基于肠运动药效学指标的半夏泻心汤君药问题研究

目的:从半夏泻心汤对肠运动影响的角度探讨半夏泻心汤君药问题。方法:采用均匀设计法对半夏泻心汤进行拆方,测定各配比组方对正常、肠运动抑制模型、肠运动亢进模型小鼠小肠推进率的影响,针对实验数据建立药味与药效指标(小肠推进率)的非线性影射模型,并应用该模型,分析半夏泻心汤中各药味在全方背景下的量效关系。结果:半夏对小鼠肠运动抑制及亢进模型具有双向调节作用。结论:半夏的药效学作用与半夏泻心汤具有某种程度上的一致性,提示半夏为半夏泻心汤之君药。     

五个胃肠复方对小鼠胃肠运动影响的比较研究

目的:观察比较半夏泻心汤、四逆散、左金丸、半夏泻心汤合四逆散(半四合方)、半夏泻心汤合四逆散及左金丸(半四左合方)等5个复方对小鼠胃排空、小肠推进的影响。方法:通过观察正常小鼠、胃肠运动抑制模型小鼠和胃肠运动亢进模型小鼠胃内葡聚糖蓝-2000排空率、小肠内葡聚糖蓝-2000推进率来研究5个复方对小鼠胃排空、小肠推进的影响。结果:对正常小鼠,左金丸抑制其胃排空和小肠推进,其余4个复方均促进其胃排空和小肠推进(P<0.05;P<0.01);对胃肠运动抑制模型小鼠,左金丸并不加重其抑制,其余四个复方均可减轻其胃肠抑制,但以半四合方和半四左合方效果较好(P<0.01);对胃肠运动亢进模型小鼠,5个复方均可减轻其亢进,但仅半四左合方有统计学意义(P<0.05)。结论:5个胃肠复方对不同病理状态小鼠胃肠运动呈现一定双向调节作用,以半四左合方作用为最佳,初步显示合方配伍组方有其科学性和先进性。     

保济丸对胃肠运动功能的影响

目的:研究保济丸对胃肠运动功能的作用。方法:通过观察保济丸(0.15,0.3,0.6 g.kg-1)对正常小鼠小肠推进功能、对肠肌运动亢进小鼠的小肠运动、对正常小鼠胃排空、对阿托品致胃肠运动功能低下小鼠胃排空的影响来评价来评价保济丸对胃肠功能的作用。结果:保济丸能明显抑制小鼠胃排空,增加胃中酚红的残留率;抑制正常小鼠及肠功能亢进小鼠的小肠推进作用,明显抑制推进距离和推进率。结论:保济丸具有解痉作用。     

生大黄、清半夏、常山的药性实验研究

目的:研究生大黄、清半夏、常山的升降浮沉药性。方法:观察生大黄、清半夏、常山水煎液对小鼠小肠推进和肠容积的影响;采用比色法测定小鼠血浆中乙酰胆碱酯酶(AchE)的活力;从与气机运动相对应的关系讨论药物的升降浮沉。结果:与对照组比较,生大黄组、常山组小肠推进率、肠容积皆有统计学意义(P0.05),生大黄组、清半夏组和常山组乙酰胆碱酯酶活力变化皆有统计学意义(P0.05)。结论:常山抑制小鼠胃肠道正常运动,表现出向上的趋势,为升浮药;生大黄和清半夏促进小鼠胃肠道的正常运动,表现出向下的趋势,为沉降药。     

痛泻要方对小鼠胃肠运动双向调节作用的研究

目的 通过观察痛泻要方对小鼠不同机能状态胃肠运动的影响,研讨痛泻要方对胃肠运动的双向调节作用.方法 采用大黄致小鼠腹泻模型、复方地芬诺酯致小鼠便秘模型及正常小鼠,观察不同剂量其对各组排稀便数量、次数、粪便直径及腹泻率、稀便率、稀便级、腹泻指数的影响;并通过对新斯的明致小鼠小肠推进功能亢进、阿托品致小鼠小肠推进功能抑制及正常小鼠小肠推进运动的影响,观察痛泻要方对小鼠小肠推进运动的调节作用.结果 痛泻要方对小鼠腹泻模型、新斯的明致小鼠小肠推进功能亢进均有一定抑制胃肠运动作用;对小鼠便秘模型.阿托品致小鼠小肠推进功能抑制均有一定促进胃肠运动作用;对正常小鼠及其小肠推进运动均无明显作用.结论 痛泻要方对小鼠不同机能状态胃肠运动有不同影响,具有双向调节作用,与中医方证相符、辨证论治相合.     

肠激安提取物对小肠吸收功能及推进运动的影响

目的:研究肠激安提取物对大鼠D-木糖吸收和小鼠肠推进运动的影响。方法:SD大鼠70只,随机分为正常对照组、模型对照组、复方谷氨酰胺肠溶胶囊组、盐酸小檗碱片组、肠激安提取物高、中、低(按生药量计为2.812,1.406,0.703 g.kg-1)剂量组i,g给药7 d;NIH小鼠154只,分组情况同大鼠,肠激安提取物高、中、低(4.062,2.031,1.016 g.kg-1)剂量组i,g给药7 d。通过测定血清D-木糖含量研究肠激安提取物对番泻叶1 g.kg-1致泻大鼠D-木糖吸收的影响,以及通过测定炭末推进率研究肠激安提取物对新斯的明致小鼠肠推进亢进的影响和该药对阿托品致小鼠肠推进抑制的影响。结果:肠激安提取物高、中、低剂量组的血清D-木糖含量明显高于ig番泻叶模型组(P<0.05);炭末推进率均明显低于新斯的明致小鼠肠推进亢进组和阿托品致小鼠肠推进抑制组(P<0.01)。结论:肠激安提取物具有增强小肠吸收功能和抑制肠推进运动的作用。     

半夏泻心汤对氟尿嘧啶致腹泻小鼠模型肠道免疫功能的影响

目的: 研究半夏泻心汤对氟尿嘧啶致腹泻小鼠模型肠道免疫功能的影响,揭示其治疗化疗相关性腹泻的作用机制. 方法: 采用腹腔注射氟尿嘧啶(40 mg·kg^-1)连续6 d,建立小鼠腹泻模型.随机分为6组:正常组,模型组,阳性药组(蒙脱石散1.17 g·kg^-1),半夏泻心汤高、中、低剂量组(2.5,1.25,0.625 g·kg^-1),造模前给药2 d,连续给药11 d.观察小鼠每日活动状况、进食量、体重、腹泻变化情况,检测胸腺、脾脏质量,取回肠组织做病理切片,采用ELISA法测定小肠中免疫球蛋白A(IgA)、血管活性肠肽(VIP)、白细胞介素15(IL-15)的含量. 结果: 与正常组比较,模型组小鼠化疗后腹泻加重,体重、胸腺及脾脏指数减小,肠道IgA,VIP的含量降低,而IL-15含量升高;与模型组比较,半夏泻心汤各剂量组能显著抑制氟尿嘧啶造成的小鼠体重降低、胸腺、脾脏指数减小,降低腹泻发生率,同时增加肠道IgA,VIP的含量,减少IL-15的含量(P<0.05或P<0.01). 结论: 半夏泻心汤能治疗化疗相关性腹泻,可能与其调节肠黏膜免疫功能有关.     

肠宁颗粒剂药效学实验研究

目的:观察肠宁颗粒对正常小鼠和脾虚小鼠的药理作用.方法:采用墨汁法观察了肠宁颗粒对新斯的明所致小肠推进运动亢进的影响,测定游泳时间观察其对鼠正常小鼠耐力的影响,通过计算湿粪数观察了肠宁颗粒对番泻叶所至泻下小鼠的止泻作用;同时观察了肠宁颗粒对大黄所致的脾小鼠体重、免疫器官重量及游泳时间的影响及肠宁颗粒对脾虚小鼠D-木糖吸收率及血精淀粉酶活性的影响.结果:肠宁颗粒能明显抑制小鼠小肠推进运动亢进;可显著延长小鼠的游泳时间;其低、中、高剂量均可使泻下模型小鼠湿粪数明显减少,腹泻程度减轻;能使脾虚小鼠体重增长明显加快同时,延长了脾虚小鼠的游泳时间,高剂组小鼠胸腺系数有明显增加;可明显增加脾虚小鼠木糠吸收,同时可明显降低其血清淀粉酶活性.结论:肠宁颗粒能有效地抗疲劳和抑制小肠运动,有明显的止泻作用,对于脾虚小鼠有很好的治疗作用.     

痛泻要方对脑肠肽含量的作用与脑-肠轴调控相关性的实验研究

目的：通过对不同机能状态小鼠肠管运动、大鼠脑肠肽含量及二者相关性的影响,研讨痛泻要方对脑肠肽含量作用与脑-肠轴调控相关性。方法：通过对新斯的明致小鼠小肠推进功能亢进、阿托品致小鼠小肠推进功能抑制及正常小鼠小肠推进运动的影响,观察痛泻要方对不同机能状态胃肠运动的影响,并通过测定大鼠下丘脑、血清、肠组织中多种下丘脑与胃肠运动密切相关的脑肠肽的含量变化及之间变化的关系,观察痛泻要方对脑肠肽含量的影响,及其与胃肠运动之间关系,以探讨该方对胃肠运动、脑肠肽含量的作用及其与脑-肠轴调控作用的关系。结果：痛泻要方对新斯的明致小鼠小肠推进功能亢进均有一定抑制胃肠运动作用;对阿托品致小鼠小肠推进功能抑制均有一定促进胃肠运动作用;对正常小鼠小肠推进运动均无明显作用;痛泻要方对大鼠下丘脑、血清、胃肠组织中5-HT、SP等多种与胃肠运动密切相关的脑肠肽的含量具有调节作用。结论：痛泻要方对小鼠不同机能状态胃肠运动有不同影响,具有双向调节作用,与痛泻要方作用于脑-肠轴不同层次、不同部位脑肠肽的含量有关。提示痛泻要方可通过对脑肠肽含量影响而调节胃肠运动,与脑-肠轴调控有相关性。     

半夏泻心汤对脾虚便秘小鼠肠道菌群与肠黏膜的影响

目的:观察半夏泻心汤对脾虚便秘小鼠肠道菌群与肠黏膜的影响。方法:将24只昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、枳术汤组和半夏泻心汤组,每组6只。模型组、枳术汤组、半夏泻心汤组采用灌胃番泻叶水煎液,7 d后控制饮食,饥饱失常8 d,构建小鼠脾虚便秘模型。造模结束后,半夏泻心汤组、枳术汤组分别采用半夏泻心汤和枳术汤灌胃,模型组和正常组均采用蒸馏水灌胃,共6 d,观察小鼠的肠道菌群变化及小肠病理切片情况。结果:半夏泻心汤组、枳术汤组、模型组所有肠道菌群数量均明显多于正常组(P0.05),半夏泻心汤组和枳术汤组所有肠道菌群数量均少于模型组(P0.05),半夏泻心汤组的双歧杆菌数量明显少于枳术汤组(P0.05);半夏泻心汤组的乳酸杆菌、大肠杆菌、肠球菌少于枳术汤组,但差异均无统计学意义(P0.05)。模型组肠道发生炎症反应及杯状细胞明显减少。枳术汤组空肠组织绒毛形状由短锥形变成指尖形,盲肠组织中的杯状细胞未见明显恢复或增多,隐窝深度也未见明显变浅;半夏泻心汤回肠组织的炎症症状改善明显,小肠绒毛完整性恢复,固有层排列十分紧密有序,杯状细胞数量明显恢复,隐窝深度变浅。结论:半夏泻心汤能有效调节脾虚便秘小鼠紊乱的肠道菌群,改善炎症症状,恢复小肠绒毛的完整性,使黏膜隐窝深度变浅。     

治泻方对小肠运动与吸收的实验研究

目的 通过本实验,观察治泻方对小鼠小肠运动功能及对兔小肠吸收功能的影响,探讨治泻方的药效机理.方法 用治泻方药液灌喂小鼠,以蒸馏水灌喂作为对照,然后各组灌喂印度墨汁,处死小鼠后记录墨汁在小肠移动的长度;将治泻方药液与台式液混合,分别配制成浓度为5％泻台液、10％泻台液,并以台式液作为对照液,将这三组药液分别注入兔小肠,然后抽出各段肠液进行氯离子测定.结果 在体小肠运动实验中A、B、C三组小鼠墨汁移动的平均百分率分别为52.55％ (SD=8.24)、54.35％(SD=12.53)、59.45％ (SD=14.17),其中A组、B组分别与C组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);在小肠吸收功能实验中5％、10％泻台液与台式液比较,差异均有统计学意义(x2值分别为6.92、46.18,P＜0.01),表明5％、10％泻台液均可促进小肠对氯离子的吸收,其中10％泻台液作用更佳.结论 治泻方不影响小鼠在体肠管的运动功能并能促进兔小肠吸收功能.     

化瘀祛痰方及其拆方对HepG2细胞胆固醇代谢的影响及机制研究

目的:观察化瘀祛痰方药及其拆方对人肝癌细胞株HepG2胆固醇代谢的影响,探讨该方药的作用机制,并比较方药全方及各拆方的疗效及调控作用.方法:SD大鼠随机分为空白对照组、化瘀祛痰方全方组、补气组、化瘀组、祛痰组,生理盐水和相应中药予以ig,连续8d.给药量为全方组17.9g·kg-1,补气组7.5 g·kg-1,化瘀组5.4 g·kg-1,祛痰组4.2 g·kg-1,空白对照组ig等量生理盐水.第9天腹主动脉采血,分离血清.体外培养HepG2细胞,随机分为6组,即①空白对照组、②ox-LDL刺激组、③化瘀祛痰方全方组、④补气组、⑤化瘀组、⑥祛痰组.其中②组加入终质量浓度为50 mg·L-1 ox-LDL,③～⑥组用相应含药血清(10％)预处理24 h后加入终质量浓度为50 mg·L-1 ox-LDL,各组细胞培养24 h后进行各项指标测定.采用MTT法检测细胞活性;胆固醇氧化酶终点法检测HepG2细胞总胆固醇含量;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)、B类Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)、胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1) mRNA表达.结果:50 mg·L-1 ox-LDL作用于HepG2细胞使其细胞活力显著降低至对照组的(59.37±18.21)％,细胞总胆固醇含量显著升高(幅度为71.52％).而化瘀祛痰方全方、补气方、化瘀方、祛痰方显著升高细胞活力分别至(76.52±24.38)％,(68.13±20.35)％,(72.63±21.56)％,(73.92±23.47)％(P＜0.05或P＜0.01),全方、化瘀方、祛痰方能显著降低HepG2细胞胆固醇含量,幅度分别为:28.77％,17.18％,25.09％.RT-PCR结果表明经ox-LDL诱导HepG2细胞HMGCR mRNA相对表达显著减少(P＜0.01),而SR-BⅠ和CYP7A1 mRNA相对表达显著增加(P＜0.01,P＜0.01).化瘀祛痰方及祛痰方含药血清均能显著降低HepG2细胞HMGCR mRNA水平(P＜0.01,P＜0.05),显著升高SR-BⅠ和CYP7A1mRNA水平(均P＜0.01).结论:化瘀祛痰方药全方及祛痰方可通过降低HMGCR水平和升高SR-BⅠ,CYP7A1水平从而影响胆固醇合成、摄取和转化,这可能是其调控脂质代谢发挥抗AS作用的机制之一.     

半夏泻心汤对小鼠小肠推进功能的影响

半夏泻心汤对正常小鼠小肠推进无明显影响,不能拮抗阿托品、左旋麻黄碱及吗啡引起的小肠推进减慢,而对芬氟拉明、多巴胺引起的小肠推进慢减及新斯的明引起的小肠推进加快均有明显的拮抗作用,提示该方对某些特异病因条件下的小肠推进机能的偏抑或偏亢可能具有双向调节作用,其作用机理可能与胆碱能和5－羟色胺能神经系统有关。     

化瘀祛痰方药及其拆方含药血清对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎症因子表达的影响

目的:观察化瘀祛痰方药及其拆方对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人脐静脉内皮细胞EA.hy926炎症因子表达的影响。方法:SD大鼠随机分为空白对照组、全方组、补气组、化瘀组、祛痰组,生理盐水和相应中药予以ig,第9天腹主动脉采血,分离血清。体外培养EA.hy926细胞,随机分为①正常对照组、②LPS刺激组、③全方组、④补气组、⑤化瘀组、⑥祛痰组、⑦空白血清对照组。其中②组加入终浓度为10 mg.L-1 LPS,③～⑦组用相应含药血清(浓度为10%)预处理24 h后加入终浓度为10 mg.L-1 LPS,各组细胞培养24 h后进行各项指标测定。RT-PCR法检测核因子-κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达;ELISA法检测TNF-α蛋白的表达;免疫荧光细胞化学法检测NF-κB蛋白的表达。结果:经LPS刺激后NF-κB和TNF-α的表达与正常组比较均明显升高(P<0.01)。全方组NF-κB和TNF-α的表达与刺激组相比明显受抑制(P<0.01);拆方各组中,化瘀组NF-κB和TNF-α的表达显著减少。补气、祛痰、空白血清对照组NF-κB和TNF-α的表达显著高于全方组;而化瘀组NF-κB和TNF-α的表达与全方组相比较无统计学差异。结论:化瘀祛痰方药及化瘀拆方可显著抑制内皮细胞炎症因子NF-κB和TNF-α的表达,这可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一。     

方剂组织药理学新假说

方剂的作用特点是多成分、多途径、多环节、多靶点，其所含药效物质是方剂研究的核心，探索中药方剂的药效物质基础是中药现代化的关键之一。中药血清药理学、方剂药动学和药效学研究取得了一定的成绩，但是以进行体外研究为主，也没有深入到病变靶组织层次。以急性胰腺炎动物模型为研究对象，采用高效液相色谱一质谱联用技术与方法检测模型动物口服或灌肠后胰腺组织内的有效中药成分谱，进而提出方剂组织药理学的理论假说，即以中医基本理论为指导，用药理学的方法研究中药(方剂)有效成分对病变靶组织的影响及其作用原理的科学；建立其实验方法学，寻找中药方剂靶组织作用的基础、原理和直接药效物质基础；可能产生新的相互有效方剂，并开辟中药方剂研究新领域。     

半夏泻心汤及其拆方抗幽门螺杆菌作用的研究

目的:探讨半夏泻心汤及其拆方抗Hp的作用.方法:运用琼脂扩散法、液体稀释法定性和定量检测半夏泻心汤及其拆方对Hp的抗菌作用 结果:在琼脂扩散法中,半夏泻心汤组对Hp抗菌作用优于辛温组和甘温组,差异有统计学意义(P＜0.05);半夏泻心汤组略优于苦寒组,差异无统计学意义(P＞0.05).在液体稀释法中,半夏泻心汤对Hp的最低抑菌浓度(MIC)与最低杀菌浓度(MBC)均为15.63mg/mL;辛温组和苦寒组对Hp的最低抑菌浓度(MIC)与最低杀菌浓度(MBC)均分别为62.50 mg/mL、31.25mg/mL.均在实验检测的浓度范围内(1.95 mg/mL ～ 250.00 mg/mL).结论:半夏泻心汤有较明显的抗菌作用,其中起优势作用的药物以苦寒药为主.     

化瘀祛痰方药对巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1、CD36表达的影响

目的:观察化瘀祛痰方药及其拆方对THP-1源性泡沫细胞腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)、CD36表达的影响,探讨该方药的作用机制,并比较方药全方及各拆方的疗效及调控作用。方法:体外培养THP-1细胞,佛波酯(PMA)使之巨噬化,氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)使巨噬细胞泡沫化。细胞随机分为空白对照组、模型组、补气组、化瘀组、祛痰组和全方组。油红O染色观察细胞浆脂滴变化,酶法测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(CE)的含量,并计算CE/TC值。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析ABCA1、CD36 mRNA水平。结果:模型组细胞TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著高于对照组(P<0.01);与模型组相比,全方组和祛痰组细胞TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著降低。RT-PCR结果提示模型组细胞ABCA1、CD36 mRNA水平显著升高;而化瘀祛痰方药及祛痰拆方含药血清可显著升高ABCA1 mRNA,显著降低CD36 mRNA水平。结论:化瘀祛痰方药及祛痰方可抑制ox-LDL诱导的THP-1细胞泡沫化,该作用可能与其上调ABCA1基因、下调CD36基因表达,从而减弱THP-1细胞对ox-LDL摄取有关。     

补肾法延缓免疫衰老的临床与实验研究

目的：观察补肾法延缓免疫衰老的临床疗效及相应的实验研究。方法：老年人22对（44名），采用随机分组，双盲给药（补方即补肾益寿胶囊和安慰剂）；实验研究则比较两个补肾方（右归饮和补肾益寿胶囊）和活血方（桃红四物汤）对老年大鼠T细胞凋亡及Fas、FasL基因表达的调控作用。结果：临床结果显示补肾组T细胞凋亡率比安慰剂组明显降低（P＜0．01），FasL基因表达亦明显降低（P＜0．05）。动物实验显示两个补肾方组老年大鼠T细胞凋亡均明显降低（P＜0．05），FasL基因表达亦明显降低（P＜0．01），而活血方组均无变化。结论：补肾法对老年人与老年大鼠T细胞FasL基因的转录具有负调控作用。这是补肾法下调老年人与老年大鼠T细胞过度凋亡的分子机理之一。     

补肾解毒活血法与益气补血法对骨髓抑制小鼠造血功能影响的比较研究

目的:比较补肾解毒活血法与益气补血法对环磷酰胺(CTX)所致骨髓抑制小鼠造血功能的影响及其作用机制的不同特点.方法:昆明种小鼠80只,随机分为4组,正常对照组、模型组、补肾解毒活血组(20.55 g·kg -1·d-1)和益气补血组(17.47 g·kg-1·d-1).采用CTX 100 mg·kg-1 ip,连续3d,制成骨髓抑制小鼠模型.各组于造模完成后次日开始ig连续10d.分别于造模前及造模后1,3,5,7,10,14 d动态检测外周血象;于末次给药次日后进行骨髓有核细胞计数(BMNC)及粒-单核系集落形成单位( CFU-GM)、红系集落形成单位(CFU-E)、和红系爆式集落形成单位(BFU-E)集落计数.结果:补肾解毒活血方和益气补血方均可明显升高模型小鼠的WBC,PLT,BMNC,可促进造血祖细胞(HPC)增殖,CFU-GM,CFU-E,BFU-E集落数均显著高于模型组(P＜0.01);补肾解毒活血方对血小板的恢复优于益气补血方.结论:补肾解毒活血方和益气补血方均可促进骨髓造血祖细胞集落生成,具有减轻和改善化疗后骨髓抑制的效果,而前者尤可减轻血小板减少、促进其恢复;其作用机制可能在骨髓细胞分化过程或造血微环境等途径上有不同.