应用PFGE分析广州稻叶型霍乱弧菌的同源性

目的分析广州40株稻叶型霍乱弧菌的毒力基因和PFGE特征,探讨菌株的同源性和广州稻叶型霍乱弧菌流行的特点。方法应用PCR方法检测稻叶型菌株的4种毒力基因,采用限制性内切酶NotI对菌株进行PFGE分型,使用BioNumerics Version4.0软件（复选Dice相关系数和UPGMA方法）对菌株进行聚类和同源分析。结果绝大多数水型稻叶霍乱疫情相关菌株为genotypeA型菌,而绝大多数环境分离稻叶型霍乱弧菌为genotypeB型和C型菌。40株霍乱菌株分布于18种pulsotype,水型霍乱疫情相关菌株的pulsotype极为相近（相似性系数98%以上）,而环境分离的稻叶型霍乱弧菌呈现明显的pulsotype多样性。结论是否携带ctxA基因是稻叶型霍乱弧菌人源分离株与环境分离株的主要区别之一,绝大多数环境分离的稻叶型霍乱弧菌与人源分离株的同源性较低,但仍需加强对不同来源菌株的同源性分析和溯源追踪。     

独活寄生汤加减配合牵引推拿治疗腰椎间盘突出症临床观察

目的观察独活寄生汤加减配合牵引推拿治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法将确诊为腰椎间盘突出症的患者126例,随机分为治疗组和对照组各63例。治疗组采用独活寄生汤加减配合牵引推拿治疗,对照组单纯采用牵引推拿治疗。14 d为1个疗程。观察比较两组患者治疗前后疼痛程度(VAS评分)的变化及疗效。结果治疗组总有效率为92.1%,对照组总有效率79.4%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组与对照组组内治疗前后疼痛程度VAS评分比较差异有统计学意义(P<0.01),组间差值比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论独活寄生汤加减配合牵引推拿治疗腰椎间盘突出症效果确切,能明显缓解患者腰腿痛症状,提高生活质量,值得推广运用。     

独活寄生汤对腰椎间盘突出症兔前列腺素E2的影响

背景:独活寄生汤是中医药治疗腰椎间盘突出症的基本方,但其具体的作用机制尚不明确。目的:观察独活寄生汤对腰椎间盘突出症模型兔椎间盘局部组织及血浆前列腺素E2的影响。方法:采用造模器造模法建立腰椎间盘突出症新西兰家兔模型,于造模后1周行CT检查确定造模成功后,分别给予13.8g/kg独活寄生汤、2.3mg/kg扶他林或等量生理盐水进行灌胃,2次/d,连续灌胃2周。并以正常及假手术兔作为对照。结果与结论:①苏木精-伊红染色显示腰椎间盘突出症模型兔病变髓核及纤维环组织内可见肉芽组织长入、新生血管形成及大量炎性细胞浸润,经灌胃独活寄生汤及扶他林后,可见炎性细胞浸润明显减轻。②ELISA结果显示,腰椎间盘突出症模型兔局部软组织及外周血浆中的前列腺素E2含量明显增加,给予独活寄生汤或扶他林后其含量明显下降(P<0.01),而独活寄生汤组和扶他林组比较差异无显著性意义(P>0.05)。说明前列腺素E2在腰椎间盘突出症中起重要作用,能介导体内炎性反应;独活寄生汤能通过调控腰椎间盘突出症模型兔体内前列腺素E2的表达,从而起到治疗作用,且其在抗炎方面的作用与非类固醇类解热镇痛药扶他林相当。     

猪链球菌2型多重PCR鉴定方法建立

目的 建立猪链球菌2型多重PCR鉴定方法.方法 根据猪链球菌种特异基因16S rRNA序列和猪链球菌2型特异性荚膜多糖编码基因cps2J基因序列,设计和合成2对特异引物,通过条件和体系优化,建立多重PCR检测方法.结果 猪链球菌2型参考株及18株分离株均扩增到清晰的目的 条带,而6株非猪链球菌2型参考菌株不能扩增出目的 条带.结论 多重PCR可以用于猪链球菌2型检测,特异性和敏感性好,为该病的快速诊断和分子流行病学调查提供了新的技术方法.     

沙门菌invA基因荧光定量PCR检测

沙门菌是引起食源性感染的常见致病菌~([1]),常规检测方法有分离培养、生化鉴定、血清学试验等.由于沙门菌有2 000多种血清型,因而监测工作多繁琐、费时、费力.实时荧光定量PCR检测技术是近年来的新方法,已经愈来愈多地用于病原体诊断~([2]).     

hsp60基因序列分析及其在病原菌鉴定中的应用

目的研究致病菌hsp60基因序列的差异性，为建立致病菌快速鉴定方法及为其他研究提供科学依据。方法在GenBank中查找所需却60基因序列，运用分子生物学软件Primer5．0和Oligo6．0设计合适的通用简并引物，采用合适的扩增条件扩增常见致病菌hsp60基因片段。利用分子生物信息学分析hsp60基因序列的保守性、变异性及菌株间种系进化关系。结果可扩增出常见致病菌hsp60基因片段，序列比较研究显示hsp60基因序列保守与变异并存，保守区与变异区呈“锯齿状”分布。种系进化关系同16SrRNA、23SrRNA分析结果一致。结论hsp60基因序列分布特点为建立致病菌的分子生物学快速鉴别诊断方法如基因芯片研制等提供了可靠的科学依据和重要的实验基础。     

大黄生地汤治疗蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛疗效观察

目的观察大黄生地汤对蛛网膜下腔出血 (SAH)并发脑血管痉挛 (CVS)的疗效.方法将患者 36例随机分为两组,对照组予西医常规处理,治疗组在此基础上予大黄生地汤加味;观察两组 HUNT和 HESS分级、 TCD治疗前后的变化.结果治疗组在 HUNT和 HESS分级、脑血流量改善方面均优于对照组.结论大黄生地汤加味治疗 SAH并发 CVS有较确切的疗效.     

非可培养状态霍乱弧菌的间接免疫荧光检测

目的建立检测水中活的非可培养状态霍乱弧菌(O1群、O139群)的间接免疫荧光法。方法用本实验室人工转化的非可培养状态霍乱弧菌的菌液制成抗原片,用混合诊断血清(抗O1群、O139群)作为一抗,异硫氰酸荧光素(FITC)标记猪抗兔IgG作为二抗,进行间接免疫荧光检测。结果该方法可以成功检测出水中非可培养状态霍乱弧菌,其检测下限约为104cells/400 ml。结论该方法具有较好的特异性和灵敏度,可作为自然水体中非可培养状态霍乱弧菌的检测方法,用于霍乱弧菌的生态研究。     

广州市市售食品食源性致病菌污染状况调查

目的了解广州市市售食品中食源性致病菌的污染状况。方法采用随机抽样方法分别对我市10个区以及两个地级市的集贸市场、超市、宾馆饭店及个体熟食销售点的7类食品共363份样品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、单增李斯特菌、肠出血性大肠杆菌O157∶H7、空肠弯曲菌等6种致病菌依据国标的方法进行了监测。结果363件样品中检出致病菌72株。其中副溶血性弧菌检出率为33.93%,主要污染水产品;金黄色葡萄球菌为3.00%,主要污染熟食品;沙门氏菌和单增李斯特菌检出率分别为1.93%和0.66%;未检出大肠杆菌O157:H7和空肠弯曲菌。在各类食品中,致病菌带菌数有显著性差异(以!2检验,P<0.005)。水产品致病菌带菌率最高,以副溶血性弧菌为主;其次为生肉类,以检出沙门氏菌为多。结论我市市售食品存在食源性致病菌污染,水产品和生肉类是主要污染食品。应加强市售食品监督管理,以减少可能引起食源性疾病的因素。