鼻咽癌放射敏感性与MDR1基因多态性的相关性

目的探讨鼻咽癌放射敏感性差异与多药耐药基因（MDRI）多态性的相关性。方法选择48例行根治性放疗的鼻咽癌患者,根据放疗疗效分为抵抗组和敏感组,针对MDR1基因多态性（21外显子G2677T和26外显子C3435T）行PCR扩增、基因测序分型及构建G2677T—C3435T单体型。结果G2677T TT基因型放射敏感性显著低于GG和GT基因型（P=0．017）,C3435T TT基因型放射敏感性显著低于CC和CT基因型（P=0．022）,携带2677T-3435T单体型的患者放射敏感性显著低于其他单体型携带者（P=0．013）。结论MDR1 G2677T和C3435T多态性可能提示鼻咽癌根治性放疗的疗效。     

加味生脉散对鼻咽癌裸鼠移植瘤放射增敏作用研究及机制探讨

目的探讨加味生脉散对鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗增敏作用及相关机制。方法构建带绿色荧光蛋白的鼻咽癌细胞HONE1稳定株,并接种裸鼠成瘤,实验分为对照组、药物组、放疗组、药物+放疗组,通过测量肿瘤体积及计算抑瘤率,观察药物加味生脉散的放疗增敏作用;荧光定量PCR及Western-blot检测瘤组织MDR1基因的表达差异。结果与对照组相比,放疗组及药物+放疗组的肿瘤抑制率均明显升高(P<0.05),其中以药物+放疗组最明显(P<0.01);MDR1的mRNA及蛋白的表达水平在单纯放疗组与药物+放疗组之间差异明显(P<0.01)。结论加味生脉散对鼻咽癌的放疗具有增敏作用,其增敏机制可能与抑制MDR1基因的表达相关。     

对比超声评价急性脑缺血对犬脑组织血流灌注的影响

目的 应用对比超声(CEU)定量评价急性脑缺血对脑组织血流灌注的影响.方法 健康杂种犬6条,左侧顶骨开窗.动脉夹夹闭左颈总动脉(LCCA)后即刻、30、60、90及120min后行声学造影.对图像进行脱机分析,得出不同时间点左右大脑皮质相应的脑组织微循环血管容积(A)、血流速度(β)及血流量(A×β).以右侧颈总动脉血流及犬头部SPECT扫描与CEU结果相对照.结果 CEU估测脑血流量(CBF)与颈动脉血流量具有良好相关性.夹闭LCCA后同一大脑半球前后不同时间点之间及双侧大脑半球同一时间点之间A、β及A×β均有显著性差异(P<0.001).夹闭侧大脑半球即刻出现缺血性低灌注,对侧大脑半球出现充血性高灌注,120min后两侧大脑半球CBF基本一致.结论 对比超声实现了实时观察犬一侧颈总动脉夹刚后时双侧大脑半球CBF的动态变化过程,血流速度β可能是急性脑缺血时CBF变化的主要调节因素.     

人组织因子基因RNA干扰载体的构建与鉴定

目的 构建人组织因子基因RNA干扰载体,为达到阻止凝血过程的启动打下基础.方法 利用Invitrogen公司在线软件设计人组织因子基因(NM 001993)干扰片段,合成shRNA序列,再制备双链寡核苷酸(ds oligo),退火后形成的ds oligo双链克隆到pENTRTM/U6载体的粘性末端,连接产物转化到感受态细胞,增菌,质粒DNA小提、测序.将构建的载体转染到脐静脉内皮细胞,应用RT-PCR和免疫荧光验证载体对目的基因的干扰情况.结果 测序证实阳性克隆为pENTRTM/U6-TF-shRNA,转染到脐静脉内皮细胞后组织因子的表达受到明显抑制.结论 成功构建出凝血途径的人组织因子基因RNA干扰载体,为研究组织因子基因RNA干扰载体在凝血疾病中的应用提供了稳定的转染细胞载体.     

RNA干扰人脐静脉血管内皮细胞组织因子基因表达

目的 利用RNA干扰技术沉默脐静脉内皮细胞中组织因子基因,实现瞬时沉默,为进行组织因子(TF)表达干扰的体内试验进行探索.方法 设立3种处理方法:①空白未干扰;②假干扰;③RNA干扰,每种实验方法各有3个样本.将合成的人组织因子基因(NM 001993)干扰片段shRNA序列,扩增、提取、测序正确后,转染至人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),分别对3种处理方法后TF基因沉默前后mRNA的表达采用Gel-Pro Analyzer软件进行区带灰度值扫描并分析、TF蛋白水平的表达采用免疫荧光检查进行观察.结果 shRNA转染到HUVECs后TFmRNA的表达处理间差异显著,F=27.657,P=0.001,未干扰和假干扰之间没有显著性差异(P=0.103,>0.05),未干扰和干扰之间(P=0.000,<0.05)有显著性差异.空白未干扰TF免疫荧光检测呈现"满天星"的表现,在阴性对照组荧光染色略有减少,在RNA干扰组TF蛋白表达明显减少.结论 HUVECs中TF的表达被所构建的pENTRTM/U6-TF-shRNA载体明显抑制,有可能成为未来出凝血及其它疾病的新的治疗手段之一.     

乳腺良恶性肿瘤新生血管超微结构及血管生成相关分子的表达

目的 探讨乳腺良恶性不同肿瘤在新生血管超微结构及其血管生成相关分子表达方面的差异性.方法 应用透射电镜观察乳腺良恶性肿瘤新生血管超微结构改变,免疫组化技术检测CD34、VEGF及其受体Flk-1/KDR在两组肿瘤中的表达特性.结果 恶性组新生血管内皮细胞紧密连接开放,基膜不连续,缺乏平滑肌成分.内皮细胞胞体大,细胞核大,畸形,核仁增大、边集,核质比例增大,胞质内吞饮泡多.较多的单个内皮细胞呈裂隙状,血管腔闭塞或明显狭窄.恶性组MVD高于良性组(P<0.05),微血管丰富区位于痛巢边缘.VEGF在乳腺癌性上皮细胞及癌周血管内皮细胞呈强阳性表达,Flk-1/KDR在乳腺恶性肿瘤m管内皮细胞旱强阳性表达,VEGF及Flk一1/KDR尤其在癌灶边缘呈强阳性表达,良性组几乎不表达(P<0.05).结论 乳腺癌新生血管内皮细胞在超微结构及分子表达上具有异质性,VEGF或受体Flk-1/KDR可能是乳腺癌早期诊断及治疗的分子靶标,癌灶边缘可能是下一步进行乳腺癌分子影像观察的重点靶区.     

急性应激对大鼠行为学及蓝斑TH、DBH基因表达的影响

目的观察急性应激状态下大鼠行为学的改变及不同时间点蓝斑内酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺-β-羟化酶(DBH)的基因表达。方法将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组和模型组,模型组又分为造模后1、3、6h组,每组6只。运用束缚和游泳的方法造模,观察其行为学的改变;并分别在造模后相应时间点取出蓝斑,用RT-PCR法检测蓝斑TH、DBH的表达。结果模型组造模前后比较,1、6h组的穿越格数和直立次数明显下降(P<0.05),3h组的穿越格数、直立次数和理毛次数均明显降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01);与对照组大鼠相比,造模后1h组的穿越格数减少(P<0.05),1、3h组的直立次数明显降低(P<0.01,P<0.05),1、3、6h组的理毛次数降低明显且差异均有统计学意义(均P<0.01)。模型组蓝斑TH和DBH表达水平较对照组升高,其中3h组表达最高(P<0.05),1、6h组差异均无统计学意义(P>0.05),TH和DBH两者的表达趋势相似。结论急性应激使大鼠的行为能力降低,蓝斑去甲肾上腺素能神经元中TH、DBH表达增高,使去甲肾上腺素合成增多,而去甲肾上腺素可以显著影响大鼠的情绪行为,在应激过程中起重要作用;TH、DBH表达的增高可能参与了急性应激所致的行为异常。     

浅析医学教学实践中课堂心理氛围的营造

良好的课堂心理氛围能促进师生互动,是保障教学成效的必要条件,对于提高教学质量至关重要。在医学教学中,通过激发兴趣和求知欲,构建和谐的师生关系,教学风格及课程设计等手段,营造和维持学生积极学习的课堂心理氛围,进而达到提高教学成效的目的。     

转化中医学:一种沟通中医基础与临床的研究策略

中医基础研究与临床脱节近年来日趋严重,转化医学是沟通实验室基础研究和临床医学之间的桥梁.将转化医学与中医学结合,建立转化中医学的研究策略,以中医基础理论为指导,强调以患者为中心,从临床中来再转化回临床中去,是一种人本主义的医学研究模式.这需要建立转化中医学团队和中心,对中医经典、经方及病证结合工作进行转化医学研究,深化转化中医学研究工作.     

梗阻性肾间质纤维化大鼠血流变及微循环研究

目的 观察单侧输尿管梗阻(UUO)致大鼠肾间质纤维化的血液流变学及微循环的变化特点,从络病角度探讨肾间质纤维化的中医病机.方法 建立单侧输尿管梗阻致大鼠肾间质纤维化模型,观察肾间质纤维化大鼠全血粘度150/s切变率、30/s切变率、5/s切变率、1/s切变率、红细胞压积、舌下及耳廓的脉络变化,同时检测肾纤维化指标、血清肌酐及尿素氮.结果 肾间质纤维化模型组的全血粘度150/s切变率、30/s切变率、5/s切变率、1/s切变率、红细胞压积、透明质酸酶(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、IV型胶原(C IV)、血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)与假手术组相比显著升高;且肾纤维化指标(HA、LN、 PCⅢ、C IV)与全血粘度的各个切变率及红细胞压积呈显著正相关.结论 肾间质纤维化大鼠血流变及微循环的变化特点一定程度上反应了肾间质纤维化"络脉瘀组"的中医病机,为抗肾间质纤维化"活血通络"的治疗提供初步依据.