分光光度法测定保健食品中总皂甙的不确定度评定

目的评定分光光度法测定保健食品中总皂甙含量的测量不确定度。方法根据测定过程建立数学模型,分析引起测量结果的不确定度来源,并计算各分量引入的不确定度、合成标准不确定度及扩展不确定度。结果当P=95%时,该方法测量保健食品中总皂甙引入的扩展不确定度为±13.2%。结论该方法在测定保健食品总皂甙不确定度的主要来源为μ(x)和μ(Rec),在测定样品时应对方法测试体系的重复性加以控制。     

海马区注射Aβ_(25-35)对大鼠学习记忆能力的影响

目的:对大鼠大脑海马区注射凝聚态的Aβ25-35,观察Aβ25-35对大鼠空间学习、记忆能力的影响以及大鼠脑组织的病理学改变。方法:SD大鼠36只,雌雄各半,将大鼠分为正常组、生理盐水组(双侧海马区各注射5μl生理盐水)、模型组(双侧海马区各注射5μl Aβ25-35),注射后1周进行水迷宫实验,连续7 d,2次.d-1,检测大鼠空间学习、记忆能力的改变状况。模型制作30 d后对各组大鼠脑组织进行苏木素-伊红(HE)染色,在光学显微镜下观察各组脑组织的形态学变化。结果:行为学实验结果显示实验第5、6天模型组的潜伏期明显延长,穿越平台次数明显减少,与生理盐水组和正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);病理学实验显示正常组海马神经元排列整齐、着色均匀,而模型组的海马神经元排列紊乱、细胞核固缩、不规则、胞浆浓缩。结论:大鼠双侧海马区注射Aβ25-35能够制作拟阿尔茨海默病模型。     

再生基因Ⅳ及其碳水化合物识别域促进裸鼠结直肠癌移植瘤血管的生成

目的:探讨再生基因Ⅳ(regenerating gene Ⅳ,RegⅣ)及其碳水化合物识别域(carbohydrate-recognition domain,CRD)对裸鼠结直肠癌移植瘤血管生成的影响。方法:将已转染了重组质粒pcDNA3.1-RegⅣ、pcDNA3.1-Reg Ⅳ△ CRD、空载体质粒的人结肠癌LoVo细胞(分别命名为LoVo/RegⅣ、LoVo/Reg Ⅳ△ CRD、LoVo/negative)和自然生长状态的LoVo细胞分别接种于裸鼠皮下。RT-PCR法检测移植瘤组织中RegⅣ及Reg Ⅳ△ CRDmRNA的表达,免疫组织化学法检测移植瘤组织中血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)和CD34的表达,计数移植瘤组织中微血管密度(microvessel density,MVD)。结果:LoVo/RegⅣ移植瘤组织中VEGF的表达水平高于其他3组,差异有统计学意义(P<0.05);LoVo/Reg Ⅳ△ CRD、LoVo和LoVo/negative组间VEGF的表达水平差异无统计学意义(P>0.05);LoVo/RegⅣ移植瘤组织中MVD值明显高于其他3组(P<0.05),LoVo/Reg Ⅳ△ CRD、LoVo和LoVo/negative移植瘤组织间MVD值差异无统计学意义(P>0.05)。结论:RegⅣ基因参与调控结直肠癌的血管生成,其作用与CRD结构域密切相关。     

32P-磷酸铬-聚L-乳酸缓释粒子近距离放射治疗前列腺癌合并淋巴结转移

目的 观察32P-磷酸铬-聚L-乳酸(32P-CP-PLLA)缓释粒子植入对裸鼠前列腺癌实体瘤和区域淋巴结转移灶的治疗作用.方法 建立裸鼠原位前列腺癌及淋巴结转移模型,4周后分别进行高、中、低剂量(剂量分别为3.7、7.4、14.8 MBq)32P-CP-PLLA缓释粒子瘤体局部植入,观察(1)不同剂量32P-CP-PLLA缓释粒子的体内生物学分布;(2)上述缓释粒子对瘤体和淋巴结病理形态学影响以及抑瘤率;(3)观察血WBC和PLT变化,研究其血液不良反应.结果 SPECT显示32P-CP-PLLA缓释粒子植入后主要聚集在瘤体局部和区域淋巴结,形态学检查显示实体瘤和区域淋巴结转移灶瘤组织呈出血、坏死性改变;抑瘤率与给药剂量正相关,给药剂量为3.7、7.4、14.8 MBq,抑瘤率分别为:(70.16±5.48)%、(80.18±5.84)%、(84.97±4.79)%,无明显骨髓抑制反应.结论 32P-CP-PLLA缓释粒子瘤体局部植入对前列腺癌肿瘤组织和区域性淋巴结转移灶具有杀伤作用.     

RhoGAP结构域在DLC-1基因抑制人结肠癌HT29细胞增殖?侵袭中的作用

目的:探讨Rho蛋白GTP酶活化蛋白(Rho GTPase activation protein,RhoGAP)结构域在肝癌缺失基因1(frequently deleted in liver,DLC-1)抑制人结肠癌HT29细胞的增殖?侵袭中的作用?方法:脂质体转染DLC-1基因及RhoGAP结构域缺失的ΔDLC-1亚克隆至大肠癌HT29细胞株;应用MTT?平板克隆实验检测细胞增殖的改变;Transwell实验观察细胞侵袭迁移能力的改变;流式细胞术检测细胞周期?结果:转染成功后,全长DLC-1基因转染组(pcDNA3.1-DLC1-HT29)与野生型及空载组相比,细胞增殖能力下降,侵袭能力减弱,细胞周期G1期阻滞并诱导凋亡,而ΔDLC-1亚克隆转染组(pcDNA3.1-ΔDLC1-HT29)对细胞增殖?侵袭及细胞周期均无明显影响?结论:DLC-1基因可能是通过其内在的RhoGAP结构域抑制人结肠癌细胞HT29的增殖和侵袭?     

TNFα对小鼠肾上腺皮质细胞系Y1增殖、凋亡的影响

目的：探讨肿瘤坏死因子α（TNFα）对小鼠肾上腺皮质细胞系Y1增殖、凋亡的影响。方法：不同浓度、不同作用时间的TNFα处理小鼠肾上腺皮质细胞系Y1;MTT法检测细胞的增殖;台盼蓝拒染法检测细胞增殖抑制;流式细胞仪检测细胞的凋亡水平;分光光度法检测细胞caspase8/3的变化。结果：不同浓度的TNFα处理Y1细胞不同时间后,细胞的增殖能力明显下降（P〈0.05）;细胞凋亡水平明显提高（P〈0.05）;细胞caspase8/3水平明显升高（P〈0.05）。结论：TNFα可抑制Y1细胞增殖,并通过提高caspase8/3的活性而诱导及促进细胞凋亡。     

几种生物材料的体内生物相容性评价的实验研究

目的:评价乌克兰产聚丙烯酰胺水凝胶(IT)、国产聚丙烯酰胺水凝胶(FH)、天然羟基磷灰石(HA)、人工合成羟基磷灰石(GSN)的体内生物相容性。方法:通过HE染色,比较了24只家兔肌肉组织分别对几种生物材料反应的强弱程度和包膜厚度。结果:植入动物体内90d后,根据炎性反应程度和包膜形成评级,FH与IT的均为Ⅰ级,评价为合格;HA的分别为Ⅳ级、Ⅲ级,GSN的分别为Ⅱ级,Ⅱ级,均超过合格的标准。结论:GSN与HA均超过合格标准,HA引起的组织反应重于GSN。     

干扰素对肺腺癌A549细胞B7-H4分子表达的影响

目的:探讨IFN-α和IFN-γ对人肺腺癌细胞株A549 B7-H4 mRNA和蛋白表达的影响。方法:用不同浓度(100、500、1 000、2 000 U.ml-1)IFN-α和IFN-γ分别处理A549细胞,未经药物处理细胞作对照(对照组)。用MTT法观察细胞增殖活性的差异,RT-PCR观察B7-H4 mRNA表达水平的变化,蛋白质印迹法观察B7-H4蛋白表达水平的变化。结果:IFN-α和IFN-γ对人肺腺癌细胞株A549增殖有抑制作用,其抑制效应具有时间和剂量依赖性(P<0.05)。随着IFN-α浓度的增加,B7-H4分子mRNA和蛋白表达增强(P<0.05),而IFN-γ对B7-H4分子mRNA和蛋白表达影响不明显(P>0.05)。结论:IFN-α和IFN-γ均可抑制人肺腺癌A549细胞株的增殖;IFN-α可增强B7-H4mRNA和蛋白水平的表达,而IFN-γ对B7-H4分子mRNA和蛋白表达影响不明显。     

锌-α2-糖蛋白对结直肠癌细胞株LoVo生物学行为的影响

目的:初步探讨锌-α2-糖蛋白(ZAG)对结直肠癌细胞LoVo的生物学行为的影响。方法:构建和应用ZAG过表达质粒pGCMV/EGFP/Neo/ZAG转染结直肠癌细胞LoVo,免疫组化检测ZAG的表达变化,MTT法检测转染前后细胞增殖能力的变化以及细胞的克隆形成能力和侵袭力的改变。结果:过表达质粒pGCMV/EGFP/Neo/ZAG可成功诱导结直肠癌细胞LoVo表达ZAG,同时其细胞增殖力受到抑制、克隆形成率降低以及细胞的侵袭能力明显降低。结论:结直肠癌细胞LoVo的生物学行为的改变可能与ZAG的过表达相关,其在结直肠癌的发生发展过程发挥抑癌的生物学效应。     

RhoA蛋白通路在DLC-1基因调控人结肠癌HT29细胞周期中的作用及其机制

目的: 探讨Rho A蛋白通路在DLC-1(frequently deleted in liver cancer-1)基因调控人结肠癌HT29细胞周期中的作用及其机制.方法: 构建pcDNA3.1-DLC1质粒载体,脂质体法转染HT29细胞,筛选稳定细胞系;pull-down方法分析Rho A蛋白活性;实时定量PCR检测细胞周期相关蛋白Cyclin D1、p21的表达变化;流式细胞仪检测细胞周期分布.结果: 野生型人结肠癌HT29细胞DLC-1基因表达呈阴性,经转染获得DLC-1稳定表达细胞系.与野生型及空载组HT29细胞相比,转染组细胞Rho A蛋白活性下降;Cyclin D1表达下调, p21表达上调;G1期及凋亡细胞数增加,而G2期细胞数下降.结论: 转染DLC-1基因引起人结肠癌HT29细胞Rho A蛋白活性下调,进而可能通过对Cyclin D1、p21表达的调控使细胞周期G1期阻滞并诱导凋亡,同时分裂前期细胞数减少,细胞增殖受抑.