预固定在淋巴细胞染色体制备中的量化分析

目的深入分析预固定在淋巴细胞染色体制备中的机制及影响因素,为染色体量化制备提供依据。方法针对预固定环节中甲醇与冰醋酸的体积配比、用量及作用时间进行试验,以染色体分裂指数及分裂相合格率为指标,研究预固定环节各因素对染色体制备的影响。结果预固定液中甲醇与冰醋酸的体积配比对分裂指数影响差异无统计学意义(F=1. 549,P 0. 05),对分裂相合格率影响差异有统计学意义(F=8. 192,P 0. 05),预固定液中甲醇与冰醋酸体积比可控制在3∶1～1∶1。预固定液用量对分裂指数(F=5. 327,P 0. 05)和分裂相合格率(F=4. 989,P 0. 05)影响差异有统计学意义,将预固定液用量维持在0. 8～0. 9 ml,染色体分散良好,无重叠。预固定作用时间对分裂指数(F=0. 821,P 0. 05)和分裂相合格率(F=0. 458,P 0. 05)影响差异无统计学意义,推荐预固定处理时间为1 min。结论预固定液中甲醇与冰醋酸配比控制在3∶1～1∶1之间,预固定液用量控制在0. 8～0. 9 ml之间,预固定1 min,可获得理想的染色体分裂相,将预固定环节影响因素进行量化分析,为预固定实现规范操作打下基础。     

临床检验中影响外周血淋巴细胞培养的因素分析

目的:观察与分析影响外周血染色体标本制备的细胞培养环节的主要因素。方法:以规模化生产的淋巴细胞培养液为材料,观察秋水仙素浓度与处理时间、外周血用量、培养时间等对淋巴细胞培养及染色体标本制备的影响。结果:秋水仙素浓度与处理时间、外周血用量等对全血淋巴细胞的培养和染色体形态观察的效果有显著的影响。结论:5ml培养液中,加入0.2～0.4ml外周血培养68～69h、以0.064μg/ml秋水仙素处理3h,可获得高分裂相与高分辨率染色体的淋巴细胞。     

蓝氏贾第鞭毛虫染色体的制备

目的:探讨蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)在分裂过程中是否形成典型的凝集染色体以及染色体的数目.方法:用改良的TYI-S-33培养基培养贾第虫滋养体.分别在不同浓度的秋水仙素(0、0.05、0.10、0.20、0.40和0.80 mg/L)、低渗处理不同时间(30、50、55、65和80 min)和不同固定液[V(甲醇):V(冰醋酸)为3:1和2:1]等条件下制备贾第虫染色体.结果和结论:在制备贾第虫染色体时,秋水仙素的最佳作用浓度为0.20 mg/L,最佳低渗处理时间为55 min,固定液推荐V(甲醇):V(冰醋酸)为3:1.贾第虫在分裂过程中形成典型的凝集染色体,染色体数目为2n=10.     

普伐他汀抑制重组人CD40配体诱导的U937诱导型细胞环氧合酶的表达

目的　探讨重组人CD40 配体(rhCD40L)对培养的人单核细胞(U937)表达诱导型环氧合酶(COX 2)的作用和普伐他汀对其的影响。方法　体外培养U937 细胞,分别以浓度为0. 05、0. 10、0. 20、0.40μg/ml的rhCD40L刺激24 h;以0. 40μg/ml的rhCD40L 分别刺激3、6、12、24 h。再将0. 40μg/ml 的rhCD40L与终浓度分别为1×10-2、1×10-3、1×10-4 mmol/L的普伐他汀共同刺激24 h。采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测COX 2 mRNA的表达。结果　0.4μg/ml的rhCD40L刺激后3 h,可诱导COX 2 mRNA表达,随着rhCD40L浓度和作用时间增加,COX 2 mRNA表达明显增加(P<0.01),呈时效和量效的关系。0.4μg/ml的rhCD40L与普伐他汀共同刺激24 h后,COX 2 的表达明显被抑制。结论　rhCD40L可以时间和浓度依赖的方式诱导COX 2的表达,普伐他汀可抑制此作用。     

里拉京通过下调NOTCH1信号通路抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖的实验研究

【摘要】目的 探讨柯里拉京能否通过下调NOTCH1信号通路抑制胃癌SGC 7901细胞的增殖, 以及对Hes1表达的影响。方法〓使用不同浓度的柯里拉京(0μg/ml、10μg/ml和100μg/ml)对胃癌SGC 7901细胞进行干预。在不同时间点(0、24和48h)使用MTT法对SGC 7901细胞活性进行检测。干预48h后, 使用qPCR和western blot对在不同浓度(0μg/ml、10μg/ml和100μg/ml)柯里拉京干预后,细胞NOTCH1、Hes1 mRNA和蛋白的表达水平进行分析。结果〓使用不同浓度柯里拉京(0μg/ml、10μg/ml和100μg/ml)对胃癌SGC 7901细胞进行干预后, 细胞活性呈时间依赖性和剂量依赖性下降, 差异均有统计学意义(P＜005)。不同浓度柯里拉京(0μg/ml、10μg/ml和100μg/ml)干预48 h后, 胃癌SGC 7901细胞NOTCH1及Hes1 mRNA和蛋白的表达水平呈剂量依赖性降低, 差异均有统计学意义(P＜005)。结论〓柯里拉京可通过下调NOTCH1/Hes1信号通路抑制胃癌SGC 7901细胞增殖, 同时为柯里拉京用于临床治疗胃癌等恶性肿瘤奠定了实验基础。
     

葡萄胎染色体快速制备法(简讯)

葡萄胎染色体制备原用细胞埋养法,技术较复杂,我们参照绒毛染色体快速制备法对35例葡萄胎进行了染色体制备。其方法是:将葡萄胎患者初次刮宫之标本迅速放入含秋水仙素之Hank's液或1640液中,选其水泡较小的新鲜组织约10g,放入小玻皿内剪碎、分移至离心管内(每管2～3g)加入1640液5ml、秋水仙素(终浓度为0.8～1μg/ml),37℃培养箱内培     

砷对Nrf2抑制HaCaT细胞凋亡及抗氧化水平的影响

目的以Nrf2基因抑制的人永生化皮肤角质细胞(HaCaT)作为模型细胞,通过染砷模型细胞,观察抗氧化水平及细胞凋亡等的变化。探讨对氧化应激的影响,为探究砷致皮肤角化紊乱机制提供基础。方法以人正常HaCaT细胞为实验空白对照组。无机砷混合物暴露于砷污染组,高、中、低砷浓度为LC50浓度的1/10、1/50、1/100,即为21. 0μmol/L、4. 2μmol/L、2. 1μmol/L。每组细胞培养8、24、48和72 h。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组HO-1、GSH和COX-2蛋白水平。结果与阴性对照组相比,高、中、低剂量组在8 h和24 h时早期凋亡率增加,差异有统计学意义(F=298. 696,P 0. 01),在低、中、高剂量组中HO-1蛋白水平在8 h和24 h时上调(F=279. 229,P 0. 01; F=530. 741,P 0. 01),48 h和72 h HO-1蛋白含量均下调(F=329. 470,P 0. 01; F=814. 141,P 0. 01),各组8 h、72 h GSH蛋白浓度先上调后下调(F=100 064. 804,P 0. 001,F=158 817. 814,P 0. 05),各组24 h、48 h GSH蛋白浓度上调(F=77 549. 323,P 0. 05),除8 h外,其余时间点各组COX-2蛋白浓度均下调(F=147. 203,P 0. 001; F=3 054. 025,P 0. 001; F=126 920. 724,P 0. 001)。结论砷暴露通过增加ROS生成,调控Nrf2通路,下调COX-2和HO-1蛋白,上调GSH蛋白,诱导皮肤角质形成细胞凋亡及皮肤角化紊乱。     

辐射遗传染色体标本制备

目的改变染色体制备过程中的培养条件,在确保收获第一次核分裂细胞的前提下,改善染色体形态。方法缩短淋巴细胞培养时间至44h,加秋水仙素时间至培养开始后的第30小时。秋水仙素用量为0.04μg/ml。结果染色体呈紫红色,长短适中,染色体间分离良好,染色体单体间分叉。结论总培养时间为44h,在培养开始后的第30小时加入秋水仙素,能保证培养出来的染色体属于第一次核分裂;缩短了秋水仙素的处理时间,可大大改善染色体的形态。     

高浓度秋水仙素直接制备孕早期绒毛膜染色体

本文提出一种孕早期绒毛直接制备染色体的改进方法。用高浓度秋水仙素(40μg/ml)不经培养,直接低渗,可制备出分裂相多、分散好、G显带较满意的染色体标本,可供核型分析。     

PTEN反义寡核苷酸对EC9706细胞增殖、凋亡和PTEN、mTOR表达的影响

目的:探讨PTEN反义寡核苷酸(ASODN)对食管癌EC9706细胞增殖、凋亡和PTEN、mTOR表达的影响.方法:利用阳离子脂质体介导PTEN的ASODN和无义寡核苷酸(N-ODN)转染食管癌EC9706细胞,终浓度为3、6和12μmol/L的ASODN为实验组,终浓度12 μmol/L的N-ODN为N-ODN对照组,不进行转染的为空白对照组.运用MTT法、TUNEL检测空白对照组、N-ODN对照组及3种浓度的ASODN作用24、48及72 h后食管癌EC9706细胞增殖和凋亡情况;采用免疫细胞化学技术及原位杂交方法检测各组EC9706细胞中PTEN蛋白、mTOR蛋白和mRNA的表达.结果:①随PTEN ASODN转染浓度(F3μmol/L=784.774,F6μmol/L=242.884,F12μmol/L=412.105,P均＜0.001)和时间(F24 h=60.676,F48 b=57.703,F72 h=51.841,P＜0.001)的增加,食管癌EC9706细胞的增殖增强.②随PTEN ASODN转染浓度(F3μmol/L=36.655,F6μ=mol/L47.594,F12μmol/L=85.264,P均＜0.001)和时间(F24h=4.860,F48 h=4.901,F72 h=8.153,P＜0.001)的增加,食管癌EC9706细胞的凋亡下降.③随PTENASODN转染浓度(F3μmol/L=45.634,F6μmol/L=66.399,F12μmol/L=72.763,P均＜0.001)和时间(F24h=4.065,F48 h=3.985,F72 h=5.446,P＜0.001)的增加,PTEN的蛋白表达降低;mRNA的表达也降低(F3μmol/L=23.357,F6μmol/L=43.272,F12μmol/L=51.402,P均＜0.001;F24h=3.933,F48 h=4.084,F72 h:4.528,P＜0.001).④mTOR蛋白(F3μmol/L=19.422,F6 μmol/L=30.000,F12 μmol/L=62.168,P＜0.001;F24 h=5.340,F48 h=9.150,F72 h=21.056,P＜0.001)和mRNA(F3μmol/L=19.414,F6 μmol/L=46.571,F12μmol/L=68.634,P＜0.001;F24 h=4.815,F48 h=12.165,F72 h=7.858,P＜0.001)的表达随PTEN ASODN转染浓度和时问的增加而增强.⑤上述各指标中均以12 μmol/LASODN作用72 h的效应最强(P均＜0.05).结论:PTEN ASODN促进食管癌EC9706细胞增殖、抑制凋亡,下调PTEN蛋白和mRNA的表达,上调mTOR蛋白和mRNA的表达.     

氟哌利多在术后镇痛中的临床观察

目的评价氟哌利多复合芬太尼、布比卡因用于下腹部手术后病人硬膜外镇痛的临床效果。方法ASAⅠ—Ⅱ级下腹部手术后病人50例，随机分两组，每组25例。A组：镇痛药为0．25％布比卡因含4μ／mL芬太尼；B组：0．125％布比卡因含4μg／mL芬太尼、50μg／mL氟哌利多。使用PCA泵持续泵入硬膜外腔，并进行临床观察。结果两组镇痛效果均满意，B组镇静效果明显优于A组，B组恶心呕吐发生率明显低于A组。结论镇痛液中加入氟哌利多产生了明显的镇静、镇吐作用，而且镇痛效果无明显改变。     

整体铸造在可摘局部义齿中的运用

目的探讨整体铸造在可摘义齿修复中,尤其在双侧游离缺失,对胎异常、邻牙,缺失间隙均异常情况下修复的效果.方法对临床1558例病人采取整铸支架式可摘局部义齿的设计,设计合理的卡环类型,设计为混合支持式或者牙支持式.结果整体铸造式的可摘义齿,符合可摘局部义齿的设计原则,有良好的固位,良好的稳定性,良好的支持,高质量的恢复牙的形态和功能.结论整体铸造在可摘局部义齿运用中,对口腔软硬组织健康的恢复有良好的作用,由于使用的带模铸造这一精密的铸造技术,加上义齿自身的优点,能够恢复牙的形态和功能.     

游泳对新生儿健康的探讨

目的 :探讨新生儿游泳对新生儿生理性体重下降 ,生理性黄疸的影响。方法 :将 15 0例正常足月新生儿作游泳组 ,同期分娩的孕母年龄、孕周、分娩时间、分娩方式、出生时体重相近的 15 0例作为对照组。测定两组新生儿出院时体重、经皮胆红素测定情况。结果 :两组出生时体重无明显差异 (P >0 0 5 ) ,出院时两组体重有显著差异。剖宫产儿游泳组平均体重 (3134± 35 6 )g ,对照组平均体重 (3170± 4 10 )g ,P <0 0 0 1;阴道分娩儿游泳组平均体重 (330 4± 335 )g ;对照组平均体重 (312 3± 4 0 0 )g ,P <0 0 0 5。产后 4d经皮胆红素测定游泳组为 (7 6 1± 2 2 )mg/L ,对照组为 (8 13± 2 4 )mg/L ,有明显差异 (P <0 0 0 5 )。结论 :新生儿游泳有助于新生儿生长发育 ,是一项值得推广的健康保证活动     

姜黄素对免疫抑制小鼠免疫功能的影响实验研究

目的观察姜黄素对免疫抑制小鼠免疫功能的调控作用。方法制备免疫抑制模型的小鼠,分5组给药7天后,处死测定小鼠体重,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,溶血空斑实验,外周血淋巴细胞转化实验。结果姜黄素对免疫抑制小鼠的体重无影响,提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数,增加B细胞产生抗体能力,姜黄素能够增强免疫抑制小鼠脾淋巴细胞的增值。结论姜黄素具有调节免疫功能,对固有免疫和适应免疫均有一定的增强作用。     

基于“肺与大肠相表里”理论探讨痤疮与肠道菌群的相关性及其中医治疗

痤疮的病位在皮，肠腑损伤，腑病及肺，肺主皮毛，故肠道菌群失调会参与或加重痤疮的发病。皮生痤疮，内合于肺，肺病及肠，又会引起肠道菌群失调。二者紧密联系，存在相关。本文基于 “肺主皮毛”、“肺与大肠相表里”理论，探讨痤疮与肠道菌群的相关性以及肠道菌群在中医中药干预痤疮治疗中的作用，为痤疮的中医临床治疗提供新的思路。     

氧化低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的:探讨氧化型低密度脂蛋白(Oxidizedlowdensitylipoprotein,oxLDL)对人血管平滑肌细胞(Smoothmusclecell,SMC)凋亡的影响。方法:利用密度梯度超速离心分离纯化人血浆LDL,体外和CuS04共孵育氧化生成oxLDL。不同浓度的oxLDL对SMC作用不同的时间,观察其对SMC凋亡状况的影响。结果:oxLDL对SMC的作用具有时间浓度依赖性,较低浓度的oxLDL促SMC增生和泡沫细胞化,高浓度时则诱导SMC凋亡发生。结论:适当浓度的oxLDL促SMC增生及表型转换而高浓度时则对SMC促凋亡作用。     

福辛普利对兔动脉粥样硬化形成的干预作用观察

目的:研究福辛普利对兔动脉粥样硬化形成的干预作用。方法:24只新西兰大白兔(雌雄各半),按体重和性别随机分为3组。对照组给予正常饮食,模型组给予高脂饲料,干预组在给予高脂饲料的同时灌胃给予福辛普利(1mg/kg/d)。上述动物于第12周取血,测血清总胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)、NO水平以及SOD活性,并在光镜和电镜下对胸、腹主动脉血管进行形态学观察。结果:给药组动物血清TC、MDA含量明显低于模型组(P<0.05或P<0.01),而NO水平以及SOD活性则明显高于模型组(P<0.01);光镜和电镜下观察到给药组动物主动脉损伤轻于模型组。结论:福辛普利可降低胆固醇,缓解自由基损伤作用,对动脉粥样硬化的形成有一定的干预作用。     

基于移动互联网的资源超市平台研究

以学习者开发并参与资源审核的思想为指导,设计了基于移动互联网的资源超市平台.在分析数字化资源超市特点的同时,介绍了移动学习资源超市平台、移动学习资源开发原则及鼓励学习者参与资源建设的激励机制.     

医学生就业竞争力培养对策研究

在高等教育迅速发展的背景下,由于医学专业的特性,导致医学生的就业形势日趋严峻。如何有效解决医学生就业不理想的问题,已成为医学院校现阶段必须解决的重要问题。本文在分析当前医学生所面临的就业形势的基础上,探讨从政府、学校、学生3个层面提高医学生就业竞争力的现实可能性,即通过政府的政策引导,吸引学生到基层医疗机构就业;通过医学院校的教学改革,提高学生的专业素养;通过医学生择业的观念转变,为其争取更多的就业机会。