Toll样受体4表达与膝骨关节炎软骨细胞凋亡的关系

目的:探讨Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)表达与人膝骨关节炎软骨细胞凋亡的关系,明确TLR4介导的信号通路在骨关节炎发病机制中的作用。方法:取骨关节炎晚期行膝关节置换的关节软骨,剪碎后,采用酶消化法消化细胞,将处于对数生长期第3代细胞随机分为ZVF组、喜树碱对照组和阴性对照组,培养4周后,TUNEL法测定各组细胞凋亡情况,然后采用免疫组化染色和蛋白质印迹测定软骨细胞的TLR4蛋白表达。将软骨细胞随机分为对照组和TLR4抑制剂组,采用流式细胞仪和Caspase-3试剂盒测定两组细胞的凋亡情况。结果:用凋亡抑制剂ZVF和凋亡诱导剂喜树碱刺激体外培养的膝骨关节炎软骨细胞,培养4周后,蛋白质印迹结果显示喜树碱组TLR4蛋白表达最多,阴性对照组其次,ZVF组较阴性对照组的TLR4蛋白表达明显降低。免疫组化染色可见喜树碱组TLR4染色阳性细胞基本充满视野,荧光强度强;而阴性对照组可见一定数量染色阳性细胞,荧光强度一般;ZVF组只可见少量染色阳性细胞,荧光强度弱。流式细胞术结果显示TLR4抑制剂组软骨细胞凋亡率明显低于正常对照组;Caspase-3活化度检测结果同流式细胞术结果一致。结论:凋亡软骨细胞较正常软骨细胞的TLR4表达增加,而阻滞TLR4信号传导通路能有效抑制软骨细胞的凋亡。TLR4信号通路参与了软骨细胞的凋亡,在骨性关节炎的发病及进展中起着重要作用。     

氯沙坦和辛伐他汀对糖尿病大鼠BAX／BCL-2 mRNA的影响

目的：探讨氯沙坦和辛伐他汀对单肾切除糖尿病大鼠肾脏凋亡相关基因BAX／BCL-2mRNA的影响。方法：单肾切除SD大鼠分为对照组（C组）、糖尿病模型组（D组）、辛伐他汀治疗组（S组）、氯沙坦治疗组（L组）。采用实时荧光定量PCR法检测各组大鼠治疗2、10周肾皮质中BAX／BCL-2的mRNA表达。结果：比较各组BAX／BCL-2比值，2周S组明显高于其他组，10周D组明显高于其他组，D组10周较2周明显升高，S组10周较2周明显降低。结论：BAX／BCL-2在糖尿病肾病发生发展中起一定的作用。氯沙坦可能部分通过降低BAX／BCL-2比值，抑制糖尿病肾病晚期细胞凋亡，发挥肾脏保护作用。辛伐他汀对BAX／BCL-2比值有双相调节作用，早期可升高，晚期可降低。     

兔膝关节内侧副韧带重度损伤后重建手术对关节软骨保护作用的研究

目的 通过动物实验研究自体肌腱移植重建膝关节内侧副韧带对膝关节软骨退变的影响,为临床使用肌腱重建手术治疗严重膝内侧副韧带损伤,进而减少骨性关节炎的发生提供实验依据.方法 取24只成年新西兰大白兔,两侧膝关节内侧副韧带(MCL)于中段完全切断做成自身对照模型.随机选取实验组,模拟人半腱肌腱重建内侧副韧带进行手术,对照组未行重建手术.术后4、12、162L 24周分别安乐死处死6只兔子,通过组织学切片、免疫组织化学和电镜观察膝关节软骨细胞的凋亡及其凋亡调控基因BCL-2的表达情况.结果 组织学观察:实验组软骨的表面情况及软骨细胞的排列、形态均好于对照组,而且24周时对照组出现了大量的软骨陷窝内细胞消失.免疫组织化学:实验组和对照组均可见BCL-2阳性表达细胞,实验组中的BCL-2阳性表达细胞所占百分比与对照组比较,差异有显著性(P＜0.05).透射电镜:实验组各组仅出现退变的软骨细胞,未见凋亡的软骨细胞,对照组各组均出现了退变的软骨细胞和凋亡的软骨细胞,在24周组尤其严重.结论 MCL重度损伤后用半腱肌腱重建MCL,能够使软骨细胞的排列和形态较好的维持.MCL重度损伤后用半腱肌腱重建MCL能够减缓软骨的退变,减少软骨细胞的凋亡.     

硫酸氨基葡萄糖胶囊对兔膝关节软骨细胞凋亡的影响观察

目的观察硫酸氨基葡萄糖胶囊对兔膝关节软骨细胞凋亡的影响,为临床应用其治疗膝关节骨关节炎提供参考。方法采用30只新西兰兔,随机分为药物组、对照组和正常组各10只。药物组、对照组通过手术造成右膝关节失稳型动物模型,造模1周始躯赶全部兔子行走,连续4周,药物组并连续给药8周。造模后12周末处死所有动物,取右膝关节内侧胫骨平台软骨组织,采用原位末端标记法检测软骨细胞凋亡率,数据经统计学处理。结果对照组软骨组织退变明显,细胞凋亡率（30.50±4.72）%;药物组软骨组织退变较轻,细胞凋亡率（16.61±2.14）%;正常组软骨组织正常。细胞凋亡率（4.67±1.85）%。各组间细胞凋亡率比较差异有高度统计学意义（P〈0.01）。结论硫酸氨基葡萄糖胶囊可降低兔膝关节软骨细胞凋亡率,延缓软骨组织的退行性改变。     

健骨伸筋汤对大鼠膝关节软骨细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨健骨伸筋汤对大鼠膝关节软骨细胞增殖与凋亡的影响.方法 采用改良的Hulth法造模,造模2周后,开始对空白对照组、模型组生理盐水灌胃;对照组壮骨关节丸灌胃;治疗组分低、高浓度进行中药灌胃,第13周处死,通过免疫组化、TUNEL法检测软骨细胞的增殖与凋亡.说明健骨伸筋汤可以通过调节软骨细胞的增殖与凋亡防治骨关节炎.结果 健骨伸筋汤方含药血清各浓度组的软骨细胞增殖指数值明显高于对照组及模型组(P＜0.05),软骨细胞凋亡率明显低于对照组及模型组(P＜0.05).结论 健骨伸筋汤可以促进软骨细胞的增殖,还可以抑制软骨细胞异常凋亡,从而起到防治骨关节炎的作用.     

退变腰椎间盘组织中细胞凋亡及相关基因bcl-2和bax表达的研究

目的:探讨腰椎间盘退变的发病机制。方法:采用原位DNA片段末端标记和免疫组织化学方法,检测40例退变腰椎间盘组织及10例正常腰椎间盘组织细胞凋亡状态及凋亡相关基因bcl-2和bax蛋白的表达。结果:40例退变腰椎间盘组织凋亡指数(AI)均值为70.51,bcl-2蛋白阳性细胞百分比为10.12％,bax蛋白阳性细胞百分比为54.56％。10例正常腰椎间盘组织AI均值为20.02,bcl-2蛋白阳性细胞百分比为53.46％,bax蛋白细胞百分比为10.54％。两组间AI均值、bcl-2蛋白表达、bax蛋白表达差异均有显著性意义(P均<0.05)。bcl-2蛋白表达越弱,bax蛋白表达越强,凋亡细胞数越多。结论:bcl-2和bax蛋白均参与了腰椎间盘组织中细胞凋亡的调节,并在腰椎间盘退行性变发生和发展中发挥着重要作用。     

胰岛素对糖尿病大鼠海马神经元凋亡相关蛋白表达的影响

目的观察糖尿病大鼠海马神经元的病理形态学改变和BCL-2、BAX、caspase-3的异常表达及胰岛素干预后的影响。方法用链脲佐菌素（STZ）诱导制备糖尿病动物模型,每日长效胰岛素应用制备糖尿病胰岛素治疗动物模型。随机分为3组：高血糖组（DM组）、胰岛素治疗组（PDM组）、对照组（NC组）。12周后,用免疫组化法检测海马神经元凋亡蛋白BCL-2、BAX、caspase-3的表达,分别在光镜、透射电镜下观察各组海马神经元病理形态学改变及超微结构的变化。结果DM组BCL-2的表达较NC组显著下降,BAX、caspase-3显著升高（P〈0．05）,出现锥体细胞退变的典型病理改变。PDM组BCL-2的表达较DM组有所增高,BAX、caspase-3有所下降（P〈0．05）,病理改变较DM组有所改善。结论高血糖可引起海马神经元凋亡,胰岛素通过逆转糖尿病大鼠海马神经元caspase-3、BAX的表达,增加BCL-2的表达,对糖尿病脑病起保护作用。     

SD大鼠髁状突颈部骨折对大鼠髁状突软骨细胞增殖与凋亡的影响

目的研究发育期SD大鼠髁状突颈部骨折对下颌髁状突软骨细胞增殖和凋亡活性的影响.方法18只4周龄SD大鼠,分为髁状突骨折组及空白对照组,分别于术后1周、3周、5周时脱颈处死,取骨折组手术侧、非手术侧及空白对照组髁状突软骨,分别采用免疫组织化学染色和TUNEL染色,观察髁状突软骨细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数和凋亡细胞数.结果在各时间点,手术侧、非手术侧的PCNA阳性细胞数存在统计学差异(P<0.01).术后3、5周,空白组与手术侧PCNA阳性细胞数有统计学差异(P<0.01);术后3周,非手术侧大鼠髁突软骨中凋亡细胞数明显增多,手术侧凋亡细胞数随时间推移明显降低;术后1周,手术侧的凋亡细胞数明显多于非手术侧(P<0.01);术后3周,非手术侧的凋亡细胞数明显多于手术侧(P<0.01);术后1、5周,空白组与手术侧凋亡细胞数有显著性差异(P<0.01).结论一侧髁状突颈部骨折导致两侧髁状突所受应力失衡,影响两侧髁状突软骨细胞增殖与凋亡的平衡,进而影响下颌骨及颌面部的发育.     

辐射诱导的重组载体p Egr 1-sh TRAI L对肺腺癌A549细胞的生长抑制作用

目的: 构建 Egr 1 介导的人分泌型肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体( hs T R AI L ) 重组表达载体 p Egr 1- hs T R AI L , 探讨其对人肺腺癌 A549 细胞的生长抑制作用。方法: 利用基因重组技术构建 Egr 1 介导的 hs T R AI L 重组载体, PCR 、酶切和测序鉴定正确后转染 A549 细胞, 给予 6 Gy X 射线照射。实验分为对照( Cont r ol ) , p Egr 1- hs T R AI L , 6 Gy X 射线和 p Egr 1- hs T R AI L + 6 Gy X 射线组。 ELI S A 法检测各组 A549 细胞中 hs T R AI L 的 表达, MT T 法检测细胞增殖能力, 流式细胞术检测细胞周期, T UNEL 法检测细胞凋亡变化。结果: 成功构建 Egr 1 调控的 hs T R AI L 重组载体 p Egr 1- hs T R AI L , 质粒转染后经 6 Gy X 射线照射, 对照组、 6 Gy 组和 p Egr 1- hs T R AI L 组 hs T R AI L 蛋白表达随时间延长变化不明显, 而 p Egr 1- hs T R AI L + 6 Gy 组随时间延长 hs T R AI L 蛋 白表达显著增加(P ＜0. 05 或 P ＜0. 01) , 8 h 达到峰值; p Egr 1- hs T R AI L 组 A549 细胞增殖能力与对照组比较无 明显差异, 6 Gy 和 p Egr 1- hs T R AI L + 6 Gy 组 A549 细胞增殖能力较对照组显著降低, p Egr 1- hs T R AI L + 6 Gy 组降低更明显(P ＜0. 05 或 P ＜0. 01) ; 与对照组比较, p Egr 1- hs T R AI L 组 A549 细胞各期百分比变化不明显, 而 6 Gy 和 p Egr 1- hs T R AI L + 6 Gy 组 G 0 ／ G 1 细胞百分比明显增加(P ＜0. 05) , G 2 ／ M 期细胞百分比明显降低(P ＜ 0. 05 ) , S 期细胞百分比无明显变化; 各期细胞百分比在 6 Gy 和 p Egr 1- hs T R AI L + 6 Gy 组基本一致; 与对照组 比较, p Egr 1- hs T R AI L 组 A549 细胞凋亡百分比无明显变化, 而 6 Gy 和 p Egr 1- hs T R AI L + 6 Gy 组 A549 细胞 凋亡百分比较对照组增加(P ＜0. 01) , 其中 p Egr 1- hs T R AI L + 6 Gy 组增加更明显。结论: 成功构建了 Egr 1 介导 的 hs T R AI L 重组表达载体 p Egr 1- hs T R AI L , 其能够增加辐射对 A549 细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用, 而对细 胞周期分布影响不大。     

环巴胺对佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞增殖凋亡的影响及其抗凋亡机制

目的：研究Hedgehog( Hh)信号通路阻断剂环巴胺对佐剂性关节炎(AIA)大鼠关节软骨细胞增殖凋亡的影响及抗凋亡机制。方法弗氏完全佐剂诱导AIA大鼠模型,胰酶-胶原酶法分离培养关节软骨细胞,环巴胺体外给药处理AIA软骨细胞,MTT法检测细胞增殖,DNA电泳、Hoechst染色、Annexin V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡, RT-PCR 检测Shh、Gli1、Ptch1、Bcl-2、Bax 和 Caspase-3 mRNA 的表达。结果环巴胺(0.08、0.4、2、10、50μmol/L)剂量依赖性地提高AIA软骨细胞增殖。 AIA组可见凋亡细胞DNA梯状条带,环巴胺(0.4、2、10μmol/L)给药组的梯状条带明显减少;AIA组存在核碎裂与染色质固缩,环巴胺给药组均匀蓝色荧光的细胞数量增多;流式分析结果表明AIA软骨细胞凋亡率显著升高,环巴胺明显减少细胞凋亡率;与正常组相比, AIA组软骨细胞中Hh信号通路相关基因( Shh、Ptch1、Gli1) mRNA表达显著升高,抗凋亡基因Bcl-2 mRNA表达显著下降,而促凋亡基因Bax、Caspase-3 mRNA表达明显升高。环巴胺体外给药能抑制Hh信号通路过度活化,提高Bcl-2 mR-NA表达,并降低Bax、Caspase-3 mRNA表达。结论环巴胺体外给药能促进AIA软骨细胞的增殖,并抑制AIA软骨细胞的过度凋亡;该抗凋亡作用和调节Bcl-2、Bax和Caspase-3表达密切相关,提示干预软骨细胞Hh信号通路对保护类风湿关节炎关节软骨具有潜在的治疗意义。     

姜黄素对免疫抑制小鼠免疫功能的影响实验研究

目的观察姜黄素对免疫抑制小鼠免疫功能的调控作用。方法制备免疫抑制模型的小鼠,分5组给药7天后,处死测定小鼠体重,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,溶血空斑实验,外周血淋巴细胞转化实验。结果姜黄素对免疫抑制小鼠的体重无影响,提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数,增加B细胞产生抗体能力,姜黄素能够增强免疫抑制小鼠脾淋巴细胞的增值。结论姜黄素具有调节免疫功能,对固有免疫和适应免疫均有一定的增强作用。     

茶色素对血液流变学指标影响的观察

目的：观察茶色素对血液流变学指标的影响。方法：２８例老年高粘血症患者服茶色素每次２粒，３次／ｄ，３０ｄ为１个疗程，服药前后检测血液流变学指标，采用自身对照分析。结果：茶色素治疗后，降低纤维蛋白原、红细胞压积和全血比粘度有非常显著性差异（Ｐ＜０．００１～０．０１），降低全血还原粘度、体外血栓湿重和干重有显著性差异（Ｐ＜０．０５），而血浆比粘度、血沉、血沉方程Ｋ值、体外血栓长度和血小板粘附率无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论：茶色素对老年高粘血症患者血液流变学指标具有明显改善作用     

胆道镜手术对胆管结石的治疗效果分析

目的 探讨胆道镜对肝内胆管结石的治疗效果.方法 对2010年住院的57例肝内胆管结石患者的临床资料进行回顾性分析,比较32例胆道镜手术患者和25例常规手术患者的治疗效果、术后残石率和术后并发症.结果 胆道镜手术患者术后优良率为93.8%,术后残余结石发生率为15.6%,术后并发症发生率为3.1%;常规手术患者术后优良率...     

福辛普利对兔动脉粥样硬化形成的干预作用观察

目的:研究福辛普利对兔动脉粥样硬化形成的干预作用。方法:24只新西兰大白兔(雌雄各半),按体重和性别随机分为3组。对照组给予正常饮食,模型组给予高脂饲料,干预组在给予高脂饲料的同时灌胃给予福辛普利(1mg/kg/d)。上述动物于第12周取血,测血清总胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)、NO水平以及SOD活性,并在光镜和电镜下对胸、腹主动脉血管进行形态学观察。结果:给药组动物血清TC、MDA含量明显低于模型组(P<0.05或P<0.01),而NO水平以及SOD活性则明显高于模型组(P<0.01);光镜和电镜下观察到给药组动物主动脉损伤轻于模型组。结论:福辛普利可降低胆固醇,缓解自由基损伤作用,对动脉粥样硬化的形成有一定的干预作用。     

血液对新型人工心瓣膜作用的基础理论研究

目的探索血液对人工心瓣膜作用的基础理论。方法①比较新型心瓣膜材料氧化钛(Ti-o)与现今临床试用的热解碳(LITC)理化特性;②体外血小板(PL)粘附试验;③放射性I125检测Ti-o与LITC表面纤维蛋白原(FIG)的吸附量;④乳酸脱氢酶(LDH)检测PL的吸附量;⑤动物犬股动脉内埋置,6个月后扫描电镜(SEM)比较吸附PL的形态和吸附量。结果 Ti-o属N型半导体,界面能近似FIG。体内、外对FIG与PL的吸附量明显小于LITC。SEM见PL变形及被吸附的量均小于LITC。结论心瓣膜置入后第一反应是血浆蛋白优先于PL被吸附,吸附的种类和数量决定于瓣膜的结构与成分,带负电荷的FIG与瓣膜间若存在较大的界面张力,又具有电子强交流,将FIG失去立体构象的稳定,FIGγ肽链C端上的PL结合位点被暴露,PL与FIG联结便发生凝血,与PL活性有关的膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa也取于瓣膜粘附的蛋白。     

维吾尔族指纹嵴线离解正常值分析

本文报道了维吾尔族17～24岁青年学生500人(男250、女250)的手指指纹离解的出现频率。结果表明:十指有肤纹覆盖的任何区域均可出现嵴线离解现象,并且指纹嵴线离解典型者更多。者更多见于中间和远侧指节。男性嵴线离解的出现频率高于女性,性别差异显著。     

游泳对新生儿健康的探讨

目的 :探讨新生儿游泳对新生儿生理性体重下降 ,生理性黄疸的影响。方法 :将 15 0例正常足月新生儿作游泳组 ,同期分娩的孕母年龄、孕周、分娩时间、分娩方式、出生时体重相近的 15 0例作为对照组。测定两组新生儿出院时体重、经皮胆红素测定情况。结果 :两组出生时体重无明显差异 (P >0 0 5 ) ,出院时两组体重有显著差异。剖宫产儿游泳组平均体重 (3134± 35 6 )g ,对照组平均体重 (3170± 4 10 )g ,P <0 0 0 1;阴道分娩儿游泳组平均体重 (330 4± 335 )g ;对照组平均体重 (312 3± 4 0 0 )g ,P <0 0 0 5。产后 4d经皮胆红素测定游泳组为 (7 6 1± 2 2 )mg/L ,对照组为 (8 13± 2 4 )mg/L ,有明显差异 (P <0 0 0 5 )。结论 :新生儿游泳有助于新生儿生长发育 ,是一项值得推广的健康保证活动     

整体铸造在可摘局部义齿中的运用

目的探讨整体铸造在可摘义齿修复中,尤其在双侧游离缺失,对胎异常、邻牙,缺失间隙均异常情况下修复的效果.方法对临床1558例病人采取整铸支架式可摘局部义齿的设计,设计合理的卡环类型,设计为混合支持式或者牙支持式.结果整体铸造式的可摘义齿,符合可摘局部义齿的设计原则,有良好的固位,良好的稳定性,良好的支持,高质量的恢复牙的形态和功能.结论整体铸造在可摘局部义齿运用中,对口腔软硬组织健康的恢复有良好的作用,由于使用的带模铸造这一精密的铸造技术,加上义齿自身的优点,能够恢复牙的形态和功能.     

秋水仙素对染色体制备的影响研究

目的探究秋水仙素的浓度和处理时间对淋巴细胞染色体制备的影响。方法研究不同秋水仙素终浓度(0. 2μg/ml,0. 3μg/ml,0. 4μg/ml)在不同秋水仙素处理时间(6 h,8 h,10 h)作用下对染色体中期分裂相的影响。结果秋水仙素终浓度和秋水仙素处理时间的交互作用对分裂指数(F=11. 982,P=0. 000 0. 05)和分裂相合格率(F=4. 632,P=0. 004 0. 05)影响差异有统计学意义。通过简单效应分析和事后多重比较分析,0. 3μg/ml秋水仙素处理8 h后,染色体分裂指数和分裂相合格率均较高,分别为58. 8%和55. 8%。结论对秋水仙素终浓度和处理时间定量控制,试验重现性良好,染色体中期分裂相数目充盈,形态良好,染色体畸变分析更准确客观。     

“脑功复得”改善脑老化的基础研究

目的：研究中药合剂“脑功复得”口服液（以下简称脑功复得）对老龄大鼠学习记忆能力及大脑皮素海马突触泡膜素（Synaptophysin,SY)、Tau-蛋白表达等的影响,探讨其延缓脑老化的功效及可能机制。方法：应用爬杆主动回避反应（Active avoidance reaction,AAR)将动物分为学习记忆正常组和障碍组,再随机分别设置对照组（普食）和实验喂药组（5ml/d,2月）。在此基础上进行AAR和多功能箱被动回避反应（Passive avoidance reaction,PAR)训练、突触体计数、突触泡膜素和Tau蛋白免疫组化染色（Immunocytochemistry,ICC）、凋亡细胞计数。结果：服用脑功复得2月后,AAR习得率明显提高、消退明显延迟、步入潜伏期（Step through altency,STL)明显延长、大脑皮质海马突触体计数明显增高、突触泡膜素ICC染色增强、Tau蛋白ICCi染色减弱、凋亡细胞减少。结论：通过动物实验说明从神经行为学和形态学指标看,提示脑功复得能够延缓脑老化。