特发性血小板减少性紫瘢患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞的变化及临床意义

 Objective To study the changes and clinical significance of lymphocyte subsets and regulatory T cells in peripheral blood of patients with idiopathic thrombocytopenic purpura （PITP）. Methods Peripheral blood lymphocyte subsets and regulatory T cells of 40 ITP patients and 40 normal controls were measured with flow cytometry. Results Compared with the normal group,the percentage of CD3+ T lymphocyte,CD4+T lymphocyte and CD16+ /56+ NK cell and ratio of CD4+ /CD8+ decreased markedly in ITP group （P < 0.01）,while the percentage of CD8+T lymphocyte increased slightly（P > 0.05）and CD19+B lymphocyte increased significantly（P < 0.01）. In ITP patients,the proportion of CD4+ CD25+ T cells in CD4+T cells was higher than that of the control group （P < 0.05）and the proportion of CD4+CD25high T cells was slightly higher（P > 0.05）,while the proportion of CD4+ CD25+ Foxp3+ regulatory T cells was lower（P < 0.05）. Con-clusion Cellular immune function in patients with ITP is obviously abnormal and the decreased proportion of CD4+CD25+ Foxp3+ regulatory T cells may be related to the immune pathogenesis of ITP. Detection of lymphocyte subsets and regulatory T cells is of some clinical value in evaluation of therapeutic effect and prognosis of ITP.     

核磷酸蛋白突变与血液肿瘤

核磷酸蛋白(Nucleophosmin,NPM)是位于核仁颗粒区的一种在细胞中广泛表达的多功能蛋白质.NPM基因异常最初被发现在急性髓系白血病(AML)、淋巴瘤及骨髓增生异常综合征(MDS)患者中,参与染色体易位而形成融合基因,如NPM-RARα,NPM-ALK,NPM-MLF1[1-3].最近研究发现,大约三分之一的原发性AML患者中存在NPM基因突变,少数MDS患者中也发现有野生型NPM(wild-NPM)的表达缺失.     

阻断TrkB-BDNF信号传导通路对神经母细胞瘤细胞生长及凋亡的影响

目的：脑源性神经生长因子(BDNF)和其酪氨酸激酶受体B（TrkB）与神经母细胞瘤(NB) 细胞的化疗耐药及恶性预后密切相关。该研究探讨阻断TrkB-BDNF信号传导通路后，NB细胞对化疗药物敏感性的变化。方法：常规培养SH-SY5Y NB细胞，用nM浓度全反式维甲酸（ATRA）诱导TrkB高表达，加入BDNF、化疗药顺铂（CDDP）和特异性酪氨酸酶抑制剂K252a处理。MTT实验方法检测应用K252a前后细胞的存活率的变化；同时应用Western-blot方法检测应用K252a前后TrkB的磷酸化水平的变化；流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡率；透射电镜（TEM）观察凋亡细胞的形态与结构。结果：ATRA+BDNF+CDDP组细胞的存活率及凋亡率与对照组相比，差异无显著性（P>0.05）。而经K252a处理后，细胞对顺铂的敏感性增加，细胞的存活率明显降低，凋亡率明显升高，差异有显著意义。Western-blot分析显示K252a能够阻断TrkB的磷酸化。结论：阻断TrkB-BDNF信号传导通路可提高NB的化疗敏感性，逆转耐药。     

成人急性双表型白血病的临床和生物学特征研究

目的：分析成人急性双表型白血病（BAL）的临床和生物学特征.方法：采用流式细胞术检测22例成人BAL患者治疗前骨髓细胞的免疫表型,染色体R显带技术对其中的16例进行核型分析.结果：在同期急性白血病496例患者中BAL发生率为4.4%（22/496）,16例（72.7%）为髓系和B系抗原共表达,5例（22.7%）为T系和髓系 抗原共表达,T系、B系和髓系均表达者1例 （4.5%）.BAL患者CD34阳性率为86.4%,高于同期ALL（60.3%）和AML（62.9%）（P＜0.05）.BAL患者中位年龄大于ALL患者（P＜0.05）.BAL组肝、脾、淋巴结肿大例数明显高于AML组（P＜0.01）.BAL组异常核型占56.3%,Ph染色体阳性率（25%）明显高于AML组（0%）（P＜0.01）.结论：成人BAL发病率低,以髓系和B淋巴系抗原共表达为主.BAL患者发病中位年龄高,高表达CD34,Ph染色体阳性者多见,肝、脾、淋巴结浸润发生率高.     

IFNγ联合TRAIL诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的研究

目的探讨IENγ（γ干扰素）对TRAIL（肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体）诱导神经母细胞瘤细胞株SMS-KCNR（KCNR）细胞凋亡的影响及其发生机制。方法应用RT-PCR方法检测IFNγ作用前后KCNR细胞Caspase8的表达；应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法及流式细胞仪（FCM）检测IFNγ、TRAIL、IFNγ＋TRAIL及IFNγ＋Caspase8抑制剂（zIETD-FMK）＋TRAIL对KCNR细胞生长及凋亡的影响；应用比色法测定Caspase8相对活性。结果KCNR细胞不表达Caspase8，IFNγ作用48h后的KCNR细胞Caspase8表达明显增加；KCNR细胞对TRAIL不敏感，IFNγ诱导表达Caspase8的KCNR细胞对TRAIL敏感；IFNγ＋TRAIL组Caspase8相对活性明显高于TRAIL组及抑制剂组；zIETD-FMK能阻断Caspase8的活化而抑制TRAIL对KCNR细胞的诱导凋亡作用。结论IFNγ通过诱导Caspase8表达而逆转KCNR细胞对TRAIL诱导凋亡的耐受。     

5氮杂胞苷诱导NB细胞Caspase 8表达及对TRAIL敏感性的研究

目的探讨5氮杂胞苷(5-Azacytidine)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞株SH-SY5Y凋亡的影响及其发生机制.方法应用RT-PCR方法检测5氮杂胞苷作用前后SY5Y细胞Caspase 8的表达;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪(FCM)检测TRAIL、5氮杂胞苷+TRAIL、5氮杂胞苷+Caspase 8抑制剂+TRAIL对SY5Y细胞生长及凋亡的影响.结果SY5Y细胞不表达Caspase 8,5氮杂胞苷作用1、3和5d的SY5Y细胞Caspase 8表达逐渐增加;SY5Y细胞对TRAIL不敏感,经5氮杂胞苷诱导表达Caspase 8的 SY5Y 细胞对TRAIL敏感,并呈现一定的时间和剂量依赖性.联合用药组细胞凋亡率分别为(28.6±4.0)%、(38.5±4.2)%和(42.3±6.2)%,与单独用TRAIL组[(9.5±2.0)%、(10.7±1.8)%和(11.2±1.5)%]比较,差异有统计学意义,F值分别为41.131、45.014和49.405,P值均为0.000;Caspase 8抑制剂组细胞凋亡率分别为(11.8±2.0)%、(13.5±2.9)%和(15.1±3.4)%,与相应浓度的5氮杂胞苷+TRAIL组相比,细胞凋亡率明显降低,F值分别为41.131、45.014和49.405,P值均为0.000,说明Caspase 8抑制剂可明显降低TRAIL对表达Caspase 8的SY5Y细胞的杀伤作用.结论5氮杂胞苷能增强SY5Y细胞对TRAIL的敏感性,其发生机制可能与Caspase 8表达上调有关.     

IFNγ、TRAIL及化疗药联合诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的研究

目的探讨γ-干扰素(Interferon,IFNγ)、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosisfactorre-latedapoptosisinducingligand,TRAIL)及化疗药联合诱导神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞株SH-SY5Y(SY5Y)凋亡的作用及其发生机制。方法应用Western-blot方法检测IFNγ作用前后SY5Y细胞Caspase8蛋白的表达;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪(FCM)检测IFNγ、TRAIL、IFNγ TRAIL、IFNγ Caspase8抑制剂(zIETD-FMK) TRAIL及IFNγ 化疗药 TRAIL对SY5Y细胞生长及凋亡的影响。结果SY5Y细胞不表达Caspase8,IFNγ作用48h后的SY5Y细胞Caspase8蛋白表达明显增加;SY5Y细胞对TRAIL不敏感,经IFNγ诱导表达Caspase8的SY5Y细胞对TRAIL敏感;zIETD-FMK可明显抑制TRAIL对表达Caspase8的SY5Y细胞的杀伤作用;化疗药可增强SY5Y细胞对TRAIL的敏感性。结论IFNγ可通过上调SY5Y细胞Caspase8表达而逆转SY5Y细胞对TRAIL诱导凋亡的耐受,化疗药可增强TRAIL对SY5Y细胞的诱导凋亡作用。     

Caspase 8和Caspase 3在TRAIL诱导神经母细胞瘤细胞凋亡中的作用(英文)

目的探讨Caspase8和Caspase3在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）诱导CHP212神经母细胞瘤细胞凋亡中的作用。方法应用流式细胞仪检测TRAIL、Caspase8／Caspase3抑制剂＋TRAIL对CHP212细胞的诱导凋亡作用。应用比色法测定Caspase8、Caspase3的相对活性。应用透射电镜对凋亡细胞进行形态学的观察。结果TRAIL可诱导CHP212细胞的凋亡，并存在剂量依赖性；Caspase8／Caspase3抑制剂能抑制TRAIL对CHP212细胞的诱导凋亡作用。随TRAIL作用时间的延长，Caspase8、Caspase3的活性逐步升高，分别于作用16h、8h后达高峰。透射电镜可见到典型的细胞凋亡特征。结论TRAIL通过Caspase信号传导通路诱导CHP212细胞凋亡并伴随Caspase8和Caspase3活性的增高。     

核磷酸蛋白突变与血液肿瘤

核磷酸蛋白(Nucleophosmin,NPM)是位于核仁颗粒区的一种在细胞中广泛表达的多功能蛋白质.NPM基因异常最初被发现在急性髓系白血病(AML)、淋巴瘤及骨髓增生异常综合征(MDS)患者中,参与染色体易位而形成融合基因,如NPM-RARα,NPM-ALK,NPM-MLF1[1-3].最近研究发现,大约三分之一的原发性AML患者中存在NPM基因突变,少数MDS患者中也发现有野生型NPM(wild-NPM)的表达缺失.     

β-榄香烯对多发性骨髓瘤细胞的白细胞介素-6表达的影响

目的探讨β-榄香烯对多发性骨髓瘤(MM)的白细胞介素-6(IL-6)表达的影响,以期了解β-榄香烯抗MM的分子机制。方法人MM细胞系RPMI 8226与不同浓度的β-榄香烯作用,以酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测MM细胞培养上清中IL-6的浓度,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-6基因表达。结果不同浓度的β-榄香烯作用RPMI 8226细胞48h后,培养上清中IL-6浓度与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR检测结果表明,不同浓度的β-榄香烯作用于RPMI 8226细胞48h,RPMI 8226细胞的IL-6基因mRNA表达强度与对照相比均明显降低。结论β-榄香烯能明显减少MM细胞IL-6的自分泌,抑制RPMI 8226细胞的IL-6基因表达。提示β-榄香烯降低IL-6表达可能是其抗MM的机制之一。