HPV6b L1蛋白在昆虫细胞中的表达及其作为特异性诊断抗原的初步研究

目的：研究人乳头瘤病毒6b结构蛋白（HPV6b L1)在昆虫细胞系统的表达及其作为特异性诊断抗原的可行性,为HPV感染的血清学诊断及基因工程疫苗研究作准备。方法：采用HPV6b L1重组杆状病毒感染sf-9昆虫细胞制备HPV6b L1,经氯化梯度离心纯化,Western blot分析及电镜观察鉴定;用1μg、5μg和20μg三种剂量免疫小鼠,以检测小鼠血清抗体反应;并用HPV6b L1作为诊断抗原检测HPV感染者（尖锐湿疣及宫颈癌）和健康对照者共112例血清特异性抗体。结果：HPV6b L1在昆虫细胞中得到表达,并可自行组装形成VLPs,且予1μg剂量免疫小鼠就能产生阳性血清抗体反应,HPV6b L1 VLPs特异性抗体对HPV6感染的敏感性和特异性分别为78．6％和97．1％。结论：HPV6b L1 VLPs具较强的免疫原性和抗原性,血清中检测到的HPV6b L1抗体对HPV6感染具较高的特异性,可进一步用于HPV感染的血清学诊断及防治尖锐湿疣的基因工程疫苗研究。     

热休克蛋白在尖锐湿疣组织中的检测及其与HPV感染相关性

目的　探讨热休克蛋白 70(HSP70)在尖锐湿疣(CA)组织中的检测及其与人乳头瘤病毒 (HPV)感染的关系。方法　采用免疫组化法检测了 24例CA、46例宫颈癌和 28例正常宫颈组织HSP70,用PCR技术对各组织标本的HPV-DNA进行检测和 6, 1 1, 1 6, 1 8分型。结果　HSP7 0在CA和宫颈癌组的阳性率显著高于正常宫颈对照组 (P<0. 01)。CA组HPV6, 11型DNA阳性者HSP70的检出率显著高于阴性者(P<0. 05),宫颈癌组HPV16, 18型DNA阳性者与阴性者HSP70的检出率差异无显著性(P>0. 05)。结论　HSP70的表达与尖锐湿疣的发病有关,HSP70在尖锐湿疣组织中的表达与HPV的感染明显相关。     

P53,Fas,Bcl-2蛋白在尖锐湿疣组织中的检出及其与HPV感染的相关性

目的　探讨P5 3 ,Fas ,Bcl 2蛋白在尖锐湿疣 (CA)组织中的检出情况及其与人乳头瘤病毒 (HPV)感染的关系。方法　采用标准免疫组化法检测了 2 4例CA、46例宫颈癌和 2 8例正常宫颈组织P5 3 ,Fas ,Bcl 2蛋白 ,用PCR技术对各组织标本的HPV DNA进行检测和 6,11,16,18分型。结果　P5 3 ,Fas ,Bcl 2蛋白在CA组的阳性率显著高于正常对照组 (P <0 .0 0 1) ;CA组和宫颈癌组之间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。综合分析 ,蛋白阳性率与HPV感染率密切相关 (P <0 .0 5 ) ,但CA组或宫颈癌组的蛋白阳性率与HPV 6/11型或 16/18型的检出与否无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论　P5 3 ,Fas ,Bcl 2蛋白与尖锐湿疣的发病有密切关系 ,凋亡基因的表达可能抑制HPV的增殖     

HSP70、P53、Bcl-2在宫颈癌组织中的表达及其与人乳头瘤病毒感染的关系

多种肿瘤组织中大量地表达,并可通过与癌基因、抑癌基因及其产物相互作用,调节细胞增殖[1].已报道恶性组织凋亡基因表达异常[2],但宫颈癌组织中HSP70表达及细胞凋亡基因P53、Bcl-2与HPV感染的关系尚未见报道.本研究应用免疫组织化学SP和PCR技术检测宫颈癌组织中HSP70、P53、Bcl-2表达和HPV的感染,以探讨HSP70、P53、Bcl-2蛋白的表达与宫颈癌的发病及与HPV感染的关系.     

NF-κB、COX-2在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16感染的关系

背景与目的:探讨宫颈癌组织中NF-κB、COX-2的表达及其与HPV16感染的关系.材料与方法:采用免疫组织化学PowerVision TM二步法对46例宫颈癌和31例正常宫颈组织进行NF-κB、COX-2蛋白检测,用PCR技术对组织标本的HPV16 DNA进行检测.结果:NF-κB、COX-2在宫颈癌组织中的表达率显著高于正常对照组(P＜0.01),NF-κB、COX-2的表达与HPV16型的感染具有相关性(P＜0.05).结论:宫颈癌组织中NF-κB、COX-2呈高表达.NF-κB的活化及COX-2的高表达可能与HPV16感染有关.     

野菊花等中草药对71株解脲脲原体体外抑菌研究

解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)不仅引起男女泌尿生殖道感染,也是男性不育及不良妊娠重要原因.由于Uu没有细胞壁结构,不被青霉素类药物所抑制.本文采用琼脂稀释法测定野菊花、白花蛇舌草、复方金钱草等中草药对71株Uu抑菌作用,为中草药应用Uu临床治疗提供实验依据.     

基于E6/E7基因检测高危型人乳头瘤病毒感染新方法的构建

目的建立一种基于E6/E7基因的高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染检测的新方法,并评价其效应。方法设计中国人群中流行的7种HPV高危型别的E6/E7特异性引物,建立E6/E7多重聚合酶链式反应(PCR)法。对68份宫颈肿瘤标本和150份宫颈脱落细胞标本分别采用不同方法进行HPV检测,评价新建立的方法。结果 68份宫颈肿瘤组织中,E6/E7多重PCR法检测阳性48份(70.59%),流式荧光杂交法检测阳性27份(39.71%),2种检测结果差异有统计学意义(P0.05);150份宫颈脱落细胞中,E6/E7多重PCR法检测阳性115份(76.67%),临床流式荧光杂交法检测阳性125份(83.33%),2种检测结果差异无统计学意义(P0.05)。结论所建立的基于HPV E6/E7基因的多重PCR方法检测高危型HPV感染情况具有特异性和灵敏性,且与目前临床上主流的流式荧光杂交法检测结果存在高度相近性,但价格便宜,操作简便,可推广适用于临床早期筛查。     

CAI课件在医学微生物学实验教学与考试中的应用

医学微生物学是一门重要的医学基础课 ,通过分析CAI课件在医学微生物学实验教学与考试中的应用并与传统教学模式相比较 ,提出以传统的教学为基础 ,辅助CAI教学的教学改革方案 ,从而提高教学的质量和效率。     

HPV6b L1 VLPs经三种途径免疫小鼠的实验研究

目的：探讨加HPV6bL1VLPs经三种途径免疫小鼠后的免疫反应，以选择机体获得免疫保护的最佳途径。方法：小鼠以鼻腔吸入、阴道免疫、肌肉注射加HPV6bL1VLPs分为三组，经间隔2w三次免疫后取血、肺冲洗液和阴道冲洗液标本，用ELISA法检测血清IgG和分泌物IgA抗体，并用血凝抑制试验检测抗体的中和作用。结果：加HPV6bL1VLPs经肌肉注射、鼻腔吸入均能诱导产生血清蜘和呼吸道、阴道粘膜的IgA抗体，经阴道免疫可产生血清IgG和阴道粘膜的IgA抗体；抗体均具有中和活性；其中肌肉注射组产生的血清IgG抗体滴度最高，鼻腔免疫产生的粘膜I醇抗体滴度最高。结论：加HPV6bL1VLPs具较强抗原性；肌肉注射和鼻腔吸入免疫可刺激小鼠产生全身和局部粘膜的中和抗体，鼻腔吸入免疫可能是诱导机体产生粘膜免疫的最佳途径。