流式细胞术检测CIK的免疫表型和体外杀伤活性

目的：探讨细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer,CIK）的免疫表型和体外杀伤活性。 方法:从健康人外周血分离淋巴细胞,经过IFNγ、CD3McAb、IL-2诱导并培养,获得大量的CIK。采用流式细胞术检测CIK的表型;以CFSE标记靶细胞来区分效应细胞,再以ＰＩ染色,用FACS检测靶细胞的死亡率。 结果:CIK于第22天达到增殖高峰,并高度表达CD3、CD11a、CD54和HLA-DR;中度表达CD3/CD56、CD25、CD28、CD69和FasL;CD16表达不增加。CIK对肿瘤细胞K562、 HL-60、Hela、SMMC7721和A375均表现出杀伤活性,其中对K562、HL-60、Hela 3种细胞的杀伤作用较强;而对SMMC7721、A375的作用不明显。 结论:细胞因子IFNγ、CD3McAb和IL-2体外诱导的单个核细胞具有强大的增殖力和杀伤活性。     

β2 GP1诱导的EAPS小鼠Treg/Th17细胞比率变化的研究

目的:观察EAPS疾病进展过程中小鼠外周血Th17细胞与CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的比率变化。方法:以重组人β2糖蛋白1(rhβ2GP1)主动免疫BALB/c小鼠建立EAPS模型,免疫12周后检测外周血浆抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2GP1)、抗心磷脂抗体(a CA)、IL-17、IL-2、IL-6、TGF-β、活化部分凝血活酶时间(APTT)和血小板计数(PLT)及流产率。流式细胞术(FCM)检测小鼠PBMC中CD4+CD25+Treg及Th17细胞的比率。结果:与对照组相比,模型小鼠anti-β2GP1、a CA、IL-17、IL-2、IL-6水平明显升高,APTT延长,TGF-β降低,PLT升高,流产率提高,差异有统计学意义(P<0.05)。PBMC中CD4+CD25+Treg细胞频率8周前与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),12周后逐渐减少,明显低于对照组(P<0.05);Th17细胞频率逐渐升高,明显高于对照组(P<0.05);CD4+CD25+Treg/Th17比值明显低于对照组(P<0.05)。结论:EAPS小鼠外周血Th17/Treg细胞比率失衡可能在EAPS的发生发展中起重要作用。     

CXCL12/CXCR4在小细胞肺癌患者中的表达及临床意义

目的研究小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者外周血中CXCL12及其受体CXCR4的表达情况,探讨CXCL12/CXCR4与SCLC发生和发展之间的关系。方法采用ELISA、real-time PCR和Westernblot方法,检测CXCL12与CXCR4在30例局限期(Limited stage disease,LD)SCLC患者、32例扩散期(Expensive stage disease,ED)SCLC患者和10例良性肺部肿瘤患者(对照组,Control)中的转录水平和表达水平,分析CXCL12、CXCR4与SCLC患者临床病理等指标之间的关系。结果 CXCL12、CXCR4在SCLC患者组织中均高表达,其中扩散期患者CXCL12、CXCR4表达平略高于局限期患者组。扩散期患者外周血中CXCL12表达高于其在局限期患者中的水平,二者均高于对照组。血清中CXCL12水平与患者的性别和年龄无关(P0.05),而与肿瘤的大小及淋巴结转移明显相关(P0.01)。结论 CXCL12/CXCR4可能直接或间接参与对SCLC发生和发展的调控。     

肝硬化患者转化生长因子和激活素A的检测及其意义

目的 探讨肝硬化患者血清转化生长因子(TGF)-β1及血清激活素A的变化及其意义.方法 经病史、临床生化、B超检查确诊的35例肝硬化患者,并以35名健康人作健康对照,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定其血清TGF-β1及激活素A的含量.结果 健康对照组血清TGF-β1[(31.9±11.9)ng/ml vs (53.2±18.7)ng/ml]及激活素A含量[(0.82±0.36)ng/ml vs(1.27±0.84)ng/ml]明显低于肝硬化组(P＜0.05).结论 测定肝硬化患者血清TGF-β1及ACT含量的变化,对肝硬化患者的早期诊断、治疗及预防有重要意义.     

IL-6对弓形虫增殖的影响

目的：观察白细胞介素－６（ＩＬ－６）对弓形虫增殖的影响。方法：以Ｃ５７ＢＬ／６小鼠腹腔巨噬细胞为靶细胞,采用３Ｈ－尿嘧啶（３Ｈ－Ｕ）特异性标记的弓形虫在ＭΦ内的增殖实验。结果：单独应用ＩＬ－６处理ＭΦ,可以促进弓形虫在ＭΦ内的增殖,α肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）的影响不明显;而在ＩＬ－６逆转γ干扰素（ＩＦＮγ）诱导的ＭΦ抗弓形虫效应的实验中发现,加入抗ＴＮＦα抗体可增加ＩＬ－６对ＩＦＮγ诱导ＭΦ抗弓形虫效应的逆转作用。结论：体外应用ＩＬ－６可促进弓形虫在小鼠腹腔ＭΦ内的增殖作用,并能部分逆转ＩＦＮγ的抗弓形虫效应。     

急性髓系白血病中uPA和uPAR的表达及意义

目的观察急性髓系白血病人骨髓单个核细胞uPAR（CD87）的表达及血浆uPA的水平,并探讨其临床意义。方法用ELISA法测定22例急性髓系白血病患者（观察组）及34例良性血液病患者（对照组）血浆中uPA表达水平,用流式细胞学技术测定骨髓单个核细胞uPAR水平,比较两组之间的表达差异。结果血浆中uPA水平和骨髓单个核细胞uPAR水平急性髓系白血病组均高于良性血液病组,差异具有显著性（P〈0.05）;pearson相关分析显示uPA表达水平及uPAR水平之间存在正相关性（观察组r1=0.614,对照组r2=0.921;P〈0.05）。结论急性髓系白血病患者血浆uPA水平及骨髓单个核细胞uPAR表达均升高,二者具有协同表达关系,联合检测对于急性髓系白血病的病情监控和预后分析有临床指导意义。     

双酚A在雌激素依赖性肿瘤中的作用机制研究进展

<正>环境污染已成为影响人类生活、健康的重要因素,人类的许多疾病都与环境因素有着密切的联系。环境雌激素作为一种能模拟和干扰动物及人类内分泌机能的物质,在我们的生活中无处不在,其与体内天然激素一样,极微量(微摩尔级或更低)就可以引起细胞功能的显著改变〔1〕。这类化合物     

育龄妇女和孕妇阴道微生态环境的比较研究

目的:对比育龄妇女和孕妇阴道内微生态状况。方法:分别取800例育龄妇女和孕妇的阴道分泌物标本,涂片后用革兰染色,显微镜下计数后进行Nugent评分分析。结果:育龄妇女和孕妇假丝酵母菌感染的阳性率分别为20.4%和8.9%,滴虫感染的阳性率分别为4.6%和1.1%,细菌性阴道病(BV)阳性率分别为33.9%和8.8%,乳酸杆菌的含量分别为63.6%和84.5%,两组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:相较于育龄妇女,孕妇的阴道微生态状况更健康,对假丝酵母菌、滴虫和细菌性阴道病等常规疾病感染的抵抗力更强。     

人心肌肌钙蛋白I的原核表达与纯化

目的构建人心肌肌钙蛋白Ⅰ（human cmdiac troponin I,hcTnI）原核表达载体并表达、分离纯化重组蛋白。方法RT-PCR从人心肌组织中克隆出hcTnI的cDNA序列构建到原核表达载体pQE30，获得重组表达质粒pQE30-hcTnI，并在大肠杆菌M15中诱导表达。镍凝胶亲和层析纯化目的蛋白，Western Blot杂交鉴定重组蛋白。结果经测序证实，获得的目的基因与（GeneBankM64247）公布的hcTnI基因序列一致。pQE30-hcTnI在大肠杆菌M15中经WFG诱导后表达出相对分子量约为29kD的目的蛋白，镍柱纯化后经抗hcTnI单克隆抗体进行Western印记，在相对分子量约29kD处可见特异性着色带。结论体外成功诱导了重组hcTnI蛋白表达，通过镍凝胶亲和层析法获得纯度较高的hcTnI蛋白，为进一步获得hcTnI的抗体及建立相应的临床快速检测方法奠定了实验基础。     

奥扎格雷钠对缺血再灌注大鼠脑海马区细胞保护作用的研究

目的 观察奥扎格雷钠对大鼠脑缺血/再灌注后IL-6和TNF-α蛋白表达的影响,探讨奥扎格雷钠对缺血再灌注大鼠脑海马区细胞的保护作用及其作用机制.方法 将40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、缺血/再灌注组、生理盐水对照组和奥扎格雷钠治疗组.采用大鼠大脑中动脉线栓(MCAO) 法制备局灶性脑缺血/ 再灌注模型,应用免疫组化技术分别检测各组大鼠脑组织IL-6和TNF-α蛋白表达情况.结果 与假手术组相比较,脑缺血/再灌注组IL-6和TNF-α蛋白的表达明显增多(P＜0.05),奥扎格雷钠能够明显减少TNF-α的表达(P＜0.05),而对IL-6表达无影响(P＞0.05).结论 奥扎格雷钠对大鼠脑缺血/ 再灌注具有保护作用,其机制可能与抑制TNF-α表达有关.