内皮依赖性超极化因子对离体家兔肠系膜动脉张力的影响

目的探讨内皮依赖性超极化因子（EDHF）对血管平滑肌张力的影响。方法采用家兔离体肠系膜动脉（MA）灌流方法，在一氧化氨合酶（NOS）抑制剂左旋硝基精氨酸（L-NNA，300μmol/L）和环氧合酶抑制剂消炎痛（Indo 7μmol/L）存在的条件下，观察乙酰胆碱（Ach）引起的血管内皮依赖性超级化因子对血管张力的影响并分析其作用机制。结果①当L-NNA和Indo存在时，在U46619（30nmol/L）引起血管收缩的基础上，Ach仍可引起家兔MA的内皮依赖性舒张，去除内皮后可消除此舒张作用（P＜0.01）②血管内皮完整时，于L-NNA和Indo存在的情况下，预先用KCa通道阻断剂四乙铵（TEA，1mol/L）可阻断Ach引起的内皮依赖性舒张（P＜0.01）；而预先用KATP通道阻断剂格列苯脲（GBM，3μmol/L）却不能阻断此舒张作用（P＞0.05）。③血管内皮完整时，L-NNA和Indo存在的情况下，细胞色素P450（CytP450）阻断剂克霉唑（CMZ，3μmol/L）可显著抑制Ach引起的内皮依赖性舒张（P＜0.01）。结论EDHF与花生四烯酸的CytP450代谢途径有关，它所介导的动脉舒张可能与KCa通道有关。     

缺氧／复氧对兔肾动脉内皮依赖性舒张功能的影响

目的 探讨缺氧／复氧对肾动脉内皮依赖性一氧化氮(NO)和内皮衍性超极化因子(EDHF)途径舒张功能的影响。方法 采用器官槽法，以兔肾动脉环为研究对象，首先抑制PGI2舒张途径，然后再分别抑制NO和EDHF舒张途径，对给与血管环以缺氧／复氧处理，观察缺氧／复氧分别对NO和EDHF舒张途径的影响。结果 缺氧／复氧使NO途径的内皮依赖性舒张功能减退．而缺氧／复氧对EDHF途径的内皮依赖性舒张功能无变化。结论 缺氧／复氧导致兔肾血管内皮衍性NO途径的舒张损伤．而对EDHF途径的舒张无影响。     

缺氧/复氧对兔肾动脉内皮依赖性舒张功能的影响

目的探讨缺氧/复氧对肾动脉内皮依赖性一氧化氮(NO)和内皮衍性超极化因子(EDHF)途径舒张功能的影响。方法采用器官槽法,以兔肾动脉环为研究对象,首先抑制PGI2舒张途径,然后再分别抑制NO和EDHF舒张途径,对给与血管环以缺氧/复氧处理,观察缺氧/复氧分别对NO和EDHF舒张途径的影响。结果缺氧/复氧使NO途径的内皮依赖性舒张功能减退,而缺氧/复氧对EDHF途径的内皮依赖性舒张功能无变化。结论缺氧/复氧导致兔肾血管内皮衍性NO途径的舒张损伤,而对EDHF途径的舒张无影响。     

维格列汀对大鼠动脉内皮舒张功能的影响及其机制研究

目的：探讨维格列汀对大鼠血管舒张功能的影响及其可能的机制。方法：将雄性SD大鼠分为对照组和维格列汀组[6 mg/（kg·d）],每组10只,连续干预6周。血管张力测定仪检测大鼠胸主动脉和肠系膜动脉的内皮依赖性舒张功能,酶标仪检测一氧化氮（nitric oxide,NO）,Western blot和RT-PCR检测内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）蛋白水平和mRNA水平。结果：重复测量方差分析提示,胸主动脉和肠系膜动脉由乙酰胆碱（acetylcholine,ACh）诱导的内皮依赖性舒张在处理组间有统计学差异（F=25.388,P=0.001;F=15.713,P=0.005）,在不同ACh浓度间有统计学差异（F=664.954,P=0.000;F=440.579,P=0.000）,处理因素与浓度因素有交互作用（F=5.905,P=0.002;F=8.446,P=0.000）,对照组和维格列汀组胸主动脉的最大舒张程度分别为（84.20±1.21）%和（92.18±1.02）%（t=5.167,P=0.000）,肠系膜动脉的最大舒张程度分别为（86.57±2.21）%和（94.24±0.92）%（t=3.202,P=0.010）。动脉对ACh反应的敏感性增强（t=3.883,P=0.001;t=4.459,P=0.001）。与对照组相比,维格列汀组NO的含量升高（t=6.019,P=0.000;t=4.848,P=0.000）。维格列汀上调胸主动脉和肠系膜动脉eNOS蛋白水平（t=6.193,P=0.000;t=4.895,P=0.001）和mRNA水平（t=6.100,P=0.000;t=6.240,P=0.000）。结论：维格列汀可上调大鼠胸主动脉和肠系膜动脉eNOS转录及蛋白表达,增强动脉的舒张功能。     

内皮衍生超级化因子对脑缺血损伤大鼠脑血管的影响

目的 探讨内皮衍生超极化因子( EDHF)对局灶性脑缺血再灌注(I/R)损伤大鼠大脑中动脉(MCA)的血管舒张作用以及对血管平滑肌细胞( VSMC)超级化反应的影响.方法 线栓法制备大鼠局灶性脑缺血( MCAO)再灌注损伤模型,按照Longa 法对实验动物进行神经功能缺陷评分;采用全自动酶标仪检测大鼠脑组织硫化氢( H2 S)含量的变化;取局灶性I/R损伤大鼠 MCA,显微镜下测量 MCA 的血管直径;用微电极记录MCA的VSMC的膜电位;RT-PCR 法测定I/R大鼠 MCA 内皮细胞胱硫醚-γ-裂解酶( CSE ) mRNA 表达.结果 I/R大鼠脑组织中的H2 S含量较正常大鼠明显增加;在离体I/R大鼠MCA,用3 × 10 -5 mol/L的 L-NAME (NO合酶抑制剂)和1 × 10 -5 mol/L的Indo(PGI2 合成酶抑制剂) 预灌30 min后,乙酰胆碱(ACh)(10 -7 ~10 -4.5 mol/L)可显著舒张血管,即 EDHF 介导的舒张反应明显增强;I/R大鼠 MCA 平滑肌细胞膜电位检测实验中,L-NAME 和 In-do 存在的条件下,ACh(10 -7 L~10 -4.5 mol/L )随着浓度增大,产生浓度依赖性的超极化作用,并且与正常大鼠MCA相比,超极化作用有明显的增强;I/R 大鼠 MCA 内皮细胞中CSE mRNA表达上调.结论 EDHF明显增强I/R大鼠MCA的血管舒张反应和平滑肌细胞超极化反应,表明内源性ED-HF( H2 S)对局灶性I/R损伤有保护作用.     

辛伐他汀对冠心病患者血管内皮功能的影响

目的探讨冠心病患者血管内皮依赖性舒张功能及血清NO浓度的变化及辛伐他汀干预对其的影响。方法用高分辩超声技术检测各组对象的肱动脉内皮依赖性舒张功能,并测定血清NO浓度,药物干预8周后复测上述指标。结果与正常对照组比较,冠心病患者肱动脉内皮依赖性舒张功能明显减退(P<0.01),血清NO浓度降低(P<0.01)。辛伐他汀可改善血管内皮依赖性舒张功能([8.12±4.26)%vs(2.64±1.35)%,P<0.01],升高血清NO浓度([68.35±18.34)μmol/Lvs(48.64±15.97)μmol/L,P<0.01],并且血管内皮依赖性舒张功能的改善与血清NO浓度的增加正相关(r=0.827,P<0.01)。结论冠心病患者肱动脉内皮依赖性血管舒张功能明显减退,血清NO浓度降低。辛伐他汀通过增加血清NO浓度改善冠心病患者的血管内皮功能,该作用可能是他汀类调脂药防治冠心病的机制之一。     

衰老对离体大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张反应的影响

目的 研究增龄对离体大鼠主动脉内皮依赖性舒张的影响.方法 成年及老年大鼠各20只,利用组织器官水浴系统,通过乙酰胆碱(Ach)、N-硝基左旋精氨酸,测量离体主动脉环的舒张反应变化(%).结果 1)老年组大鼠主动脉环对10-8～10-4mol/L Ach诱发的内皮依赖性血管舒张反应均较成年组明显减弱,两组之间差异有非常显著性意义(P< 0.01).2)离体大鼠主动脉环经10-4mol/L L-NNA预处理20分钟,阻断一氧化氮合酶(NOS)后,同样剂量的Ach不再诱发上述内皮依赖性舒血管反应.结论 随增龄血管内皮分泌的一氧化氮(NO)逐渐减少,导致血管内皮依赖性舒张减弱;NOS的异常表达对NO 减少起着重要的作用,eNOS随增龄表达减弱,而iNOS 随增龄表达则明显增强.     

金丝桃苷对离体大鼠腹主动脉的舒张作用及其机制研究

目的 研究金丝桃苷对离体大鼠腹主动脉环的舒张作用并探讨其可能的作用机制。方法 在大鼠离体腹主动脉环上,分别观察累积浓度的金丝桃苷 (1×10-6.5～1×10-4mol/L) 对 KCl (30 mmol/L) 和 U46619 (血栓素类似物,1×10-7 mol/L) 预收缩血管环的作用。结果 金丝桃苷能够浓度依赖性舒张由 KC1 和 U46619 预收缩的血管环,最大舒张率分别为 (52.2±7.2)%、(80.7±4.1)%;去除血管内皮后,最大舒张率分别降为 (15.4±1.2)%、(21.6±1.2)%,与内皮完整组比较有显著差异 (P＜0.01)。在 30 mmol/L KCl 和 1×10-7 mol/L U46619 预收缩的内皮完整血管环,用一氧化氮 (NO) 合酶抑制剂 (〖WTBX〗L -NAME,3×10-4 mol/L) 预温育后,金丝桃苷的最大舒张率分别降为 (23.0±3.0)%、(40.3±3.6)%,与未加 〖WTBX〗L -NAME 组比较有显著差异 (〖WTBX〗P ＜0.01);用环氧酶抑制剂吲哚美辛 (1×10-5 mol/L) 预温育对金丝桃苷的舒张血管作用没有明显的影响;在 U46619 预收缩的血管环,合用 〖WTBX〗L -NAME 和吲哚美辛不能完全阻断金丝桃苷引起的血管舒张,最大舒张率为 (36.6±1.9)%,与去内皮组比较差异显著 (P ＜0.01)。结论 金丝桃苷具有内皮依赖性和较弱的非内皮依赖性血管舒张作用,其内皮依赖性血管舒张可能涉及到内皮 NO 和内皮依赖性超极化因子 (endothelium-derived hyperpolarizing factor, EDHF) 的释放。     

水溶性蜂胶对溃疡性结肠炎大鼠肠系膜动脉内皮的保护作用

目的:探究水溶性蜂胶(WSP)对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠系膜动脉血管内皮功能的影响。方法:SD雄性大鼠随机分成4组(n=6),即正常对照组(NC组)、溃疡性结肠炎组(DSS组)、蜂胶低剂量组(L-WSP组)、蜂胶高剂量组(H-WSP组)。测量并记录各组大鼠结肠长度，HE染色观察结肠组织形态学变化。张力测定仪检测离体肠系膜动脉舒张功能。肠系膜血管HE染色并分析血管壁厚度/管腔半径(WT/LR)。检测肠系膜动脉中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性和一氧化氮(NO)含量。结果:与DSS组相比，L-WSP组和H-WSP组大鼠结肠长度增长(P<0.05),结肠组织的结构和形态损伤减轻，肠系膜动脉血管壁变薄，WT/LR下降(P<0.01),肠系膜动脉对乙酰胆碱(ACh)介导的舒张反应减弱(P<0.01),肠系膜动脉eNOS活性和NO含量增加(P<0.01);经左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)孵育30 min后，肠系膜动脉对ACh介导的舒张反应减弱(P<0.05)。结论:WSP能保护UC大鼠肠系膜动脉内皮损伤并改善动脉舒张功能，其机制可能与调节eNOS/NO信号通路...     

葛根素对溶血磷脂酰胆碱损伤血管内皮依赖性舒张功能的影响

目的 探讨葛根素（puerarin）对溶血磷脂酰胆碱（lysophosphatidylcholine，LPC）损伤家兔血管内皮依赖性舒张功能的影响。方法 采用离体血管环张力实验法检测乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应来评价LPC对血管内皮功能的损害和葛根素的保护作用。结果 分别用2．5～10mg／LLPC孵育血管环30min，出现剂量依赖性抑制乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应。用0．25～1g／L葛根素分别孵育血管环15min，再与5mg／LLPC共同孵育30min，明显改善LPC所致的血管舒张功能的损害。结论 葛根素对LPC所致的血管内皮依赖性舒张功能的损伤具有明显的保护作用。     

冠心病患者冠脉循环ox-LDL水平与内皮依赖舒张功能关系的研究

目的 探讨冠心病患者冠脉循环ox-LDL变化与内皮依赖舒张功能的变化及临床意义.方法 临床及选择性冠状动脉造影确定冠心病患者96例,其中急性心肌梗死(AMI)22例,不稳定性心绞痛(UA)29例,稳定性心绞痛(SA)25例,排除冠心病组20例;利用心导管技术采其冠状窦血通过夹心双抗酶联免疫法测定氧化低密度脂蛋白(ox-LDL),利用高分辨率超声测肱动脉反应性充血引起的流量介导血管扩张(FMD)与硝酸甘油介导的血管扩张(NTG).结果 冠心病组患者冠状窦血中ox-LDL水平均明显增高(P＜0.01).AMI组、UA组量较SA明显增高(P＜0.01).AMI组较UA组明显增高(P＜0.05).冠心病组FMD均降低(P＜0.05),AMI、UA两组相比无显著差异(P＞0.05).AMI、UA组与SA相比有显著差异(P＜0.05),而NTG在3组之间无显著差异(P＞0.05).结论 冠心病患者冠脉局部ox-LDL升高,过氧化所致血管内皮功能损伤,内皮依赖舒张功能降低,可能参与其发病过程及临床表现.     

低氧对肺动脉内皮细胞一氧化氮合酶及细胞间黏附因子-1表达的影响

目的通过检测低氧状态血管内皮细胞一氧化氮合酶（eNOs）及细胞间黏附因子（ICAM1）表达的变化．探讨低氧对血管内皮细胞功能的影响。方法采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）及Western blot测定低氧条件下不同时间点大鼠动脉内皮细胞中eNOS、ICAM-1 mRNA及蛋白质的表达变化情况。结果同常氧组相比，低氧1h时eNOS、IcAM-1 mRNA及蛋白表达无变化．而6、12、24h时eNOS、ICAM-1mRNA及蛋白表达明显升高（P〈0.05），但eNOS mRNA与ICAM-1mRNA的表达变化在同一时间点并不一致。结论低氧状态下血管内皮细胞eNOS与ICAM-1表达升高，可能参与了低氧性肺血管疾病的发病机制。     

Cinaciguat对高糖损伤血管内皮细胞功能的影响

目的 糖尿病状态下，一氧化氮(NO)与可溶性鸟苷酸环化酶(soluble guanylatecyclase,sGC)均被氧化，使NO-sGC-环磷酸鸟苷(cGMP)信号通路传导异常，NO-sGC-cGMP信号通路异常是糖尿病血管内皮功能障碍的重要病理基础。可溶性鸟苷酸环化酶激活剂(cinaciguat，CIN)可激活失活的sGC进而起到保护血管内皮细胞功能的作用。本研究通过体外实验制造高糖内皮细胞损伤模型，观察CIN对人脐静脉内皮细胞功能的影响。 方法 培养人脐静脉内皮细胞，并将细胞分为正常对照组、高糖组、CIN干预组，每组6例。高糖组及CIN干预组均加入33.3 mmol/L的葡萄糖制造高糖细胞损伤模型，而CIN组同时加入0.1 μmol/L CIN干预。各组细胞在培养6、24、48 h时，检测上清液中的NO水平及细胞内一氧化氮合酶(NOS)浓度；培养48 h后RT-PCR检测细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达；培养48 h后Western blotting检测细胞间粘附分子-1(ICAM-1)及血管粘附分子-1(VCAM-1)蛋白的表达。 结果 与正常对照组相比，高糖组NO、NOS含量呈现早期升高晚期下降的趋势，而CIN组上述趋势消失；与正常组比较，高糖组内皮细胞的eNOS mRNA表达水平降低(P＜0.05)，iNOS mRNA、ICAM-1与VCAM-1蛋白表达明显升高(P＜0.05)，而CIN组eNOS mRNA表达水平较高糖组明显升高(P＜0.05)，iNOS、ICAM-1与VCAM-1蛋白的表达水平明显降低(P＜0.05)。 结论 CIN可平衡NOS的活性，调节NO的生成及ICAM-1与VCAM-1的表达，改善高糖状态下内皮细胞的功能。      

川崎病(KD)患者血清中抵抗素对人冠状动脉内皮细胞(HCAEC) ET-1及NO/eNOS的作用

 目的  探讨抵抗素与川崎病(Kawasaki disease,KD)患儿冠状动脉内皮细胞ET-1及NO/eNOS的关系。方法  收集川崎病患儿和健康儿童血清,加入人冠状动脉内皮细胞培养体系,分为4组:KD患儿血清组(KD组)、抵抗素组(Re组)、正常人血清组(N组)、KD患儿血清加抵抗素抗体组(KD+antiRe组)。干预24 h后,硝酸酶还原法测定细胞上清液中NO水平,real-time PCR测定细胞ET-1及eNOS的mRNA表达,ELISA检测细胞上清抵抗素及eNOS蛋白的表达水平。结果  各组抵抗素水平:与N组比较,KD组与Re组抵抗素水平明显增高(P<0.05),KD+antiRe组抵抗素水平明显下降(P<0.05),KD组较Re组降低(P<0.05)。各组NO水平:与N组比较,KD组和KD+antiRe组NO水平明显升高(P<0.05),Re组下降(P<0.05);KD+antiRe组较KD组NO水平升高更明显(P<0.05)。各组ET-1mRNA表达水平:与N组及KD+antiRe组比较,KD组、Re组的ET-1 mRNA表达水平升高(P<0.05),N组与KD+antiRe组间差异无统计学意义,KD组与Re组间差异无统计学意义。各组eNOS mRNA及蛋白表达水平:KD组、Re组与KD+antiRe组较N组均降低(P<0.05),KD组较Re组及KD+antiRe组降低(P<0.05),Re组较KD+antiRe组降低(P<0.05)。结论  抵抗素参与了KD患儿冠状动脉内皮细胞损伤,其机制可能与调节ET-1及NO/eNOS表达有关。     

Influence of L-arginine on the Expression of eNOS and COX2 in Experimental Pulmonary Thromboembolism

The influence of L-arginine on endothelial nitric oxide synthase (eNOS) and cyclooxy-genase 2 (COX2) was observed in experimental pulmonary thromboembolism and the action mechanism on pulmonary thromboembolism was explored. Wistar rats were randomly divided into control group, model group and treatment group. Pulmonary thromboembolism models were established by auto-blood back transfusion, and L-Arg 100 mg/kg was intraperitoneally injected after successful model preparation. The animals were sacrificed at 3 h, 1 day, 3 days and 7 days after embolism. Plasma NO, TXB2 and 6-Keto-PGF1αwere detected. The expression of eNOS and COX2 protein and mRNA in pulmonary tissues was detected by immunohistochemistry and RT-PCR respectively. The results showed that pulmonary thrombosis could be seen post pulmonary embolism and inflammatory reaction was significant. Plasma NO was decreased (P<0.01), and the levels of TXB2, 6-Keto-PGF1αand T/P ratio were all elevated. The expression of eNOS protein and mRNA in the pulmonary tissue was down-regulated (P<0.05), while that of COX2 protein and mRNA was upregu-lated (P<0.01). In treatment group, the level of NO was increased, the levels of TXB2 and T/P ratio were decreased, but the level of 6-Keto-PGF1αwas increased. The expression of eNOS protein and mRNA in pulmonary tissue was upregulated (P<0.05), while that of COX2 protein and mRNA was down-regulated (P<0.05). In conclusion, L-arginine can educe the role of pulmonary tissue protection through up-regulating the expression of intra-pulmonary NOS and down -regulating COX2 in pulmonary thromboembolism.     

2型糖尿病患者肱动脉内皮依赖性血管舒张功能变化的研究

目的：探讨2型糖尿病患者内皮功能的变化。方法：选择50例2型糖尿病患者，和年龄、性别匹配的健康个体30例。采用高分辩血管外超声法检测肱动脉血流介导的内皮依赖性血管舒张功能和硝酸甘油(GNT)介导的内皮非依赖性血管舒张功能。结果：2型 DM 组血流介导的血管舒张功能为3.22%，明显低于对照组的4.90%(P＜0.05)。基础血管内径、基础血流、GNT 介导的血管舒张功能在2组间无明显差异(P＞0.05)。结论：2型糖尿病患者内皮依赖性血管舒张功能降低。     

波动性高糖对人脐静脉内皮细胞中NO 合成的影响及作用机制

目的：探索波动性与持续性高糖对人脐静脉内皮细胞合成血管舒张因子一氧化氮（NO）的影响及其作用机制。方法：以体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）为研究对象,分别测定波动性高浓度葡萄糖(5.5 或20 mmol/L) 与持续性高浓度葡萄糖(20 mmol/L)环境下NO浓度,RT-PCR及Western印迹方法检测磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B（PKB/AKT）、内皮型一氧化氮合酶(eNOS）mRNA及蛋白表达水平。结果：波动性高糖组NO均明显低于持续高糖组和正常组（P<0.05）;波动组,持续高血糖组的PI3K,PKB,eNOS mRNA及蛋白表达水平均较正常组下调（P<0.01）,而波动组又低于持续组（P<0.05）。结论：波动性高血糖较持续性高血糖可能对血管内皮细胞具有更强的损伤效应,并可能通过影响信号通路PI3K/PKB/eNOS导致NO合成减少。     

MiR-21对香烟烟雾提取物诱导的巨噬细胞自噬、增殖及凋亡的影响

目的：探讨微小RNA(micro RNA,miR)-21对香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导的巨噬细胞 自噬、增殖和凋亡的影响。方法：实验分为对照组、CSE干预巨噬细胞组(CSE组)、miR-21抑制剂+CSE干预巨噬细胞 组(miR-21抑制剂+CSE组)。采用实时聚合酶链反应(real-time PCR)检测3组巨噬细胞miR-21表达水平,Western印迹、 MTT试验及流式细胞术检测miR-21抑制剂对巨噬细胞自噬、增殖及凋亡的影响。结果：与对照组相比,CSE组miR- 21表达和自噬水平均增加,差异有统计学意义(均P<0.05)。MiR-21抑制剂+CSE组miR-21的表达量较CSE组明显降低 (P<0.05)。Western印迹显示：与正常组比较,CSE组的微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3 alpha,LC3)和自噬相关蛋白7(autophagy related 7,ATG7)表达增加,而miR-21抑制剂可减少LC3与ATG7的表达。MTT 试验显示：与对照组比较,CSE组的巨噬细胞增殖减少,而miR-21抑制物+CSE组2,3,4 d的增殖率分别为CSE组的 1.41,1.54和1.70倍(均P<0.05)。流式细胞术显示：对照组凋亡率为(2.57±1.35)%,CSE组为(18.70±2.16)%,miR-21抑制 剂+CSE组为(6.28±1.08)%,3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论：CSE可通过影响巨噬细胞miR-21的表达及自噬 水平而使巨噬细胞的自噬和凋亡增加,增殖减少。