鹿茸健骨滴丸对骨质疏松症大鼠肾组织和骨组织CaBP-D_(28k)表达的影响

目的:本实验采用具有糖皮质激素性骨质疏松症(GIO)的大鼠为实验对象,通过与服用鹿茸健骨滴丸后的大鼠股骨骨密度(BMD)及肾、骨组织CaBP-D_(28k)蛋白表达的比较,探讨糖皮质激素性骨质疏松症的病理机制及鹿茸健骨滴丸的疗效。方法:实验共采用82只Wistar大鼠,并将其随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、鹿茸健骨滴丸组(C组)及骨疏康组(D组)。采用后肢肌注地塞米松(2.5 mg·kg~(-1),每周2次)造模,造模同时,C、D组分别按0.88 g·kg~(-1)·d~(-1),2.1 g·kg~(-1)·d~(-1)剂量静脉给药,造模及给药9周后,应用XR-26型双能X线骨密度仪测定BMD,采用实时定量PCR法及Western Blot法测定肾组织和骨组织CaBP-D_(28k)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠BMD明显降低(P0.01),肾组织CaBP-D_(28k)蛋白表达明显下降(P0.01),然而骨组织CaBP-D_(28k)蛋白表达却明显升高(P0.01);与模空组对比,健骨滴丸组肾组织CaBP-D_(28k)蛋白表达量明显升高(P0.01),骨疏康组CaBP-D_(28k)蛋白表达量虽有升高趋势,但无统计学意义(P0.05)。骨组织CaBP-D_(28k)蛋白表达与模空组比较,健骨滴丸组蛋白显著降低(P0.01),骨疏康组明显降低(P0.05)。结论:地塞米松是诱发GIO的重要病理机制之一,其对肾钙转运过程产生抑制作用,鹿茸健骨滴丸和骨疏康均通过下调骨钙转运过程的相关蛋白表达,进而发挥抑制骨吸收的作用,达到治疗GIO的作用。     

补肾中药对地塞米松诱导的骨质疏松大鼠肾组织TRPV5表达的影响

目的:通过观察补肾中药对地塞米松诱导的骨质疏松大鼠肾组织TRPV5 mRNA和蛋白表达的影响,探讨糖皮质激素性骨质疏松症(GIO)的病理机制,以及补肾中药的疗效机制。方法:地塞米松肌肉注射复制GIO大鼠模型,实验设正常组、模型组、补肾组、健脾组、活血组及骨疏康组。造模及给药9周后,采用实时定量PCR法及Western Blot法测定肾组织TRPV5 mRNA和蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠骨密度明显降低(P<0.01),肾组织TRPV5 mRNA与蛋白表达均下降(P<0.01);与模型组比较,补肾组骨密度明显升高(P<0.01),TRPV5 mRNA与蛋白表达亦明显上调(P<0.01)。结论:补肾中药通过上调肾组织TRPV5 mRNA与蛋白表达而促进肾钙重吸收,达到治疗GIO的作用。     

心复康口服液对心梗后心衰大鼠心肌组织CK-MMmRNA及蛋白表达的影响

目的: 观察心复康口服液对心肌梗死心衰大鼠心肌组织肌型肌酸激酶同工酶(CK-MM)mRNA及CK-MM蛋白表达的影响。 方法: 采用结扎SD大鼠左冠状动脉前降支复制心肌梗死后心衰大鼠模型,大鼠随机分为假手术组(Sham 组)、模型组(Model 组)、Capt 0.1 g·kg^-1组(Capt 组)、心复康口服液组5.4 g·kg^-1(XFK组),分别于术后 24 h 灌胃给药,给药4周末,用Real-time RT-PCR方法, Western blotting方法检测心肌细胞能量穿梭关键酶CK-MM mRNA和蛋白表达水平。 结果: ①与假手术组比较,模型组左心室心肌CK-MM的mRNA表达水平下调,在第4周末,统计学有显著性意义(P<0.01);与模型组比较,Capt组、XFK组心肌CK-MM mRNA、蛋白表达均上调,在第4周末,统计学有显著性意义(P<0.01)。②与Captopril组比较,XFK组心肌CK-MM mRNA表达水平在第4周末下调,统计学有显著性意义(P<0.05);XFK组心肌CK-MM蛋白表达水平在第4周末比较无显著性意义。 结论: 心复康口服液可上调心梗后心衰大鼠心肌细胞CK-MM mRNA的表达,促进CK-MM蛋白含量增加,达到改善CHF心肌细胞能量穿梭紊乱,重塑心梗后心衰大鼠心肌能量代谢作用。     

生川乌配伍瓜蒌对大鼠长期毒性实验研究

目的: 观察生川乌配伍瓜蒌对大鼠长期毒性的影响,探讨该反药对配伍与毒性的关系。 方法: SD大鼠80只随机分为生川乌单行(RA)0.3 g·kg^-1、生川乌与瓜蒌(1:1)配伍(RAFT)0.3,0.1 g·kg^-1生川乌剂量组、空白对照组,每组20只,雌雄各半,连续ig给药30 d,末次给药24 h后,腹主动脉取血,取脏器计算脏器指数,检测心肌酸激酶(CK),乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转氨酶(AST),丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、肾尿素氮(BUN),血清肌酐(Cr)等生化指标,主要组织器官进行病理学检查。余1/3大鼠停药15 d后检测相应指标。 结果: 各给药组雌性大鼠肾脏系数高于对照组、胸腺系数低于对照组、红细胞数高于对照组(P<0.05),各给药组雌雄大鼠血清AST,ALT,LDH及BUN水平高于对照组 (P<0.05或P<0.01),RA组及RAFT 0.3 g·kg^-1组雌性大鼠血清Cr水平高于对照组 (P<0.05或P<0.01);RA组雌性大鼠AST,LDH水平高于RAFT 0.1 g·kg^-1组 (P<0.05或P<0.01);RAFT 0.3 g·kg^-1组雌性大鼠AST,ALT,Cr,LDH水平及雄性大鼠AST水平高于RAFT 0.1 g·kg^-1组 (P<0.05或P<0.01)。主要脏器常规HE染色,RAFT 0.3 g·kg^-1及RA组大鼠心、肝、肾均有一定程度损伤。恢复期末,RAFT及RA组雌性大鼠血清AST,ALT水平及雄性大鼠血清ALT水平高于对照组(P<0.05,P<0.01),RAFT及RA组AST,ALT水平差异无统计学意义。 结论: 在所给剂量下,生川乌对大鼠心、肝、肾有明显毒性,RAFT对大鼠心、肝、肾等器官的毒性与RA组比较无明显差异,RA及RAFT对雌性大鼠毒性强于雄性大鼠。     

六味补气胶囊对COPD肺气虚证模型STAT4,STAT6蛋白表达影响

目的: 观察六味补气胶囊对慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺气虚证模型大鼠细胞信号转导转录因子(STAT)4,STAT6蛋白表达影响及机制。 方法: 将大鼠随机分为正常组、模型组、六味补气胶囊高剂量组(六高组)、六味补气胶囊低剂量组(六低组)、金水宝胶囊组(中药对照)、脾氨肽组(西药对照),每组12只。除正常组外,其余大鼠采用烟熏加脂多糖(LPS)气管滴入方法建立COPD肺气虚证大鼠模型,模型复制成功第28天给药,各组给药剂量为:正常组、模型组:生理盐水0.09 g·kg^-1;六高组:六味补气胶囊0.16 g·kg^-1;六低组:六味补气胶囊0.04 g·kg^-1;金水宝组:金水宝49.5 mg·kg^-1, 脾氨肽组:灌服脾氨肽0.033 mg·kg^-1,1次/d,连续给药14 d。观察各组大鼠肺组织STAT4,STAT6蛋白表达变化。 结果: 与正常组比较,STAT4蛋白在COPD肺气虚证大鼠肺组织中表达的阳性面积增加、平均光密度增强 (P<0.01),而STAT6蛋白表达的阳性面积减小、平均光密度降低(P<0.01);经六味补气胶囊等药治疗后,较之模型组,各治疗组STAT4的表达面积减小、强度减弱,STAT6的表达面积扩大(P<0.05),各治疗组之间无明显差异。 结论: 六味补气胶囊可抑制COPD肺气虚证大鼠肺组织中STAT4蛋白表达,促进STAT6蛋白的表达。     

滋阴清热方对金黄地鼠血清性激素及雄激素受体mRNA表达的影响

目的: 探讨滋阴清热方对金黄地鼠血清性激素及雄激素受体表达的影响。 方法: 选用成年雄性金黄地鼠侧腹皮脂腺斑作为动物模型,随机分为4组,分别予生理盐水、滋阴清热方高剂量(18 g·kg^-1)、滋阴清热方低剂量(9 g·kg^-1)、安体舒通(10 mg·kg^-1)灌胃给药,每天1次。 4周后,采用ELISA法检测各组血清睾酮(T)、雌二醇(T₂)的水平,实时荧光定量PCR法检测各组皮脂腺斑处雄激素受体(AR)mRNA的表达水平。 结果: 滋阴清热方高、低剂量组与空白组比较,能降低血清T水平,但无显著性差异;高剂量组血清E₂水平升高,与空白组比较有显著性差异(P<0.05)。4组皮脂腺斑处AR mRNA的表达水平有显著性差异(P<0.05),清热滋阴方高剂量组与空白组比较有显著性差异(P<0.05)。 结论: 滋阴清热方可能是通过改善金黄地鼠血清雌二醇水平,并抑制局部雄激素受体mRNA的表达,而影响皮脂腺的增生。     

镇肝熄风汤对帕金森病模型小鼠神经行为学及黑质14-3-3、酪氢酸羟化酶表达的影响

目的: 观察镇肝熄风汤对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahy-dropyridine MPTP)诱导的C57BL/6小鼠帕金森病模型自主活动的影响及其可能机制。 方法: 连续灌胃14 d给予不同剂量的镇肝熄风汤(12.5, 25,50 g·kg^-1)和司来吉兰(10 mg·kg^-1)预处理,于给药第11天开始连续4 d C57BL/6小鼠皮下注射MPTP(30 mg·kg^-1)制备帕金森病小鼠模型。通过自主活动实验 观察动物行为学表现,采用实时定量RT-PCR法检测多功能蛋白14-3-3和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH) mRNA表达,Western blot方法检测多功能蛋白14-3-3,TH蛋白表达。 结果: 与模型组比较,镇肝熄风汤可显著增强帕金森病小鼠自主活动能力(均P<0.05),上调多功能蛋白14-3-3和TH mRNA和蛋白表达(均P<0.05)。 结论: 镇肝熄风汤具有抗实验性帕金森病的作用,其机制可能与上调多功能蛋白14-3-3和TH的mRNA和蛋白表达有关。     

地锦草水提液对移植性肝癌的抑制作用及对凋亡蛋白表达的影响

目的: 研究地锦草对移植性肝癌H22小鼠的抑制作用及对凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax和Caspase-3表达的影响。 方法: 复制小鼠移植性肝癌模型后,随机分为模型组、地锦草组和环磷酰胺组。地锦草低、中、高剂量组分别以66,132,264 mg·kg^-1 ig,环磷酰胺组1 mg·kg^-1 iv 1次,模型组和环磷酰胺组灌服同体积的蒸馏水,14 d后处死小鼠,剥离瘤组织,称肿瘤质量;比色分析法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;免疫组化法观察肿瘤组织Bcl-2,Bax和Caspase-3蛋白表达。 结果: 与模型组比较,地锦草治疗后肿瘤质量明显减轻(P<0.05);地锦草各剂量组与环磷酰胺组小鼠血清SOD均升高(P<0.05,P<0.01),血清MDA含量均下降(P<0.05,P<0.01);地锦草高、中剂量组及环磷酰胺组降低Bcl-2蛋白表达,同时提高Bax,Caspase-3蛋白表达(P<0.05),降低Bcl-2/Bax。 结论: 地锦草抗肿瘤机制可能是通过增强抗氧化防御系统抑制肿瘤细胞的生长,纠正机体凋亡蛋白与抗凋亡蛋白失衡,激活Caspase-3酶活性而诱导肿瘤细胞凋亡。     

复方雪莲胶囊对Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎的治疗作用

目的: 考察复方雪莲胶囊对Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎大鼠的治疗作用,并探讨其作用机制。 方法: 采用大鼠足趾部皮内注射牛Ⅱ型胶原乳剂,建立胶原诱导的关节炎模型(collagen-induced arthritis, CIA),设正常对照组、模型组、风湿定胶囊组(0.1 g·kg^-1)、复方雪莲胶囊(0.05,0.1,0.2 g·kg^-1)3个剂量组,于造模第14天分组并开始灌胃给药,连续给药14 d。观察复方雪莲胶囊对CIA大鼠关节肿胀的治疗作用;取关节滑膜组织做病理学检查;并用酶联免疫(ELISA)法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E₂(PGE₂)的水平。 结果: 造模14 d后,模型大鼠的足趾肿胀明显,与正常对照组比较,有显著性差异(P<0.01)。复方雪莲胶囊组可明显减轻CIA大鼠的足肿胀度,与模型组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01);各给药组关节滑膜组织病变与模型组比较明显改善;与模型组大鼠血清中TNF-α(51.3±16.8)ng·L^-1及PGE₂(683.3±174.7) ng·L^-1的水平比较,复方雪莲胶囊(0.1,0.2 g·kg^-1)剂量组大鼠血清中TNF-α[(24.5±13.9),(23.1±7.0)ng·L^-1]及PGE₂[(452.9±102.2),(466.8±88.4) ng·L^-1]的水平明显降低(P<0.01)。 结论: 复方雪莲胶囊对大鼠胶原性关节炎有一定的抑制作用,其作用机制可能与抑制炎症介质TNF-α及PGE₂的表达有关。     

瓜蒌-薤白对异丙肾上腺素诱导心肌缺血大鼠MAPKs信号通路的影响

目的: 探讨瓜蒌-薤白对心肌缺血损伤的保护作用机制。 方法: SD大鼠分为6组:正常组,模型组,瓜蒌25 g·kg^-1组,薤白12.5 g·kg^-1组,瓜蒌-薤白37.5 g·kg^-1组,阳性对照(普萘洛尔)0.02 g·kg^-1组,每组9只,连续给药14 d。心肌缺血模型完成后,开始给药,采用连续6 d腹腔注射异丙肾上腺素0.04 mg·kg^-1制造大鼠心肌缺血模型,给药14 d后,分离血清检测超氧化物歧化酶(SOD) 活性、丙二醛(MDA) 以及血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)含量。采用Western blotting 法观测瓜蒌-薤白对有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPKs)家族3个主要信号分子C-Jun氨基端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶(ERK)、p38磷酸化水平的影响。 结果: 与正常组相比,模型组大鼠血清中LDH,CK和MDA水平明显升高,SOD活性显著下降(P<0.05, P<0.01),与正常组相比,模型组P-p38 P-JNK P-ERK明显上调(P<0.05, P<0.01)。 与模型组比较瓜蒌,薤白,瓜蒌-薤白能显著降低血清中MDA,CK,LDH含量,瓜蒌-薤白降幅最大,与瓜蒌,薤白组比较有显著性差异(P<0.01)。瓜蒌-薤白组P-p38, P-JNK,P-ERK水平显著降低。 结论: 瓜蒌-薤白对心肌缺血损伤有保护作用,其机制可能是通过清除氧自由基、减轻氧化反应而抑制p38,JNK,ERK蛋白磷酸化以减轻缺血损伤,对心肌具保护作用。     

补肾、健脾、活血中药对地塞米松诱导骨质疏松大鼠骨组织TRPV5表达的影响

目的:观察地塞米松诱导的骨质疏松大鼠骨组织新型上皮钙通道( TRPV5)基因和蛋白表达的变化,探讨糖皮质激素性骨质疏松症( GIO)的发病机制,并比较补肾、健脾、活血中药的疗效及其调控作用.方法:Wistar大鼠132只,雌雄各半,随机分为正常组、模型组、补肾组(1.139 g·kg-1)、健脾组(0.945 g·kg-1)、活血组(0.504 g·kg-1)和骨疏康组(2.1 g·kg-1).地塞米松im造模(2.5 mg·kg-1),每周2次,造模及给药连续9周.测定离体股骨骨密度(BMD),生化法测定血清骨代谢指标,实时定量PCR与Western -blot法测定骨组织TRPV5 mRNA和蛋白表达.结果:模空组大鼠BMD明显降低(P＜0.01),血清骨吸收标记物TRAP含量明显升高(P＜0.01),骨组织TRPV5 mRNA与蛋白表达均上升(P＜0.01);补肾中药能明显增加模型大鼠股骨BMD(P ＜0.01),降低大鼠血清TRAP含量(P＜0.01),下调骨组织TRPV5 mRNA与蛋白表达水平(P＜0.01或P＜0.05).结论:补肾中药通过下调骨组织TRPV5 mRNA与蛋白表达而抑制破骨细胞骨吸收,从而起到抗骨质疏松的作用,其疗效优于健脾与活血中药.     

健骨片对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢、骨微结构及骨强度的影响

目的:研究健骨片对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢、骨质微结构及骨强度的作用。方法:将50只雌性SD大鼠随机分为假手术组(n=10),模型组(n=10),戊酸雌二醇片组(n=10),健骨片低剂量组(n=9),健骨片高剂量组(n=9)。除假手术组外,其余各组行卵巢切除建立大鼠骨质疏松模型,术后各组分别灌服相应药物或蒸馏水,给药剂量分别为戊酸雌二醇片组(0.1 mg·kg~(-1)·d~(-1)),健骨片低剂量组(0.35 g·kg~(-1)·d~(-1)),健骨片高剂量组(1.05 g·kg~(-1)·d~(-1)),连续12周。每周测定大鼠体重,给药结束后酶联免疫吸附测定(ELISA)测定大鼠血清骨钙素(OC)。测定血清碱性磷酸酶(ALP),抗酒石酸酸性磷酸酶(Str ACP),钙(Ca),磷(P)。Micro-CT扫描重建股骨微结构,检测骨矿含量(BMC),组织骨矿含量(TMC),骨密度(BMD),组织矿物质密度(TMD),骨体积分数(BV/TV),骨小梁数量(Tb N),骨小梁分离度(Tb Sp),骨小梁厚度(Tb Th)。三点弯曲法测定股骨刚度及最大载荷。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清OC,ALP显著升高,血清Ca,P明显降低(P0.05,P0.01);股骨远心端及中点骨小梁稀疏,缺失严重,BMC,TMC,BMD,TMD,BV/TV明显降低(P0.05,P0.01);股骨最大载荷显著降低(P0.05)。与模型组比较,健骨片低、高剂量组均明显降低血清OC及ALP,升高血清Ca,高剂量组明显升高血清P(P0.05,P0.01);骨参数分析显示,低、高剂量明显升高股骨BMC,TMC,BMD,BV/TV(P0.05,P0.01),高剂量组明显降低Tb Sp(P0.05);低、高剂量组均明显增加股骨刚度及最大载荷(P0.05,P0.01)。结论:健骨片可影响去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢,从而改善骨微结构,增加骨强度。     

益心脑滴丸对血小板聚集、血栓形成及凝血作用的影响

目的: 研究益心脑滴丸对血小板聚集、血栓形成及凝血作用的影响。 方法: 将Wistar大鼠随机分为5组,分别为正常组、阿司匹林组、益心脑滴丸高、中、低剂量组(906,453,226 mg·kg^-1,ig)。分别由ADP、凝血酶、CaCl₂诱导血小板聚集,采用比浊法观察益心脑滴丸对大鼠血小板聚集率的影响;通过毛细玻璃管法研究益心脑滴丸对血瘀模型大鼠凝血时间的影响,同时评价滴丸对大鼠凝血酶原时间(PT)及凝血酶时间(TT)的作用;采用大鼠动静脉旁路血栓形成法,检测益心脑滴丸抗血栓的作用。 结果: 益心脑滴丸各剂量组均可明显抑制ADP、凝血酶及CaCl₂诱导的大鼠血小板最大聚集率(P<0.05或P<0.01);能够不同程度延长大鼠 PT,TT及凝血时间(P<0.05或P<0.01);益心脑滴丸高、中剂量能够抑制大鼠血栓形成,减轻血栓质量(P<0.05或P<0.01)。 结论: 益心脑滴丸可以对抗血栓形成,具有抑制血小板聚集及抗凝血的作用。     

芪参益气滴丸对慢性心力衰竭患者心功能及血浆超敏C反应蛋白和B型脑钠肽的影响

目的:探讨芪参益气滴丸对慢性心力衰竭(CHF)患者心功能及血浆超敏C反应蛋(hs-CRP)和B型脑钠肽(BNP)的影响.方法:120例患者随机分为治疗组和对照组,均给予抗心力衰竭常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用芪参益气滴丸,疗程12周.治疗前后用彩色多普勒测定心功能指标左室射血分数(LVEF)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD);测定血浆hs-CRP和BNP水平.结果:两组患者治疗12周后临床疗效比较,差异有统计学意义(P＜0.05);两组治疗后心功能指标LVEF,LVESD,LVEDD水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);两组治疗后hs-CRP,BNP水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:CHF患者在常规治疗基础上加用芪参益气滴丸治疗,可明显降低血浆hs-CRP及BNP水平,同时降低LVESVI,LVEDVI,增加LVEF,改善心功能.     

芍药甘草汤及其拆方对超高温环境大鼠心肌、下丘脑TRPV3,TRPV4表达的影响

目的:通过观察芍药甘草汤及其拆方对超高温环境大鼠心肌、下丘脑瞬时感受器电位香草酸受体3(TRPV3)和瞬时感受器电位香草酸受体4(TRPV4)表达的影响,探讨芍药甘草汤及其拆方抗高温的机制。方法:SPF级SD雄性大鼠75只,适应饲养1周后,按体质量随机分为5组,分别为常温正常组,高温正常组,芍药甘草汤组(2. 16 g·kg~(-1)),单味白芍组(1. 08 g·kg~(-1))和单味甘草组(1. 08 g·kg~(-1)),除常温正常组外,均饲养于人工气候箱,各给药组按相应剂量连续给药13 d,常温正常组和高温正常组均给予同体积的纯净水;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)测定各组心肌、下丘脑TRPV3,TRPV4蛋白和m RNA的表达情况。结果:与常温正常组比较,高温正常组大鼠心肌TRPV3蛋白表达显著上升(P 0. 01);心肌TRPV4 m RNA表达明显下降(P 0. 05);下丘脑TRPV3蛋白表达显著上升(P 0. 01);下丘脑TRPV3 m RNA表达明显下降(P 0. 05)。与高温正常组比较,单味白芍组大鼠心肌TRPV3,TRPV4蛋白表达显著下降(P 0. 01);芍药甘草汤组与单味甘草组大鼠心肌TRPV4蛋白表达明显下降(P 0. 05);单味白芍组大鼠心肌TRPV4m RNA表达明显上升(P 0. 05)。结论:大鼠心肌、下丘脑TRPV3,TRPV4通道在高温环境下被激活,芍药甘草汤及其拆方抗高温机制与调节大鼠心肌、下丘脑TRPV3,TRPV4通道蛋白及m RNA表达有关。     

水蛭素对高尿酸血症大鼠尿酸盐转运体OAT1、URAT1、GLUT9表达的影响

目的 探究水蛭素对高尿酸血症大鼠的作用及机制。方法 雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、别嘌醇（30 mg/kg）组和水蛭素低、中、高剂量（0.2、0.4、0.8 g/kg）组。大鼠ig氧嗪酸钾（0.75 g/kg），1次/d，连续5周，建立高尿酸血症模型；同时各给药组分别ig相应剂量的药物，1次/d，连续5周。采用生化法检测大鼠血清和尿液中的尿酸水平；免疫组化法测定肾组织中有机阴离子转运蛋白1（organic anion transporter 1，OAT1）水平；Western blotting法测定肾组织中葡萄糖转运体9（glucose transporter 9，GLUT9）、OAT1、尿酸盐转运体1（urate transporter 1，URAT1）蛋白表达；qRT-PCR检测肾组织中GLUT9、OAT1、URAT1 mRNA表达。结果 模型组大鼠血清和尿液中尿酸水平显著升高（P<0.01），GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01），OAT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）；与模型组比较，水蛭素可显著降低大鼠血清和尿液中尿酸水平（P<0.01），显著下调GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达水平（P<0.01），显著上调OAT1 mRNA和蛋白表达水平（P<0.01）。结论 水蛭素可通过调控高尿酸血症大鼠肾脏尿酸盐转运体OAT1、URAT1、GLUT9的表达，从而发挥降尿酸作用。     

左归丸对去势大鼠钙转运通路相关蛋白的影响

目的:探讨左归丸对去势大鼠骨密度和骨组织中钙转运通路相关蛋白的影响。方法:选取48只雌性SD大鼠,随机分为正常组,假手术组,模型组,尼尔雌醇组(0.167 mg·kg^-1),左归丸低、高剂量组(9.6,38.4 g·kg^-1)。除假手术组和正常组,其余组切除大鼠卵巢,造模成功后3个月进行各组干预。3个月后处死大鼠,检测大鼠骨密度(BMD)和骨代谢标志物;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测钙转运通路(骨组织)瞬时受体电位通道V5(TRPV5),钙结合蛋白-D28K(CaBP-D28K),钠钙交换器1(NCX1)和细胞膜钙汞(PMCA1b)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组血钙降低(P<0.01),与模型组比较,左归丸高剂量组和尼尔雌醇组大鼠血钙显著升高(P<0.01);与正常组比较,模型组BMD显著降低(P<0.01),与模型组比较,左归丸高剂量组与尼尔雌醇组大鼠BMD均有改善(P<0.05);与假手术组和正常组比较,模型组各蛋白表达均有不同程度上调(P<0.05,P<0.01),与模型组比较,左归丸高剂量组中TRPV5蛋白表达有显著下调(P<0.01),各干预组中的CaBP-D28K与NCX1蛋白表达均有不同程度的下调(P<0.05,P<0.01),PMCA1b蛋白表达在左归丸低剂量组和尼尔雌醇组内表达均有不同程度下调(P<0.05,P<0.01)。结论:左归丸可不同程度的降低大鼠破骨细胞中TRPV5,CAPB-D28K,PMCA1b,NCX1等介导破骨细胞吸收钙离子的重要通道蛋白的表达,左归丸的抗骨质疏松机理有可能是通过抑制TRPV5介导的破骨细胞的骨吸收而起作用。     

归芪益元膏对重离子辐射诱发体内旁效应中Cyt-C，Bax及Bcl-2表达的影响

目的:探讨归芪益元膏对重离子辐射旁效应大鼠肺肾组织中细胞色素-C(Cyt-C)及Bax,Bcl-2基因表达的影响。方法:Wistar雄性大鼠随机分为7组,归芪益元膏组预先灌胃归芪益元膏2周(灌胃剂量为3.28 g·kg~(-1)·d~(-1)),正常组和辐射组灌胃等量生理盐水。2周后辐射组和归芪益元膏组大鼠右肺予2Gy~(12)C~(6+)离子束单次照射,正常组不予照射。照射后6,12,24 h处死各组大鼠,蛋白免疫印迹(Western blot),免疫组化及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠右肺、左肺、左肾组织中Cyt-C,Bax,Bcl-2蛋白及mRNA表达。结果:右肺、左肺、左肾中Cyt-C,Bax mRNA表达在照射后6,12,24h均明显上调,而蛋白表达只在照射后24 h明显上调,与正常组比较,差异有统计学意义(P0.01);右肺中,Bcl-2蛋白及mRNA表达只在照射后24 h明显下调,而左肺、左肾中照射后6,12,24 h均明显下调,与正常组比较,差异有统计学意义(P0.01)。右肺、左肺、左肾中,归芪益元膏组Cyt-C,Bax mRNA表达在照射后6,12,24 h较辐射各组明显下调,归芪益元膏组Cyt-C,Bax蛋白表达在照射后24 h较辐射组明显下调,差异有统计学意义(P0.01);右肺中,归芪益元膏组Bcl-2 mRNA及蛋白表达在照射后24 h较辐射组明显上调,左肺、左肾中,归芪益元膏组Bcl-2 mRNA及蛋白表达在照射后6,12,24 h较辐射各组明显上调,差异有统计学意义(P0.01)。结论:重离子辐射大鼠右肺后,左、右肺和左肾组织中Cyt-C,Bax,Bcl-2基因表达异常,归芪益元膏通过延缓Bcl-2表达的下调而抑制Bax,Cyt-C表达的上调,从而起到预防肺肾细胞凋亡,发挥其对重离子辐射诱发体内旁效应损伤的防护作用。     

莱菔承气汤对重症急性胰腺炎大鼠肾脏细胞凋亡的影响

[目的]探讨中药莱菔承气汤对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾脏细胞凋亡及凋亡基因Bax和Bcl-2表达的影响。[方法]健康Wistar大鼠72只,随机分为空白对照组(24只)、SAP模型组(24只)和莱菔承气汤治疗组(24只)。3组大鼠均于术后6 h,12 h,24 h心脏采血,检测血肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)。Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞术检测肾脏细胞凋亡指数,RT-PCR检测肾脏组织Bax、Bcl-2 mRNA的表达。[结果]与对照组相比较,随着时间变化,SAP模型组大鼠血肌酐、血尿素氮水平明显升高(P0.01),肾脏细胞凋亡指数趋于升高,Bax mRNA表达明显升高(P0.01),Bcl-2 mRNA表达明显下降(P0.01)。与SAP模型组相比较,莱菔承气汤治疗组大鼠血肌酐、血尿素氮水平明显下降(P0.01),肾脏细胞凋亡指数下降,Bax mRNA表达明显下降(P0.01),Bcl-2 mRNA表达明显升高(P0.01)。[结论]中药莱菔承气汤可能通过调节凋亡相关基因,减少肾脏细胞凋亡以减轻肾脏病理损伤,从而改善SAP时并发的急性肾功能障碍。