组蛋白去乙酰化酶抑制剂对乙型肝炎病毒复制的影响

目的：研究SIRT1抑制剂sirtinol、曲古抑菌素A（trichostatin A,TSA）对乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）复制的影响,并探讨组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase,HDAC）在HBV复制过程中的作用。方法：运用MTS分析HepG2.2.15细胞对sirtinol、TSA的耐受程度;real-time PCR和Southern blot验证sirtinol和TSA对HepG2.2.15细胞中HBV复制中间体表达的影响;Western blot和ELISA分析sirtinol对HBV核心蛋白（HBc）和HBsAg、HBeAg表达的影响。结果：sirtinol能抑制HBV复制中间体、HBc的表达和HBsAg、HBeAg的分泌,TSA可以促进HBV的复制。结论：SIRT1抑制剂sirtinol具有抗病毒作用。     

几种肿瘤特异性启动子在人肝癌细胞系中的活性比较

目的 克隆甲胎蛋白(AFP)、survivin(SUR)、人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因启动子,检测并评价其在不同肝癌细胞系和正常组织细胞中的转录活性,为肝癌靶向性基因治疗提供依据.方法 采用PCR法扩增获得AFP、SUR、hTERT基因的启动子片段,将之克隆到表达虫荧光素酶基因的报告质粒上,检测AFP、SUR、hTERT基因启动子在肝癌细胞系和正常组织中的转录活性,评价其转录活性水平和肿瘤特异性.结果 成功克隆了AFP、SUR、hTERT启动子,证实AFP、SUR、hTERT启动子在肝癌细胞中具有肿瘤特异性转录活性,SUR启动子活性最高,其活性水平为AFP启动子的52～98倍;hTERT启动子次之,其活性水平为AFP启动子的14～30倍;AFP启动子活性最低.结论 hTERT和SUR启动子在肝癌细胞系中具有较强的启动活性和显著的肿瘤特异性,可望开发成为新型的肝癌靶向性基因治疗工具.     

中国西部地区男男性行为人群艾滋病相关知识及行为调查分析

目的:中国西部地区男男性行为人群(Men who have sex with men,MSM)艾滋病病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染率较高,对该地区MSM的艾滋病(Acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)相关知识及行为进行调查,为制定该人群艾滋病防治策略及行为干预措施提供较为切实的依据和参考.方法:研究设计为横断面调查,于2009年7月至2010年4月对我国西部的重庆、四川、广西三省市1407名MSM进行问卷调查.结果:MSM的年龄中位数是26岁,同性恋者占69.26%,双性恋者占21.40%.艾滋病相关知识知晓率为88.37%.最近6个月,61.22%的MSM有2个及以上同性性伴,7.42%的有同性商业性行为,12.48%的有异性性行为.近6个月内男男肛交性行为时每次都坚持使用安全套的占46.40%.最近6个月与不同对象发生性行为时的安全套使用有差别(P＜0.05).不同地区、是否多性伴和是否有同性商业行为与安全套的使用有关联.结论:中国西部地区MSM人群中普遍存在感染艾滋病的高危行为,且与其较高的艾滋病知识水平分离现象严重,这对该人群的行为干预提出了挑战,因此,探索控制MSM人群艾滋病传播的新干预模式具有重要意义.     

人MxA基因重组真核载体抗乙型肝炎病毒作用的实验室研究

目的:研究重组真核载体PcDNA3.l-MxA体外抗HBV的作用,为研究MxA基因(myxovirus-resistant A)治疗慢性HBV感染奠定基础.方法:将构建成功的重组真核载体PcDNA3.l-MxA转染入HepG 2.2.15.将HepG 2.2.15分为实验组(转染PcDNA3.1-MxA的HepG 2.2.15)和对照组(转染PcDNA3.1的HepG 2.2.15),应用RT-PCR方法检测两组HepG2.2.15内MxAmRNA(P<0.01),并应用ELISA法检测两组HepG2.2.15内HBsAg、HBeAg的水平.结果:RT-PCR扩增结果显示实验组的MxAmRNA水平均较对照组明显升高,实验组HBsAg、HBeAg水平明显低于对照组(均P<0.01).结论:转染重组真核载体PcDNA3.l-MxA HepG2.2.15内MxA蛋白明显抑制了HBV DNA的复制及表达,为进一步研究MxA蛋白体内抗病毒作用提供理论.     

丙型肝炎病毒P7蛋白体外原核表达状况的研究

目的:扩增丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)P7蛋白基因,克隆到多个原核表达系统,观察P7蛋白在体外表达的情况,获取具有生物学活性的HCV P7重组蛋白.方法:设计扩增全长HCVP7基因片段的特异引物,以H/FL质粒DNA(含HCV 1acDNA全长序列)为模板,通过PCR扩增全长HCVP7基因...     

艾滋病暴露前用药优先干预人群筛选研究

目的:筛选艾滋病暴露前用药(Preexposure prophylaxis,PrEP)扩大规模临床试验的适宜高危人群。方法:采用Topsis法对高危人群的9个指标基于PrEP必要性和可行性两个层面进行评估。结果:男性性行为者为最佳目标人群,艾滋病病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染者配偶次之,女性性工作者为较不适宜人群。结论:评价结果符合实际情况,选择的评价指标代表性较好,结果可靠。     

动脉粥样硬化模型小鼠血管平滑肌细胞原代培养及鉴定

目的:介绍动脉粥样硬化模型小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)原代培养及鉴定的方法。方法:分离载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉,组织贴块法获得原代平滑肌细胞,免疫荧光及免疫组化方法检测细胞的纯度和分化状态。结果:培养第3天时,可见自组织块周围长出少量梭形或长梭形细胞,至培养2周细胞融合成片,呈"峰、谷"状生长。肌动蛋白免疫组化及荧光染色显示,细胞传至第6代后纯度在98%以上,证实应用此方法分离原代VSMC可以满足平滑肌体外功能实验的需求。结论:应用组织贴块法培养小鼠VSMC,操作简单,结果稳定,纯度较高,具有推广应用价值。     

性激素结合球蛋白基因Asp327Asn多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的：研究中国汉族人群性激素结合球蛋白（Sex hormone-binding globulin,SHBG）基因Asp327Asn多态性与2型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus,T2DM）发病风险的关系。方法：应用限制性片段长度多态性（Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP）方法,对599例重庆及周边地区汉族人群（T2DM患者248例、正常对照351例） Asp327Asn进行基因分型。用稳态模型（Homeostatic model assessment,HOMA）评估胰岛素抵抗（HOMA-IR）和胰岛β细胞功能（HOMA-B）。结果：Asn等位基因的分布频率T2DM组低于正常对照组（分别为14.5％、20.1％）;与Asp等位基因携带者相比,Asn等位基因携带者患T2DM的风险显著降低（OR=0.62,95％CI为0.42~0.91,P=0.016）。结论：SHBG基因Asp327Asn位点Asn等位基因可能与低T2DM患病风险相关。     

HIV感染者配偶或固定性伴安全套使用影响因素分析

目的 分析影响人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者配偶或固定性伴安全套使用的影响因素.方法 将HIV感染者的配偶或固定性伴作为研究对象,采用问卷调查方法收集一般资料及安全套使用情况资料,以等级资料的秩和检验和logistic回归方法分析使用安全套的影响因素.结果 共纳入395位研究对象,其中72.66％的人与配偶或固定性伴发生性行为时每次都使用安全套,15.70％的人从不使用安全套.经统计分析,民族、是否有小孩、艾滋病知识知晓情况、配偶或固定性伴查出感染HIV的时间和自认为从配偶或固定性伴处感染HIV的可能性是安全套使用的影响因素.结论 我国HIV感染者配偶或固定性伴安全套的使用状况仍不甚理想,其影响因素是多方面的.在以后的工作中,应针对重点人群,加强艾滋病的干预工作,并按时进行高危人群的筛查,以便及早采取预防措施.     

HIV感染高危人群暴露前预防用药临床试验依从性分析

目的 了解HIV感染高危人群暴露前预防用药(pre-exposure prophylaxis,PrEP)临床试验的依从性及可能的影响因素.方法 采用非概率抽样法筛选出352名受试者进入研究队列,其中男男性行为者(MSM) 153人、女性性工作者(FSW)36人、HIV感染者固定性伴侣(PAR) 163人,随机决定其每日1次或每周2次服药方式,分别在0、4、8、12、16、20、24、28周进行随访观察,从队列保持和药物漏服两个方面了解PrEP依从性情况.采用Cochran-Mantel-Haenszel (CMH)检验进行单因素分析,多因素分析采用logistic回归分析.结果 本次高危人群PrEP临床试验中有76.70％(270/352)完成了28周的观察期,药物漏服者所占比例在随访期间波动约为35％,总体依从性得分平均(82.12±27.48)分,中位数95.24分.经logistic回归分析,影响本次PrEP临床试验队列保持的因素为月收入水平、试验期间是否有担心和困难、试验期间是否有医疗服务需求、随访管理模式;影响药物漏服的因素为婚姻状况、服药方式、试验期间是否有担心和困难、是否出现不良反应;影响总体依从性得分的因素为人群类别、性伴侣数、是否有伴随用药、试验期间是否有医疗服务需求、随访管理模式.结论 本次HIV感染高危人群PrEP临床试验的整体依从性高,影响因素多,在后续研究中应特别加强流动性较强的MSM和FSW人群的依从性管理,并继续推广由专人随访的队列管理模式,适当增加随访次数,不同特征个体分类管理,从而确保临床试验的高依从性.