ标记的人ａｐｏＣ　Ⅲ为配体，采用聚乙二醇沉淀分离Ｂ／Ｆ的方法，建立了纯化肝细胞膜...     

Oxidative modification of high density lipoprotein induced by cultured human arterial smooth muscle cells

Objective: To observe the oxidative modification of high density lipoprotein (HDL) induced by culturedhuman arterial smooth muscle cells (SMCs). Methods: HDL cocultured with SMCs at 37℃ in 48 h was subjected,and native HDL (N-HDL) served as control. Oxidative modification of HDL was identified by using agarose gel electro-phoresis. Absorbances of conjugated diene (CD) and lipid hydroperoxide (LOOH) were measured with ultravioletspectrophotometry at 234 and 560 nm respectively, and fluorescence intensity of thiobarbuturic acid reaction substance     

内源性高甘油三酯血症患者血浆VLDL、LDL及HDL对血凝的影响

目的：研究内源性高甘油三酯血症(HTG)患血浆极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)是否发生了氧化修饰及其对血凝的影响。方法：对2l例内源性高甘油三酯血症患与2l例年龄性别相近的正常人的血脂、脂质过氧化物进行了分析。用一次性密度梯度超速离心法分离血浆VLDL、LDL及HDL，测定这三种脂蛋白的234nm光吸收、相对电泳迁移率(REM)和硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)，分别将这三种脂蛋白加入由正常人新鲜混合血浆构成的反应系统中，按试剂盒分别测定凝血酶原时间(PT)及活化部分凝血酶原时间(APIT)。结果：内源性HTG患血浆TG含量平均升高2．73倍，HDLC下降l.7l倍，同时LPO升高1．22倍;HTG组VLDL、LDL及HDL的REM、234nm光吸收值、TBARS含量均较对照组显增加(P＜0．01)，表明内源性HTG患血浆VLDL、LDL及LDL均发生了氧化修饰生成Ox—VLDL、Ox-LDL.PT及APTT在分别加入HTG组的VLDL、LDL及HDL后均比加入相应正常组脂蛋白明显缩短(P均＜0．05)。相关分析表明，HTG组血浆VLDL及HDL相对电泳迁移率(REM)与PT呈负相关(P＜0．01)。结论：HTG患血浆VLDL、LDL及HDL发生了氧化修饰，并使PT及APTT明显缩短。     

血清及高密度蛋白对氧磷酶活性的分光光度测定法

目的 在现有的实验条件下,获得稳定可靠的血清及高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL) 中对氧磷酶J（paraoxonase,PON）活性的测定方法。方法 以乙酸苯酯为底物,在对氧磷酶的作用下水解,生成产物苯酚,测定5分钟内反应体系中在270nm处苯酚特征性的紫外吸收,换算为酶促反应速度。结果 通过观测底物浓度、pH、激活剂Ca^2 、抑制剂EDTA等对酶促反应的影响,得出最适的测定条件;底物浓度为5mmol/L,最适pH为8．0,必需激活剂Ca^2 浓度为2mmol/L。结论 在该反应条件下,测定不同浓度HDL或血清中该酶的活性,重复性和稳定性均符合要求。     

视黄酸对培养的HepG2细胞分泌载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B100、CⅢ及E的影响

目的　探讨视黄酸在脂蛋白代谢中的作用。方法　采用冻干浓缩培养液载脂蛋白 RID测定法 ,分别观察 4种不同浓度的视黄酸对培养的人肝癌细胞系 Hep G2细胞载脂蛋白 ( apo) A 、A 、C 、B10 0及 E分泌的影响。结果　视黄酸对 Hep G2细胞 apo A 、A 、B10 0及 C 的分泌均有促进作用 ,对 apo E的分泌则有抑制作用。在本研究条件下 ,当视黄酸的浓度为 2× 10 - 4 m ol/ L时 ,其对 Hep G2细胞 apo分泌的影响作用最大 ,此时apo A 、A 、B10 0和 C 的分泌分别增加 14.3% ( P<0 .0 1)、2 3.8% ( P<0 .0 5 )、16 .1% ( P<0 .0 1)、47.6 % ( P<0 .0 1) ,而 apo E的分泌减少 37.2 % ( P<0 .0 1)。结论　视黄酸对 Hep G2细胞 apo A 、A 、C 、B10 0及 E的分泌有不同的影响