实验性骨延长区TGF—β1的基因表达和细胞定位

目的 了解骨延长过程中TGF-β1基因在骨延长区组织细胞的表达和定位,从分子水平探讨延长区骨修复的机制。方法 采用胫骨上干骺端截骨延长（1.0mm/d）动物模型,14只山头分7个时相点取材。通过延长区组织冰冻切片,TGF-β1地高辛记的cDNA探针原位杂交。结果 延长早期延长区阳性表达细胞逐渐增加（15d）到进取高峰,此阶段主要定位于增生的纤维细胞血管内皮细胞;以后细胞阳性表达率迅速下降,定位于延长区骨小梁边缘的成骨细胞。结论 TGF-β1在延长区骨修复过程中具有重要作用,提高和维持延长区TGF-β1基因高水平有效表达,可能对促进加快延长区骨愈合具有重要的意义。     

转化生长因子β1在下颌骨牵引成骨过程中的作用

目的 :研究TGF β1在不同时期下颌骨牵引成骨过程中表达水平的变化 ,探讨其可能发挥的作用。 方法 :恒河猴 16只 ,10只行单侧下颌骨牵引 ,6只行双侧下颌骨牵引 ,采用下颌角部骨截开术 ,5d间歇期后以每天0 .5mm× 2次的速度牵引 ,共 15d。分别于牵引完成时、牵引后 2、4、6、12周时处死一组动物。将牵引区骨块制作脱钙石蜡切片 ,进行HE染色及TGF β1免疫组化染色。结果 :牵引完成后早期阶段 ,TGF β1阳性着色颗粒广泛分布于牵引区的纤维血管基质、成骨细胞及成软骨细胞中 ,尤其是在截骨断端的血肿区 ,TGF β1的阳性着色最强。在稳定期 ,牵引区TGF β1的阳性着色逐渐减弱 ,主要见于胶原纤维矿化、成骨细胞形成类骨质的区域 ,且主要位于血小板、血管内皮细胞及成骨细胞胞浆中。牵引完成后 12周 ,除骨髓腔中纤维血管基质可见少量TGF β1的阳性着色颗粒外 ,在骨外膜、骨基质及骨细胞内已见不到明显的TGF β1的阳性着色。结论 :TGF β1活跃参与了牵引区新骨的形成过程 ,它在刺激和诱导骨前体细胞及原始间充质细胞增殖分化 ,促进牵引区成骨细胞及血管内皮细胞增生方面可能发挥了重要作用。     

转化生长因子β1基因转染人肝癌细胞及其对MMP-2，9表达的影响

目的　通过对人肝癌细胞株 (SMMC 772 1)转染TGF β1基因 ,观察该细胞MMP 2 ,9表达的变化。方法　用电穿孔法进行基因转染 ,并经Westernblot ,Northernblot法作鉴定 ,后分别应用Northernblot,Westernblot法观察该细胞株表达MMP 2 ,9mRNA和MMP 2蛋白的变化。结果　经转染TGF β1基因的细胞株MMP 2mRNA和蛋白表达均高于对照组 ,但MMP 9mRNA表达则没有变化。结论　TGF β1可促进肝癌细胞MMP 2表达 ,表明TGF β1可能在肝癌发生浸润和转移过程中也发挥重要作用     

转化生长因子β1在哮喘豚鼠气道壁中的表达及牛磺酸干预的研究

目的 :初步探讨转化生长因子 β1(TGF - β1)在哮喘豚鼠气道壁中的表达和细胞来源及牛磺酸的干预效果。方法 :采用卵蛋白腹腔注射法复制哮喘豚鼠模型。实验动物分三组 :哮喘组 (A组 ) ,牛磺酸组 (B组 ) ,盐水对照组 (C组 ) ,比较三组豚鼠气道壁中TGF - β1的含量 ,粘膜下TGF - β1阳性细胞数 (mm2 )和上皮细胞TGF - β1阳性百分比。结果 :三组豚鼠气道壁中均有广泛的TGF - β1阳性表达。与C组相比 ,A组豚鼠气道壁TGF - β1含量增高显著 (P <0 .0 1) ;气道上皮细胞TGF - β1阳性百分比差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;粘膜下TGF - β1阳性细胞数差异非常显著 (P <0 ,0 1) ;B组豚鼠气道壁TGF - β1含量显著下降 (P <0 .0 1)。结论 :TGF - β1存在于正常豚鼠及哮喘豚鼠的气道壁中 ,但哮喘时含量明显增多 ,可能主要来源于粘膜下的嗜酸细胞 ;牛磺酸能下调气道壁中TGF - β1的含量。     

乳头状甲状腺癌中转化生长因子-β及其受体的基因表达

目的　探讨转化生长因子 β(TGF β)及其受体基因的表达与乳头状甲状腺癌的关系。 方法　取甲状腺手术标本 ,其中乳头状甲状腺癌 8例、桥本甲状腺炎症 7例、甲状腺腺瘤 8例和正常甲状腺组织 8例 ,扩增TGF β1、TGF β2 、TGF β3 、TGF β受体Ⅰ、TGF β受体Ⅱ及TGF β受体Ⅲ基因 ,比较各种基因在不同组织中的表达水平。结果　TGF β1在 4种组织中表达阳性率均较高 ,但在乳头状甲状腺癌中的表达丰度高于其他 3组 (P<0 .0 5 )。TGF β受体Ⅰ在乳头状甲状腺癌组织中表达阳性率低于其他 3组 ,表达丰度也明显降低 (P <0 .0 5 )。TGF β2 、TGF β3 、TGF β受体Ⅱ及TGF β受体Ⅲ在 4种组织中均部分表达 ,且表达量的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　TGF β1表达水平上升和TGF β受体Ⅰ表达水平下降可能与乳头状甲状腺癌的发生有关 ,TGF β2 、TGF β3 、TGF β受体Ⅱ及TGF β受体Ⅲ基因与乳头状甲状腺癌可能不存在相关性     

TGF-β1对大鼠肾小球系膜细胞ⅩⅧ型胶原表达的影响

目的　探讨转化生长因子 β1(TGF β1)对ⅩⅧ型胶原在大鼠肾小球系膜细胞中表达的影响 ,以及两者在大鼠抗Thy 1肾小球肾炎中的相互关系。方法　采用RT PCR、Westernblot法观察外源性TGF β1对大鼠肾小球系膜细胞中ⅩⅧ型胶原表达的影响 ;制备大鼠抗Thy 1肾小球肾炎模型 ,应用免疫组织化学ABC方法分别观察TGF β1和ⅩⅧ型胶原在大鼠肾组织中的表达 ,并对其染色强度作图像定量分析。结果　外源性TGF β1作用后 ,大鼠肾小球系膜细胞中ⅩⅧ型胶原的表达升高 ,并显示出一定的时间与浓度依赖性。大鼠抗Thy 1肾小球肾炎中TGF β1的表达在 1、3和 5d仅有微量表达 ,第 7天开始其表达明显且随时间增强 ;ⅩⅧ型胶原和Ⅳ型胶原的表达趋势都与TGF β1吻合 ,ⅩⅧ型胶原的表达与TGF β1的表达间具有显著的相关性。结论　ⅩⅧ型胶原的表达与TGF β1的作用相关 ,可能参与了肾小球肾炎的发生发展过程 ,并且可能在肾小球纤维化中起一定的作用     

PRK术后转化生长因子β1 mRNA表达的实验研究

目的 :探讨准分子激光角膜切削术 (PRK)后转化生长因子β1(TGF β1)在角膜伤口愈合和角膜雾状混浊发病机制中的作用。方法 :将 2 4只新西兰大白兔 (2 4只眼 )随机分为正常组 (n =4 )和手术组 (n =2 0 )。手术组每只左眼行PRK术 ,术中采用准分子激光器 ,角膜中央激光去上皮 ,然后按 10 .0 0D近视进行切削 ,分别于术后第 7d ,14d ,2 8d和 3月于裂隙灯下观察记录角膜haze的变化并处死动物 ,将角膜组织制成石蜡切片 ,应用原位杂交技术检测角膜组织中TGF β1mRNA的表达。结果 :①从术后第 7d开始 ,术眼均不同程度地发生了角膜haze ,严重者可达 3级 ,haze高峰约在术后第 2 8d。②正常角膜上皮中TGF β1mRNA有低水平表达 ,PRK术后第 7d ,14d和 2 8d ,角膜上皮TGF β1mRNA表达明显增高 ,术后 3月已开始降低 ;正常组角膜基质中未检测出TGF β1mRNA ,术后第 7d ,14d和 2 8d ,角膜基质中TGF β1mRNA表达明显增高 ,术后 3月己开始降低。结论 :TGF β1可能参与了PRK术后的伤口愈合 ,它可能通过促进角膜基质细胞的增殖和细胞外基质的合成而促进角膜haze的发生。     

全反式维生素A酸对小鼠囊胚转化生长因子β_1蛋白表达的影响

目的:探讨全反式维生素A酸(ATRA)对体外培养小鼠囊胚转化生长因子β1 (TGF β1 )蛋白表达的作用,并了解其对着床前期胚胎发育的影响作用。方法:获取妊娠3.5 d小鼠囊胚,分别培养在含0,0.1,1,10μmol·L-1的ATRA的M199培养基中24 h,用免疫组织化学SP法,分别检测不同剂量组 ATRA对小鼠囊胚 TGF β1蛋白表达的状况。结果:ATRA可增强小鼠囊胚TGF β1 蛋白表达,表达强度呈现剂量依赖型。结论:ATRA对小鼠胚胎的发育具有细胞毒性作用,TGF β1 在小鼠胚胎发育的调节中发挥了重要的作用。     

DCN基因转染对大鼠肾系膜细胞生长及表型改变的影响

目的　通过观察转染DCN基因的大鼠系膜细胞 (MsC)生长及其一些表型的改变 ,为其用作细胞载体回输入大鼠肾病模型体内进行基因治疗奠定实验基础。方法　采用MTT比色法和流式细胞仪技术 ,检测该MsC株生长情况 ;Northernblot和Westernblot法检测其TGF β1mRNA、ColⅣmRNA和TGF β1蛋白表达水平 ;半定量RT PCR法检测其TIMP 2mRNA表达的改变。结果　与未转染MsC相比 ,转染DCN基因的MsC株的生长受到明显抑制 (5d时P <0 .0 5 ,6d时P <0 .0 1) ;G0 /G1期比例增加 ,S期比例降低 ,提示其生长缓慢 ;TGF β1和ColⅣmRNA表达明显降低 ,TGF β1蛋白分泌减少 ;TIMP 2mRNA表达明显下调。 结论　转染DCN基因的MsC可被用作载体开展对大鼠系膜增生性肾炎的实验治疗。     

RT-PCR检测人烧伤愈合中TGF-β_1的表达

目的　通过对烧伤愈合不同阶段人皮肤组织中转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA表达变化的研究 ,阐明TGF β1对促进愈合的调节作用。方法　取人深Ⅱ度烧伤后 5d、7d、12d手术切除的烧伤区皮肤组织 ,采用RT PCR后电泳扫描求积方法 ,检测各时相烧伤皮肤组织TGFβ1mRNA表达量的变化。结果　人深Ⅱ度烧伤皮肤TGFβ1mRNA在伤后 7d出现表达高峰 ,5d与 12d也有表达增强。结论　TGFβ1对烧伤患者创伤愈合有促进作用。     

大鼠肝纤维化中PDGF和TGF-β1的动态改变

目的　探讨肝纤维化过程中血小板衍生生长因子(PDGF)和转化生长因子 (TGF β1)表达的动态变化。方法　采用CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型 ,分别于造模的第 3、7、10周末处死动物 ,取肝组织石蜡包埋 ,制作组织芯片 ,免疫组织化学SP法检测PDGF、TGF β1的改变。结果　正常肝组织不表达或微弱表达PDGF、TGF β1,纤维化的肝组织PDGF、TGF β1表达明显增强 ,并随肝纤维化时间的延长而增强 (P <0 0 5 ) ,第 7、10周间表达差异无显著性。两者的表达呈正相关。结论　PDGF和TGF β1是参与肝纤维化发生发展的重要生长因子     

大肠癌组织中TGF-α、TGF-β1的表达及其意义

目的 :探讨转化生长因子α(TGF α)和转化生长因子 β1(TGF β1)在大肠癌组织中表达的相关意义。方法 :应用免疫组织S P法对大肠癌细胞进行检测。结果 :TGF α、TGF β1在大肠癌中的阳性表达率分别为6 2 .90 %和 6 9.35 % ,明显高于二者在大肠腺瘤、正常粘膜中的表达 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,癌旁粘膜中的表达高于正常粘膜 (P <0 .0 5 ) ;TGF α在高、中分化腺癌中的表达低于低分化腺癌 (P <0 .0 5 ) ;DukesA +B期中二者的表达低于DukesC +D期 (P <0 .0 5 ) ;二者在大肠癌中的表达有相关性 (P <0 .0 5 ,Pearson列联系数 =0 .4 1)。结论 :大肠癌TGF α、TGF β1过度表达与大肠癌发生、发展、Dukes分期、癌组织浸润、转移范围有关 ;TGF α与腺癌分化程度有关 ;少部分大肠癌旁粘膜已偏离正常细胞生长状态 ,具有肿瘤细胞生长代谢的某些特征。     

转化生长因子-β1、β3及其受体βRI、βRII mRNA及蛋白在子宫肌瘤组织中的表达

人体内卵巢雌孕激素通过局部的生长因子以自分泌或旁分泌的形式调节肌瘤细胞的生长和分化 ,转化生长因子 β(transforminggrowthfactor β ,TGF β)是备受关注的一种。其在哺乳动物中存在 3种形式 ( β1、β2、β3)及 3种受体 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型 )。人体组织纤维化、免疫抑制、肿瘤发生以及其他功能失调均与TGF β1、TGF β3行为异常有关。本研究通过免疫组织化学、原位杂交 2种方法 ,分别从基因和蛋白水平上了解TGF β1、TGF β3及其受体TGF βRⅠ、TGF βRⅡ在子宫肌瘤及邻近健康肌层中的表达 ,初步探讨TGF β1、TGF β3及其受体…     

转化生长因子-β及其受体在人类IgA肾病的表达

目的　探讨转化生长因子 (TGF) β及其受体 (TGF βR)在人类IgA肾病及正常肾组织中表达的差异。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)及表达丰度定量法检测IgA肾病组和正常对照组肾组织中TGF β1～ 3 、TGF βRⅠ～Ⅲ的mRNA表达。 结果　IgA肾病组TGF β1的表达明显高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,而TGF βRⅠ的表达在IgA肾病组明显降低 (P <0 .0 5 )。两组间TGF β2 及TGF βRⅡ、Ⅲ表达的差异无显著性。结论　IgA肾病中 ,TGF β促进系膜细胞增殖及促进细胞外基质蛋白合成和沉积的作用可能是通过非经典通道实现的 ,其生长抑制作用却因TGF βRⅠ的低表达而丧失 ,同时TGF βRⅠ表达的降低又反馈性地刺激TGF β1过度表达。而TGF β2、3 及其受体的表达可能与IgA肾病无密切关系。     

转化生长因子β1在鼻息肉中的表达

目的 :探讨TGF - β1在息肉组织中的分布及在鼻息肉发生发展过程中的作用。 方法 :检测标本 84份 ,其中 6 5份是鼻息肉、12份是慢性鼻窦炎 ,7份是正常鼻黏膜 ,用免疫组化 (SP法 )检测TGF - β1的表达。结果 :TGF - β1在绝大部分息肉 (5 5 /6 5 )中呈Ⅲ～Ⅳ级表达 ,11例鼻窦炎 (11/12 )为Ⅱ～Ⅲ级表达 ,3例正常鼻黏膜 (3/7)为Ⅱ级表达 ,3组间两两比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。炎细胞、上皮细胞和纤维母细胞是TGF- β1的主要染色细胞。 结论 :TGF - β1由息肉中炎性细胞和结构细胞等产生 ,参与息肉的发生发展 ,在息肉的组织增生和化生中起重要作用     

转化生长因子β_1对软骨样细胞整合素和吞噬细胞糖蛋白-1表达的影响

目的 :检测软骨样细胞 (HEMCSS)α1β1,α2 β1,α5 β13种整合素 (integrins)和吞噬细胞糖蛋白 - 1(CD4 4 )的表达 ,及转化生长因子 β1(TGF - β1)对它们表达水平的影响。方法 :HEMCSS是永生性软骨肉瘤细胞 ,培养于含10 %胎牛血清 ,不含或含 1,5 ,10ng·ml-1的TGF - β1的培养液 ,培养时间 2 4h。共聚焦显微镜观察α1β1,α2 β1,α5 β1和CD4 4在HEMCSS细胞上的表达和分布 ,流式细胞仪检测α1β1,α2 β1,α5 β1和CD4 4在HEMCSS细胞上表达的水平。结果 :共聚焦显微镜结果显示 ,HEMCSS细胞膜表面均有α1β1,α2 β1,α5 β1及CD4 4表达。流式细胞仪检测表明 ,加入TGF - β1,培养HEMCSS细胞 2 4h后可诱导α1β1,α2 β1,α5 β1的表达增加 ,并呈剂量依赖趋势。而 3种不同浓度的TGF - β1培养 2 4h后均减少了HEMCSS细胞CD4 4表达。结论 :TGF - β1可以调节HEMCSS细胞膜上细胞外基质受体的表达 ,从而调节软骨细胞与细胞外基质成分的结合 ,对调节软骨细胞的功能起着重要的作用。     

转化生长因子β_1在毛细血管瘤组织中的表达

目的 :探讨TGF β1 在毛细血管瘤病理演变过程中的作用。方法 :通过免疫组织化学方法及图像分析技术 ,观察并分析TGF β1 在不同时期小儿皮肤毛细血管瘤组织中的表达变化。结果 :退化期血管瘤组织中TGF β1 表达阳性面积率及平均光密度明显高于增生期血管瘤组织 ,两者经统计学处理具有显著差异性 (P <0 .0 5 )。结论 :由此提示TGF β1 可能是影响小儿皮肤毛细血管瘤增生与退化的重要因素     

转化生长因子β1在涎腺肿瘤中的表达及意义

目的　探讨转化生长因子 β1(TGF β1)在涎腺良、恶性肿瘤中的表达及其意义。 方法　应用免疫组化方法研究了 4 0例涎腺良、恶性肿瘤石蜡标本。结果　良性肿瘤和低度恶性肿瘤呈强阳性或阳性表达 ,高度恶性肿瘤呈阴性或弱阳性表达 ,其差异具有显著性 (P <0 .0 1)。结论　TGF β1的表达程度可能和肿瘤的分化程度或恶性程度有关     

转化生长因子β1对大肠癌细胞增殖与侵袭能力的影响

目的:观察 TGF β1 对大肠癌细胞增殖与侵袭能力的影响。方法:体外培养大肠癌细胞株 SW480 和LS174T,加入不同浓度的 TGF β1,应用 MTT法检测不同浓度的 TGF β1 对 SW480 和 LS174T细胞增殖的影响,MatrigelTM侵袭试剂盒检测不同浓度的TGF β1 对 SW480 和 LS174T细胞运动和侵袭能力的影响,免疫细胞化学(SP法)检测SW480和LS174T细胞TGF βRⅡ蛋白和Smad 4蛋白的表达。结果:不同浓度的TGF β1(0.1, 1.0,10.0μg·L-1)对SW480和LS174T细胞的增殖均无影响(P>0.05)。TGF β1 能显著促进 SW480 细胞的运动与侵袭能力, 3 种浓度的 TGF β1 (0. 1, 1. 0, 10. 0μg·L-1 )作用于 SW480 细胞 24 h 后,侵袭率分别为 30. 2%、41.1%和41.7%,与对照组的侵袭率18.6%相比明显升高,而在 LS174T细胞中却观察不到此种效应。免疫细胞化学显示 SW480 细胞表达 TGF βRⅡ蛋白,但不表达 Smad 4 蛋白;而 LS174T细胞表达 Smad 4 蛋白却不表达TGF βRⅡ蛋白。结论:TGF β1 能促进SW480细胞的侵袭能力,这种作用不依赖于Smad 4信号途径,TGF β1 发挥生长抑制和促进侵袭能力的作用可能是通过不同的信号路径实现的。     

供体脾脏对大鼠移植胰腺细胞凋亡的影响

目的: 观察供体脾脏对胰腺移植大鼠免疫反应的影响。方法: 制作异基因大鼠胰、脾、十二指肠联合移植模型,观察供体胰腺的病理学改变,测定供体胰腺组织中细胞凋亡的变化、转化生长因子β1 (TGF β1 )mRNA的表达及CD4+ T淋巴细胞和CD8+ T淋巴细胞的变化。结果: 胰、脾、十二指肠联合移植组:术后 3 d胰腺小叶间质水肿,腺泡细胞和胰岛细胞轻度水肿;术后5 d炎细胞浸润,腺泡细胞灶状坏死;术后7 d腺泡细胞和胰岛细胞部分坏死、自溶。胰、十二指肠移植组:术后3 d胰腺腺泡细胞片状坏死;术后 5 d胰腺小叶和部分胰岛细胞坏死;术后7 d腺泡细胞大片坏死,胰岛结构消失。胰、脾、十二指肠联合移植组供体胰腺组织中凋亡细胞数和 TGF β1mRNA的表达于术后各时点均高于胰、十二指肠移植组(P<0.001);其 CD4+ 和 CD8+ T细胞数高于正常对照组,但低于胰、十二指肠移植组(P<0.001)。结论: 细胞凋亡和 TGF β可减轻受体大鼠对供体胰腺的免疫排斥反应;调高供体胰腺组织TGF βmRNA的表达是供体脾脏发挥免疫抑制作用的机制之一。