HSP27基因的克隆与表达

目的构建热休克蛋白27(Heat shock protein 27,HSP27)真核表达质粒以用于肾脏缺血预适应(ischemia Preconditioning,IP)的作用及机制研究.方法利用乳腺癌细胞系MCS-7,用RT-PCR方法扩增HSP27全长基因,将HSP27基因克隆到真核表达载体pAAV-MCS中.重组质粒转染NIH3T3细胞,Western blot法鉴定重组质粒HSP27/pAAV-MCS能在哺乳动物细胞中正确表达.结果RT-PCR方法正确地扩增出全长HSP27基因.限制性内切酶酶切和测序结果证实HSP27基因克隆完全正确.重组质粒转染哺乳动物细胞系NIH3T3后,ECLWestern blot法证实了目的基因能在其中正确表达.结论成功地克隆真核表达重组质粒HSP27/pAAV-MCS,为下一步研究HSP27对肾脏缺血预适应的作用及其机制打下了基础.     

选择性前列腺切除联合膀胱颈切开治疗小体积前列腺增生的临床研究

目的探讨小体积前列腺增生引起膀胱颈出口梗阻的理想治疗方法。方法选择2009年7月至2010年6月,我科收治的小体积前列腺增生124例手术患者资料,其中单纯经尿道前列腺电切除术（TURP组）61例,选择性前列腺切除加膀胱颈切开术（STURP＋TUIBN组）63例。对两组病人的一般状况、术中术后以及随访资料进行对照分析。结果两组病例在年龄、前列腺体积、术前国际前列腺症状评分（IPSS）、最大尿流率（Qm ax）方面比较无明显差异（P〉0.05）。两组病人手术时间、前列腺切除质量、出血量无明显差异。两组患者术后IPSS评分比较无明显差异（P〉0.05）,但较术前均有明显降低（P〈0.01）。两组术后出院时Qm ax较术前有明显改善（P〈0.01）,STURP＋TUIBN组（24.33±7.64）mL/s较TURP组（18.46±5.79）mL/s明显好转（P〈0.05）。两组患者术后6个月随访结果满意,其中STURP＋TUIBN组Qm ax为（28.28±6.46）mL/s,更为理想（P〈0.01）。TURP组中3例出现膀胱颈挛缩（BNC）和5例尿路感染,均较STURP＋TUIBN组多。结论选择性前列腺切除联合膀胱颈切开术治疗小体积前列腺增生具有较好疗效,值得推广应用。     

1 131例社区中老年男性尿流率调查

目的获取中老年男性尿流率资料,了解我国中老年男性基本排尿功能状况.方法将1 131例中老年男性志愿者按年龄段分为4组,分别饮水1 000ml后进行尿流率检测,记录最大尿流率(Qmax),平均尿流率(Qave),排尿量(VV),排尿时间(VT),尿流时间(FT).结果随年龄增加Qmax、Qave、VV都显著降低,不同组间相比均存在显著性差异,Qmax下降率约为年龄每增加10岁,Qmax降低2.3 ml/s.结论中老年男性尿流率随年龄增长而显著降低,部分患者症状与实测尿流率有背离现象,提示不能单纯根据患者症状进行前列腺手术.本研究累积了我国中老年人基本尿流率数据,为进一步研究前列腺增生的诊断和标准化治疗提供了较好的基础.     

CRRT在顽固性频发心衰尿毒症患者肾移植中的应用

目的　总结CRRT在顽固性频发心衰尿毒症患者肾移植中临床应用价值。方法　回顾 2 0例伴发顽固性频发心衰尿毒症患者肾移植的效果及患者围手术期对心衰处理方法 ,特别是对 4例术后常规方法无法纠正和伴有急性排斥反应的顽固性心衰病人 ,采用CRRT。结果　 16例患者通过常规处理安全度过围手术期 ,术后 3个月心脏缩小 ,心功能明显改善 ,移植肾功能正常 ;4例术后仍有频发顽固性心衰致少尿无尿 ,行CRRT ,其中 3例心衰改善后尿量迅速增多 ,肾功能逐渐恢复 ,1例因急性排斥反应肾脏破裂行肾脏修补术后虽经CRRT ,仍死于心肺功能衰竭。结论　肾移植术后频发心衰常规处理无效时 ,CRRT处理简便、安全、有效 ,可以快速纠正心衰 ,提高移植肾灌注 ,增加尿量 ,恢复移植肾功能     

脊髓损伤后逼尿肌细胞钙通道改变

目的 探讨脊髓损伤(SCI)后逼尿肌细胞钙通道改变及其与逼尿肌反射亢进(DH)的关系.方法 建立SD大鼠骶髓上损伤动物模型,进行逼尿肌条钙通道阻滞实验及逼尿肌细胞钙震荡激光共聚焦线性扫描.结果 相同前负荷下逼尿肌条的收缩频率SCI组(2.51±0.39)明显高于正常对照(C)组(1.95±0.58,P<0.05),滴加高浓度T型钙通道阻滞剂咪拉地尔后两者收缩频率降低至相同水平,滴加高浓度L型钙通道阻滞剂异搏定后两者收缩频率下降相同;逼尿肌细胞钙振荡频率SCI组(2.68±0.42)明显高于C组(1.87±0.48,P<0.05),滴加高浓度咪拉地尔后两者钙振荡频率降低至相同水平,滴加高浓度异搏定后两者振荡频率下降相同.结论 SCI后DH的发生与逼尿肌细胞T型钙通道性状改变密切相关.     

血管形成抑制剂TNP-470对膀胱癌抑制作用的实验研究

目的　探讨血管形成抑制剂烟曲霉菌衍生物TNP 470抑制膀胱癌生长的作用机制。　方法　采用TNP 470 (6 0mg/kg)皮下注射治疗T739膀胱癌荷瘤鼠 ,观察肿瘤生长情况。 17天后杀鼠 ,观察TNP 470对肿瘤微血管密度 (MVD) ,肿瘤细胞凋亡指数及增生指数的影响。　结果　TNP 470治疗组肿瘤生长明显缓慢 ,肿瘤抑制率为 46 3 %。组织学检查显示 ,治疗组与对照组相比 ,MVD明显减少 (P <0 0 1) ,肿瘤细胞凋亡指数明显增加 (P <0 0 1) ,增生指数无明显变化 (P >0 0 5 )。　结论　TNP 470对膀胱癌生长有明显的抑制作用 ,其机理可能为抑制肿瘤血管形成 ,引起肿瘤组织缺血 ,从而导致肿瘤细胞凋亡增加     

泌尿道感染防御机制的研究进展

泌尿道感染 (ＵＴＩ)是威胁人类健康的常见疾病之一。Ｍａｓｋｅｌｌ估计约 5 0 %的妇女一生中有过泌尿道感染。我国的普查资料显示 ,女性的发病率为 2 .0 5 %。尽管当今抗菌药物研究迅猛发展 ,品种不断更新换代 ,泌尿道感染的发病率仍居高不下 ,且不断面临新的挑战。抗菌素的滥用、免疫抑制剂的应用等导致一些原来非致病菌引起的感染不断增加。近年来 ,泌尿道感染发病机制的研究已深入到免疫学和分子生物学。下面我们就机体防御机制作一综述。　　病原体进入泌尿道后必须经过定居、粘附及侵入才能导致泌尿道感染。而在正常情况下 ,机体具有…     

逼尿肌自身肌源性变化与逼尿肌不稳定的关系

目的:探讨逼尿肌不稳定(Detrusor instability,DI)的发病机制。方法:建立Wistar大鼠膀胱流出道梗阻(Bladder outlet obstruction,BOO)动物模型,6周后行充盈性膀胱测压分出梗阻后稳定组和不稳定组,进行离体膀胱充盈性测压、逼尿肌条机械牵拉及胆碱类药物刺激试验。结果:不稳定组膀胱充盈至出现收缩时的压力明显低于稳定组及正常对照组,收缩发生时的容积明显低于稳定组;不稳定组逼尿肌条机械牵拉至其出现收缩时的最小张力明显低于稳定组及正常对照组;不同浓度氯化氨基甲酰胆碱刺激诱发的收缩频率各组间差异无统计学意义(P<0.05)。结论:逼尿肌不稳定的发生与逼尿肌自身的兴奋性增强密切相关。     

衰老对大鼠阴茎组织中一氧化氮，cGMP，cAMP的影响及与勃起功能障碍的关系

目的：观察衰老对一氧化氮(NO)，cAMP，cGMP含量变化，探讨其与阴茎勃起功能障碍的关系。方法：应用亚硝酸还原酶法及放免法对不同月龄(2，8，16，24个月)大鼠阴茎组织中NO及cGMP，cAMP含量分别进行检测。结果：随月龄增加，NO含量先增高，再降低，其中8月龄最高，24月龄最低，各月龄组间差异有非常显著性意义(P&;lt;0．001)；cGMP，cAMP含量均随月龄增加而逐渐下降，各月龄组间差异也有非常显著性意义(P&;lt;0．001)。结论：衰老对NO及cGMP，cAMP有显著影响，提示临床应用增加NO，cGMP，cAMP的药物对勃起功能障碍的康复有重要价值。     

锤头状核酶对不同长度mdrl mRNA的体外切割

目的：探讨膀胱癌多药耐药性逆转的新方法。方法：应用计算机地ｍｄｒｌ ｍＲＮＡ二级结构进行模拟，设计针对ｍｄｒｌ ｍＲＮＡ１９５９位ＧＵＣ的“锤头状”（Ｈａｍｍｅｒｈｅａｄ）核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ１，ＲＺ１）基因，定点克隆于质粒ｐＧＥＭＥＸ－１的ＢａｍＨ Ｉ和ＥｃｏＲ Ｉ位点上；将ｍｄｒｌ ｃＤＮＡ ８６４ ｂｐ的片段亚克隆于ｐＧＥＭＥＸ－１的ＨｉｎｄⅢ和ＥｃｏＲＩ位点上，ｍｄｒｌ ｃＤＮＡ １３８