阿奇霉素、乙酰螺旋霉素、青蒿琥酯及联合用药体外抗弓形虫作用的研究

目的:观察阿奇霉素、乙酰螺旋霉素、青蒿琥酯及联合用药体外抗弓形虫的效果.方法:将小鼠弓形虫速殖子腹水悬液定量分装到细胞培养板,平均约2.5×104个虫体/孔,以生理盐水作为空白对照组,不同浓度的阿奇霉素、乙酰螺旋霉素、青蒿琥酯及乙酰螺旋霉素青蒿琥酯联合用药为实验组;用细胞计数法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定药物对弓形虫的抑制和杀灭作用.结果:加药24 h后,3种药物及联合用药对弓形虫表现出不同的作用效果,与未加药组相比差异均有统计学意义(P<0.01).最好为阿奇霉素,其次是青蒿琥酯;乙酰螺旋霉素青蒿琥酯联合用药的疗效低于青蒿琥酯,但高于乙酰螺旋霉素.结论:阿奇霉素、乙酰螺旋霉素、青蒿琥酯及联合用药对体外弓形虫均有抗虫效应,在常规药物浓度下,阿奇霉素对弓形虫的杀灭作用比其他药物明显,杀虫效果与剂量呈正相关.     

三种药物对体外人芽囊原虫的作用效果观察

目的了解甲硝唑、替硝唑和阿奇霉素对人芽囊原虫的作用效果。方法从门诊病人阳性粪便中分离出人芽囊原虫，接种到96孔无菌培养板中，实验组加入不同药物浓度的甲硝唑、替硝唑和阿奇霉素，对照组加入无菌生理盐水，应用细胞增殖实验方法检测三种药物对人芽囊原虫的抑制和杀灭作用。结果药物作用72h后，甲硝唑、替硝唑和阿奇霉素药物浓度为5μg／ml时相对抑制率分别为5．45％、16．13％和11．23％，光镜下原虫形态发生了改变。结论甲硝唑、替硝唑和阿奇霉素对体外人芽囊原虫的生长具有抑制和杀灭作用，替硝唑的作用效果最好     

红霉素、阿奇霉素、磺胺嘧啶、大蒜素体外抗弓形虫作用的研究

目的　比较阿奇霉素、红霉素、磺胺嘧啶、大蒜素体外抗弓形虫的效果。方法　用弓形虫RH株速殖子感染培养的巨噬细胞 ,每一种药物根据预实验设立 2至 3个浓度 ,分别在速殖子侵入细胞前和侵入细胞后用不同浓度的药物处理 ,每隔 1h在倒置显微镜下观察细胞及弓形虫的形态及生长情况 ,9d后取出盖玻片 ,染色透明后 ,镜下观察。再将培养液及培养细胞注入鼠腹腔 ,观察小鼠的发病情况。结果　阿奇霉素的浓度在 2 0 μg/ml时具有抑制虫体生长的作用 ,>40 μg/ml时对巨噬细胞有明显的毒性。红霉素的浓度在 10 0 μg/ml、15 0 μg/ml时可抑制弓形虫的生长与繁殖 ,但不能完全杀死虫体 ,形成假包囊。将假包囊及培养液接种小鼠腹腔 6d后小鼠发病死亡 ,解剖小鼠后 ,可见大量的虫体。没有观察到 10 0 μg/ml、2 0 0 μg/ml的磺胺嘧啶及 2 0 μg/ml、40 μg/ml的大蒜素有抑制弓形虫生长的作用。 结论　阿奇霉素具有明显杀灭速殖子的作用。低浓度的红霉素有利于包囊形成。磺胺嘧啶、大蒜素体外无杀灭速殖子的作用。     

红霉素、阿奇霉素、磺胺嘧啶、大蒜素体外抗弓形虫作用的研究

目的 比较阿奇霉素、红霉素、磺胺嘧啶、大蒜素体外抗弓形虫的效果.方法 用弓形虫RH株速殖子感染培养在盖玻片上的巨噬细胞,每一种药物根据其血药浓度及预实验设立2～3个浓度,分别在速殖子侵入细胞前和侵入细胞后用不同浓度的药物处理,每隔1小时在倒置显微镜下观察细胞及弓形虫的形态及生长情况,9天后取出盖玻片,经吉氏染色、二甲苯透明后,镜下观察.再将培养液及培养细胞注入鼠腹腔,观察小鼠的发病情况.结果 阿奇霉素的浓度在20 μg/mL 时具有抑制虫体生长的作用,＞40 μg/mL 时对巨噬细胞有明显的毒性.红霉素的浓度为100 μg/mL、150 μg/mL时可抑制弓形虫的生长与繁殖,但不能完全杀死虫体,形成假包囊,将假包囊及培养液接种小鼠腹腔,6天后,小鼠发病死亡,解剖小鼠后,可见大量的虫体.没有观察到100 μg/mL 、200 μg/mL的磺胺嘧啶及20 μg/mL、40 μg/mL的大蒜素抑制弓形虫生长的作用.结论 阿奇霉素具有明显的杀灭速殖子的作用,但浓度大于40 μg/mL时对细胞的毒性较大,100 μg/mL的红霉素可抑制弓形虫生长繁殖,形成假包囊(或包囊).当红霉素的浓度达150 μg/mL时,对弓形虫的抑制作用增强,但不能完全杀灭弓形虫.100 μg/mL、200 μg/mL的磺胺嘧啶及20 μg/mL、40 μg/mL的大蒜素对弓形虫的生长无抑制作用.     

氯丙嗪对体外培养人宫颈癌Hela细胞株的生长抑制作用

目的：探讨氯丙嗪对人宫颈癌Hela细胞株的体外抑制作用。方法：采用MTT测定法，观察不同浓度氯丙嗪(0μmol／L，3．0μmol／L，6．0μmol／L，12．5μmol／L，25．0μmol／L，50．0μmol／L，100．0μmol／L)作用后体外培养的人宫颈癌Hela细胞的细胞增殖抑制率，并于用药后不同时间点观察细胞形态学变化。结果：不同浓度的氯丙嗪对Hela细胞生长均有抑制作用，随药物浓度的增加，抑制作用加强。氯丙嗪浓度为3．0μmol／L即呈现明显的生长抑制作用，抑制率为7．91％；浓度为100．0μmol／L时抑制率最高，达59．39％。用药4h后镜下即可见部分细胞贴壁性降低，肿胀呈球形，核膜溶解，不见核的轮廓；部分细胞裂解呈碎片状；用药8h后碎片明显增多。结论：氯丙嗪对人宫颈癌Hela细胞株具有体外生长抑制作用。     

金荞麦根体外培养人肿瘤细胞的抗癌研究

利用直接杀伤细胞法，集落培养抑制法及DNA前体物质参入法研究金荞麦根对体外培养的多种人癌细胞的抗癌作用。结果：此药在1g·L^-1时对多种人癌细胞的杀伤率均超过一个对数杀灭，浓度降低至0.125g·L^-1的杀伤率仍接近一个对数杀灭达74.3％～92.1％，金荞麦根中的提取物具有明显抗癌作用，其浓度为0．1，0.05g·L^-1对多种癌细胞的集落抑制率达100％，浓度为0．0125g·L^-1时抑制率达75．1%～89.2％，再用^3H-TdR标记法观察发现，金E能明显抑制癌细胞内的核酸代谢，其抑制作用与同浓度的阳性对照氟尿嘧啶近似。     

国产磷酸阿奇霉素体外抗菌作用试验

目的：检测国产磷酸阿奇霉素（Azithromycin)以及对照乳糖酸红霉素对临床分离致病菌的体外抗菌作用。方法：测定药物对常见致病菌的最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）及杀菌曲线等。结果：磷酸阿奇霉素对革兰氏阳性菌的抗菌作用较强,MIC90在0．25－16mg/L范围内;在2.0mg/L时,对肺炎球菌表现出较强的杀菌作用。对革兰氏阴性菌也有一定的抗菌作用,但明显优于红霉素,MIC90为红霉素的1／4。结论：磷酸阿奇霉素对革兰氏阳性菌的抗菌作用与红霉素相似,对革兰氏阴性菌的抗菌作用优于红霉素,该药与红霉素有交叉耐药性。     

血水草生物碱杀灭日本血吸虫尾蚴预防感染的实验研究

目的 探讨血水草生物碱(ECA)实验室及现场杀灭尾蚴、预防日本血吸虫感染的保护性效果。方法 在实验室配置不同浓度的血水草生物碱溶液：玻片法灭蚴、实验室及现场防护动物血吸虫感染的试验。结果 尾蚴接触药物2.5mg/L，60min死亡率为97．71％，5mg/L死亡率为100％。10mg／L-100mg/L尾蚴100％死亡时间由45min缩短至3min。10mg／L组药物浸杀尾蚴后，对小鼠的防护率为100％；5mg／L ECA组的防护率为82．35％—94．53％。现场实验1．25mg/L能完全阻止血吸虫尾蚴感染。结论 血水草生物碱具有杀灭日本血吸虫尾蚴的效果。     

复方一枝蒿颗粒体外抗弓形虫RH株速殖子的超微结构观察

目的 探索复方一枝蒿颗粒体外对弓形虫RH株速殖子超微结构的影响。方法 收集弓形虫RH株速殖子感染72 h后的昆明（KM）小鼠腹腔冲洗液,加入复方一枝蒿颗粒水溶液使药物终浓度达到0.8 mg/mL,并以0.04 mg/mL剂量阿奇霉素作为阳性药物对照,同时设立空白对照组。置二氧化碳孵箱作用2 h,分别制备吉瑞氏复合染色涂片和透射电镜样本,比较观察各实验组弓形虫速殖子光镜下形态和透射电镜下超微结构。结果 空白对照组虫体符合弓形虫速殖子超微结构正常形态,而阳性药物对照组和复方一枝蒿颗粒作用组均显示着色较浅的异常形态虫体：虫体肿胀变形,两端钝圆。细胞质着色浅且偶见空泡,个别虫体细胞膜似有断裂缺如,胞膜不完整。透射电镜下可见阳性药物对照组和复方一枝蒿组弓形虫速殖子细胞质疏松并出现大量不规则空泡等异常形态,复方一枝蒿颗粒还可使弓形虫速殖子超微结构发生胞膜断裂、破损,核膜破损,致密颗粒增多等改变。结论 复方一枝蒿颗粒具有损伤弓形虫速殖子超微结构的直接作用。     

白头翁体外抗阴道毛滴虫效果观察

目的：探讨中草药白头翁体外抗阴道毛滴虫作用。方法：光镜下观察白头翁水提液（FWE）作用后阴道毛滴虫的形态变化,并用姬氏法染色。结果：随着药物作用时间的延长和药物浓度的增加,阴道毛滴虫死亡率增高。白头翁水提液24h杀灭阴道毛滴虫的最低有效浓度为1．25mg／ml。药物作用后虫体内空泡增多,颗粒堆积,虫体碎解。结论：白头翁具有较强的抗阴道毛滴虫作用。     

弓形虫对HPB-ALL细胞及CNE-2Z细胞增殖的影响

目的：探讨弓形虫对HPB—ALL细胞及CNE-2Z细胞增殖的影响。方法：取培养至对数生长期的HPB—ALL细胞和CNE-2Z细胞分别接种于96孔培养板中,加入不同浓度（1×10^4、2×10^4、4×10^4、8×10^4、16×10^4／mL）的弓形虫速殖子作用48h,MTT法检测细胞增殖抑制率。结果：弓形虫对HPB—ALL细胞增殖抑制率依次为14％、20％、33％、38％和39％,除第1组外,其余4组的吸光度值与对照组比较．差异均有统计学意义（P〈0．05）,且实验3、4、5组吸光度值与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）;弓形虫对CNE-2Z细胞增殖抑制率分别是4％、9％、16％、20％和23％,其中实验4、5组吸光度与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：弓形虫逮殖子对体外培养的HPB—ALL细胞和CNE．2z细胞增殖有不同程度的抑制作用．     

PPAR-γ配体罗格列酮对胆管癌细胞增殖抑制作用的实验研究

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)配体罗格列酮(RGZ)对胆管癌细胞增殖的影响.方法 采用不同浓度RGZ对胆管癌细胞系QBC939进行干预,计算不同浓度下QBC939细胞的增殖抑制率,用流式细胞技术检测各浓度下细胞周期变化和凋亡发生率.结果 RGZ对胆管癌细胞有明显的增殖抑制作用,以1200 mg/L浓度组最为明显,最高增殖抑制率达83.66%;在1200 mg/L、600 mg/L、300 mg/L、150 mg/L、75 mg/L和37.45 mg/L组经48 h和72 h培养处理后,细胞增值抑制率与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.001).细胞周期亦受到明显的调控,高浓度组有62.77%细胞停滞于G0/G1期.结论 PPAR-γ配体RGZ在体外对胆管癌细胞系QBC939有明显的增殖抑制作用.     

盐酸阿比朵尔抗腺病毒7型的实验研究

目的:明确抗病毒新药盐酸阿比朵尔体外抗腺病毒7型(ADV-7)的作用方式。方法:主要通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性、病毒滴定3种方法从药物抗病毒生物合成、药物直接杀伤病毒以及药物抗病毒吸附3方面检测盐酸阿比朵尔的作用方式。结果:盐酸阿比朵尔对ADV-7无直接杀伤作用,也不能阻止ADV-7的吸附和穿入,各用药组均出现典型的CPE,但盐酸阿比朵尔能明显抑制ADV-7的生物合成作用,对细胞的半数毒性浓度(CC50)为85.37 mg/L,对ADV-7的半数有效浓度(IC50)为15.39 mg/L,治疗指数(TI)为5.55,且随着药物浓度的增加,病毒所致的CPE效应逐渐减弱,培养液中的病毒滴度也逐渐降低,而病毒抑制率则明显升高。结论:盐酸阿比朵尔在体外通过抑制病毒生物合成而发挥抗ADV-7的作用,其具体作用机制有待进一步研究。     

腺病毒介导的HSV-TK基因系统联合羟基喜树碱对人膀胱癌细胞的体外杀伤作用

目的 研究腺病毒介导的HSV-TK系统联合羟基喜树碱(HCPT)对人膀胱癌细胞的体外杀伤作用.方法 使用含有HSV-TK基因、绿色荧光蛋白(GFP)基因的复制缺陷腺病毒转染人膀胱癌细胞T-24细胞,表达GFP为转染成功标志,同时观察转染率,PCR检测TK表达.以正常T-24细胞为空白对照,转染成功后分别加入GCV、GCV HCPT,采用MTT法测定单纯HCPT作用于人膀胱癌细胞72 h细胞增殖抑制率、各组治疗转染后人膀胱细胞24、48、72 h细胞存活率;流式细胞仪检测GCV(0.5 mg/ml) HCPT(10 mg/L)作用T-24细胞4h后的凋亡情况.结果 随着浓度的增高,HCPT对T-24细胞的生长抑制率逐渐增高,HCPT浓度为0.01 mg/L时T-24生长抑制率为14%,50 mg/L时T-24生长抑制率为63%,当HCPT浓度大于100 mg/L时,抑制作用无明显增加(P=0.216).GCV组、GCV HCPT各组对转染后细胞有明显杀伤作用(P=0.00),GCV HCPT组随HCPT浓度增高和作用时间的延长,杀伤效率明显增高.0.5 mg/ml GCV单独作用于转染后的膀胱癌细胞72 h后,细胞存活率为34.6%,GCV(0.5 mg/m1) HCPT(10 mg/L)组的细胞存活率仅为8.07%(P=0.00).GCV 10 mg/mlHCPT作用后4h,T-24细胞出现M1期前典型的细胞凋亡峰,凋亡率达52.93%.结论 HSV-TK/GCV系统联合HCPT治疗能增强自杀基因系统对人膀胱癌的杀伤作用,能够良好地诱导人膀胱癌细胞的凋亡.     

汉防己甲素对肝癌耐药细胞抑制作用机制研究

目的:应用汉防己甲素(tetrandrine,TET)作用于肝癌耐药细胞系,探讨TET及其联合抗癌药物抑制肝癌耐药细胞系增殖的可能机制。方法:肝癌耐药细胞株BEL-7402/DOX经TET或联合多柔比星(doxorubicin,DOX)处理后,MTT法检测肝癌耐药细胞抑制率,荧光分光光度计测定的D值计算细胞内DOX的浓度,Fura-2/AM方法测细胞内Ca2+的浓度。结果:TET对BEL-7402/DOX细胞的增殖有一定的抑制作用,并可增加DOX对BEL-7402/DOX细胞的抑制作用,且呈剂量相关性。不同浓度的TET与DOX合用均可显著增加BEL-7402/DOX细胞内的DOX浓度(P<0.05～0.01)。浓度为5.0 mg/L、10.0 mg/L的TET均可显著降低BEL-7402/DOX细胞内的Ca2+浓度(P<0.05,P<0.01)。结论:TET及其联合抗癌药抑制肝癌耐药细胞系增殖的机制,可能与其降低细胞内Ca2+浓度,阻抑信息传递,提高细胞内DOX浓度有关。     

156株肺炎支原体对14种抗生素的药敏分析

目的 了解肺炎支原体对临床常见14种抗生素的敏感情况及其特点,用于说明肺炎支原体药敏检测在临床的意义.方法 用商品化试剂盒考察临床收集并确认的156株肺炎支原体菌株对14种抗生素的药敏情况.结果 14种抗生素的敏感率分别是:依托红霉素(58.3%)、美满霉素(94.2%)、强力霉素(92.3%)、红霉素(54.5%)、阿奇霉素(71.2%)、交沙霉素(76 9%)、乙酰螺旋霉素(70.5%)、克林霉素(74.3%)、克拉霉素(68.6%)、罗红霉素(64.1%)、环丙沙星(60.9%)、莫西沙星(87.8%)、左氧氟沙星(82.7%)、加替沙星(86.5%).结论 肺炎支原体在临床耐药情况日趋严重,药敏检测对有效快速治疗意义重大.     

RNA 干扰 ERCC1基因表达对人卵巢癌耐药细胞 DDP、PGPIPN 敏感性的影响

目的：探讨 RNA 干扰核苷酸剪切修复偶联因子1（ERCCl）基因表达对人卵巢癌耐药细胞 DDP、PGPIPN 敏感性的影响。方法实验分为空白对照组、特异性转染组和非特异性转染组。采用 MTT 法测定 PGPIPN、DDP 对3组细胞的增殖抑制率,RT-PCR 法检测 PGPIPN 对3组细胞乳腺癌易感基因1（BRCAl）基因表达的影响。结果 MTT 法结果显示,PGPIPN 作用人卵巢癌耐药细胞 SKOV3/ DDP 48 h,对其增殖有一定的抑制作用,在浓度为40、60 mg/ L 时,与浓度为0 mg/ L 比较,差异有统计学意义（ P <0.05）;DDP、PG-PIPN 分别作用特异性转染组细胞48 h,其增殖明显受到抑制,与0 mg/ L 比较,差异均有统计学意义（ P <0.05）;RT-PCR 法结果显示,PGPIPN 作用特异性转染组细胞48 h,其BRCAl 基因表达随着 PGPIPN 浓度升高而明显降低,在浓度为40、60 mg/ L 时,与 PGPIPN 浓度为0 mg/ L 比较,差异有统计学意义（P <0.01）。结论 PGPIPN 对 SKOV3/ DDP 细胞的增殖有一定的抑制作用,并且通过干扰 ERCCl 基因表达可以明显增强 SKOV3/ DDP 细胞对 DDP、PGPIPN 的敏感性,同时可增强 PGPIPN 对 BRCAl 基因的下调水平。     

苦参素对人肝正常细胞L02影响的实验研究

目的探讨不同浓度苦参素(OM)作用不同时间对人肝正常细胞L02的损伤作用或不良反应。方法体外培养人肝正常细胞L02;采用MTT法观察不同浓度的OM作用不同时间后观察肝正常细胞L02细胞形态变化及增殖的情况。结果倒置显微镜下观察:与阴性对照组相比较,OM作用时间在24h、浓度为0～2.0mg/ml时L02细胞的形态及数量无明显变化,当作用时间超过24h后,随着时间延长、浓度增加,OM实验组L02细胞收缩变小、与周围细胞分离、细胞核周围较多空泡样结构均越明显,细胞数量逐渐减少。MTT检测结果显示:①当作用时间在24h时,与阴性对照组相比较,OM浓度为0.5mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml时对正常肝细胞L02的增殖无明显抑制作用(P>0.05),浓度为3.0mg/ml、4.0mg/ml、8.0mg/ml时对人肝正常细胞增殖有不同程度的抑制作用(P<0.05),其抑制率分别为8.48%、15.43%、51.72%;②OM 1.0mg/ml、2.0mg/ml、3.0mg/ml、4.0mg/ml、8.0mg/ml各浓度组作用于L02细胞48h和72h的抑制率分别为18.79%、26.06%、27.58%、31.52%、76.36%和33.20%、38.53%、41.82%、55.61%、89.95%。与24h相比较,作用48h、72h对正常肝细胞的增殖有不同程度的抑制作用(P<0.05或P<0.01)。结论 OM在低浓度短时间内对人正常肝细胞L02无明显损伤或不良反应,但随着浓度增加、作用时间延长对人正常肝细胞L02的增殖有不同程度的损伤或不良反应,且呈时间-剂量依赖性。