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相似文献
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1.
目的 对淋巴细胞的伸瘤现象进行描述,并探讨伸瘤的一些影响因素及伸瘤运动与淋巴细胞功能的关系。方法 分离外周血淋巴细胞,用PHA、IL-2、a-CD3、PHA+IL-2预刺激后与口腔上皮癌细胞混合作用。于倒置显微镜下直接观察淋巴细胞的粘(伸)瘤情况;取混合细胞经冷丙酮固定并Gimasa染色后在镜下观察淋巴细胞与瘤细胞作用情况,并于1、2、4、6h,取混合淋巴细胞于扫描电镜下观察伸瘤运动的发生、发展变化。结果 与未预刺激组比较,PHA组能提高粘瘤指数,IL-2、a-CD3、PHA+IL-2均能提高淋巴细胞的粘(伸)瘤指数,以PHA+IL-2对粘(伸)瘤率的提高作用最为显著,电镜下发现在粘(伸)瘤运动过程中,外周血淋巴细胞的形态也发生变化。结论 淋巴细胞预刺激能促进伸瘤运动的发生,伸瘤运动可能是淋巴细胞的一种杀伤方式。  相似文献   

2.
目的 探讨黄芪(AM)对新生儿脐血淋巴细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 随机选择30例正常足月新生儿为研究对象,收集并分离脐血单个核细胞(CBMC),体外分别经植物血凝集素(PHA)、PHA联合白细胞介素6(IL-6)、PHA联合AM刺激培养48h,采用丫啶橙-溴化乙锭(AB-EO)染色法测定细胞凋亡水平,间接免疫荧光法测定CBMC中CD38阳性和CD25阳性细胞百分率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清液中IL-6的水平。结果 PHA+AM刺激组细胞凋亡率明显低于单纯PHA刺激组(F=205.91,q=25.16,P〈0.001),PHA+IL-6刺激组明显低于单纯PHA刺激组(q=24.54,P〈0.001),而PHA+IL-6刺激组与PHA+AM刺激组间细胞凋亡水平比较差异无显著性(q=0.62,P〉0.05)。PHA+AM刺激组CD38阳性细胞百分率明显低于单纯PHA刺激组(F=790.12,q=48.95,P〈0.001),PHA+IL-6刺激组也明显低于单纯PHA刺激组(q=48.42,P〈0.001),但PHA+IL-6刺激组与PHA+AM刺激组间比较差异无显著性(q=0.53,P〉0.05)。PHA+AM刺激组CD25阳性细胞百分率明显高于单纯PHA刺激组(F=221.38,q=26.60,P〈0.001),PHA+IL-6刺激组也明显高于单纯PHA刺激组(q=24.86,P〈0.001),但PHA+IL-6刺激组与PHA+AM刺激组间比较差异无显著性(q=1.74,P〉0.05)。PHA+AM刺激组培养上清液中IL-6水平明显高于单纯PHA刺激组(t'=6.50,P〈0.001)。CBMC经48h培养后,凋亡细胞百分率与培养上清液中IL-6浓度呈明显负相关(r=-0.75,P〈0.05)。结论 黄芪能明显抑制CBMC体外经PHA激活后的细胞凋亡,其机制可能与促进CBMC中胸腺细胞向T淋巴细胞分化、增强脐血淋巴细胞活化和增加IL-6产生水平等有关。  相似文献   

3.
用羧甲基茯苓多糖(CMP)预处理人外周血淋巴细胞(HPBL)后经PHA或(和)ConA刺激的促诱生组IL-6效价,结果比无CMP的PHA或(和)ConA刺激的常规诱生组高0.5~0.8倍(p<0.01),尤以CMP+PHA+ConA促诱生IL-6效果最佳(p<0.01);而且可达生物制剂的药用标准,经临床试验证明安全有效。  相似文献   

4.
目的:研究新城疫病毒疫苗(ATV-NDV)对人卵巢癌细胞株体外生长的抑制作用.方法:制备人卵巢癌细胞株3A0 ATV-NDV瘤苗,将不同浓度的ATV-NDV、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素15(IL-15)、ATV-NDV+IL-12、ATV-NDV+IL-15分别与正常人外周血淋巴细胞混合培养,MTT法测定其刺激淋巴细胞增殖的程度及对肿瘤细胞的生长抑制率;HE染色法观察效靶比为50:1时活化的淋巴细胞与3A0细胞共同培养24~96 h后细胞形态学的变化.结果:活化的淋巴细胞与靶细胞共培养可杀死肿瘤细胞,并具有时效性(P<0.05);不同细胞间细胞生长抑制率(GIR)差异无显著性(P>0.05);IL-15、IL-12与ATV-NDV在活化淋巴细胞方面具有协同作用,与单独作用差异有显著性(P<0.01);IL-15与ATV-NDV作用差异无显著性(P>0.05)。淋巴细胞作用48 h后3AO细胞即出现凋亡形态。结论:经ATV-NDV、IL-12、IL-15、ATV-NDV+IL-12、ATV-NDV+IL-15混合培养的正常人外周血淋巴细胞可有效地抑制3AO细胞株的生长,并具有时间、浓度依赖性,其作用机制是诱导细胞凋亡。  相似文献   

5.
目的探讨实验性大肠癌对机体免疫功能的影响。方法利用1,2-二甲肼诱导大鼠建立大肠癌模型,流式细胞术检测成瘤16、21周外周血淋巴细胞和21周脾细胞中CD3、CD4、CD8、CD25、4-1BB和4-1 BBL表达率,ELISA法检测成瘤21周时脾细胞经植物血凝素(PHA)刺激后分泌γ干扰素(IFN-γ)的能力。结果 21周时的诱癌率达100%(5/5)。16周时成瘤组外周血淋巴细胞CD3+和CD3+ CD4+表达率较对照组略有降低,但差异无统计学意义(P〉0.05);21周时成瘤组外周血淋巴细胞和脾细胞中CD3+ CD4+表达率较对照组明显降低(P〈0.05),4-1BB和4-1 BBL的表达较对照组均降低,但差异均无统计学意义(均P〉0.05);成瘤组脾细胞PHA刺激试验后分泌IFN-γ的能力较对照组显著下降(P〈0.01)。结论实验性大肠癌同人类大肠癌具有类似的免疫功能降低,主要是细胞免疫功能的下降。  相似文献   

6.
目的:研究猪骨髓间充质干细胞(MSC)成骨分化(DOC)后在干扰素-γ(IFN-γ)刺激下对猪白细胞表面抗原(SEA)的变化及外周血单个核细胞(PBMC)增殖的影响,了解其免疫原性。方法:以未分化的MSC为对照,采用流式细胞术分别检测未诱导、成骨诱导的MSC、MSC+IFN-γ、DOC+IFN-γ的SLA分子的表达,采用单向混合淋巴反应观察各组细胞对外源凝集素(PHA)刺激PBMC的每分钟脉冲值(CPM)变化。结果:MSC+IFN-1组和DOC+IFN-1组SLA—Ⅰ表达上调(P〈0.05),SLA—Ⅱ表达明显上调(P〈0.01)。MSC成骨分化后能抑制PHA刺激的PBMC增殖反应。结论:在体外实验中,DOC后的MSC在IFN-γ刺激下仍具有低免疫原性,且具有免疫调节作用。  相似文献   

7.
目的 研究含多基因(p53、GM-GSF、B7-1、IL-2)的重组腺病毒载体Ad-multigenes,对大鼠脾脏淋巴细胞毒作用的影响及对淋巴细胞分泌IL-2的刺激作用。方法 应用人外周血淋巴细胞和肿瘤细胞混合培养,分析导入目的基因的肝癌细胞系体外刺激人T淋巴细胞分泌IL-2的作用;利用大鼠脾淋巴细胞杀伤活性试验,分析导入目的基因的大鼠癌肉瘤Walker256细胞,其名疫原性的变化。结果 导入Ad-multigenes的肝癌细胞系体外刺激人外周血T淋巴细胞分泌IL-2的水平增加,导入Ad-multigenes的大鼠Walker256细胞,能增加大鼠脾脏淋巴细胞的杀辛本瘤细胞活性。结论 腺病毒介导多基因Ad-multigenes、能增加大鼠癌肉瘤Walk-er256细胞的免疫原性,和T细胞分泌IL-2的水平增加。  相似文献   

8.
目的在乙型肝炎疫苗体外诱导B淋巴细胞产生HBs-Ab过程中,通过脂多糖和IL-2作为有效刺激物质,使用多秆组合方法进行观察比较,了解影响抗体产生的体外诱导因素。方法用乙型肝炎疫苗刺激组(A组)、乙型肝炎疫苗+脂多糖刺激组(B组)、乙型肝炎疫苗+脂多糖+IL-2刺激组(C组)三组进行淋巴细胞培养和诱导,比较HBs-Ab产生情况,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定HBs-Ab含量。结果在脂多糖和IL-2的刺激诱导下。能有效促进B淋巴细胞产生HBs-Ab。结论实验证明脂多糖是激活人血B淋巴细胞的有效丝裂原,IL-2可促使活化B细胞增生及产生抗体,脂多糖和IL-2联合作用,可增强乙型肝炎疫苗诱导体液免疫水平。  相似文献   

9.
Shi LB  Zhang HW  Peng CH 《中华医学杂志》2007,87(14):942-946
目的探讨CD4^+CD25^+调节性T细胞、共刺激通路阻断剂CD154单抗及两者联合应用在抑制大鼠肝移植急性排斥反应中的作用。方法48例原位肝移植大鼠(DA→Lewis)分为A组:对照组;B组:术前7d回输经DA大鼠脾细胞体外激活的Lewis大鼠CD4^+CD25^+细胞;C组1术后第1、2d腹腔注射CD154单抗(15m/kg);D组:联合应用CD4^+CD25^+细胞和CD154单抗。术后7d各组处死6只受体,观察移植肝病理变化,检测移植肝内T细胞亚群和细胞因子白细胞介素之(IL-2)、IL4、IL-10和转化生长因子B1(TGFβ1)表达情况;分离脾淋巴细胞与供体行单向混合淋巴细胞反应观察刺激指数。余大鼠观察生存情况。结果D组平均存活时间(52.00±10.64)d明显长于其他各组(P〈0.01);移植肝内淋巴细胞浸润数量(2.47±0.61)×10^6和CD8^+细胞百分比(14.2±3.0)%明显低于B、C组(P〈0.05、P〈0.01),而CD4^+CD25^+细胞比例(16.4±4.3)%高于B、C组(P〈0.05,P〈0.01)。移植物内IL-2mRNA表达A组最高,D组最弱;IL4mRNA各组均弱表达;IL-10mRNAB、D组高表达,A、C组未表达;TGFβ1mRNAB、D组表达明显强于A、C组。单向混合淋巴细胞反应D组刺激指数最低(P〈0.05)。结论CD4^+CD25^+调节性T细胞和共刺激通路阻断剂CD154单抗均能抑制大鼠肝移植急性排斥反应;联合应用CD154单抗明显增强CD4^+CD25^+调节性T细胞对急性排斥反应的抑制作用。  相似文献   

10.
目的:研究新型免疫抑制剂霉酚酸酯对哮喘小鼠骨髓CD34^+造血细胞生物活性的影响。并与糖皮质激素比较.探讨其潜在的治疗哮喘的机制及可能性。方法:以卵白蛋白(OVA)致敏并激发BALB/c小鼠建立哮喘模型。连续激发2周期间分为3组,每组6只,分别给予生理盐水(对照,A组)、泼尼松(B组)及霉酚酸酯(C组)灌胃.末次激发后24h分别取支气管肺泡灌洗液(BALF)、外周血及骨髓,测定BALF、外周血中有核细胞的分类计数及骨髓中有核细胞总数:ELISA方法测定外周血中IL-5水平;流式细胞仪测定外周血及骨髓中CD34^+造血细胞、CD4^+T淋巴细胞占有核细胞的比例:免疫组化结合原位杂交法检测骨髓内表达白细胞介素5(IL-5)受体α链mRNA的CD34^+造血细胞(CD34^+IL-5Rα mRNA^+细胞)计数。结果:B、C组哮喘小鼠BALF中细胞总数、EOS计数,外周血中CD34^+造血细胞计数及外周血中IL-5水平均低于A组相应指标.且差异有显著性(均P〈0.05);C组BALF及外周血巾EOS计数、骨髓中CD34^+造血细胞计数及CD34^+IL-5RαmRNA+细胞计数与B组相应指标比较,差异有显著性(均P〈0.05)。结论:霉酚酯酸(MMF)可能抑制嗜酸粒细胞(EOS)、T淋巴细胞的肺内浸润,抑制CD34^+造血细胞从骨髓迁移至外周血,它可能主要通过抑制淋巴细胞增殖,减少IL-5的产生.来影响骨髓EOS祖细胞的分化。  相似文献   

11.
通过用抗CD3,CD28+CD80 McAb激活健康人的PBLs,并以PHA,IL-2,PBLs为对照组;对各组不同时间段的淋巴细胞超微结构进行观察。结果提示:CD3及CD28+CD80刺激淋巴细胞增殖外,也能使淋巴细胞活化,细胞表现为胞体增大,细胞器增多,具有粗大的绒毛和突出伪足,并可见单核细胞吞噬活跃。  相似文献   

12.
陈芦斌  邓琰  袁志林  冯晶 《医学争鸣》2009,30(12):1107-1109
目的:探讨CD28mAb与CD80共刺激活化的外周血淋巴细胞(PBLs)在体外对大肠癌细胞株HT-29杀伤强度及杀伤作用机制,为大肠癌的过继免疫治疗提供参考.方法:获得人PBLs;共刺激;检测活化细胞的体外淋巴细胞毒作用,并用电子显微镜观察效应细胞杀伤的大肠癌细胞超微结构,用流式细胞仪检测大肠癌细胞的凋亡指数.结果:共刺激PBLs对肿瘤细胞杀伤作用较强,达到(69.4±1.2)%.电镜结果显示,效应细胞作用12h肿瘤细胞出现坏死,部分可见凋亡.流式细胞仪检测效应细胞凋亡指数为12h19.6%,48h12.1%.结论:活化的淋巴细胞杀伤大肠癌细胞是通过坏死及凋亡两条途径来实现的.  相似文献   

13.
目的:观察甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血环瓜氨酸肽抗原特异性T细胞(circum-citrullinated peptide antigen specific Tcells,CCP/AST)分泌白介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)水平的影响。方法:体外分离、培养RA患者外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL),分别设RA空白组不加任何干预药物;RA CCP组仅加CCP干预(CCP终浓度为20μg/ml);RAMTX组同时加CCP与MTX干预(CCP与MTX终浓度均为20μg/ml);健康对照组培养健康者PBL,不加任何干预药物。体外培养72 h后,采用酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中IL-4、IFN-γ分泌水平。结果:CCP干预后,RA患者PBL分泌的IFN-γ水平升高,IL-4分泌水平下降,IFN-γ/IL-4比值也明显升高;加入MTX后,RA患者CCP/AST分泌的IFN-γ水平下调,IL-4水平升高,IFN-γ/IL-4比值下降,差异有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。结论:MTX对RA患者PBL源CCP/AST分泌的TH1/TH2型细胞因子的网络失衡状态有调节作用;MTX可以抑制CCP诱导的TH1型细胞因子,上调TH2型细胞因子的表达,这可能是MTX治疗RA有效途径之一。  相似文献   

14.
目的 为研究IL 2R基因转染PBL对人卵巢癌细胞生长抑制的影响。方法 用脂质体Fugene作载体将IL 2和IL 2R基因分别转染入人卵巢癌细胞株 3AO和人外周血白细胞 (PBLs) ,转染 2 4小时后分别将转染和非转染的PBLs与转染和非转染的 3AO细胞混合培养 4 8小时 ,并用MTT法测定PBLs对 3AO细胞的杀伤作用。结果 转染前后 3AO细胞和PBLs细胞形态无明显变化。 3AO能转染IL 2基因并表达IL 2mRNA ,PBLs能转染IL 2R基因并表达IL 2RmRNA。IL 2基因修饰 3AO细胞可增强淋巴细胞对 3AO细胞的抑制作用 ,同时联合IL 2R基因转染PBLs和IL 2基因修饰 3AO细胞可显著增强其淋巴细胞对 3AO细胞的抑制作用。结论 IL 2R基因转染效应细胞可增加IL 2基因转染肿瘤细胞的抗肿瘤免疫效应 ,这一方法为卵巢癌IL 2基因治疗开辟了新的治疗途径  相似文献   

15.
OBJECTIVE: To assess the separation efficiency of magnetic-activated cell sorting in the purification of CD4+ T cells from murine spleen, and observe the effects of koumine on the proliferation of the separated cells. METHODS: CD4+ T cells were isolated from murine spleen by magnetic-activated cell sorting (MiniMACS). Fluorescence-activated cell sortering was employed to determine the purity of CD4+ T cells before and after the separation procedure followed by evaluation of the cell viability using trypan blue staining. Concanavalin A- (ConA, 5 microg/ml) or phytahematoagglutinin (PHA,1 mg/ml)-induced murine T cells were treated with different concentrations of koumine (10-320 microg/ml), and their proliferation was determined by MTT colorimetry, and enzyme-linked immunosorbent assay was used to measure IL-2 level in the cell culture supernatant. RESULTS: The purity of CD4+ T cells reached (90.3+/-5.8)% after the purification with a cell viability of (94.9+/-3.6)%. Koumine (20-320 microg/ml) dose-dependently inhibited ConA- or PHA-induced proliferation of murine lymphocytes as compared with the controls (P<0.05). Koumine (20, 100, and 200 microg/ml) significantly decreased the level of IL-2 in comparison with the control group (P<0.05). CONCLUSIONS: CD4+ T cells of high purity can be obtained from murine spleen using MiniMACS without impairing the viability of the cells. Koumine significantly inhibits the proliferation of murine CD4+ T cells due to its immunosuppressive effect and inhibition of IL-2 secretion.  相似文献   

16.
氧化锌纳米材料对小鼠混合培养的脾淋巴细胞的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的评价氧化锌(ZnO)纳米材料对不同品系小鼠脾淋巴细胞混合培养的影响。方法提取BALB/O和057BL/6小鼠脾细胞进行混合淋巴细胞培养,通过对细胞增殖率、IL-2水平的检测及电镜观察来研究氧化锌纳米材料对混合淋巴细胞培养的影响。结果氧化锌纳米材料的加入提高了淋巴细胞增殖率及上清液IL-2水平,电镜下可见纳米材料吸附于淋巴细胞表面并促进淋巴细胞间的接触。结论氧化锌纳米材料促进混合淋巴细胞培养中淋巴细胞的增殖,增强了免疫应答的强度。  相似文献   

17.
对50例良恶性淋巴增生病变组织及其短期培养细胞进行免疫表型研究,重点观察白细胞介素-2受体及CD4阳性细胞的数量、分布及其变化情况。结果发现:①多种良恶性淋巴增生病变组织中均有不等量的白细胞介素-2受体及CD4抗原的表达;②部分肿瘤性及非肿瘤性CD4阳性细胞、B细胞及R-S细胞上亦有白细胞介素-2受体存在,而在CD1或CD8阳性细胞上则未见;③正常人淋巴细胞经PHA刺激并发生增殖后所形成的细胞克隆亦有较多的白细胞介素-2受体和CD4抗原表达。提示:尽管白细胞介素-2受体不是某一类细胞的特异性抗原标记,但与细胞的免疫表型有一定关系。文内还结合文献扼要讨论了白细胞介素-2、白细胞介素-2受体及辅助性T淋巴细胞在淋巴瘤发病中的作用和意义。  相似文献   

18.
Background Celecoxib, a selective cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibitor, is a non-steroidal anti-inflammatory drug used as an adjuvant to sensitize cancer cells to apoptosis. However, in rats suffering from acute rejection, celecoxib reduced apoptosis of myocardial cells. We hypothesize that celecoxib reduces myocardial apoptosis either by inducing apoptosis in peripheral blood lymphocytes (PBLs) or by altering the percentage of CD4~ and CD8~ lymphocytes. Methods After cardiac transplantation, rats were administered intragastrically with celecoxib (50 mg/kg per day) for 3, 5 or 7 days, at which time the graft was excised and evaluated for organ rejection. In addition, PBLs were isolated from the blood to determine PBLs apoptosis, and the percentage of CD4+ and CD8+ lymphocytes. Results Celecoxib induced PBLs apoptosis in 3 days, but protected the cells from apoptosis at 5 and 7 days. Also, the percentage of CD4+ lymphocytes decreased only at 3 days, but a reduction in the percentage of CD8+ lymphocytes was not seen until 7 days after the transplant surgery. Celecoxib only decreased acute rejection at 5 days, with no discernible difference in rejection after 3 and 7 days. Conclusions The results suggested that celecoxib displayed a multiple physiological function in a time-dependent manner. Chin Med J 2009; 122(2): 188-192  相似文献   

19.
目的:探讨以NY-ESO-1为靶抗原、树突状细胞(dendritic cell,DCs)为抗原载体激发特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)反应的能力,以明确特异性CTLs的抗肿瘤免疫功能.方法:在临床前实验基础上选择2014年11月至2015年10月于中国医学科学院肿瘤医院治疗的符合入选标准的15例Ⅱ~Ⅲ期HLA-A0201+NY-ESO-1+胃癌患者外周血,分离单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)和外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes,PBLs),并诱导出成熟DCs (mature dendritic cell,mDCs);将人工合成的NY-ESO-1多肽负载mDCs后通过流式细胞仪(flow cytometry,FCM)分析细胞表型,检测体外反复致敏PBLs后负载NY-ESO-1的DCs激发特异性CTLs的能力以及CTLs对NY-ESO-1+胃癌细胞的体外杀伤活性,同时患者回输CTLs细胞,每2周1次,共回输2次,检测回输前后患者外周血细胞因子和特异性CTLs水平变化.结果:采用FCM分析DCs细胞表型显示HLA-DR+ CD11c+细胞为93.6%±1.2%,其中CD80+细胞为87.3%±3.6%,CD83+细胞为82.8%±2.5%,CD86+细胞为93.4%±6.4%.患者外周血分离的PBLs经NY-ESO-1多肽负载的DCs反复诱导后,细胞不断增殖,其中未负载多肽的DCs也能促进PBLs增殖,但细胞增殖指数(proliferation index,PI)明显低于负载多肽的DCs,两者比较差异有统计学意义(P<0.05).负载NY-ESO-1多肽DCs诱导的NY-ESO-1多肽特异性的CTLs比例较未负载NY-ESO-1多肽DCs诱导的对照组明显升高(5.2%±1.2%vs0.4%±0.1%,P<0.05),且致敏后CTLs对NY-ESO-1+胃癌细胞及负载NY-ESO-1+多肽T2靶细胞的杀伤率明显高于对照组.输注CTLs细胞后,患者体内血清中细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-12水平较治疗前显著升高[(132.9±10.2)μg/Lvs.(46.4±3.1)μg/L;(101.3±6.4) μg/Lvs.(26.7±1.2) μg/L;(51.3±2.6) μg/Lvs.(26.4±1.1) μg/L;P均<0.05],且患者外周血特异性CTLs细胞比例明显升高.结论:负载NY-ESO-1多肽的DCs体内外均具有激发特异性CTLs反应的能力,可诱导明显的抗肿瘤免疫效应.  相似文献   

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