热休克蛋白70,p53,Bcl-2在宫颈癌组织中的表达及相关性研究

目的探讨宫颈癌组织中热休克蛋白70(HSP70),p53,Bcl-2的表达及相关性研究。方法采用免疫组织化学SP法对46例宫颈癌组织和26例正常组织进行HSP70,p53和Bcl-2基因蛋白检测。结果HSP70,p53和Bcl-2基因蛋白在宫颈癌组织中的表达率显著高于正常对照组(P<0.01);HSP70和p53在宫颈癌组织中的表达呈显著正相关(rS=0.659,P=0.000);HSP70和Bcl-2及p53和Bcl-2在宫颈癌中的表达显著无相关(rS=0.100,P=0.508;rS=0.184,P=0.221)。结论HSP70,p53和Bcl-2的表达与宫颈癌的发病有密切关系,HSP70蛋白和p53蛋白与宫颈癌生物学行为有关,具有显著的相互协同作用。     

格尔德霉素对乳腺癌细胞HSP、突变型p53和CDK4表达的影响

目的 探讨格尔德霉素(geldanamycin,GA)对乳腺癌MDA-MB- 435s细胞中HSP(HSP90、HSP70、HSP27)和癌蛋白(突变型p53、CDK4)表达的影响.方法 采用MTT法检测GA对乳腺癌MDA-MB-435s细胞的生长抑制作用,RT-PCR检测GA作用后细胞内HSP90、HSP70、HSP27 mRNA表达变化,用Western blot检测GA作用后细胞内HSP90、HSP70、HSP27、突变型p53和CDK4蛋白质表达变化.结果 不同浓度GA对MDA-MB-435s细胞有生长抑制作用,呈时效量效依赖关系.400 nmol/L GA处理细胞48 h后,细胞内HSP90、HSP70、HSP27 mRNA表达和蛋白表达均增高,以HSP70增高最明显,而突变型p53和CDK4蛋白表达明显减少.结论 GA通过下调突变型p53和CDK4表达抑制乳腺癌MDA-MB-435s细胞的增殖,同时GA可诱导细胞内HSP90、HSP70和HSP27表达参与细胞应激保护.     

以热休克蛋白HSP70为靶点的药物研究进展

热休克蛋白HSP70是最保守的蛋白之一,由于在应激反应中的敏感性以及功能的多样性,HSP70逐渐成为研究的热点。HSP70蛋白可以结合错误折叠或非正常聚集的蛋白,使之正常折叠或降解,因此合理干预HSP70的生物功能,可有望治疗一系列与蛋白错误折叠相关的疾病,如肿瘤和神经退行性疾病等。目前已有多类以HSP70为靶点的药物处于临床前研究中。本文综述了HSP70的分类、结构、功能及以HSP70为靶点的药物研究进展。     

结核分支杆菌HSP70原核表达载体的构建和表达及蛋白纯化

目的：构建结核分支杆菌HSP70原核表达载体并诱导其表达和纯化及鉴定目的蛋白。方法：利用PCR技术从牛型结核分支杆菌基因组中扩增出Mtb HSP70 DNA序列，构建重组质粒pGEM-Mtb HSP70，经酶切、PCR和测序鉴定后，将Mtb HSP70基因亚克隆到原核表达质粒PQE30，构建重组表达质粒PQE30-Mtb HSP70，在大肠杆菌M15中诱导表达。用镍凝胶亲和层析的方法纯化目的蛋白，Western blotting杂交鉴定纯化蛋白。结果：经测序证实，获得的目的基因与GenBank中公布的结核杆菌Mtb HSP70基因序列一致。构建的原核表达载体PQE30-Mtb HSP70在大肠杆菌M15中经1 mmol•L^-1 IPTG诱导后表达出相对分子质量约为70 400的蛋白，镍柱纯化后经抗组氨酸单克隆抗体进行Western blotting,在相对分子质量约70 400处可见特异性着色带。结论：成功构建原核表达载体PQE30-Mtb HSP70，并成功诱导Mtb HSP70蛋白的 表达，通过镍凝胶亲和层析法获得纯度较高的Mtb HSP70蛋白。     

胃癌中HSP70、NF-κB p65的表达及临床意义

目的探讨热激蛋白70(HSP70)、核因子κB(NF-κB)p65在胃癌中的表达及其意义。方法收集2011年8月至2012年5月益都中心医院经病理诊断确诊为胃癌并行胃癌根治术的胃癌组织标本60例,采用免疫组织化学法检测60例胃癌患者癌组织及癌旁组织中HSP70、NF-κB p65的表达,并分析两者与胃癌病理特征的关系。结果胃癌组织中HSP70的阳性表达率显著高于癌旁胃组织(78.3%vs 13.3%)(P<0.05);NF-κB p65阳性表达率显著高于癌旁胃组织(63.3%vs 30.0%)(P<0.05);HSP70、NF-κB p65与胃癌组织分化程度、肿瘤的浸润深度以及淋巴结转移有关(P<0.05);HSP70、NF-κB p65在胃癌中的表达呈正相关(P<0.05)。结论 HSP70、NF-κB p65可能通过调节细胞凋亡及细胞增殖参与胃癌的发生、发展,监测HSP70、NF-κB p65在一定程度上有助于胃癌的治疗及预后判断。     

HSP70蛋白在外生殖器鳞状细胞癌的表达及临床意义

目的研究热休克蛋白70（HSP70）在外生殖器鳞癌（External-Genitalia Squamous Cell Carcinoma,EGSCC）的表达及临床意义。方法采用免疫组化技术检测15例正常外生殖器组织、31例EGSCC石蜡包埋组织HSP70蛋白的表达。结果 EGSCC组织中HSP70阳性表达率70.9%（22/31）,低于正常外生殖器组织中100%的阳性表达率（t＇=-7.327,P〈0.05）,差异有显著性统计学意义。随着疾病的进展,有明显的嗜基底膜细胞染色,HSP70阳性表达与临床分期、组织分化程度无明显相关性。结论 HSP70在EGSCC中的表达较正常组织低,提示HSP70与外生殖器鳞癌有关。     

HSP70蛋白在外生殖器鳞状细胞癌的表达及临床意义

目的研究热休克蛋白70(HSP70)在外生殖器鳞癌(External-Genitalia Squamous Cell Carcinoma,EGSCC)的表达及临床意义。方法采用免疫组化技术检测15例正常外生殖器组织、31例EGSCC石蜡包埋组织HSP70蛋白的表达。结果 EGSCC组织中HSP70阳性表达率70.9%(22/31),低于正常外生殖器组织中100%的阳性表达率(t’=-7.327,P<0.05),差异有显著性统计学意义。随着疾病的进展,有明显的嗜基底膜细胞染色,HSP70阳性表达与临床分期、组织分化程度无明显相关性。结论 HSP70在EGSCC中的表达较正常组织低,提示HSP70与外生殖器鳞癌有关。     

热休克蛋白70多肽复合物与肿瘤免疫

热休克蛋白（HSP）与肿瘤免疫治疗的关系是近年来肿瘤免疫治疗的热点之一。许多研究结果均证实，从肿瘤组织中提取HSP能诱导机体产生对该肿瘤细胞的免疫应答，达到治疗肿瘤的目的。HSP分子实际上是分子量大小不同的一组蛋白，根据HSP的同源程度及分子量的大小差异，可分为HSP110家族、HSP90家族、HSP70家族、HSP60家族及小HSP家族，其中HSP70在肿瘤免疫中发挥重要的作用。     

热休克蛋白70与妇产科疾病

热休克蛋白(Heat-shock protein,HSP)普遍存于在生物细胞中,是一组具有重要生理功能、高度保守的蛋白质分子。应激状态下可被诱导表达,故又称应激蛋白。根据分子量大小可分为：HSP110、HSP70、HSP60、小分子2HSP及泛素等几个家族;其中HSP70在细胞生长、发育、分化、基因转变等方面发挥着重要作用。其生物学功能主要表现在应激状态下保护细胞生命活动、维持细胞的生存。HSP70与多种蛋白源形成复合     

p38MAPK与HSP70关系的初步研究

0　引言　丝裂原活化蛋白激酶 (m itogen- activated proteinkinases,MAPKs)是细胞内重要信号传递者 ,其中 p38参与细胞的增殖、分化和对凋亡的调控 [1 ] .热休克蛋白 (heatshock protein,HSP)在通常情况下在细胞中低水平表达 ,应激时高表达 ,肿瘤细胞中 HSP70呈现持续的高诱导表达 [2 ] .我们对 HSP70和 p38之间的关系作了初步探索 ,试图为肿瘤细胞的信号转导研究及肿瘤治疗寻找理论依据和新的治疗途径 .1　材料和方法1.1　材料　人胶质瘤细胞 BT- 32 5 (第四军医大学生理学教研室周华硕士惠赠 ) ,鼠抗人 HSP70单抗 (购自武汉博士…     

αA晶体蛋白基因启动子与HSP70融合基因表达载体的构建及鉴定

目的构建αA晶体蛋白基因启动子与HSP70融合基因表达载体pαACP-HSP70。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术,从质粒pIRES2-EGFP-HSP70中扩增HSP70基因,将已构建的含αA晶状体蛋白基因特异性启动子活性片段(αACP)的质粒pαACP-IRES2-EGFP双酶切,回收载体片段,利用基因重组技术,将HSP70基因片段定向插入载体启动子αACP之后,构建特异性表达载体,命名为pαACP-HSP70,并通过PCR、酶切和DNA测序进行鉴定。结果构建的pαACP-HSP70质粒通过酶切图谱鉴定、PCR检测有1924 bp条带出现,通过测序显示所克隆的HSP70基因与基因库中的同种序列比较,核苷酸序列有100%的同源性。结论成功构建了晶状体上皮细胞特异性表达载体pαACP-HSP70。     

HSP70与TNF-α在甲状腺癌组织中的表达及其与临床病理分期关系的研究

目的:探讨热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)在甲状腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系?方法:采用RT-PCR以及Western blot技术检测对比40 例甲状腺癌组织?20例甲状腺良性病变组织以及15例正常甲状腺组织中HSP70?TNF-α的表达情况,并分析HSP70表达水平与甲状腺癌临床病理学特征的关系?结果:3组人群组织中HSP70 mRNA水平比较差异有统计学意义(P < 0.001),甲状腺癌组织中HSP70 mRNA水平显著高于正常甲状腺组织以及甲状腺良性病变组织(P均< 0.05);HSP70 mRNA的表达水平与甲状腺癌组织病理分级显著相关(rs = 0.810,P < 0.05);甲状腺癌组织中HSP70 蛋白水平显著高于正常甲状腺组织(P < 0.05);3组人群组织中TNF-α mRNA水平比较差异有统计学意义(P < 0.05),甲状腺癌组织中TNF-α mRNA水平显著高于正常甲状腺组织以及甲状腺良性病变组织(P均< 0.05)?结论:HSP70?TNF-α在甲状腺癌组织中的表达升高,且HSP70与甲状腺癌组织病理分级明显相关,提示HSP70在甲状腺癌发生发展中发挥重要的作用?     

肝缺血模型大鼠热休克蛋白70与γδ-TCR阳性细胞群的变化

通过建立大鼠肝缺血再灌注模型,应用抗热休克蛋白70(HSP70)抗体,采用Westernblotting方法观察缺血-灌注前后HSP70变化;同时用抗γδ-TCR阳性细胞单克隆抗体,应用流式分析γδ-TCR阳性细胞群的变化。结果发现:①在缺血-灌注实验组、假手术模型组、阳性对照组和阴性对照四组中均观察到HSP70蛋白的存在;②肝脏缺血5～15 min再灌注2 h后,Western blotting检测有HSP70蛋白存在;肝缺血45 min再灌注2 h后,HSP70蛋白明显增多,而γδ-TCR阳性性细胞在肝缺血45 min再灌注2 h后明显高于其它各组别。结果提示,肝缺血-灌注可诱导HSP70蛋白合成,并随缺血时间的延长而增多。     

衰老、慢性应激与免疫细胞热休克蛋白70反应抑制

自然衰老和慢性应激都能导致免疫细胞对环境刺激的抵抗力降低。衰老和慢性应激影响免疫细胞功能的分子机制目前还不清楚。热休克蛋白(HSP)是一类在所有原核细胞和真核细胞中均有表达的高度保守的蛋白质。研究表明,HSP反应是细胞维持正常功能,对抗应激性损伤的基本保护性机制之一。在HSP家族中,热休克蛋白70(HSP70)对应激条件最敏感,且被认为是功能最重要的一类热休克蛋白[1]。本文综述衰老和慢性应激对免疫细胞HSP70表达的抑制作用及其调节机制。一、热休克蛋白70的细胞保护作用研究证实,HSP70通过“分子伴侣”作用广泛参与细胞周期…     

热休克蛋白70与心肌保护

热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs),也称应激蛋白,是生物体或离体培养细胞在应激状态下产生的一类内源性保护蛋白,根据同源程度及相对分子质量大小可分为HSP110、HSP90、HSP70、HSP60、小分子HSPs等几个家族。由于HSP70在正常细胞中水平较低,应激状态下可显著升高,目前成为HSPs中最为关注、研究最深入的一个家族[1]。近年研究发现,缺血/再灌注心肌中有HSP70的表达,通过多种机制产生心肌保护作用。1概述1.1 HSP70的分类、表达及分布HSP70家族主要包括Hsp72、Hsp73、Grp78、Grp75四个成员,按表达情况分为诱导型和结构型[1-…     

热休克蛋白70与临床相关性疾病的研究进展

热休克蛋白是1962年发现的一种机体在各种应激因素刺激下产生的一种特殊蛋白,保护细胞免受有害刺激造成的损伤,具有多种生物学功能,在热休克蛋白家族中研究较多的是热休克蛋白70(Heat shock protein70, HSP 70).近年来研究发现HSP 70与呼吸、血液、神经、自身免疫系统等疾病密切相关,具有重要的基础研究和临床应用前景.结合相关文献对HSP 70与临床相关性疾病的研究进展做如下综述.     

高温和一氧化碳联合作用对应激反应的影响

采用mRNA斑点杂交和免疫蛋白印迹方法，探讨了高温、一氧化碳（CO）以及它们联合作用对大鼠肝脏热应激蛋白70ku（HSP70）mRNA、HSP70蛋白合成的影响；使用纯化的HSP27、HSP60、HSP70、热应激同源蛋白70ku（HSC70）、HSP89α和HSP89β，调查了接触高温、CO工人血浆中相应的抗体，也调查了这些工人中血浆游离氨基酸浓度。结果：在应激处理之后，大鼠肝脏HSP70mRNA、HSP70蛋白明显增加，高温和CO联合作用对HSP70mRNA、HSP70诱导表现为协同作用，但高温起主要作用。接触高温、CO工人血浆中HSP27和HSP70抗体阳性率明显增高（P＜0．05），但在CO组是最高的。尽管以前的调查结果表明这些工人摄入蛋白质不足，但他们血浆中游离氨基酸却趋向增高，特别是蛋氨酸、色氨酸，因为主要HSP70几乎不含这两种氨基酸。结果提示了这些工人所面临的主要问题是如何促进这些氨基酸的利用，减轻职业有害因素应激时正常蛋白的抑制。     

葡萄胎组织中HSP70的表达及与其预后的关系

目的 :探讨热休克蛋白 70的表达与葡萄胎侵袭恶变的关系。方法 :采用Western免疫组织化学法检测 4 8例葡萄胎组织石蜡标本中HSP70的表达情况。结果 :4 8例观察标本中 ,侵袭组的HSP70表达阳性率显著高于未恶变组 (p <0 .0 1) ;滋养细胞由轻度至重度增生过程中 ,HSP70表达阳性率逐渐增高。中重度组的HSP70表达阳性率显著高于轻度增生组 (P <0 .0 1)。结论 :侵袭性葡萄胎组织的HSP70表达明显高于未恶变的葡萄胎组织。葡萄胎组织中HSP70过度表达者与其恶性程度增高有关。     

急性心肌梗死猝死者心肌细胞hsf1和HSP70改变的意义

目的探讨急性心肌梗死猝死者梗死区心肌细胞内热休克转录因子1(hsf1)和热休克蛋白70(HSP70)改变的临床意义。方法分别用RT-PCR和免疫组化法检测(IHC)18例急性心肌梗死猝死者(研究组)和15例心脏正常因车祸快速死亡者(对照组)心肌细胞中hsf1和HSP70基因的mRNA和蛋白表达量。结果急性心肌梗死猝死者心肌细胞hsf1和HSP70的mRNA表达量都显著高于正常对照组(P<0.01),且hsf1和HSP70 mRNA的表达量之间呈显著的正相关关系(P<0.001)。急性心肌梗死猝死者心肌细胞hsf1和HSP70蛋白在细胞浆和细胞核表达较对照组显著增强(P<0.01),其中hsf1蛋白主要在心肌细胞核内表达,HSP70蛋白主要在心肌细胞浆内表达。结论急性心肌梗死猝死者心肌细胞内hsf1和HSP70可能共同参与了急性心肌梗死的病理生理过程,这一过程可能是热休克反应的另一调节途径。     

HSP60 HSP70 HSP90α在结直肠癌癌旁组织的表达及与病理分级的关系

目的研究结直肠癌、癌旁正常组织中HSP60、HSP70、HSP90α蛋白的表达情况,并分析其与病理分级的关系。方法采用免疫组化法测定49例结直肠癌及其癌旁组织HSP60、HSP70、HSP90α的表达情况。结果免疫组化结果表明结直肠癌组织中HSP60、HSP70和HSP90α表达率及过表达率较其癌旁组织中均有明显差异。HSP60、HSP70、HSP90α在结直肠癌高分化腺癌、中分化腺癌、低分化腺癌的表达率和过表达率均无明显差异。结论HSP60、HSP70、HSP90α三种蛋白表达水平在结直肠癌组织均明显高于癌旁组织,但是其与病理分级无相关关系,证明这三种蛋白在结直肠癌的发病机理中具有普遍意义,为进一步探索HSPs在结直肠癌发病中作用及机制提供了依据。