应用载体介导的RNA干扰技术抑制肝癌细胞H-rasVal12的表达

目的观察载体介导的RNA干扰(RNAi)技术对肝癌细胞突变的H-rasVal12表达的抑制作用。方法将针对突变H-ras的短发夹RNA(shRNA)质粒表达载体转染肝癌细胞株BEL7402和SMMC7721,用免疫印迹(Western blot)法检测H-ras蛋白的表达,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。计量资料比较采用t检验;计数资料比较采用χ2检验。结果 (1)转染前、后SMMC7721的H-ras蛋白表达量〔光密度值分别(1 752±21)和(1 736±28)〕比较,差异无统计学意义(t=0.474,P=0.646);而转染了H1-shRNA的BEL7402的H-ras蛋白表达量(920±11)与转染前(1 221±11)比较,差异有统计学意义(t=20.126,P<0.01);转染了H2-shRNA的BEL7402的H-ras蛋白表达量(872±10)与转染前(1 201±10)比较,差异有统计学意义(t=23.477,P<0.01)。H1-shRNA组和H2-shRNA组H-ras蛋白表达下调了62.8%和63.4%。(2)流式细胞仪检测表明,BEL7402转染H1-shRNA质粒后细胞凋亡率(47.7%)与转染H2-RNA质粒后细胞凋亡率(49.3%)比较,差异无统计学意义(χ2=0.005,P=0.94);但均高于BEL7402转染对照质粒后细胞凋亡率(30.2%),差异有统计学意义(χ2H1=6.810,P<0.01;χ2H2=6.103,P<0.01)。结论载体介导的RNAi技术可有效特异抑制肝癌细胞突变的H-rasVal12表达,对野生型的H-ras表达无影响。     

结节性甲状腺肿术后促甲状腺激素抑制治疗效果的探讨

目的:观察结节性甲状腺肿患者手术后在不同时间给予抑制治疗后促甲状腺激素(TSH)水平的变化和2年后的复发率,探讨给予TSH抑制治疗的最佳时机.方法:将120例结节性甲状腺肿术后患者分为对照组(n=60)和实验组(n=60),对照组术后3周开始给药,实验组在术后第1d开始给药,药物为左甲状腺素,剂量均为100μg/d,每天早晨空腹顿服.于术后第3d、第5d、第9d、第14d及每个月检测血清促甲状腺激素(血清s-TSH)水平,比较2组TSH值的变化及其复发率.结果:与对照组相比,实验组术后s-TSH水平较早达到平稳(P＜0.05),且其术后2年的复发率显著低于对照组(P＜0.05).结论:结节性甲状腺肿患者术后早期给予TSH抑制治疗能明显缩短其达到TSH平稳的时间,并且降低术后的复发率.     

基质金属蛋白酶7及基质金属蛋白酶9的表达与结直肠癌侵袭转移的相关性研究

目的 观察基质金属蛋白酶7(MMP-7)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)在结直肠癌组织中的表达情况,分析二者的表达与结直肠癌侵袭转移的相关性.方法 应用免疫组化SP法,采用组织芯片技术分析98例结直肠癌、30例癌旁正常组织中MMP-7、MMP-9蛋白表达.结果 MMP-7、MMP-9在结直肠癌组织中表达的阳性率(分别为79.6%和77.6%)均显著高于癌旁正常结直肠组织(分别为10.0%和13.3%),差异均有统计学意义(P＜0.01).MMP-7和MMP-9在结直肠癌组织中的表达在不同性别、年龄、肿瘤的瘤体大小患者中比较,差异无统计学意义(P＞0.05);而不同肿瘤的分化程度、TNM分期、浸润程度及淋巴结转移与否、腹腔微转移与否患者结直肠癌组织中,MMP-7和MMP-9的表达水平比较差异有统计学意义(P＜0.05).结直肠癌组织中MMP-7的表达与MMP-9的表达呈正相关(r=0.532,P＜0.01).结论 MMP-7、MMP-9在结直肠癌组织中高表达,且与肿瘤的浸润、转移密切相关,可作为判断结直肠癌进展的生物学标记物.     

腹腔镜治疗小儿腹股沟斜疝术后复发50例原因分析

目的探讨腹腔镜治疗小儿腹股沟斜疝术后复发原因。方法对50例腹腔镜下治疗小儿腹股沟斜疝的临床资料进行回顾性分析。结果50例均在腹腔镜下完成内环口的荷包缝合,术后随访时间为6～24个月,平均12个月,术后疝复发2例,治愈率96％,复发率4％。结论腹腔镜治疗小儿腹股沟斜疝是一种安全可靠的手术方法,但仍存在一定复发,加强腹腔镜内环口缝合的训练以及选择合理的缝合线,可降低其术后复发。     

甲状腺术后喉返神经损伤的分阶段康复治疗

目的:观察分阶段康复治疗对甲状腺术后暂时性喉返神经损伤恢复的临床疗效.方法:共选取32例甲状腺术后暂时性喉返神经损伤患者,将其随机分为治疗组及对照组.治疗组给予分阶段规范化康复治疗:第一康复阶段指术后至术后2周,行超短波治疗;第二康复阶段指术后2周至2个月,行红外线偏振光照射结合中频电治疗;第三康复阶段指术后2个月至3个月,行直流电离子导入结合中频电治疗.另外,在二、三阶段以及以后的康复中,结合发音训练治疗.对照组未给予物理康复治疗.以电子喉镜检查声带运动与声门闭合.结果:治疗组患者病程3个月内电子喉镜检查,声带运动恢复正常、声门闭合完全者达到11例(68.75％),高于对照组5例(32.25％),P＜0.05;随访至4个月,治疗组患者恢复达100％,对照组仅有11例(68.75％),P＜0.05;6个月时对照组患者完全恢复.2组的散点回归方程,治疗组斜率(4.0)大于对照组斜率(2.9),治疗组恢复快于对照组.主观嗓音评估中简化嗓音障碍指数(VHI-10)在第3、4、5个月,治疗组均明显好于对照组(P＜0.05).结论:规范化分阶段康复治疗对甲状腺术后暂时性喉返神经损伤患者的声音恢复具有显著疗效.     

多药耐药相关蛋白1和CD34在大肠癌组织中的表达及其意义

目的 探讨多药耐药相关蛋白1(MRP1)和小血管内皮细胞标志物CD34在大肠癌组织中的表达及其与临床病理指标的关系.方法 应用免疫组织化学法对53例大肠癌患者的癌组织、正常组织中MRP1和CD34表达进行检测,将结果与临床病理指标进行分析.结果 MRP1在大肠癌及正常组织的阳性表达率分别为49.1％和15.1％,差异有统计学意义(x2=14.029,P＜0.01).MRP1的表达与分化程度、浸润深度、淋巴结转移等病理特征均无关.CD34在大肠癌及正常组织的表达分别为(35.63±12.23) MVD/HP和(6.12 ±0.97) MVD/HP,差异有统计学意义(t=17.565,P＜0.01).CD34的表达与年龄、性别、肿瘤大小、生长部位均无关,与Dukes分期、淋巴结转移、分化程度、肠壁浸润深度均有关(均P＜0.05).结论 MRP1和CD34在大肠癌组织中高表达,可能与大肠癌的发生有关;MRP1可能与原发性多药耐药性有关,CD34可能参与了大肠癌的侵袭和转移,联合检测可为大肠癌的诊治和预后评估提供新的参考指标.     

单孔腹腔镜下改良双钩疝针经皮腹膜外结扎术治疗小儿腹股沟疝的疗效观察

目的:探讨单孔腹腔镜改良双钩疝针经皮腹膜外结扎术治疗小儿腹股沟疝的临床效果。方法:纳入2014年10月至2016年10月收治的120例腹股沟疝患儿作为研究对象,根据手术方式分为三组,每组40例。其中A组行单孔腹腔镜下硬膜外针法经皮腹膜外结扎术,B组行单孔腹腔镜下单钩疝针法经皮腹膜外结扎术,C组行改良双钩疝针经皮腹膜外结扎术。观察3组手术情况、疼痛情况、家长满意度及并发症、复发情况。结果:三组住院时间、住院费用及面部疼痛表情量表评分差异均无统计学意义(P>0.05); C组手术时间短于B组,B组短于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。A、B、C组家长满意度分别为75.0%、77.5%与97.5%,A、B两组满意度差异无统计学意义(P>0.05); C组高于A、B两组,差异有统计学意义(P<0.05)。A、B、C组并发症发生率分别为37.5%、15.0%与2.5%,复发率分别为5.0%、5.0%与2.5%; C组并发症发生率低于B组,B组低于A组,差异有统计学意义(P<0.05); 3组复发率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:单孔腹腔镜下改良双钩疝针经皮腹膜外结扎术治疗小儿腹股沟疝效果良好,手术时间短,术后家属满意度高,并发症发生率低,值得临床推广应用。     

糖预处理对胃肠道肿瘤手术后胰岛素抵抗的影响

目的探讨糖预处理对胃肠道肿瘤手术后胰岛素抵抗的影响。方法选取60例择期行胃肠道肿瘤手术患者,按随机数字表法分为观察组和对照组,每组30例。观察组术前给予糖预处理,即麻醉前2h口服含50g葡萄糖的碳水化合物300ml;对照组患者按传统方法进行处理,术前12h禁食,术前6h禁饮。于术前3h和术后1,3,7d分别抽取患者外周血,监测空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）水平,采用稳态模型法计算胰岛素抵抗指数（HOMA．IR）。结果术后1,3d两组FBG、FINS水平及HOMA．IR均明显高于术前3h[观察组：（10．65±1．78）、（7．32±1．48）mmol／L比（5．09±0．43）mmol／L,（25．78±12．43）、（16．23±7．56）mU／L比（10．48±1．57）mU／L,11．67±6．32、5．12±2．11比2．35±0．54;对照组：（11．18±1．25）、（8．04±1．53）mmol／L比（5．12±0．39）mmol／L,（39．67±10．37）、（24．34±6．78）mU／L比（9．98±2．04）mU／L,19．07±5．49、8．56±2．87比2．28±0．39],差异有统计学意义（P〈0．05）;术后1d对照组FINS及HOMA-IR明显高于观察组,术后3d对照组FINS及HOMA-IR明显高于观察组,差异有统计学意义（P〈0．05）;术后7d观察组FINS及HOMA．IR接近术前3h,差异无统计学意义（P〉0．05）,而对照组[（16．32±4．56）mU／L、3．87±1．123仍高于术前3h,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论糖预处理可以缩短胃肠道肿瘤手术后胰岛素抵抗的时间,减轻胰岛素抵抗的强度,从而有利于患者的加速康复。     

结直肠癌组织MMP-7、MMP-9表达与腹腔微转移的相关性研究

目的:探讨MMP-7、MMP-9在结直肠癌腹腔微转移中的作用以及相关性。方法:收集98例结直肠癌患者手术中腹腔冲洗液,进行CEA、CK20免疫细胞化学染色确定腹腔微转移。使用组织阵列仪制作组织芯片,进行免疫组化染色(SP),检测MMP-7、MMP-9在结直肠癌组织中的表达情况,分析其与腹腔微转移的关系。结果:CEA、CK20联合检测腹腔微转移率为32.7%(32/98)。MMP-7、MMP-9在伴有腹腔微转移的结直肠癌中阳性表达率分别为93.75%和96.88%,明显高于无腹腔微转移结直肠癌表达率72.73%和68.18%(P<0.05,P<0.01)。结论:MMP-7、MMP-9可能在结直肠癌腹腔微转移的发生过程中起重要作用。