上海市黄浦区饮服从业人员沙门菌监测分析

在中国沙门菌引起的食物中毒占细菌性食物中毒的第一位~([1]).沙门菌可通过病人或带菌者污染食品及餐具传播,也可通过日常生活接触传播,引起腹泻病及细菌性食物中毒.为了解本地区饮食、服务行业从业人员的沙门菌分布状况,对上海市黄浦区2008年饮服从业人员进行沙门菌检测.结果报告如下.     

基于聚合酶链式反应的肠道病原菌检测技术

正肠道感染性疾病重要病原菌,如志贺菌和沙门菌等感染发病率高、传播速度快、耐药发生率也高~([1-2])。据文献报道,肝硬化~([3])、HIV感染~([4])、炎症性肠道病~([5])以及血糖调节~([6])等均与肠道菌群失调有关。此外,引起胃肠道感染的食源性致病菌是食品安全的严重隐患~([7]),可引起胃肠炎、败血症等疾病。因此,快速检测威胁人类健康的病原菌刻不容     

保健食品中沙门菌的快速检测方法

沙门菌(Salmonella)是革兰氏阴性无芽孢杆菌,寄生在人类和动物肠道内,该菌有200多种,致病菌只占少数,如伤寒、副伤寒沙门菌。引起食物中毒或败血症,如鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌等十余种.因此,对该病菌的检测和对该病的有效防治显得尤为重要。对沙门菌进行快速检测,及早发现传染源,切断传播途径,是最有效地防治沙门菌病的手段。沙门菌传统的检测方法是先采用选择性培养基增菌,然后分离培养、生化反应和血清学鉴定等,检验程序十分繁琐,且肠杆菌科细菌间的生化反应多有交叉,需4 d～7 d才能完成,传统的检测方法检测周期长,所     

胶体金免疫层析试纸快速灵敏检测沙门菌

目的建立快速、灵敏检测沙门菌的免疫层析试纸方法。方法根据沙门菌的16S DNA序列设计引物进行PCR扩增,并根据PCR产物设计2种特异性探针(探针B和探针F),分别在其5'端和3'端标记Biotin和FAM。PCR产物与探针杂交后应用于免疫层析试纸条。当检测有沙门菌时试纸条会出现2条红线,当没有沙门菌会出现1条红线。对探针的浓度进行优化后,检测沙门菌以及其他7种细菌分析该方法的特异性,并检测不同浓度(107cfu/ml~101cfu/ml)的沙门菌,分析其灵敏度。结果探针的最优浓度为1μmol/L,检测除沙门菌外的其他7种细菌,结果均显示阴性,检测沙门菌的最低浓度为10~2cfu/ml。结论该实验方法的灵敏度高、特异性好,适用于检测沙门菌,有良好的应用性。     

医院餐厅从业人员肠道沙门菌属带菌调查

目的 了解并分析餐厅从业人员肠道沙门 菌属携带状况、菌型分布及耐药性.方法 对某医院7个餐厅工作人员的1007份查体便标本进行增菌和分离,对可疑沙门菌属进行生化、血清学分型鉴定,并采用K-B纸片法检测药物敏感性.结果 该医院餐厅工作人员沙门菌的总携带率是4.37％,有B、C1、C2、D1和E4等血清群；肠炎血清型出现多耐药菌株.结论 该地区餐饮从业人员肠道沙门菌属的携带比较严重,应加强健康检查和食品卫生培训.     

伤寒和甲型副伤寒沙门菌复合PCR检测

目的 建立用于快速和特异检测伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的复合PCR方法.方法 根据rfbS、rfbE、fliC和vi基因序列设计4对PCR引物,对54株沙门菌和其他菌属的菌株进行复合PCR检测.结果 采用所建立的复合PCR方法可分别检测到伤寒和甲型副伤寒沙门菌的3条和2条特异性条带带型,可与其他菌株带型准确分开.结论 本研究建立的复合PCR方法可用于检测伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌.     

应用PCR法检测沙门菌

目的 研究沙门菌的PCR检测方法.方法 引物选择沙门菌的hilA基因,应用PCR法检测沙门菌.结果 PCR能检测经选择性增菌液培养的沙门菌,扩增片段在497 bp.结论 应用PCR检测沙门菌,具有快速、特异、灵敏和简便的特点.     

食品中沙门菌变性高效液相色谱检测技术的研究与方法建立

目的:应用PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术建立食品中沙门菌的快速检测方法.方法:根据沙门菌fimY基因序列的特点设计特异性引物,PCR扩增的产物经DHPLC技术进行快速检测.以沙门菌等89株参考菌株做特异性检测;沙门菌液体培养物稀释成不同梯度,做灵敏度检测.结果:试验结果表明该方法有很好的特异性,而其它非沙门菌均为阴性.该方法灵敏度较高,检测低限可达到45 cfu/ml.结论:该方法可以快速、准确检测食品中沙门菌,是食品中致病菌检测的新技术和新方法.     

结晶紫沙门菌培养基应用研究

目的:研究结晶紫沙门菌培养基应用于健康人群粪便中志贺菌和沙门菌检测效果.方法:采用结晶紫沙门菌培养基和SS培养基配对,同时对同一样本进行检验.结果:对已知志贺菌和沙门菌的检出率为100%;对12048份样本检验,沙门菌的检出率前者为0.42%,后者为0.27%(χ2=6.564,P<0.025).结论:沙门菌培养基检测志贺菌和沙门菌的效果明显优于SS培养基.     

应用多重PCR检测食品中的沙门菌

目的 建立快速检测食品中沙门菌的多重PCR方法. 方法应用软件设计4对沙门菌群特异引物,优化多重PCR扩增条件与样品处理方法,分别对61株沙门菌、14株非沙门菌及模拟标本进行检测,观察方法的特异性、敏感性和可行性. 结果建立的多重PCR检测所有的沙门菌均能扩出清晰、特异的预期条带,而非沙门菌均未检出;每反应的灵敏度平均为100 cfu.对食品中人工污染的沙门菌的检测,最低检测量是10 cfu,检测时间为8～9 h,与培养法比较,阳性符合率100%;对市售的481份禽制品进行检测,阳性结果12份,而细菌培养法检测阳性结果为10份. 结论多重PCR检测沙门菌敏感、特异、省时、省力,适用于沙门菌快速检测.     

一起食源性疾病暴发事件分离的2种血清型沙门菌的病原学分析

目的 对一起食源性疾病暴发事件中分离的2种血清型沙门菌进行病原学分析。方法 采集2022年9月8日某学校暴发事件中病例肛拭子11件、可疑污染食品13件和环境样本10件；对病例肛拭子分别使用亚硒酸盐煌绿增菌液和脑心浸液肉汤（BHI）进行增菌培养，在完成常见肠道病原菌荧光PCR检测后，根据结果开展相应致病菌的分离培养；对可疑污染食品参照食品安全国家标准进行检测；每份肛拭子样本和食品样本均挑取多个疑似沙门菌菌落进行血清学凝集和全基因组测序；根据全基因组测序结果确定沙门菌血清型，基于菌株核心基因组单核苷酸多态性（SNP）进行聚类分析。结果 病例肛拭子和可疑污染食品沙门菌检出率分别为9/11和5/13，其中4例病例肛拭子和4件可疑污染食品样本均分离到2种血清型沙门菌（乌干达沙门菌和伊迪坎沙门菌），其余阳性样本分离沙门菌均为单一乌干达沙门菌血清型或单一伊迪坎沙门菌血清型。11件病例肛拭子样本接种BHI增菌液后12 h和24 h沙门菌荧光PCR检出率均为9/11，与分离培养结果一致。2种血清型沙门菌在基于核心基因组SNP构建的聚类树中形成2个相互独立且遗传距离较远的分支，而每一种血清型沙门菌也表现出基因组多态性，乌干达沙门菌之间SNP差异个数介于0~14个，伊迪坎沙门菌之间SNP差异个数介于0~23个。结论 本次事件为乌干达沙门菌和伊迪坎沙门菌共同导致食源性疾病暴发事件，基于BHI对病例肛拭子增菌并进行沙门菌荧光PCR检测的方案可在暴发中应用。     

沙门菌实验室检测技术研究进展

自从1885年分离出沙门菌后,对沙门菌的检验普遍采用传统培养方法,其检验结果需4~7天,该综述描述了沙门菌检测领域的研究进展,从各种免疫学检测方法到各种分子生物学的检测方法的发展过程,直到最近几年新出现的环介导等温扩增（LAMP）技术检测沙门菌。反映了人类在检测沙门菌方面进行了不断的创新,一直在追求一种简单、快速的检测方法。     

多位点序列分型和脉冲场凝胶电泳技术辅助鉴定肠炎沙门菌

伤寒沙门菌和甲、乙、丙型副伤寒沙门菌引起肠热型感染,而肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鸭沙门菌等则多引起急性胃肠炎型感染.准确的沙门菌菌株鉴定对于传染病的预防控制有重要意义.笔者应用肠杆菌科细菌鉴定系统ATB ID32E和API 20E对一起食源性疾病暴发事件中分离到的2株沙门属菌株及1株分离自住院患者的沙门属菌株进行生化鉴定,同时进行血清凝集试验.     

沙门菌MFS外排泵耐药性相关基因的研究

目的调查沙门菌9种MFS外排泵耐药性相关基因的分布情况以及沙门菌的耐药情况。方法收集2012年4月-2014年8月温州地区176株沙门菌,用PCR方法检测9种外排泵基因(emr B3、emr B5、emr D1、emr D3、emr K、tet B、floR、yie O、yeb Q)并测序,进行NCBI基因数据库检索,同时测定菌株的MIC值。结果 176株沙门菌中9种MFS外排泵耐药基因均能检出,每株沙门菌中均检测到了2种~8种基因。药敏试验显示176株沙门菌除对左氧氟沙星、加替沙星、阿米卡星、亚胺培南完全敏感外,对其余17种抗生素均产生一定耐药性,所有菌株都呈2种及2种以上抗生素的耐药。结论沙门菌中MFS外排泵耐药性相关基因携带率高,或许是沙门菌高度耐药的一个重要原因。沙门菌呈多重耐药趋势,建议加强对生畜禽类沙门菌的监控和耐药性监测工作,以防止耐药菌株引起的食物中毒和暴发流行。     

9株鼠伤寒沙门菌的生物学特性实验研究

正浙江省仙居县于2013年起开展食源性疾病的主动监测,沙门菌检测是其中的一项监测指标。2013—2014年共收到腹泻标本426份,检出沙门菌26株,检出率为6.1%,其中鼠伤寒沙门菌9株,占总沙门菌检出数的34.6%。9株鼠伤寒沙门菌显示出多项不同的生物学特性,有些结果对从事沙门菌检测工作者有一定的参考和借鉴作用,药     

基于基因水平的沙门菌检测、鉴定及分型研究进展

沙门菌是引起我国食源性疾病的重要致病菌。传统的沙门菌生化鉴定和血清分型方法已不能满足日益繁重的检测工作要求,快速灵敏的分子生物学方法越来越多地应用于沙门菌研究中。本文就基因水平的沙门菌检测、鉴定及分型最新进展进行综述。     

荧光PCR法与细菌培养法检测从业人员沙门菌和志贺菌的对比研究

目的比较荧光PCR法与细菌培养法对从业人员肠道携带沙门菌和志贺菌的检出率。方法收集2015年7月24日-2015年11月13日4 620份从业人员肛拭子,分别用荧光PCR法和培养法进行肠道沙门菌和志贺菌的检测,比较2种方法的检出率。结果培养法检出沙门菌54株、志贺菌0株,总检出率为1.17%;荧光PCR法检出沙门菌81株、志贺菌1株,总检出率为1.78%。荧光PCR法检测的灵敏度高于培养法检测,差异有统计学意义(χ~2=5.85,P0.05)。荧光PCR法与培养法对比,其灵敏度为100.00%,特异度为99.39%。结论荧光PCR方法操作简便、快速、灵敏度高、特异性强,可降低工作强度,适合在实验室进行常规推广;本区从业人员肠道沙门菌携带率明显偏高,相关部门需加强公共卫生监督。     

食品中沙门菌国家标准检验方法实验室验证及结果分析

目的 实验室验证食品中沙门菌国家标准检验方法的可操作性及可行性.方法 按照国家疾病预防控制中心《食品卫生微生物学检验沙门菌检验》标准验证方案进行.用不同浓度的沙门菌菌悬液人工染菌2类食品共40份,同时用两种增菌液增菌,4种分离培养基分离,对比检出率及分离效果.结果 检出率34.4%,最低检出线为10～2.3 cfu/25 g.结论 该方法使用选择性强、特异性高的分离培养基及快速筛选方法,克服了传统沙门茵检测方法的检测周期较长、所需试剂繁多等缺点.该方法使沙门菌检测具有更好的适用性和可操作性.     

PCR快速检测甲型副伤寒沙门菌鞭毛抗原H-a研究

目的研究快速、特异、灵敏的检测甲型副伤寒沙门菌鞭毛特异相H-a的PCR法.方法选择甲型副伤寒沙门菌鞭毛抗原H-a基因的特异引物进行PCR扩增,检测甲型副伤寒沙门菌标准菌株和我省不同地区上送的57株甲型副伤寒沙门菌以及非甲型副伤寒沙门菌的其它菌株;将甲型副伤寒沙门菌标准菌株按10-1～10-9稀释后扩增比较PCR的检测灵敏度.结果所有甲型副伤寒沙门菌均在329bp处出现甲型副伤寒沙门菌鞭毛抗原基因产物,非甲型副伤寒沙门菌株PCR结果均为阴性;PCR检测下限为103cfu/ml.结论 PCR比传统细菌检测方法更特异、快速、灵敏、简便,为临床诊断、实验室筛查以及流行病学快速查源、溯源提供了新的手段.     

沙门菌快速检测技术研究进展

沙门菌(Salmonella)是一群可寄生在人和动物肠道中、生化反应和抗原构造相似的革兰阴性杆菌.沙门菌在自然界中广泛存在,少数对人致病,主要通过污染的食物和水经口感染,是导致人类胃肠炎及食物中毒的主要病原菌[1].在世界各国的细菌性食物中毒中,由沙门菌引起的食物中毒常居于首位;沙门菌亦是我国内陆地区食源性疾病的首要致病菌[2-3].传统的沙门菌检测方法 耗时长,操作繁琐,常不能满足突发公共卫生事件等领域快速检测的需要.多年来,国内外学者进行了大量研究,以传统方法 为基础,结合免疫学、分子生物学等技术,创建了不少快速、简便的检测方法 .现将沙门菌快速检测技术的研究及应用进展做一综述.