苯乙酸钠对小鼠腹腔内种植肝癌细胞株凋亡的作用

目的 探讨苯乙酸钠(NaPA)对小鼠体内种植性肿瘤生长的影响,以及对肿瘤细胞凋亡和细胞周期的作用,寻找新的有效的肿瘤治疗药物.方法 制作小鼠体内种植性肿瘤模型,NaPA腹腔内注射10 d后运用流式细胞技术检测肿瘤组织细胞凋亡及细胞周期的变化情况,并检测NaPA对荷瘤小鼠的抑瘤作用和毒副作用.结果 随着NaPA浓度的增加,对荷瘤小鼠的抑瘤作用加强,肿瘤细胞凋亡率呈正比例增加.NaPA主要抑制细胞的G1期,且与浓度相关.NaPA各组肿瘤细胞增殖指数下降,细胞生长受阻于G0/G1期,细胞趋于成熟.且没有检测到药物对荷瘤鼠正常组织的毒副作用.结论 NaPA可以抑制肿瘤生长,使肿瘤细胞产生凋亡,诱导细胞向成熟转化;并且无毒副作用,有望成为新的肿瘤治疗药物.     

NK细胞及其受体与肝脏疾病的研究进展

肝脏是位于胃肠道和循环系统之间的器官。肝脏供血的75%～80%来源于门静脉系统,由胃肠道提供,富含微生物,环境毒素及食物抗原。然而,肝脏必须有选择的对抗原做出免疫反应,以防止无害性食物抗原引起不恰当的免疫激活反应,并且肝脏     

综合护理干预对老年高血压患者治疗依从性的影响

进入21世纪以来,高血压病正日益成为威胁人类健康的主要杀手,而中老年高血压病又成为中老年人的主要疾病或危险因素.重视高血压患者的健康教育,加强对其生活方式的干预及血压的自我监测,对控制高血压的临床症状、提高患者生活质量有着重要意义.     

抗乙型肝炎病毒治疗研究进展

乙型病毒性( MBV)肝炎是由HBV引起的传染性疾病.目前全世界约有4亿HBV携带者,我国是乙肝高发区之一,约有HBV携带者1.3亿人,每年约有30万人死于慢性肝炎(CHB),其中70％的病毒性肝炎是乙型肝炎[1].卫生部2008年传染病疫情统计数据显示,我国乙型肝炎发病总数居传染病发病总数的第二位,其死亡总数居第四位,与2007年同期比较,乙型肝炎死亡率呈上升趋势.抗病毒治疗的目标是最大限度地抑制或消除HBV,减少和防止肝脏功能失代偿、肝硬化、肝细胞癌及其并发症的发生,改善患者生活质量并延长其存活时间.现有抗HBV药物很少能对cccDNA( covalently closed circular DNA)有降解作用,即使DNA链合成终止,病毒仍能以cccDNA为模板,转录mRNA并继而翻译病毒蛋白.     

肝病患者血清Gc球蛋白和细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10检测及临床意义

目的分析Gc球蛋白在肝病患者,尤其是重症肝炎患者血中的浓度改变及临床意义;探讨肝病患者血清Gc球蛋白和细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10的关系。方法应用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒体外检测不同类型肝病患者血清中游离Gc球蛋白和细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10的浓度。结果重症肝炎组较急性、慢性肝炎组、肝硬化组及正常对照组相比,Gc球蛋白浓度下降得最为显著,且有统计学意义;Gc球蛋白和细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10在各种肝病中具有相关性。结论 Gc球蛋白的浓度的改变和肝脏坏死程度关系密切,Gc球蛋白可以作为诊断重症肝炎的敏感指标;Gc球蛋白和上述4种细胞因子在不同的肝病类型中具有不同的相关性。     

人肝细胞癌抗原HCA661 DNA疫苗的构建

目的：构建人肝细胞癌特异性抗原HCA661的DNA疫苗。方法：通过PCR从SMMC7721中获得编码肝细胞癌特异抗原HCA661的基因组DNA序列,插入pGEM-T easy载体后测序,并将目的基因定向亚克隆进入真核表达载体pCI-neo,以PCR和酶切方法鉴定构建的重组真核表达质粒pCI-neo-HCA661。结果：PCR产物为 1 040 bp,测序结果与Gene Bank登记完全相同;PCR和酶切结果表明,构建的重组真核表达质粒中含有正确编码的目的基因片段。结论：成功地构建了含有HCA661基因的DNA疫苗。     

C-MYC基因在肝癌与肝硬化组织中扩增的实验研究

目的 研究C-MYC基因在肝癌及肝硬化组织中的扩增情况。方法 采用聚合酶链式反应(PCR)对32例肝癌及12例肝硬化组织中的C-MYC基因扩增情况进行研究，并通过激光密度扫描仪对琼脂糖凝胶EB染色底片进行积分光密度分析。结果 正常组织无C-MYC扩增，C-MYC与N-MYC L-MYC比值95％可信区间为0．1325-0．5632，肝硬化组织扩增阳性率为8．33％，肝癌组织扩增阳性率43．75％。结论 肝癌组织C-MYC扩增率高于正常组织和肝硬化组织，且C-MYC扩增者大多有淋巴结转移，组织分化差。检测C-MYC基因扩增情况可对肿瘤发生、发展及预后进行判断，并指导临床基因治疗。     

流式细胞术检测细胞毒方法的建立

目的：建立一种用流式细胞仪测定细胞介导细胞毒活性的方法。方法：用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记靶细胞，再用碘化丙碇(PI)标记DNA筛选细胞膜已破坏的靶细胞。效靶比为100：1—6．25：1，共孵育时间为1-6小时，流式细胞仪收集1000个靶细胞并测定被杀细胞的百分率。结果：CFSE是合适的标记靶细胞的荧光染料，18小时后也能很好地区分效靶细胞；靶细胞的自然死亡率低于5％；杀伤百分率随着效靶比和共孵育时间的增加而增加。最佳效靶比为50：1—25：1，共孵育时间为2—4小时。结论：CFSE／PI双荧光染料标记的流式细胞分析检测细胞毒具有多个优点：避免放射性试剂的应用，敏感性增强，单细胞水平的分析。     

β2-GPI与细胞凋亡的关系研究

目的探讨β2-糖蛋白-Ⅰ(β2-GPI)与凋亡细胞的结合是否通过磷脂酰丝氨酸(PS).方法采用UV照射的方法,诱导K562细胞凋亡,应用碘化丙啶、梯状电泳和β2-GPI检测细胞凋亡.采用β2-GPI与Annexin V的竞争实验来检测β2-GPI是否通过PS与凋亡细胞结合.结果随着UV照射时间延长,K562细胞的凋亡率增加,在照射300秒时,凋亡细胞达到51.01%(47.23%±4.41%), DNA出现明显的片段化.rGFP连接的β2-GPI,与凋亡细胞结合,β2-GPI可以有效地检测细胞凋亡,而且与Annexin V竞争同一结合位点,即PS.4℃时β2-GPI与晚期凋亡细胞的结合高于37℃,而且随着时间延长,与凋亡细胞的结合均降低.结论通过β2-GPI与Annexin V的竞争抑制实验第一次为"β2-GPI通过PS与凋亡细胞结合"这一推断提供直接的实验证据,第一次证实β2-GPI既可以与早期凋亡细胞结合,也可以与晚期凋亡细胞结合,rGFP-hβ2-GPI可以作为新的检测细胞凋亡的试剂应用.     

重组人β2糖蛋白1第一结构域对抗磷脂抗体综合征患者血清诱导人脐静脉内皮细胞产生ICAM-1、MCP-1的影响

目的：探讨重组人β2糖蛋白1第一结构域（hrβ2GPⅠDⅠ）对抗磷脂抗体综合征（APS）患者血清诱导人脐静脉内皮细胞产生细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的影响。方法：应用hrβ2GPⅠDⅠ二聚体处理前后的APS患者血清分别与人脐静脉内皮细胞（HUVEC）共孵育，细胞EL／SA和RT-PCR方法分析处理前后HUVEC表达ICAM-1、MCP-1的变化。结果：hrβ2GPⅠDⅠ二聚体处理后的APS患者血清较处理前相比，与其孵育的HUVEC表达ICAM-1、MCP-1在蛋白和mRNA水平均明显降低。结论：邮：GPⅠDⅠ可中和APS患者血清中的大部分致病性抗β2GPⅠ抗体（anti-β2 GPⅠ）。