四肽AC-DEVD-CHO对硫芥诱导淋巴细胞凋亡的干预作用

目的 探讨caspase-3活性在硫芥诱导淋巴细胞凋亡中的变化和其四肽抑制剂AC-DEVD-CHO对细胞凋亡的干预作用。方法 荧光分光光度法检测caspase-3活性变化，琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪分别检测DNA ladder，细胞凋亡率。结果 硫芥可诱导淋巴细胞caspase-3活性升高，其多肽抑制剂可部分阻断细胞凋亡，主要表现在抑制剂作用下DNA ladder。现象减弱，细胞凋亡百分数下降。结论 硫芥通过激活caspase-3诱导淋巴细胞凋亡，其多肽抑制剂对淋巴细胞凋亡具有干预作用。     

硫芥对大鼠脾脏淋巴细胞线粒体的损伤作用

目的观察硫芥对大鼠脾脏淋巴细胞线粒体的损伤作用.方法用密度梯度离心法分离大鼠脾淋巴细胞,与硫芥共同进行体外培养.用琼脂糖DNA凝胶电泳观察细胞凋亡的发生;用Western blot观察Cyt-c释放.用MTT法检测线粒体功能状态,以罗丹明123标记的荧光探针检测线粒体跨膜电位.结果 100 μmol/L硫芥作用4 h线粒体功能就有降低,线粒体跨膜电位降低,二者间呈直线相关.硫芥中毒早期即可引起淋巴细胞线粒体细胞色素C释放和细胞凋亡(DNA ladder).结论硫芥可引起大鼠脾淋巴细胞线粒体明显损伤,线粒体参与了硫芥的细胞毒性作用过程.     

硫芥中毒犬外周血IL-2、IL-6含量变化和淋巴细胞DNA损伤

目的 研究硫芥中毒犬外周血IL-2、IL-6变化和淋巴细胞DNA损伤的规律。方法 重庆家犬硫芥中毒(16mg/kg，sc)。中毒后不同时相点取血，分离血清和淋巴细胞。采用放射免疫方法测定血清中IL-2、IL-6含量，以单细胞凝胶电泳技术测淋巴细胞DNA损伤程度。结果 中毒后4h血清IL-2、IL-6含量开始下降，72h达最低值，120h开始恢复。单细胞电泳检测结果提示，硫芥导致明显的淋巴细胞彗星现象。受损细胞率、淋巴细胞DNA片段迁徙度于中毒4h即开始升高，24～72h持续升高。结论 硫芥中毒导致发生早且持续时间较长的犬外周血IL-2、IL-6含量下降和淋巴细胞DNA损伤。     

乌头碱中毒致心律失常的表现及对内皮功能的影响

目的探讨乌头碱中毒致心律失常的表现和对内皮功能的影响。方法回顾性分析29例乌头碱中毒患者的临床资料,检测患者血浆一氧化氮（NO）和一氧化氮合成酶（NOS）,同时检测20名正常人（对照组）的NO和NOS。结果中毒组83％的患者有明显心律失常,其中室性心律失常最为明显,治愈出院26例,3例死亡;中毒组患者血浆NO和NOS明显高于对照组（P〈0．05）。结论乌头碱中毒可导致多种心律失常,尤其是室性心律失常;同时可以导致NO和NOS升高,造成细胞毒性。     

硫芥诱导大鼠小肠上皮细胞凋亡的研究

目的：观察硫茶对大鼠小肠上皮细胞（IEC－6）生长的影响及其引起的细胞死亡的方式。方法：透射电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳定性硫芥中毒的IEC－6细胞形态变化及DNA的改变。采用Cell Death DetectionELISA试剂盒研究IEC－6细胞凋亡与硫芥浓度之间的关系。结果：0．1－1000μmol/L硫芥对IEC－6细胞的毒性作用与硫芥的深度和作用时间呈正相关。电镜观察到细胞凋亡的形态学改变。细胞膜完整,染色质固缩并聚集于核膜边缘,凋亡小体形态;DNA电泳有“DNA Ladder”出现,0．1－100μmol/L硫芥处理的细胞的凋亡量随硫芥 度的升高而增加,超过100μmol/L测凋亡量反降低。结论：硫芥可诱导大鼠小肠上皮IEC－6细胞凋亡,在低浓度时以凋亡为主,高浓度时则出现坏死。     

硫芥对大鼠淋巴细胞DNA及白细胞介素的影响

目的　探讨硫芥中毒动物淋巴细胞的损伤特点及中毒早期白细胞介素的浓度变化作为硫芥毒性损伤诊断的可能性 .方法　分离大鼠脾淋巴细胞培养 ,经 10～ 10 0 0 μmol·L- 1 芥子气染毒 30 min,以单细胞凝胶电泳法 (SCG )检测DNA损伤 ;同时测定硫芥中毒大鼠血液 IL- 2和 IL- 6浓度 .结果　中毒后淋巴细胞 DNA迁移率和受损细胞百分率呈时间和剂量依赖关系 (r=0 .6 3,P<0 .0 1) ;培养液中 IL- 2和IL- 6浓度明显降低 ,IL- 6含量为 (46 8± 16 ) μg· L- 1 ,4 h开始下降 ,72 h降至 (177± 16 )μg· L- 1 (P<0 .0 1) ,12 0 h有所回升 ,但仍然明显低与对照 (P<0 .0 1) .其中 IL- 2几乎难以检出 .结论　硫芥中毒早期机体免疫系统受到明显抑制 ,SCG检测 DNA损伤用作评价硫芥细胞毒性指标在诊断方面具有一定价值     

全脑缺血再灌注后海马神经元凋亡及组织NO含量动态变化的研究

目的:观察全脑缺血15 m in后再灌注不同时间点海马神经元凋亡及海马组织NO含量的动态变化。方法:采用4血管闭塞法制备大鼠全脑缺血再灌注模型,采用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测缺血15 m in后再灌注1 d、2 d、3 d、5 d、7 d时海马神经元凋亡情况;硝酸还原酶法检测各时间点海马组织中NO含量。结果:DNA琼脂糖凝胶电泳显示:在再灌注1 d时呈大致正常条带,2 d、3 d呈“梯状条带,”5和7 d出现了代表部分神经元坏死的涂抹状条带;流式细胞仪检测结果显示:在脑缺血再灌注1 d时,海马神经元凋亡率即明显增加,再灌注3 d时凋亡率达高峰,随后凋亡率逐渐下降,7 d时大致达正常水平;海马组织中NO含量于再灌注后2 d明显升高,3 d达峰值,以后逐渐下降,7 d降至接近对照组水平。结论:全脑缺血再灌注后海马神经元凋亡和NO含量均于再灌注3 d时达高峰,7 d大致恢复至正常水平,提示NO增多可能是诱导海马神经元凋亡的机制之一。     

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠精索静脉曲张生精细胞的保护作用

目的探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠精索静脉曲张生精细胞的保护作用。方法(45±5)天的SD雄性大鼠复制左侧精索静脉曲张模型。假手术组、手术组、手术 L-NAME组术后8周起腹腔注射L-NAME,剂量:50mg/(kg.d),每组10只大鼠。术后10周用流式细胞仪检测睾丸生精细胞凋亡,分光光度法检测Caspase-3活性,用硝酸还原酶法测定睾丸组织一氧化氮(NO)含量和NOS活性。结果与假手术组相比,精索静脉曲张组发生凋亡的生精细胞数显著增加,Caspase-3活性升高。与精索静脉曲张组相比,本实验精索静脉曲张手术 L-NAME组生精细胞凋亡率下降,Caspase-3活性降低,睾丸组织中NO含量及NOS活性与显著降低。结论精索静脉曲张睾丸组织中NO含量升高导致Caspase-3活性升高可能是精索静脉曲张生精细胞凋亡增加的机制之一。L-NAME通过抑制NOS活性,减少NO产生来降低睾丸组织生精细胞的凋亡,发挥其保护作用。     

高碘对大鼠大脑皮层神经细胞凋亡的诱导作用

目的 观察长期高碘对大鼠皮层神经细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 断乳1月龄的SD大鼠随机分为三组,对照组、高碘Ⅰ组、高碘Ⅱ组,分别以含碘量为5μg/L、5000μg/L、10000μg/L的自来水及普通饲料喂养6个月,测定血清甲状腺激素（TT3、TT4）水平;透射电镜观察皮层神经元形态结构的改变;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期的变化;采用比色法检测大鼠皮层神经细胞一氧化氮（NO）含量和一氧化氮合酶（nitric oxide synthse,NOS）的活性.结果 与对照组比较,高碘Ⅰ组、高碘Ⅱ组的血清TT3、TT4呈逐渐下降趋势,但各组间差异无统计学意义（P＞0.05）.超微结构观察,高碘组神经细胞核内染色质浓缩成块状,聚集在核膜边缘,形成新月状、马蹄状等不规则形态,核膜内陷、形成凋亡小体.流式细胞仪检测高碘组引起大鼠皮层神经细胞周期改变,细胞凋亡率明显高于对照组（P＜0.01）,同时高碘组NOS活性及NO含量显著降低,但两个高碘组之间无明显差异（P＞0.05）.结论 长期高碘可诱导大鼠皮层神经细胞损伤及凋亡,其机制可能与NOS活性及NO含量降低有关.     

流式细胞定量检测细胞凋亡

目的研究流式细胞仪定量检测细胞凋亡。方法用流式细胞仪检测雷公藤多甙对慢性肾疾病患者的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）凋亡，再用琼脂糖凝胶电泳观察ＤＮＡ电泳情况。结果流式细胞仪出现亚二倍体峰，凋亡细胞百分比明显增多。琼脂糖凝胶电泳呈现特征性的“梯状”带。结论流式细胞仪可定量检测细胞凋亡。     

大鼠脑缺血再灌注损伤后兴奋性氨基酸、NOS和NO的含量变化

目的 :通过测定大鼠脑缺血再灌注后兴奋性氨基酸 (EAA)、一氧化氮合酶 (NOS)和一氧化氮 (NO)含量的变化 ,探讨脑缺血再灌注损伤的发生机制。方法 :将动物分为假手术组和缺血 30min后再灌注组 ,通过高效液相色谱或分光光度法测定再灌注后不同时间 (1h、6h、2 4h、4 8h和 72h)脑组织EAA、NOS和NO的含量。结果 :再灌注后 1hEAA水平较假手术组显著增高 ,以谷氨酸最为明显 ,随后逐渐下降 ,2 4h达正常水平。NOS和NO于再灌注后1h即升高 (P <0 .0 5 ) ,2 4h达最高水平 (P <0 .0 1) ,72h降至正常。结论 :脑缺血再灌注后EAA、NOS和NO含量发生变化 ,与缺血再灌注脑损伤有相关关系     

褪黑素对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性的影响及其机制

目的：探讨褪黑素对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性变化的影响及机制。方法：用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型。大鼠随机分为假手术组（阴性对照组），缺血组，褪黑素组（给药组）（4mg/kg)，尼莫地平组（阳性药物对照组）（0.2mg/kg)，缺血前30分钟舌下静脉给药。持续性缺血30分钟，6小时，24小时后处死动物，测定NO含量和NOS活性（用分光光度法）。结果：MCAO后，缺血30分钟NO含量及NOS活性升高，缺血6小时降低，24小时再度升高。与模型组比较，缺血30分钟，褪黑素使NO含量及NOS活性或高，6小时，24小时降低。结论：褪黑素对大鼠局灶脑缺血有一定的保护作用，其机制可能与降低脑组织中NO含量与NOS活性，减轻脑组织自由基的损伤有关。     

鱼藤酮长期作用对大鼠纹状体单胺递质、NO和NOS的影响

目的观察鱼藤酮长期作用对大鼠纹状体单胺递质和NOS/NO系统的变化规律.方法 Wistar大鼠每日皮下注射鱼藤酮90 d,于第30、60、90天处死动物,分离大鼠纹状体,分别以HPLC法和生化法测定其多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、5-羟色胺(5-HT)、一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性.结果在鱼藤酮中毒各时相点,大鼠纹状体单胺递质均出现不同程度的变化,以DA、DOPAC、5-HT含量改变尤为明显;纹状体NO含量和NOS活性均明显升高,且中毒剂量越大、中毒时间越长NO、NOS升高越明显.结论纹状体单胺递质代谢紊乱和NOS/NO系统改变在鱼藤酮长期作用引起的中枢DA神经损伤中起重要作用.     

人参二醇组皂苷对感染性休克大鼠血清一氧化氮合酶及一氧化氮的影响

目的观察人参二醇组皂苷（PDS）对感染性休克大鼠血清中一氧化氮合酶（NOS）活性及一氧化氮（NO）含量的影响，探讨其抗感染性休克的作用机制。方法大鼠舌下静脉注射PDS进行预治疗，10rain后注射细菌内毒素（LPS5mg／kg）复制感染性休克模型。实验动物随机分为对照（Control）组；内毒素休克（LPS）组；地塞米松（LPS＋Dex）组；人参二醇组皂苷（LPS＋PDS）组。颈动脉插管记录平均动脉压（MAP）。分别于休克后2h和4h腹主动脉取血，用硝酸还原酶法测定血清中NOS活性和N02^-／NO3^-的含量，间接反映N0的水平。结果注射内毒素后，模型组的MAP迅速下降，在低水平维持，LPS＋Dex组和LPS＋PDS组的MAP未见明显下降，优于模型组（P〈0．01）；注射内毒素2h后模型组的血清NOS和NO明显升高，LPS＋Dex组和LPS＋PDS组NOS活性、NO2^-／NO3^-含量显著低于LPS组（P〈0．05）。结论PDS能够明显改善内毒素休克大鼠的低血压状态，降低NOS活性、NO含量，并对其NO的生成具有抑制作用。     

一氧化氮、内皮素-1在兔脑局灶性脑缺血中相互关系

研究一氧化氮 （ＮＯ）和内皮素 （ＥＴ）两者在脑缺血中的关系,建立免大脑中动脉阻断（ＭＣＡＯ）模型,分别测定脑组织ＮＯ、ＥＴ－１含量及一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）活性：应用ＮＯＳ抑制剂、ＥＴ受体拮抗剂分别观察它们对ＥＴ－１、 ＮＯ含量的影响。结果：脑缺血早期 （２ ｈ）ＮＯ含量、 ＮＯＳ活性均降低,脑缺血后 ４～４８ ｈ ＮＯ含量, ＮＯＳ活性显著增加;应用 ＮＯＳ抑制剂后 ＥＴ—ｌ含量增加, ＥＴＢ受体拮抗剂后 ＮＯ含量降低。结论： ＮＯ可能抑制 ＥＴ—ｌ产生,反过来ＥＴ—１可能促进ＮＯ形成．其机理尚待进一步研究。     

INSULIN INDUCES NITRIC OXIDE PRODUCTION IN BOVINEAORTIC ENDOTHELIAL CELLS

ffeStun6. ObjeCtif Dens cette dtude nons avons ewilue l' effet de l' insuline sur ba Proliferation cellulaire, liberationd' oxide nitrique et l' expression gdrktique de synthase d' oxide nitrique dens la cellule endotheliale aortique bovine. methIn mitogdthe est evalude per la ndthae M7T. In Production de NO dans ie alga en culture est determine per la reactionGness. In technique quantitative RT/PCR est utility pour quantifier ie niveau de sWthase d' oxide nitrique mRNA dens la cellule…     

大鼠局灶性颅脑损伤并弥漫性轴突损伤脑水肿一氧化氮含量的变化

目的探讨局灶性颅脑损伤并弥漫性轴突损伤后一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（NOS）与脑水肿的关系。方法建立大鼠局灶性颅脑损伤并弥漫性轴突损伤模型,按不同时间点处死动物,测定其脑含水量及脑组织中NOS活性和NO代谢产物,并用尼莫地平进行治疗。结果局灶性颅脑损伤并弥漫性轴突损伤后脑含水量随静脉血NO的增加而增加,重创组NOS活性在4h达高峰,8h仍比假手术组高。应用尼莫地平可以有效减少脑含水量,减少一氧化氮的含量和一氧化氮合酶的表达。结论创伤性脑水肿与血NO有密切相关性,组织中NOS则是该过程的可能催化剂。尼莫地平有干预脑水肿形成的作用。     

糖尿病大鼠病程早期视网膜蛋白激酶C对NO通路的影响

目的探讨蛋白激酶C(PKC)和一氧化氮合酶(NOS)在糖尿病早期视网膜功能改变中的作用,观察早期糖尿病大鼠视网膜内PKC对NOS表达及NO含量的影响。方法2周糖尿病大鼠玻璃体腔注射PKC抑制剂后用ELISA法测定PKC活性,用半定量RT-PCR法测定NOS mRNA表达量,间接法测定NO含量。结果糖尿病模型建立2周后视网膜内PKC活性、nNOSmRNA及NO含量均明显高于正常组(P<0·01),i NOS mRNA稍高但差异无统计学意义(P>0·05)。注射PKC抑制剂后12h、24h时nNOS mRNA含量明显降低(P<0·05),24h时NO含量亦降低P<0·01。结论PKC抑制剂可降低糖尿病早期视网膜nNOS的异常高表达。PKC影响nNOS表达可能是视网膜神经细胞功能紊乱和血管通透性增高的机制之一。     

他罗利姆对癫痫持续状态大鼠海马的影响及脑保护作用

目的研究免疫抑制剂他罗利姆（FK506）对癫痫持续状态（SE）大鼠海马组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的影响及其脑保护作用。方法随机将162只Wistar大鼠分为癫痫组、FK506干预组、对照组各54只。采用匹鲁卡品腹腔注射制作SE模型,FK506干预组在注射匹鲁卡品之前24、1?h 2次腹腔注射FK506,对照组注射等体积生理盐水;采用比色法和羟胺法分别检测海马组织中NO、MDA含量、NOS、SOD活性;采用免疫组化法检测海马组织神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的表达;采用HE染色观察神经元形态变化。结果与癫痫组相比,FK506干预组NO、MDA含量、NOS活性明显降低（P均＜0.01）,SOD活性在癫痫发作后12?h以内降低（P＜0.05）,在3?d之后升高（P＜0.01）;海马nNOS的表达降低（P＜0.01）,存活神经元增加。结论FK506可能通过抑制NOS/NO途径发挥抗癫痫和脑保护作用。     

Alteration of Nitric Oxide Synthase in Experimental Spinal Cord Injury in Rats

Alteration of Nitric Oxide Synthase in Experimental Spinal Cord Injury in Rats...