研究生电子显微镜教学的体会

研究生教育担负着为我国经济发展、社会进步和技术创新不断输送高层次人才重要任务,而我军高等院校是培养和造就大批国防事业的高级专门人才。研究生教育是最高层次的教育,是培养未来学科带头人和学术骨干的重要途径。抓好研究生教育关系着跨世界人才建设的重要环节,如何提高研究生的培养质量,使其全面发展的高素质人才,是值得探讨的课题。为此,作就十多年来研究生电子显微镜教学工作中的体会总结如下。     

调节性T细胞的MACS分选和纯度鉴定

目的 建立CD4^ CD25^ 调节性T细胞（Regulatory T Cells,Treg)的磁珠（MACS）分选方法，并对分选结果进行纯度鉴定。方法 采用T细胞纯化柱分离小鼠脾脏T淋巴细胞，以抗－CD8－FITC抗体和抗FITC标记磁珠相结合的阴性选择法剔除CD8^ T细胞，再以抗－CD25－FITC抗体和义气风发FITC标记磁珠相结合的阳性选择法选出CD25^ T淋巴细胞；以FACS流式细胞法检测分选的CD4^ CD25^ 调节性T细胞纯度。结果 MACS磁珠分选法能够成功分选出CD4^ CD25^ 调节性T细胞，分选平均纯度达到73％，分选细胞活力为95％。结论 MACS磁珠分选法能够分选出高纯度的Treg细胞，该分选方法不影响分选靶细胞的细胞活力。     

重组hCTLA4Ig对小鼠脾淋巴细胞活化的抑制作用

目的 探讨基因重组hCTLA4Ig对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响。方法 于不同时相点在Con A刺激的小鼠脾淋巴细胞及BALB/c与昆明种小鼠混合淋巴细胞培养中加入不同剂量hCTLA4Ig，应用^3H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖情况。结果 重组hCTLA4Ig能显著抑制ConA刺激的脾淋巴细胞及混合淋巴细胞反应中的细胞增殖。结论 重组hCTLA4Ig能抑制鼠淋巴细胞的活化。     

载银磷酸锆纱布对烧伤创面常见细菌作用的实验研究

目的 了解载银磷酸锆纱布对烧伤大鼠创面感染常见细菌的抗菌效力。方法制作Wistar大鼠烫伤(以下称烧伤)感染模型，采用试管双倍稀释法测定载银磷酸锆及磺胺嘧啶银的最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC)。观察大鼠创面用磺胺嘧啶银纱布、普通尢菌纱布、载银磷酸锆纱布(小水洗及水洗20次)后痂下组织的细菌计数和对创面愈合的作用。结果载银磷酸锆对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠竹菌的MIC各为8、8、16mg／L，MBC各为16、8、32mg／L，为磺胺嘧啶银的2～8倍?大鼠创面用未水洗的载银磷酸锆纱布覆盖后，痂下细菌计数比用磺胺嘧啶银纱布低91％，比普通无菌纱布低99％未水洗的载银磷酸锆纱布对创面愈合的作用明显优于其他两种纱布，且其痂下组织细菌计数与水洗20次的效银磷酸锆纱布比较，差异无显著性意义(P＞0．05)。结论载银磷酸锆埘烧伤创面感染常见细菌有较强的抑制和杀灭作用，其敷料可作为治疗措施中新的选择。     

高效耐用抗菌织物敷料在烧伤创面的临床应用研究

目的 了解高效耐用抗菌织物敷料（有效成分为载银磷酸锆）对烧伤后Ⅱ度创面的治疗效果及安全性。方法 选择符合入选标准的72例烧伤后Ⅱ度创面患者为受试对象，磺胺嘧啶银作为对照组，观察其创面用高效耐用抗菌织物敷料及磺胺嘧啶银覆盖后治疗、控制伤口感染方面的疗效和安全性。结果 高效耐用抗菌织物实验组比对照组创面用药后愈合时间明显提前，平均提前3．39d，两组之间差异有统计学意义（P〈0．01）。实验组用药后6d及12d的细菌累计清除率分别为83．87％、96．77％，较对照组明显提高。高效耐用抗菌织物对血常规和肝、肾功能均无明显影响，未见局部致敏和全身症状。结论 高效耐用抗菌敷料能有效促进烧伤后Ⅱ度创面的愈合，抑制创面细菌生长。     

树突状细胞在移植免疫耐受诱导中的作用

移植排斥是异体/种组织和器官移植中长期存在而尚未克服的医学难题.目前临床应用的免疫抑制剂虽能使移植排斥反应得到有效控制,但由于其对受者免疫系统非选择性的广泛抑制而常引起感染、肿瘤发生等诸多并发症.因此诱导供者特异性免疫耐受被认为是最终克服移植排斥的有效途径.树突状细胞(dendriticcell,DC)由于来源、发育阶段不同而存在的功能异质性,使其成为诱导移植免疫耐受的重要靶细胞.     

电子显微镜保护电路的分析及故障的排除

故障现象 束流超过180μA，偏压显示不闪烁。 电路分析 电子显微镜的保护电路主要是用于在某种原因引起高压箱电流异常增大时，切断高压发生回路和灯丝回路的电源，起安全保护的作用。 此电路上端点的电压上升到3．5V时，由IC1的4、5、2脚组成的起滞后作用的比较器的2脚输出“L”电平，使TR2截止；这时，IC1的14脚输出矩形波，使继电器RY2不断地接通、断开，偏压显示也不断闪烁，当端点6的电压上升到5V时，由IC1的7、6、1脚的比较器的1脚输出为“H”电平，TR1导通，继电器RY1接通，真空系统板的C端由“L”电平变为“H”电平，HT R…     

腺病毒介导CTLA4Ig基因在体外培养细胞中的表达

目的 鉴定腺病毒介导免疫调节基因CTLA4Ig在体外培养细胞中的表达能力和细胞毒性。方法 以肾小管上皮细胞（PK－15），血管内皮细胞（ECV－304）为靶细胞，观察感染强度为100，200，400时CTLA4Ig重组腺病毒转梁靶细胞后不同时相细胞存活百分率；以免疫组化以及Westerb blot分别检测CTLA4Ig在细胞以及上清中的表达。结果 转染后2d,4d，转染组两种细胞存活百分率与对照组相比无显著差异；转染后24h,CTLA4Ig在PK－15和ECV－304中的阳性率表达率分别为93．7％和90．2％；Westerb blot检测到两种细胞上清中均有CTLA4Ig表达。结论 重组腺病毒对非包装靶细胞毒性很小，能够介导CTLA4Ig基因对靶细胞的高效转染，并使其表达分泌型CTLA4Ig，具备了以基因治疗诱导免疫耐受的潜能，为介导CTLA4Ig基因转染移植物和抗原提呈细胞提供了一种安全有效的载体。     

脾脏与远隔脏器的关系

近年来，人们对脾脏的功能有了新的认识，脾脏是重要的免疫器官。虽然与一些重要生命器官(如心、肝、肾、肺)相比，脾脏的作用显得次要，但脾脏并不是可有可无的的器官，与一些重要脏器又有着千丝万缕的联系，甚至影响着一些脏器重要功能的发挥。现就脾脏与肝脏、肺脏、肠道、内分泌、胸腺、淋巴结、胰腺等的关系作一概述。