定心方及丹参酮防治大鼠缺血再灌注性心律失常的NO机制研究

目的 :研究定心方和丹参酮防治大鼠缺血再灌注性心律失常的一氧化氮 (NO)机制。方法 :大鼠冠状动脉结扎造成心肌缺血 ,松开结扎线造成缺血再灌注模型 ,观测定心方及丹参酮对 NO及心律失常的影响。结果 :NO升高时 ,心律失常的发生减少 ,定心方和丹参酮均能增加心脏血中 NO含量 ,减少心律失常的发生。结论 :定心方和丹参酮能通过增加血中 NO含量而防治心律失常。     

甘蔗渣多糖的纯化工艺

目的:研究甘蔗渣中多糖的最佳纯化工艺。方法:用Savage法、TCA法脱蛋白;用双氧水法、活性炭法脱色;用AB-8,DB301,D101,MG-1大孔树脂纯化甘蔗渣多糖,用苯酚-硫酸法测定多糖的含量。结果:最佳工艺为用Savage法脱蛋白、活性炭脱色、MG-1型大孔吸附树脂纯化(上样量为0.3 g,柱高35 cm、流速10 mL/15 min),经富集后甘蔗渣多糖的含量由51.11%提高到了83.57%。结论:本实验为甘蔗渣多糖的分离纯化条件提供了参考,为甘蔗渣的进一步开发研究提供了依据。     

围手术期术后认知功能障碍的影像遗传学研究

目的研究围手术期脑源性神经营养因子(BDNF)的单核苷酸多态性及其表达与术后认知功能障碍(POCD)的关系。方法结核病手术患者223例术前均行PET检测和认知功能测定。其中20例诊断为POCD者,在治疗后第3天、1个月、3个月分别行PET检测,并进行BDNF基因SNP的检测和基因型分析。结果 12-back任务中,BDNF Val纯合子组比BDNF Met携带者表现差。2BDNF Val纯合子组休息局部脑血流量(rCBF)有更低的基底海马rCBF。3基因型主要作用在几个中线区域,包括中央前回和几个扣带皮质集群以及杏仁核和左颞下叶和中央后回,海马rCBF在BDNF Met携带组呈强阳性,但不在Val纯合子表现。相反的,在中间枕骨和上颞脑回,海马rCBFVal纯合子表现出强阳性,BDNF Met携带组不表现。4海马rCBF明显影响平均海马工作记忆激活,BDNF Met携带组中更明显。5在BDNF Val纯合子组,海马失活强烈预测横向PFC激活和前和后扣带皮质失活。结论 POCD者大脑功能发生变化,在分子水平上也反映大脑存在生理或病理变化。     

经支气管镜中药灌洗治疗肺系疾病初探

介绍经支气管镜进行中药灌洗治疗肺系疾病,对于开创新的中药治疗途径、缩短患者病程、减少医疗费用等方面有着重要的意义。通过对临床病例的观察,说明了此种方法使用于临床的可行性。推测这种方法的使用,对于某些肺系的疑难顽证的治疗,以及借助支气管镜的镜下观察,对中医望诊的发展都有着较为宽广的前景。     

大黄虫丸超微粉剂对肾间质纤维化模型大鼠血流变的影响

目的：探讨大黄虫丸超微粉剂对肾间质纤维化模型大鼠血流变的影响,并论证其抗纤维化机制。方法：通过单侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化大鼠模型,观察大黄虫丸超微粉剂对该模型大鼠血清尿素氮（BUN）、肌酐（SCr）、透明质酸酶（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（CⅣ）、全血黏度150/s切变率、30/s切变率、5/s切变率、1/s切变率以及血细胞比容的影响。结果：大黄虫丸超微粉剂能显著降低肾间质纤维化大鼠血清BUN、SCr、HA、LN、PCⅢ、CⅣ以及全血黏度150/s切变率、30/s切变率、5/s切变率、1/s切变率、血细胞比容指数。结论：大黄虫丸超微粉剂对肾间质纤维化大鼠血流变的改善,进一步证明了活血化瘀是其抗肾间质纤维化机制之一。     

丹参多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的: 探讨丹参多糖Salvia miltiorrhiza polysaccharides(SMPS)对小鼠急性肝损伤的影响。 方法: 将小鼠随机分为空白对照组、模型组、丹参多糖高剂量组(15.6 g ·kg^-1)、丹参多糖中剂量组(7.8 g ·kg^-1)和丹参多糖低剂量组(3.9 g ·kg^-1),连续ig 7 d后,采用尾iv脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肝损伤模型,检测各组小鼠肝组织中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、血清中谷丙转氨酶(ALT)的活性以及肝组织的病理改变。 结果: 丹参多糖能降低LPS诱导的急性肝损伤模型小鼠肝组织中MDA含量,升高GSH含量,降低血清ALT含量。 结论: 丹参多糖对小鼠急性肝损伤有显著的保护作用。     

人组织因子基因RNAi载体pENTRTM/U6-TF-shRNA的构建与鉴定☆

目的： RNAi效应与基因转移有密切关系。拟通过构建组织因子基因RNAi载体，为达到阻止凝血过程的启动打下基础。 方法：实验于2006-11/2007-05在南方医科大学中医药学院中医症候实验室完成。利用Invitrogen公司在线软件设计人组织因子基因（NM_001993）干扰片段，合成shRNA序列，再行寡核苷酸双链的合成，退火后形成的寡核苷酸双链克隆到pENTRTM/U6载体的黏性末端，连接产物转化到感受态细胞，增菌，质粒感受态扩增，质粒DNA小提、测序。 结果：合成的寡核苷酸双链退火处理后，经4%琼脂糖凝胶电泳，紫外观察可见ds oligo和ss oligo清晰可见，双链寡核苷酸与pENTRTM/U6的连接反应，转化到质粒感受态扩增后，提取得到的质粒DNA经过测序结果证实pENTRTM/U6- TF-shRNA为阳性克隆。 结论：成功构建出凝血途径的人组织因子基因pENTRTM/U6- TF-shRNA载体，为研究组织因子基因RNAi载体在出凝血疾病中的应用提供了稳定的转染细胞工具。     

人Toll样受体4胞浆内段融合蛋白表达载体的构建与表达

目的：构建人Toll样受体4胞浆内段（hTLR4C)His融合蛋白表达载体并在原核表达与纯化，以研究其功能及鉴定与其相互作用的蛋白。方法：采用PCR方法扩增hTLR4基因编码区的胞浆内段，并将其重组于pET-DsbA2.0载体中。重组质粒经酶切、序列鉴定分析后，转化大肠杆菌BL21（DE3）。结果：用异丙基β－D硫代半乳糖（IPTG）诱导产生hTLR4胞浆内段的His-DsbA融合蛋白，继而纯化获得了分子量约42kd的融合蛋白。结论：本研究成功地构建了hTLR4胞浆内段融合蛋白表达载体并获得高效表达，为进一步研究提供了重要的实验材料。     

人组织因子基因RNAi载体pENTRTM/U6-TF-shRNA的构建与鉴定

目的:RNAi效应与基因转移有密切关系.拟通过构建组织因子基因RNAi载体,为达到阻止凝血过程的启动打下基础.方法:实验于2006-11/2007-05在南方医科大学中医药学院中医症候实验室完成.利用Invitrogen公司在线软件设计人组织因子基因(NM_001993)干扰片段,合成shRNA序列,再行寡核苷酸双链的合成,退火后形成的寡核苷酸双链克隆到pENTRTM/U6载体的黏性末端,连接产物转化到感受态细胞,增菌,质粒感受态扩增,质粒DNA小提、测序.结果:合成的寡核苷酸双链退火处理后,经4%琼脂糖凝胶电泳,紫外观察可见ds oligo和ss oligo清晰可见,双链寡核苷酸与pENTRTM/U6的连接反应,转化到质粒感受态扩增后,提取得到的质粒DNA经过测序结果证实pENTRTM/U6-TF-shRNA为阳性克隆.结论:成功构建出凝血途径的人组织因子基因pENTRTM/U6-TF-shRNA载体,为研究组织因子基因RNAi载体在出凝血疾病中的应用提供了稳定的转染细胞工具.     

信号肽-FRET荧光蛋白载体的构建及在NIH3T3细胞中的表达

目的 构建带TLR4信号肽的增强型青色荧光蛋白(pECFP-C1-SP)和增强型黄色荧光蛋白(pEYFP-C1-SP)的质粒载体，为使用荧光共振能量转移(FRET)技术研究LPS在细胞膜上的受体识别机制提供依据。方法 采用点突变技术构建了带TLR4信号肽的载体，用脂质体瞬时转染NIH3T3细胞，观察带信号肽载体和融合蛋白载体在细胞内的表达。结果 DNA测序证明所构建的带TLR4信号肽的载体正确；酶切和DNA测序表明融合蛋白载体的构建正确，TLR4信号肽可以使蛋白主要表达在膜上。结论 所构建的带信号肽的荧光蛋白载体是正确的，pECFP-C1-SP和pEYFP-C1-SP能够表达在细胞膜上，可有效地应用于膜蛋白相互作用的研究。