应用PFGE分析广州稻叶型霍乱弧菌的同源性

目的分析广州40株稻叶型霍乱弧菌的毒力基因和PFGE特征,探讨菌株的同源性和广州稻叶型霍乱弧菌流行的特点。方法应用PCR方法检测稻叶型菌株的4种毒力基因,采用限制性内切酶NotI对菌株进行PFGE分型,使用BioNumerics Version4.0软件（复选Dice相关系数和UPGMA方法）对菌株进行聚类和同源分析。结果绝大多数水型稻叶霍乱疫情相关菌株为genotypeA型菌,而绝大多数环境分离稻叶型霍乱弧菌为genotypeB型和C型菌。40株霍乱菌株分布于18种pulsotype,水型霍乱疫情相关菌株的pulsotype极为相近（相似性系数98%以上）,而环境分离的稻叶型霍乱弧菌呈现明显的pulsotype多样性。结论是否携带ctxA基因是稻叶型霍乱弧菌人源分离株与环境分离株的主要区别之一,绝大多数环境分离的稻叶型霍乱弧菌与人源分离株的同源性较低,但仍需加强对不同来源菌株的同源性分析和溯源追踪。     

猪链球菌2型多重PCR鉴定方法建立

目的 建立猪链球菌2型多重PCR鉴定方法.方法 根据猪链球菌种特异基因16S rRNA序列和猪链球菌2型特异性荚膜多糖编码基因cps2J基因序列,设计和合成2对特异引物,通过条件和体系优化,建立多重PCR检测方法.结果 猪链球菌2型参考株及18株分离株均扩增到清晰的目的 条带,而6株非猪链球菌2型参考菌株不能扩增出目的 条带.结论 多重PCR可以用于猪链球菌2型检测,特异性和敏感性好,为该病的快速诊断和分子流行病学调查提供了新的技术方法.     

沙门菌invA基因荧光定量PCR检测

沙门菌是引起食源性感染的常见致病菌~([1]),常规检测方法有分离培养、生化鉴定、血清学试验等.由于沙门菌有2 000多种血清型,因而监测工作多繁琐、费时、费力.实时荧光定量PCR检测技术是近年来的新方法,已经愈来愈多地用于病原体诊断~([2]).     

一起金黄色葡萄球菌食物中毒的病原检测

目的：对一起疑似食物中毒事件进行流行病学调查和病原菌检测以确定致病因素。方法：参照传统分离培养GB/T4789-2003方法对3例患者的3份肛拭子、2份剩余食品、3份厨房公用具棉拭子进行病原菌检测,同时采用环介导等温扩增（LAMP）技术对样品进行病原菌检测;采用mini VIDAS全自动荧光酶标免疫测试系统检测金黄色葡萄球菌肠毒素;采用反向被动乳胶凝集法进行肠毒素分型。结果：采用GB/T4789-2003方法,8份样本中有4份检出金黄色葡萄球菌,LAMP检测结果与GB/T4789-2003方法检测结果一致。4株金黄色葡萄球菌均检出A型肠毒素。结论：该次食物中毒为金黄色葡萄球菌肠毒素所致。     

O139群霍乱弧菌分子流行病学研究

目的分析2001-2006年广州地区霍乱暴发、散发事件及外环境监测中分离的O139群霍乱弧菌的致病相关基因型和PFGE型,追踪菌株的来源和变迁,探讨本地区O139群霍乱流行特点。方法采用多重PCR方法检测O139群菌株的4种致病相关基因,应用脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)对菌株进行分子分型,采用软件Bio Numerics Version4.0对分型数据进行处理和分析。结果广州地区O139群菌株中存在2种致病相关基因型,即A型和C型,18株感染者相关菌株中,除1株外,均为致病相关基因A型;10株珠江水分离株均为致病相关基因C型。28株O139群霍乱弧菌分为20个不同的PFGE型,归为4个聚类群(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ群)。珠江水中O139群菌株存在PFGE克隆型的多样性。O139群暴发中分离的菌株PFGE型相同或相近,O139群散发疫情中的病例分离株与部分暴发株也具有相同或相近的PFGE型。结论分子分型方法结合流行病学资料,可分析O139群霍乱菌株的流行特点,致病相关基因分型可代替噬菌体-生物分型来判断和区分O139群霍乱弧菌的流行株与非流行株,从而为霍乱的预防、控制和预警提供科学依据。     

独活寄生汤加减配合牵引推拿治疗腰椎间盘突出症临床观察

目的观察独活寄生汤加减配合牵引推拿治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法将确诊为腰椎间盘突出症的患者126例,随机分为治疗组和对照组各63例。治疗组采用独活寄生汤加减配合牵引推拿治疗,对照组单纯采用牵引推拿治疗。14 d为1个疗程。观察比较两组患者治疗前后疼痛程度(VAS评分)的变化及疗效。结果治疗组总有效率为92.1%,对照组总有效率79.4%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组与对照组组内治疗前后疼痛程度VAS评分比较差异有统计学意义(P<0.01),组间差值比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论独活寄生汤加减配合牵引推拿治疗腰椎间盘突出症效果确切,能明显缓解患者腰腿痛症状,提高生活质量,值得推广运用。     

hsp60基因序列分析及其在病原菌鉴定中的应用

目的研究致病菌hsp60基因序列的差异性，为建立致病菌快速鉴定方法及为其他研究提供科学依据。方法在GenBank中查找所需却60基因序列，运用分子生物学软件Primer5．0和Oligo6．0设计合适的通用简并引物，采用合适的扩增条件扩增常见致病菌hsp60基因片段。利用分子生物信息学分析hsp60基因序列的保守性、变异性及菌株间种系进化关系。结果可扩增出常见致病菌hsp60基因片段，序列比较研究显示hsp60基因序列保守与变异并存，保守区与变异区呈“锯齿状”分布。种系进化关系同16SrRNA、23SrRNA分析结果一致。结论hsp60基因序列分布特点为建立致病菌的分子生物学快速鉴别诊断方法如基因芯片研制等提供了可靠的科学依据和重要的实验基础。     

广州市市售食品食源性致病菌污染状况调查

目的了解广州市市售食品中食源性致病菌的污染状况。方法采用随机抽样方法分别对我市10个区以及两个地级市的集贸市场、超市、宾馆饭店及个体熟食销售点的7类食品共363份样品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、单增李斯特菌、肠出血性大肠杆菌O157∶H7、空肠弯曲菌等6种致病菌依据国标的方法进行了监测。结果363件样品中检出致病菌72株。其中副溶血性弧菌检出率为33.93%,主要污染水产品;金黄色葡萄球菌为3.00%,主要污染熟食品;沙门氏菌和单增李斯特菌检出率分别为1.93%和0.66%;未检出大肠杆菌O157:H7和空肠弯曲菌。在各类食品中,致病菌带菌数有显著性差异(以!2检验,P<0.005)。水产品致病菌带菌率最高,以副溶血性弧菌为主;其次为生肉类,以检出沙门氏菌为多。结论我市市售食品存在食源性致病菌污染,水产品和生肉类是主要污染食品。应加强市售食品监督管理,以减少可能引起食源性疾病的因素。     

大黄生地汤治疗蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛疗效观察

目的观察大黄生地汤对蛛网膜下腔出血 (SAH)并发脑血管痉挛 (CVS)的疗效.方法将患者 36例随机分为两组,对照组予西医常规处理,治疗组在此基础上予大黄生地汤加味;观察两组 HUNT和 HESS分级、 TCD治疗前后的变化.结果治疗组在 HUNT和 HESS分级、脑血流量改善方面均优于对照组.结论大黄生地汤加味治疗 SAH并发 CVS有较确切的疗效.