TSC1基因对调节性T细胞发育分化的免疫调控作用

【目的】 本研究利用TSC1的T细胞特异缺失小鼠探讨TSC1对T细胞尤其是调节性T细胞(Treg)发育的免疫调控效应。 【方法】 主要应用T细胞特异性TSC1基因敲除小鼠(Lck-cre; TSC1loxp/loxp)及细胞分子免疫学技术, 阐明TSC1基因对CD4⁺ Treg发育分化及其免疫功能的重要调控作用和规律。 【结果】 (1)TSC1基因缺失小鼠,其胸腺CD4⁺CD8^-T (CD4SP),CD8⁺CD4^-T(CD8SP),CD4^-CD8^-T(DN)和CD4⁺CD8⁺T(DP)细胞百分率无显著差异;(2)TSC1基因缺失小鼠CD4⁺Foxp3⁺Tregs百分率和细胞绝对数均明显增加;(3)小鼠外周免疫器官(脾脏)的CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞百分率和绝对数均无显著差异;(4)小鼠胸腺中CD4⁺CD25⁺Foxp3^-T细胞百分率和绝对数有下降的趋势;(5)小鼠胸腺中Treg其他亚型如CTLA-4以及GITR型均有所增加。 【结论】 TSC1缺失可以影响nTreg的发育和分化,而对iTreg发育和分化无明显影响,并且TSC1对于nTreg的调节可能是通过调控其前体发育分化而实现的。     

胃癌病人外周血及肿瘤组织调节性T 细胞的表达水平及临床意义

目的: 探讨胃癌病人肿瘤组织及外周血中调节性T 细胞( Regulatory cell，Trey) 表达水平及其临床意
义。方法: 自2015－04～ 2016－04 连续性纳入于我院就诊胃癌病人68 例为研究组，同期纳入我院体检中心70 例
健康人员为对照组。检测并比较两组外周血CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 及TGF－β1 表达水平; 分析胃癌肿瘤组
织CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 表达水平与血清CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 及TGF－β1 表达水平之间相关性; 以及
肿瘤组织CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 与胃癌病人病情严重度之间的相关性。结果: 研究组外周血CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 比例( t = 16．254，P = 0．000) 及TGF－β1( t = 5．841，P = 0．000) 表达水平均显著性高于对照组。胃癌病
人肿瘤组织CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 表达水平与外周血CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs( r = 0．793，P= 0．000) 及TGF
－β1( r = 0．690，P= 0．000) 表达水平呈明显正相关。胃癌病人血清及肿瘤微环境CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 表达
水平与病人TNM 分期，分化程度及有无淋巴结转移显著性相关( P＜0．05) 。结论: 肿瘤组织CD4⁺、CD25⁺、Foxp3
Tregs 表达水平与胃癌病人疾病严重程度息息相关，可作为胃癌诊断、治疗和预后评估的重要指标。     

PD-1在Graves病CD4+、CD8+T细胞中表达水平及作用机制

目的 探讨PD-1在Graves病CD4⁺、CD8⁺T细胞中表达水平,对甲状腺滤泡上皮细胞增殖及炎性细胞因子作用。方法 采用ELISA法检测GD患者和健康人血清炎性细胞因子水平。流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMC)中CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞的百分率和T淋巴细胞中PD-1的表达。采用CCK-8、流式细胞仪和ELISA法检测CD4⁺PD-1⁺和CD8⁺PD-1⁺T细胞与甲状腺滤泡上皮细胞共培养后的存活率和炎性细胞因子的变化。结果 GD患者炎性细胞因子干扰素-γ、IL-4、IL-17和转化生长因子-β水平均升高(P<0.05)。GD患者CD4⁺T细胞百分率升高,CD8⁺T细胞百分率降低,CD4⁺和CD8⁺细胞PD-1表达均升高。在与CD4⁺PD-1⁺和CD8⁺PD-1⁺T细胞共培养的甲状腺滤泡上皮细胞中,细胞活力及上述炎性细胞因子最高。结论 GD患者CD4⁺、CD8⁺细胞中PD-1表达升高,可促进甲状腺滤泡上皮细胞活性,炎性细胞因子水平升高,可能加速GD的发生和发展。     

幼儿贫血患者的调节T细胞表达及临床预后相关性研究

[目的]探讨调节性T细胞在幼儿贫血中的表达及临床预后价值。[方法]选择2016年3月-2017年3月天津市儿童医院治疗的贫血患儿80例作为研究对象,设为观察组;根据贫血严重程度分为轻度组、中度组与重度组;所有患儿均给予铁剂、维生素及饮食强化治疗。根据治疗预后分为预后良好组与预后差组;选择同期健康体检者56例,设为对照组。采用流式细胞仪完成各组调节性T细胞CD4⁺、CD4⁺CD125⁺、CD4⁺CD125⁺CD127^low水平;采用SPSS Pearson相关性分析软件对调节性T细胞与患儿治疗预后进行相关性分析。[结果]观察组调节性T细胞CD4⁺、CD4⁺CD125⁺、CD4⁺CD125⁺CD127^low百分比,均低于对照组（P<0.05）;观察组贫血患儿中预后良好组CD4⁺、CD4⁺CD125⁺、CD4⁺CD125⁺CD127^low百分比高于预后差组（P<0.05）。[结论]调节性T细胞在幼儿贫血中呈低表达,且与患儿临床预后呈负相关性,加强调节性T细胞测定能评估预后,指导临床治疗。     

Breg Tfh Tfr细胞在免疫性血小板减少症患者中的表达及意义

目的 探讨调节性B细胞（Breg）、滤泡辅助性T细胞（Tfh）、滤泡调节性T细胞（Tfr）在免疫性血小板减少症（ITP）中的作用和临床意义。方法 选择2017年10月至2019年10月安徽医科大学第一附属医院收治的初次诊断的30例ITP患者为ITP组,同期选择健康对照组25例,应用流式细胞术（FCM）检测外周血Breg、Tfh、Tfr细胞的表达水平并统计分析。结果 ITP组患者外周血CD19⁺B细胞中Breg[（1.93±1.21）%]、IL-10⁺Breg[（28.64±10.31）%]水平低于健康对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;外周血CD4⁺T细胞中Tfh细胞比例高于健康对照组[（12.18±5.26）% vs（6.21±1.78）%],Tfr细胞比例[（1.64±1.01）%]、Tfr/Tfh比值（0.21±0.13）低于健康对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 Breg细胞降低,IL-10分泌减少,Tfr/Tfh比值失衡,在ITP发病过程中可能起到重要的作用。     

使用链脲佐菌素造模对1型糖尿病大鼠调节性T细胞的影响

目的 研究使用链脲佐菌素造模1型糖尿病大鼠发病机制与调节性T细胞（regulatory T cells,Tregs）数量和功能变化的关系.方法 使用链脲佐菌素（streptozocin,STZ）对健康SD大鼠造模,分别选取造模成功大鼠和健康大鼠各12只,各项体征均符合成模标准后,分别选取模型和健康大鼠各6只（雌雄各半）解剖,取脾脏、胸腺和外周血使用流式细胞仪检测CD4＋CD25＋ Foxp3＋ （Tregs）水平状况,剩余大鼠解剖取脾脏分选CD4＋ CD25＋细胞后检测其免疫抑制功能.结果 两组大鼠脾脏、胸腺和外周血CD4＋ CD25＋ Foxp3＋水平比较无统计学差异（P＞0.05）,自体和异体大鼠CD4＋ CD25-细胞增殖率比较无统计学差异（P＞0.05）.结论 使用链脲佐菌素造模的1型糖尿病大鼠调节性T细胞数量和功能无显著变化,其发病机制与Tregs无直接关系.     

支气管哮喘患者外周血CD3+T细胞趋化因子受体表达的研究

目的 探讨支气管哮喘患者外周血CD3⁺T细胞趋化因子受体表达情况。方法 选取2017年1月—2017年12月山东省立第三医院就诊的40例支气管哮喘患者及同期该院体检的27例健康志愿者，采用流式细胞仪检测所有受试者外周血CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上趋化因子受体CXCR1、CXCR2、CXCR3、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR8的表达。比较轻、中度支气管哮喘患者、重度支气管哮喘患者及健康志愿者，以及不同剂量糖皮质激素使用者趋化因子受体表达的差异。结果 轻、中度支气管哮喘组、重度支气管哮喘组、对照组受试者CD3⁺CD8⁺T细胞上CXCR1、CCR7阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8⁺T细胞上CXCR1阳性表达率低于轻、中度支气管哮喘组和对照组（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8⁺T细胞上CCR7阳性表达率低于对照组（P <0.05）。轻、中度支气管哮喘组、重度支气管哮喘组、对照组受试者CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1、CXCR2阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1、CXCR2阳性表达率低于轻、中度支气管哮喘组和对照组（P <0.05）。3组吸入不同剂量糖皮质激素患者CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1的阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。每天吸入>800 μg/g布地奈德组的患者CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1阳性表达率低于每天吸入< 400 μg/g布地奈德组的患者（P <0.05）。结论 重度支气管哮喘组患者外周血CD3⁺T细胞部分趋化因子表达减少，轻、中度哮喘患者Th1和Th2相关的趋化因子受体参与免疫应答，而重度支气管哮喘患者Th1/Th2应答下降。     

乳腺增生症超声血流与T细胞亚群的相关性

目的 探讨乳腺增生症彩色多普勒超声血流表现与外周血T细胞亚群的相关性。方法 检测83例乳腺增生症患者的超声图像,观察病变区的彩色多普勒血流显像（color doppler flow imaging,CDFI）,测量其最高血流速度Vmax和阻力指数（RI）,应用流式细胞技术检测外周血中T细胞亚群,分别分析超声血流表现与T细胞亚群变化的相关性。结果 乳腺增生症患者有T细胞亚群失调,CD3⁺CD8⁺下降,CD4⁺/CD8⁺上升,CD3⁺CD8⁺与Vmax呈负相关（r=-0.25,P<0.05）;CD3⁺CD8⁺与RI呈负相关（r=-0.547,P<0.01）;CD4⁺/CD8⁺与Vmax呈正相关（r=0.373,P<0.01）;CD4⁺/CD8⁺与RI呈正相关（r=0.464,P<0.01）。结论 对于乳腺增生症患者,超声检测血流,同时检测外周血T细胞亚群的变化,有助于病情的判断。     

特发性血小板减少性紫瘢患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞的变化及临床意义

 Objective To study the changes and clinical significance of lymphocyte subsets and regulatory T cells in peripheral blood of patients with idiopathic thrombocytopenic purpura （PITP）. Methods Peripheral blood lymphocyte subsets and regulatory T cells of 40 ITP patients and 40 normal controls were measured with flow cytometry. Results Compared with the normal group,the percentage of CD3+ T lymphocyte,CD4+T lymphocyte and CD16+ /56+ NK cell and ratio of CD4+ /CD8+ decreased markedly in ITP group （P < 0.01）,while the percentage of CD8+T lymphocyte increased slightly（P > 0.05）and CD19+B lymphocyte increased significantly（P < 0.01）. In ITP patients,the proportion of CD4+ CD25+ T cells in CD4+T cells was higher than that of the control group （P < 0.05）and the proportion of CD4+CD25high T cells was slightly higher（P > 0.05）,while the proportion of CD4+ CD25+ Foxp3+ regulatory T cells was lower（P < 0.05）. Con-clusion Cellular immune function in patients with ITP is obviously abnormal and the decreased proportion of CD4+CD25+ Foxp3+ regulatory T cells may be related to the immune pathogenesis of ITP. Detection of lymphocyte subsets and regulatory T cells is of some clinical value in evaluation of therapeutic effect and prognosis of ITP.     

老年2型糖尿病患者血清维生素D与T细胞亚群水平及胰岛素抵抗的关系

目的 探讨老年2型糖尿病（T2DM）血清维生素D（VitD）与T细胞亚群水平及胰岛素抵抗的关系。方法 根据VitD水平,将2013年11月至2018年7月中国科学技术大学附属第一医院老年医学科收治的128例T2DM患者根据VitD水平分为正常组（29例）、不足组（40例）、缺乏组（28例）与严重缺乏组（31例）。比较T细胞亚群水平,分析VitD与T细胞亚群水平及胰岛素抵抗的关系。结果 严重缺乏组HOMA-IR、CD3⁺T、CD8⁺T细胞水平均高于缺乏组、不足组和正常组,差异均有统计学意义（P<0.05）;缺乏组HOMA-IR、CD3⁺T、CD8⁺T细胞水平均高于不足组、正常组,差异均有统计学意义（P<0.05）;正常组HOMA-IR、CD3⁺T、CD8⁺T细胞水平最低,差异均有统计学意义（P<0.05）。lgHOMA-IR、CD3⁺T、CD8⁺T细胞水平与VitD呈负相关（P<0.05）。HOMA-IR的多元线性回归分析的回归方程为：Y_lgHOMA-IR=0.480X_CD8+T+0.605X_BMI-27.875（R²=15.103,P=0.006）。结论 老年T2DM血清VitD影响T细胞亚群水平导致胰岛素抵抗加重。     

调节性T细胞研究进展

调节性T细胞(regulatory T cell,Treg细胞)具有免疫抑制作用,在乙肝慢性化的形成中具有重要意义。Treg细胞能够抑制CD4+和CD8+T细胞的活化和增殖,其数量和功能的改变可能与HBV的持续感染相关。本文对Treg细胞的研究进展等进行综述     

CD4+CD25+Treg细胞调节T细胞的作用机制分析

目的通过检测Treg细胞表达介导抑制性共刺激分子CTLA4和分泌抑制性细胞因子,并设置Treg细胞与效应性T细胞共培养和分隔培养实验模型,分析Treg细胞对效应性T细胞形成抑制作用的可能机制及各机制的主次要关系.方法对比分析Treg细胞与效应性T细胞膜分子CTLA4、CD28表达和细胞因子IL-10、TGF-β1分泌水平;以TransWell Millicell-PCF分隔培养槽分隔培养Treg细胞与不同淋巴细胞组成的反应体系,采用向共培养及分隔培养体系加入与不加入IL-10、TGF-β1抗体的阻断方法,检测Treg细胞对不同组混合淋巴细胞反应的抑制效率.结果 Treg细胞分泌IL-10和TGF-β1的浓度水平明显高于效应性T细胞,Treg细胞培养上清中IL-10和TGF-β1水平分别达到(380±36.3) pg/ml和(790±56.8) pg/ml,Treg细胞分泌IL-10和TGF-β1的浓度水平与效应性T细胞比较,均有显著性差异(P<0.01).共刺激分子CTLA4、CD28在Treg细胞和效应性T细胞膜表面的表达水平存在明显差异,Treg细胞以表达CTLA4为主.Treg细胞对共培养体系混合淋巴细胞反应的抑制效率明显高于分隔培养,通过分泌IL-10对效应性T细胞的抑制作用亦明显强于通过TGF-β1.结论细胞接触机制是Treg细胞抑制效应性T细胞的主要作用机制,而细胞因子机制中,以通过分泌IL-10的方式对效应性T细胞的抑制作用更明显.     

髓系抑制性细胞和调节性T细胞在小鼠实验性结肠炎中的作用

目的探讨髓系抑制性细胞（MDSC）和调节性T 细胞（Treg 细胞）在小鼠溃疡性结肠炎发生、发展过程中的作用。方法使用5%右旋葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液复制小鼠溃疡性结肠炎模型,每日观察小鼠体重和大便状况。DSS 处理3 和7 d 后处死小鼠,苏木精- 伊红染色法观察病理组织学变化,流式细胞仪检测脾脏和肠系膜淋巴结中MDSC 和Treg 细胞的表达。结果模型组小鼠于造模第4 天体重开始下降,有腹泻和血便,HE染色结果显示小鼠结肠出现黏膜损伤及炎症表现。与对照组和造模3 d组比较,造模7 d 组肠系膜淋巴结中Treg 细胞比例增加,而MDSC 比例降低;进一步观察MDSC 亚群变化发现,粒细胞型MDSC 在造模7 d组中比例下降,而单核细胞型MDSC则无改变。无论Treg细胞还是MDSC,脾脏中的水平3组比较差异无统计学意义。结论急性溃疡性结肠炎可导致MDSC降低和Treg细胞增高,可能与疾病的发生发展有关。     

Changes of Regulatory T Cells in Graves＇ Disease

The immune mechanism of Graves＇ diseases （GD） and the roles of regulator T cells were investigated. In 32 patients with GD （GD group） and 20 healthy volunteers （control group）, flow cytometry was used to detect the proportion of CD4^＋CD25^＋ cells, MACS to isolate CD4^＋ CD25^＋ cells, RT-PCR to assay the expression of FOXP3, and ELISA to test the leyel of IL-10, respectively. It was found that there was no significant change in the proportion of CD4^＋CD25^＋ T cells between GD group and control group （P〉0.05）, while secretion of IL-10 and expression of FOXP3 in GD group were lower than control group （P〈0.01 and P〈0.05, respectively）. In conclusion, though the proportion of regulatory T cells of peripheral blood lymphocytes in the patients with GD, the functions of them were significantly weakened, which might be a pathogenic factor in GD.     

深度血液稀释对大鼠调节性T细胞和组织代谢的影响

目的 探讨深度血液稀释对大鼠调节性T细胞(Treg)及组织代谢的影响.方法 健康雄性SD大鼠,体重350～400 g,戊巴比妥腹腔注射麻醉后,解剖颈总动脉连接L-420E动物测压系统监测血压和心率,并用于放血和进行血气分析;解剖股静脉后留置24G套管针,备采血和输液用;输液用微量注射泵泵入,先输羟乙基淀粉,后输携氧液,羟乙基淀粉与携氧液之比为1:2.当红细胞压积值达目标值(<20%)时,静脉输液停止.分别于稀释前和稀释后即刻取静脉41 mL置于EDTA-K2抗凝管中送流式细胞仪检测CD4和CD25.稀释结束后24 h处死动物,取心、肺、肝、肾组织制片,光镜下进行病理学观察.结果 3只大鼠被剔除.17只大鼠红细胞压积值达目标值17.41%±1.28%,且全部存活,输液量(32.88±1.65)mL,动物放血量(10.00±2.00)mL,血液稀释所用时间(60.00±10.00)min.血液稀释前后Na 、K 、Ca2 浓度及pH、CO2分压、心率、血压变化无统计学意义,血液稀释后CD 4CD 25、氧分压高于稀释前(P<0.01),心、肺、肝、肾等组织无缺血、缺氧及水肿改变.结论 应用携氧液行深度血液稀释,可使大鼠外周血中Treg细胞及血氧分压明显升高,血流动力学稳定,可改善组织氧供给.     

调节性T 细胞与肝癌的研究进展

调节性T细胞(regulatory T lymphocytes,Treg)是一类具有独特免疫调节功能的T细胞亚群,可通过多种方式 抑制肿瘤免疫,在肿瘤的发生、发展过程中发挥着极为重要的作用,越来越多的证据表明Treg通过多种机制参与了肝 癌特别是肝细胞肝癌的形成和发展,对Treg参与肝癌进展机制的研究从免疫学角度为肝癌治疗提供了新的思路。     

CD4+CD25+调节性T细胞在胃癌患者的表达及其临床意义

目的研究胃癌患者肿瘤组织、淋巴结及外周血中CD4 、CD25 调节性T细胞(T regulatory cells,Treg)的表达情况与胃癌临床病理的关系并分析其意义.方法胃癌患者肿瘤组织、淋巴结、外周血及对照组中Treg表达情况分别以冰冻切片荧光抗体染色、流式细胞仪进行检测,结合胃癌患者临床病理情况分析.结果健康成人对照外周血Treg表达率为(4.1±5.7)%,胃癌患者外周血Treg表达显著增高(16.8±7.9)%.胃癌组织Treg表达为(6.5±7.2)%,胃癌周围淋巴结Treg比例为(8.4±7.2)%,均较对照组显著增高.胃癌外周血和淋巴结Treg表达与淋巴结转移率和TNM分期有着负相关性,淋巴结转移阳性和TNM分期越晚,Treg表达率越高.结论Treg在胃癌患者的瘤组织、淋巴结及外周血中表达较对照组显著增高,并与临床病理存在显著相关性.     

调节性T细胞在炎症性肠病中的研究进展

调节性T细胞(Treg)是一类具有免疫调节功能的T细胞亚群,可通过直接接触和细胞因子依赖等方式下调机体免疫反应,维持自身免疫耐受。近年来,Treg细胞在炎症性肠病中的作用越来越受到关注,本文总结并讨论了CD4 CD25 Treg细胞在炎症性肠病免疫方面的研究进展。     

Detection of lymphocyte subsets and regulatory T cells in peripheral blood of patients with acute leukemia and its clinical significance

Objective To study the changes of lymphocyte subsets and regulatory T cells in peripheral blood of patients with acute leukemia (AL) and its clinical significance.Methods The different levels of periph...     

寻常型天疱疮患者外周血调节性T淋巴细胞数量及Foxp3基因表达

目的研究寻常型天疱疮(PV)患者外周血调节性T淋巴细胞(Treg),即CD4 CD25 Foxp3 T细胞的数量及其Foxp3mRNA的表达水平,探讨其在PV发病机制中的作用。方法收集15例PV患者(PV组)和15名健康人(对照组)外周抗凝静脉血,分离外周血单个核细胞。分别用FITC标记抗CD4单抗,APC标记抗CD25单抗,PE标记抗Foxp3单抗,流式细胞仪检测分析PV患者外周血Treg在CD4 T细胞中的百分率及CD4 T细胞在淋巴细胞中的百分率;荧光定量PCR检测外周血单个核细胞Foxp3 mRNA表达情况。结果PV组外周血Treg在CD4 T细胞中百分率为(6.99±1.86)%,CD4 T细胞在淋巴细胞中的百分率为(32.78±8.33)%,对照组分别为(7.95±1.68)%和(33.45±7.32)%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);荧光定量PCR检测结果显示,PV组与对照组Foxp3 mRNA相对表达量分别为8.80±5.53和8.47±5.46,两组比较无显著差异(P>0.05)。结论调节性T细胞可能不直接参与PV的发生。