草药S抑制大鼠移植肾排斥反应中MHC ClassⅡ分子表达的研究

为探索草药Ｓ抗大鼠同种异体肾移植急性排斥的作用机理，采用改进的Ｆａｂｒｅ和Ｋａｍａｄａ大鼠原位移植模型，将ＳＤ大鼠肾移植给Ｗｉｓｔａｒ大鼠为同种异种异体移植，Ｗｉａｔａｒ移植给Ｗｉｓｔａｒ大鼠为同品系移植（空白对照），共设五个实验组，观察移植后受体鼠存活、检测移植肾功能及定量测定移植肾内ＭＨＣ ＣｌａｓｓⅡ抗原分子的表达。结果表明，草药Ｓ能延长受体鼠存活时间，并抑制ＭＨＣ ＣｌａｓｓⅡ在移植肾内的     

血清IL-2水平在大鼠心脏移植术后早期急性排斥反应诊断中的意义

大鼠同种异体心脏异位移植模型实验动物分为：对照组、 Ａ Ｌ Ｓ 组、 Ｃｓ Ａ 组及不用药组,分别于术后２ 、４ 、６ 天应用 Ｍ Ｔ Ｔ 法测定受体大鼠血清 Ｉ Ｌ－ ２ 水平,并于处死后行病理组织学检查。其中 Ａ Ｌ Ｓ 组为受体胸腺内注射供体脾细胞及腹腔注射 Ａ Ｌ Ｓ（ 抗淋巴细胞血清） 移植组。实验结果：不用药组的 Ｉ Ｌ－ ２ 水平较对照组、 Ａ Ｌ Ｓ 组、 Ｃｓ Ａ 组明显增高。病理组织学检查不用药组的排斥反应明显高于其它３ 组。结论：受体胸腺内注射供体脾细胞同时腹腔内注射 Ａ Ｌ Ｓ可诱导产生同种异体心脏移植免疫耐受。在心脏同种异体移植排斥反应中,受体血清 Ｉ Ｌ－ ２ 水平的增高可作为诊断心脏同种异体移植术后早期急性排斥反应的一个有效指标。     

草药S抑制大鼠移植肾排斥反应中MHC Class Ⅱ分子表达的研究

为探索草药Ｓ抗大鼠同种异体肾移植急性排斥的作用机理，采用改进的Ｆａｂｒｅ和Ｋａ－ｍａｄａ大鼠原位肾移植模型，将ＳＤ大鼠肾移植给Ｗｉｓｔａｒ大鼠为同种异体移植，Ｗｉｓｔａｒ移植给Ｗｉｓｔａｒ大鼠为同品系移植（空白对照），共设五个实验组，观察移植后受体鼠存活、检测移植肾功能及定量测定移植肾内ＭＨＣＣｌａｓⅡ抗原分子的表达。结果表明，草药Ｓ能延长受体鼠存活时间，并抑制ＭＨＣＣｌａｓⅡ在移植肾内的表达（与不用药物组比较Ｐ＜０．０１），Ｓ药加小剂量环孢素Ａ（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅＡ，ＣｓＡ）治疗组与同系组相比差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。这些结果提示，移植肾内ＭＨＣＣｌａｓｓⅡ表达水平的高低与其排斥的强弱有相关性。     

cuff技术血管连接法及Tacrolimus免疫抑制效果研究

ＤＡ和Ｌｅｗｉｓ鼠分别作为移植的供受体。采用Ｃｕｆｆ微血管吻合技术,建立大鼠异位心脏移植模型,移植术后分别使用不同浓度的Ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ与非治疗组比较,观察Ｔａｒｃｏｌｉｍｕｓ对同种心脏移植的免疫抑制作用。提示Ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ对大鼠同种心脏移植排斥反应有明显的抑制作用。     

SD大鼠同种异体结膜移植的免疫组织化学

用免疫组织化学方法观察ＳＤ大鼠同种异体结膜移植术后结膜植片的临床和局部免疫情况。结果显示：实验组动物结膜移植片的ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＭΦ、ＢＣ在术后第１天与术后４周出现２个峰值，ＤＣ在术后４周也明显升高，至１２周时以上各指标恢复到正常结膜水平。第１天的结果应为同种异体结膜移植术后发生的创伤性反应所致。第４周的结果揭示受体动物受异体抗原刺激后，有发生免疫排斥反应的可能性。１２周后各指标恢复正常，说明机体通过某种机制抑制了免疫排斥反应的发生。     

SD大鼠同种异体结膜移植的免疫组织化学

用免疫组织化学方法观察ＳＤ大鼠同种异体结膜移植术后结膜植片的临床和局部免疫情况，结果显示：实验组动物结膜移植片的ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ８，ＭΦ，ＢＣ在术后第１天与术后４周出现２个峰值，ＤＣ在术后４周也明显升高，至１２周时以上各指标恢复到正常结膜水平，第１天的结果应力同种异体结膜移植术后发生的制伤性反应所致，第４周的结果揭示受体动物受异体的抗原刺激后，有发生免疫排斥反应的可能性，１２周后各指标恢复正常     

CTLA4-Ig诱导大鼠同种肝细胞移植免疫耐受的实验研究

目的研究CTLA4-Ig诱导在D-氨基半乳糖致急性肝功能衰竭大鼠脾内同种异体肝细胞移植的免疫耐受。方法急性药物性肝衰模型:用10%D-氨基半乳糖溶液按1.0 g/kg一次性大鼠腹腔注射;用Ⅳ型胶原酶肝脏原位灌注,制备肝细胞悬液,浓度为4×107/ml,2 h内经脾移植;24只用D-氨基半乳糖诱导的急性肝衰大鼠,24 h后均进行经脾同种异体肝细胞移植,然后随机分为两组,一组为治疗组,腹腔一次性注射CTLA4-Ig,另一组为对照组,不予处理。两组均分别于术后第1,3,5,7天观察IL-2、TNF、肝功能及脾脏HE染色的变化。结果治疗组与对照组比较,术后治疗组IL-2含量明显下降,差异有显著性,P<0.05;术后TNF含量两组之间差异无显著性,P>0.05;术后肝功能治疗组比对照组下降明显,P<0.05。组织学改变:术后第7天治疗组仍可见肝细胞或肝细胞团,对照组脾内见大量淋巴细胞浸润,但很少见肝细胞。结论CTLA4-Ig能诱导大鼠经脾同种异体肝细胞移植的免疫耐受,促使急性肝衰大鼠肝功能得到改善。     

倒千里光碱处理SD大鼠永生化肝细胞同种脾内移植增殖实验研究

目的探讨倒千里光碱(Retrorsine, Rts)处理对SD大鼠永生化肝细胞同种脾内移植增殖效率的影响。方法SV40 T抗原转染法制备永生化肝细胞。成熟SD大鼠24只,随机分为A、B、C 3组,A组为Rts处理SD大鼠永生化肝细胞移植组;B组为Rts处理SD大鼠正常肝细胞移植组;C组为正常SD大鼠永生化肝细胞移植组。A、B两组SD大鼠分2次腹腔注射Rts,间隔2周,第2次注射Rts 4周后备用。20%肝叶切除后,3组SD大鼠分别行永生化肝细胞移植或肝细胞移植,常规病理切片检查脾内移植永生化肝细胞增殖效率,免疫组化检测脾脏内移植永生化肝细胞白蛋白表达,透射电镜检测移植永生化肝细胞形态。结果病理检查显示,肝细胞移植后3周内,3组SD大鼠脾脏内均可见移植肝细胞;免疫组化结果显示,3组SD大鼠脾脏实质内均可见散在棕黄色白蛋白颗粒,A组大鼠脾脏内肝细胞面数密度与B组比较无显著差异,但与C组有显著差异;透射电镜检测结果显示,脾内移植永生化肝细胞具有正常肝细胞的超微结构。结论脾内移植永生化肝细胞具有正常肝细胞的形态、结构及白蛋白表达功能;Rts可促进永生化肝细胞SD大鼠脾脏内移植的增殖效率。     

倒千里光碱处理SD大鼠永生化肝细胞同种脾内移植增殖实验研究

目的 探讨倒千里光碱(Retrorsine，Rts)处理对SD大鼠永生化肝细胞同种脾内移植增殖效率的影响。方法 SV40T抗原转染法制备永生化肝细胞。成熟SD大鼠24只，随机分为A、B、C3组，A组为Rts处理SD大鼠永生化肝细胞移植组；B组为Rts处理SD大鼠正常肝细胞移植组；C组为正常SD大鼠永生化肝细胞移植组。A、B两组SD大鼠分2次腹腔注射Rts，间隔2周，第2次注射Rts4周后备用。20%肝叶切除后，3组SD大鼠分别行永生化肝细胞移植或肝细胞移植，常规病理切片检查脾内移植永生化肝细胞增殖效率，免疫组化检测脾脏内移植永生化肝细胞白蛋白表达，透射电镜检测移植永生化肝细胞形态。结果 病理检查显示，肝细胞移植后3周内，3组SD大鼠脾脏内均可见移植肝细胞；免疫组化结果显示，3组SD大鼠脾脏实质内均可见散在棕黄色白蛋白颗粒，A组大鼠脾脏内肝细胞面数密度与B组比较无显著差异，但与C组有显著差异；透射电镜检测结果显示，脾内移植永生化肝细胞具有正常肝细胞的超微结构。结论 脾内移植永生化肝细胞具有正常肝细胞的形态、结构及白蛋白表达功能；Rts可促进永生化肝细胞SD大鼠脾脏内移植的增殖效率。     

白细胞介素10和γ干扰素基因表达在大鼠肝移植排斥反应诊断中的意义

目的:研究探讨白细胞介素10和γ干扰素基因表达在大鼠肝移植排斥反应诊断中的意义。方法:以成年、健康的二级雌性SD大鼠、Wistar大鼠为研究对象,体重为(250±20)g,实施肝移植手术,术后采用RT-PCT技术对大鼠白细胞介素10(IL-10)和γ干扰素基因(IFN-γ)表达进行检测,并以组织病理学结果为急性排斥反应的诊断标准,将大鼠分为排斥组与非排斥组,对比观察两组大鼠的IL-10与血清IFN-γ含量及移植肝脏内IL-10与IFN-γ基因表达情况。结果:同系移植组肝移植后肝细胞、组织、结构轻微变化,同种异体移植组则变化显著,严重紊乱。同系移植组血清IL-10含量最高,显著高于同种异体移植组与对照组(P0.05);同种异体移植组IFN-γ含量最高,显著高于同系移植组与对照组(P0.05)。同系移植组肝脏IL-10 m RNA表达水平显著高于对照组与同种异体移植组(P0.05);同种异体移植组IFN-γm RNA表达水平显著高于对照组与同系移植组(P0.05)。结论:大鼠肝移植手术后发生排斥反应的IL-10表达显著降低,IFN-γ表达显著增高,两者表达的变化可作为早期诊断肝移植术后急性排斥反应的诊断指标,为临床诊断提供依据。     

腹部多器官联合移植研究进展

既往两个以上的脏器同时出现功能衰竭时曾被认为是器官移植的绝对禁忌证,但近年来由于移植外科技术和相关学科的迅速发展,腹部多器官的联合移植成为解决这个难题的新的有效措施。胰肾联合移植、肝肾联合移植、肝肠联合移植和全腹腔多器官簇移植使腹部外科的领域和范畴得到了进一步拓展。     

腹部大器官联合移植的临床研究

目的 探讨腹部大器官联合移植治疗腹部多器官功能衰竭的效果。方法 2例I型糖尿病并发尿毒症患者施行改良式胰液肠腔引流胰、十二指肠及肾一期联合移植,1例高龄酒精性肝硬化终末期并慢性肾功能不全尿毒症患者施行一期肝肾联合移植,1例慢性乙型病毒性肝炎、肝硬化、原发性肝细胞癌合并胰岛素依赖型糖尿病患者施行同期原位肝-异位胰十二指肠联合移植,观察其临床疗效。结果 2例胰肾联合移植患者术后第5天肾功能恢复正常,术后第10天停用胰岛素,2例均分别于术后20、22 d出现消化道出血,经止血治疗后痊愈;肝肾联合移植患者术后第3天移植肝肾功能正常,术后第10天移植肝发生急性排斥反应,抗排斥治疗后逆转;肝胰联合移植患者术后第5天停用胰岛素,移植肝功能恢复正常。4例患者分别随访29、26、9、6月,移植物功能均正常。结论 腹部大器官联合移植是腹部多器官功能衰竭的有效治疗方法,肝胰联合移植可减少胰腺的排斥反应,促进移植肝功能恢复。     

大鼠卵巢经培养前后异体移植的实验研究

目的：为恢复失去卵巢功能妇女体内性激素的作用,本实验将大鼠卵巢异体皮下移植,观察移植效果。方法：分别将SD大鼠新鲜卵巢及培养后卵巢异体皮下移植。通过观察阴道脱落细胞、子宫重量的变化,移植物的组织形态学及测定血清雌二醇(E2)水平了解卵巢移植鼠体内激素分泌状况。结果：新鲜移植组,3／10只受体鼠阴道脱落细胞显示有雌激素作用,子宫重量及血清E2显著高于去势组,移植物表面无明显血管网形成,组织切片可见大量原始卵泡和及少量发育卵泡。培养后移植组,6／10只受体鼠阴道脱落细胞显示有雌激素作用,子宫重量及血清B水平显著高于去势组,与新鲜移植组无显著差别。移植物表面可见少量微血管分布,组织切片可见较多的发育卵泡。结论：异体皮下移植可降低组织的免疫源性,而经体外培养后可进一步降低免疫源性,利于移植物存活,为临床组织器官同种异体移植提供实验依据。     

异种骨复合自体骨髓基质干细胞修复节段性骨缺损

目的探讨异种骨复合骨髓基质干细胞(MSCs)修复节段性骨缺损的可行性。方法将MSCs与异种松质骨在体外联合培养,兔桡骨中上段制成1.5 cm的骨-骨膜缺损模型,实验组植入复合异种骨,对照组植入单纯异种骨,空白对照组不植入任何材料,分别于术后4、8、12周各时间点行标本的组织学观察、X线片观察、透射电镜观察及骨密度测试,比较其骨缺损区骨修复情况。结果术后第12周,实验组骨缺损区完全修复,骨密度接近正常;对照组骨缺损区修复缓慢,新骨形成量少;空白对照组骨缺损区未修复。结论异种骨复合MSCs修复节段性骨缺损能力强,在成骨速度和量上明显优于单纯异种骨。     

腹部多器官联合移植的围手术期处理

目的 总结腹部多器官联合移植的围手术期处理经验。方法 我院自2001年10月至2005年1月共施行19例腹部多器官联合移植术,其中胰肾联合移植6例、肝肾联合移植12例、肝胰联合移植1例;分析手术方法、免疫抑制剂的使用和术后并发症处理的方法。结果 19例患者手术均获成功,术后发生FK506中毒1例(5.3%),发生急性排斥反应3例(15.8%),消化道出血发生2例(10.5%),腹腔出血1例(5.3%),肺部感染1例(5.3%),经相应治疗后好转。结论 腹部多器官联合移植成功的关键是作好供体选择、保证供器官质量、选择适当手术方式、术后合理应用免疫抑制剂以及有效防治术后并发症。     

供体脾细胞输注增强CTLA4Ig致小鼠皮肤移植耐受的研究

目的：研究联合应用供者特异性脾细胞输注（donor-specific-spleen-cell-transfusion,DST)与CTLA4Ig对促进小鼠皮肤移植物存活的作用。探索CTLA4Ig促进移植物存活的作用机制。方法：单独或联合应用CTLA4Ig及供者特异性脾细胞输注，同时行皮肤移植，观察皮肤移植物存活时间并检测受者脾细胞对供者细胞的单向混合淋巴细胞反应。结果：联合应用供者特异性脾细胞输注及CTLA4Ig使小鼠皮肤移植物的存活时间延长，并使受者脾细胞对供者细胞的反应性特异性降低，与未处理组、单用CTLA4Ig或供者特异性脾细胞输注处理组相比有显著性差异（P＜0．01）。结论：联合应用供者特异性脾细胞输注及CTLA4Ig可促进皮肤移植物的存活。移植物中过客淋巴细胞的存在可能对CTLA4Ig诱导免疫耐受有促进作用。     

小鼠颈部心脏移植模型的改进

目的　探讨小鼠颈部心脏移植模型的改进和研究心脏移植再灌注损伤及急性排异反应。方法　将Chen氏术式加以改进 ,将供心主动脉与受体颈总动脉行端侧吻合 ,进行 6 0次小鼠颈部心脏移植。结果　新方法使供心总缺血时间缩短至 30min ,7d存活率提高到 98%。结论　改进后的模型简单实用 ,提高了小鼠颈部心脏移植存活率 ,值得推广。     

脱细胞保鲜异种骨移植免疫反应的实验研究

目的　研究脱细胞保鲜异种骨移植的免疫排斥反应。方法　以大鼠为动物模型 ,分别植入脱细胞保鲜牛皮质骨(PBCTB)和松质骨 (PBCCB)、新鲜骨 (FBC)、去抗原牛松质骨 (BCB) ,采用体外二次刺激增殖实验 ,酶联免疫吸附实验及局部组织学观察 ,研究移植后大鼠体内的细胞免疫、体液免疫及宿主对该移植物的局部病理反应。结果　保鲜牛皮质骨、松质骨显著降低了异种骨的抗原性、其中保鲜松质骨尤佳 ,与BCB相比较 ,没有统计学差异。结论　脱细胞处理的保鲜松质骨显著降低了细胞的免疫原性 ,同时可以避免化学毒物的残留 ,是一种理想的植骨材料。     

兔异体异位下丘脑-垂体移植的实验

目的 探讨幼兔的下丘脑－－垂体异体异位移植后,细胞成活及内分泌重建的可能性,方法 以徒手定向穿刺成兔垂体区,射频毁损垂体建立去垂体动物模型,将制备好的幼兔下丘脑－垂体组织植入模型兔的臀部肌肉内,放免测定术后１,３及８ｗｋ血清Ｔ４,ＰＲＬ,ＧＨ水平。结果 垂体去除组上述激素水平持续下降,移植组术后８ｗｋ上述激素恢复到术前水平,术后３ｗｋ移植物ＨＥ染色见垂体及下丘脑细胞结构良好,术后８ｗｋ透射电镜下见     

心肾联合移植中肾移植临床特点的初步分析

目的 初步分析我国首例心肾联合移植中肾移植的临床特点。方法 对1例58岁男性原发性扩张性心肌病伴慢性肾功能衰竭的患者实施同期心肾联合移植术，供心和供肾来自同一供体。结果 移植肾立即泌尿，但术后第1天尿量仅800ml，连续性肾脏替代治疗(CRRT)支持24h后血压逐渐升高，尿量显著增加而脱机。术后第3天移植心、肾功能恢复正常。术后第15天发生移植心、肾急性排斥反应，经处理后移植心肾功能正常至术后38d因肺部感染死亡。结论 不可逆转的心衰合并肾衰是心肾联合移植的适应证；移植心功能恢复、循环稳定后开始肾移植；心脏移植术中可能发生水、电解质、酸碱平衡紊乱，紧急抢救可采用单纯血液超滤；移植肾血流开放时短时间升高血压然后维持较低水平，以降低移植心负荷，肾功能采用CRRT替代，术后第2天，可升高血压增多尿量，撤除CRRT；应分别对两个移植器官进行排斥反应监测；肺部感染是联合器官移植的重要死亡原因。