甘草黄酮对荷瘤(S180)小鼠免疫细胞数量的影响

目的：研究甘草黄酮对荷瘤（S180）小鼠免疫细胞数量的影响,探讨甘草黄酮抗肿瘤作用的免疫学机制。方法：取荷瘤（S180）小鼠,随机分4组：生理盐水对照组、甘草黄酮高、中、低剂量组,每组10只,灌胃给药9天后,采用血细胞分析仪计数血液中白细胞、淋巴细胞的数量;流式细胞仪检测T细胞亚群百分率。结果：甘草黄酮最佳抑瘤率为52.3%（高剂量组）;甘草黄酮组血液中白细胞总数、淋巴细胞总数均高于生理盐水对照组,高剂量组增加最多,P〈0.01;甘草黄酮给药组CD4＋/CD8＋T细胞比值明显高于生理盐水对照组,以高剂量组为最高,P〈0.01。结论：甘草黄酮增加荷瘤（S180）小鼠效应免疫细胞的数量,从而达到抗肿瘤作用。     

定心方防治心肌缺血再灌注心律失常大鼠的心肌蛋白质组初步研究

目的:观察心肌缺血再灌注心律失常大鼠心肌蛋白质组表达谱及定心方对其的干预作用。方法:采用冠脉结扎再松开的方法制备动物模型,采用双向凝胶电泳及计算机图像分析系统对心肌总蛋白进行分离分析。结果:模型组动物发生各种心律失常,多个蛋白质的表达发生了变化,定心方作用后,心律失常有所减轻,蛋白质表达谱也发生变化。结论:缺血再灌注心律失常的发生及定心方的干预作用可能与心肌某些蛋白质表达的变化有关。     

One Hundred and Seven Middle-Aged and Senile Cases of Coronary Heart Disease with Ventricular Premature Beat Treated by Qing Xin An Shen Fang

The therapeutic principle of clearing away the heart-heat to induce tranquilization was adopted in107 middle-aged and senile patients with ventricular premature beat of coronary heart disease on thebasis of pathogenic features of phlegm,heat,blood stasis and deficiency in this condition.Qing XinAn Shen Fang(清心安神方 a formula for clearing away the heart-heat to induce tranquilization)wasused in the treatment group and compared with mexiletine and Fu Fang Dan Shen Tablets(复方丹参片 Compound Salvia Tablets)used in the control group.The results turned to be that the markedlyeffective rate was 85.1% and the total effective rate 96.3% in the treated group,better than that inthe control group,with the former having a good antihypertensive and antihyperlipemic effect and aneffect of improving microcirculation and clinical symptoms.     

一种基于HIV-1 TAT蛋白质转导结构域细胞内转导系统的成功改建

目的 探索本室构建的pET14b-His-TAT-Flag重组载体表达的融合蛋白在细胞中转导效率低的原因，建立高效的细胞内转导系统。方法 通过PCR方法去除原有载体中的Flag序列，在改建正确的pET14b-His-TAT重组载体基础上插入EGFP编码序列，将经酶切、DNA测序鉴定正确的pETl4b-His-TAT-EGFP质粒转化E.coli BL21（DE3）。经IPTG诱导表达、SDS-PAGE鉴定正确，再经蛋白透析、过滤处理。将His-TAT-EGFP融合蛋白加入ECV304细胞中，用荧光显微镜观察。结果 重组质粒pET14b-His-TAT融合表达载体和pET14b-His-TAT-EGFP重组载体经酶切、DNA测序鉴定证实构建成功。表达纯化出了高纯度His-TAT-EGFP融合蛋白并具有较高细胞内转导活性。结论 成功改建pET14b-His-TAT-Flag重组载体，正确构建pET14b-His-TAT-EGFP载体，His-TAT-EGFP融合蛋白高效表达。并具有明确的细胞内转导活性。     

补阳还五汤防治动脉粥样硬化炎症形成的研究进展

动脉粥样硬化（AS）是一种炎症。AS炎症的发生和发展经历了内皮功能障碍、脂质条纹形成、晚期复杂斑块，不稳定斑块等四个主要阶段。补阳还五汤从AS发生和发展的四个阶段防治动脉粥样硬化．     

p38 MAPK在细胞内的定位及其对LPS刺激的反应

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)转导通路调节着生长、分化、凋亡、细胞周期、应激反应等多种细胞过程.p38通路是新近鉴定的一条MAPK信号转导通路,参与了炎症、应激、细胞周期和凋亡等病理生理过程.蛋白激酶特定的细胞内定位及其在特定刺激作用下的移位是细胞信号维持特异性转导的重要机制之一.为了探讨p38信号转导的过程及其特异性机制,本研究应用激光共聚焦显微镜对p38MAPK4种不同的亚型在单核细胞、平滑肌细胞、心肌细胞和内皮细胞在静息和受到不同刺激的条件下的细胞内定位进行了观察,发现未受刺激的静止单核细胞,p38(α)蛋白激酶处于未激活状态,弥漫性地分布于细胞中;单核细胞、平滑肌细胞、心肌细胞和内皮细胞在受到LPS刺激后,p38(α)由胞浆移位到胞核;LPS刺激单核细胞15min后,p38开始出现明显的细胞核移位,于LPS刺激后45min入核量(核区荧光强度)达到峰值,之后维持于平台期.LPS诱导RAW细胞p38激酶活性呈一过性增强,在LPS刺激后2h其活性逐渐恢复到接近基础水平.LPS刺激RAW细胞p38移位入核明显滞后p38激活过程,提示p38移位后入细胞核依赖于p38磷酸化活化,p38磷酸化活化及由细胞浆移位到细胞核是一系列相继发生的连续事件.用p38-红色荧光蛋白融合表达载体在哺乳动物细胞的转染实验也证实了上述结果.     

RNA干扰人脐静脉血管内皮细胞组织因子基因表达

目的 利用RNA干扰技术沉默脐静脉内皮细胞中组织因子基因,实现瞬时沉默,为进行组织因子(TF)表达干扰的体内试验进行探索.方法 设立3种处理方法:①空白未干扰;②假干扰;③RNA干扰,每种实验方法各有3个样本.将合成的人组织因子基因(NM 001993)干扰片段shRNA序列,扩增、提取、测序正确后,转染至人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),分别对3种处理方法后TF基因沉默前后mRNA的表达采用Gel-Pro Analyzer软件进行区带灰度值扫描并分析、TF蛋白水平的表达采用免疫荧光检查进行观察.结果 shRNA转染到HUVECs后TFmRNA的表达处理间差异显著,F=27.657,P=0.001,未干扰和假干扰之间没有显著性差异(P=0.103,>0.05),未干扰和干扰之间(P=0.000,<0.05)有显著性差异.空白未干扰TF免疫荧光检测呈现"满天星"的表现,在阴性对照组荧光染色略有减少,在RNA干扰组TF蛋白表达明显减少.结论 HUVECs中TF的表达被所构建的pENTRTM/U6-TF-shRNA载体明显抑制,有可能成为未来出凝血及其它疾病的新的治疗手段之一.     

人组织因子基因RNA干扰载体的构建与鉴定

目的 构建人组织因子基因RNA干扰载体,为达到阻止凝血过程的启动打下基础.方法 利用Invitrogen公司在线软件设计人组织因子基因(NM 001993)干扰片段,合成shRNA序列,再制备双链寡核苷酸(ds oligo),退火后形成的ds oligo双链克隆到pENTRTM/U6载体的粘性末端,连接产物转化到感受态细胞,增菌,质粒DNA小提、测序.将构建的载体转染到脐静脉内皮细胞,应用RT-PCR和免疫荧光验证载体对目的基因的干扰情况.结果 测序证实阳性克隆为pENTRTM/U6-TF-shRNA,转染到脐静脉内皮细胞后组织因子的表达受到明显抑制.结论 成功构建出凝血途径的人组织因子基因RNA干扰载体,为研究组织因子基因RNA干扰载体在凝血疾病中的应用提供了稳定的转染细胞载体.     

知柏地黄丸联合氧氟沙星对慢性细菌性前列腺炎患者血清炎性因子的影响

采用知柏地黄丸联合氧氟沙星治疗慢性前列腺炎31例,观察其对患者疗效及炎性因子的影响.结果 与单纯氧氟沙星治疗比较,知柏地黄丸联合氧氟沙星治疗可显著提高患者疗效,降低患者血清TNF-α和IL-8水平.认为知柏地黄丸通过减轻炎症反应,从而达到治疗慢性前列腺炎的效果.