自体骨髓间充质干细胞不同移植途径对脑冷冻伤大鼠神经功能改善的影响

目的探索自体骨髓间充质干细胞(BMMSCs)不同移植途径对脑冷冻伤大鼠神经功能改善的影响。方法将Wistar大鼠自体骨髓间充质干细胞在体外扩增并经Brdu标记后,通过颈内动脉和脑室系统注射移植入冷冻伤脑水肿动物体内,以免疫组化和神经功能评分评价BMMSCs自体移植的疗效。结果经颈内动脉和脑室系统注射的Brdu标记的大鼠BMMSCs细胞可向脑损伤区域迁移。经颈动脉注射BMMSCs治疗组和经脑室注射BMMSCs治疗组Brdu阳性细胞的数量和神经功能恢复的程度均高于常规治疗组,且有明显统计学差异(P0.05)。两移植组BMMSCsBrdu阳性细胞的数量和神经功能恢复的程度相比无明显差异(P0.05)。结论本实验研究提示,BMMSCs通过循环系统和脑室系统移植后可向脑损伤区迁移而发挥治疗作用,但二者无统计学差异。     

自体骨髓间充质干细胞移植辅助高压氧治疗高血压脑出血临床观察

目的：观察自体骨髓间充质干细胞移植辅助高压氧治疗高血压脑出血的疗效。方法将102例高血压脑出血患者随机分为治疗组（自体骨髓间充质干细胞移植＋高压氧治疗组）和对照组（高压氧治疗组）,比较2组患者治疗前和治疗后6个月的神经功能缺损程度评分（NIHSS）和日常生活活动能力评分（Barthel指数）,治疗后6个月格拉斯哥预后评分（GOS）及远期生活质量评估量表评分（KPS）。结果治疗后6个月与对照组比较,NIHSS评分均有显著降低Barthel指数均有显著升高（P＜0·05）,治疗组GOS及KPS评分显著好于对照组（P＜0·05）。结论自体骨髓间充质干细胞移植辅助高压氧治疗能显著促进高血压脑出血患者神经功能恢复,提高患者生存率和生活质量。     

骨髓间充质干细胞立体定向移植治疗大鼠脑缺血损伤的实验研究

目的观察立体定向移植骨髓间充质干细胞(BMSC)治疗MCAO大鼠的效果并探讨其可能机制。方法用改良线拴法制作大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。60只模型大鼠随机分为移植组(A组)、磷酸盐缓冲液溶液组(B组)与假手术组(C组)。在模型建立后7 d,通过立体定向方式将1×106个BMSCs移植入A组大鼠损伤侧纹状体,B组大鼠以同样方式在同样部位移植等体积的磷酸盐缓冲液,C组完成立体定向过程,但无液体注入。应用改良大鼠神经功能缺损评分(m NSS评分)、水迷宫测试观察大鼠神经功能恢复状况,并取大鼠脑组织行免疫组织化学染色。结果 A组m NSS评分优于B组、C组(P0.05);A组逃避潜伏期明显缩短(P0.05);跨越平台次数明显增多(P0.05)。A组大鼠在脑损伤中心及周围区,可见Brdu单染阳性细胞及Brdu+BDNF、Brdu+GFAP、Brdu+v WF、Brdu+VEGF双染阳性细胞。结论立体定向移植BMSCs可以显著改善MCAO大鼠神经功能恢复。     

骨髓间充质干细胞联合bFGF治疗颅脑损伤的实验研究

目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)及碱性成纤维生长因子(bFGF)移植治疗大鼠脑损伤的疗效及机制。方法①采取成年大鼠的MSCs进行体外培养并鉴定;②建立大鼠脑损伤模型;③将48只脑外伤大鼠分为4组,每组12只,分别为对照组、MSCs治疗组、bFGF治疗组及MSCs+bFGF治疗组;分别于脑室注入相应的试剂后不同时间采用行为学评分的方法比较其疗效。④每组大鼠分为伤后3、7和14d3个亚组,并分别用Brdu标记干细胞,免疫组化法测定Brdu标记阳性细胞,计算并比较各组的阳性细胞数。结果免疫组化结果证实MSCs培养成功。脑室注射后3～13d各实验组动物的神经功能明显好于对照组(P<0.05),MSCs+bFGF治疗组又明显好于MSCs治疗组和bFGF治疗组(P<0.05)。用药后3、7和14d,在各实验组损伤的脑区、伤侧海马及室管膜下区的Brdu标记的干细胞数明显多于对照组(P<0.05)。而MSCs+bFGF治疗组又明显好于MSCs治疗组和bFGF治疗组(P<0.05)。结论 bFGF联合MSCs脑内移植可以改善脑损伤大鼠模型的神经功能,且较单纯MSCs移植或单纯bFGF注射的效果更佳;bFGF可促进移植MSCs及内源性干细胞的增殖并控制它治疗的分化方向。     

骨髓间充质干细胞立体定向移植治疗大鼠脊髓损伤*

摘要 背景：传统观念认为,神经组织损伤后几乎不能再生,以往对SCI的治疗缺乏有效手段,致使本病致残率高,疗效差。干细胞治疗关键在于移植具有再生能力的干细胞,通过多种作用机制,可以重建中枢神经系统的结构和功能,近年来引起了广泛的关注。 目的：探讨立体定向移植骨髓间充质干细胞（MSCs）对大鼠脊髓损伤修复的影响并探讨其机制 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-10/2008-6在天津市环湖医院完成。 材料：1月龄SD大鼠20只,用于制备骨髓间充质干细胞;健康成年Wistar大鼠45只,雌性、同系,体质量280±20 g。将动物随机分为对照组、假手术组与移植组,每组各15只。 方法：密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离骨髓间充质干细胞,经流式细胞仪鉴定为MSCs。以动脉瘤夹夹闭法制备大鼠脊髓损伤（SCI）模型,在SCI大鼠致伤后第7天,通过立体定向途径移植MSCs到移植组大鼠脊髓损伤中心,移植等量生理盐水至假手术组大鼠脊髓损伤中心,对照组大鼠不做处理。 主要观察指标：SCI大鼠损伤前及损伤后第7天、14天、30天、60天、90天的BBB评分;损伤后第90天处死大鼠,观察其脊髓组织中有无BrdU阳性细胞、Brdu+NSE、Brdu+GFAP、Brdu+bFGF、Brdu+BDNF免疫组化双染阳性细胞并观察NSE、GFAP、bFGF、BDNF单染阳性细胞。 结果： ①BBB评分发现,MSCs移植组大鼠BBB后肢功能评分恢复优于对照组（p<0.05）;假手术组BBB评分在损伤后30天内恢复速度慢于对照组（p<0.05）,至第90天与对照组比较无显著差异（P>0.05）;②免疫组织化学染色发现,移植组大鼠脊髓内在损伤中心及头、尾端距离脊髓损伤中心1cm处均可见BrdU染色阳性细胞及Brdu+NSE、Brdu+GFAP、Brdu+bFGF、Brdu+BDNF免疫组化双染阳性细胞。移植组NSE、GFAP、bFGF、BDNF单染阳性细胞数明显高于对照组和假手术组（p<0.05）。 结论： MSCs移植可以促进SCI大鼠的神经功能的恢复,其机制可能与移植细胞分化为神经元样和神经胶质细胞样细胞,并分泌或促进宿主分泌神经营养因子有关。 关键词 脊髓损伤 骨髓间充质干细胞 立体定向 细胞移植     

GDNF诱导分化骨髓基质细胞对PD大鼠的治疗作用

目的探讨胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）诱导分化骨髓基质细胞（BMSCs）脑内移植对帕金森病（PD）模型的治疗作用。方法体外培养、分离和纯化的BMSCs，用5-溴脱氧尿核苷（BrdU）标记和GDNF诱导分化。分别将经GDNF诱导分化（A组）和未经GDNF诱导分化（B组）的BMSCs移植到PD大鼠模型纹状体区。另设生理盐水对照组（C组）和PD模型对照组（D组）。于不同时间点检测大鼠旋转行为变化，运用免疫荧光组织化学方法分析比较各组纹状体内酪氨酸羟化酶（TH）阳性细胞数量。结果①旋转行为检测显示，C组和D组在所有时间点未见明显变化；在移植后7～30d，A组和B组分别与C组和D组比较，旋转行为明显减少（P〈0．05）；A组比B组旋转行为减少更为显著（P〈0．05）。②免疫荧光组织化学检测显示，A组与B组比较，GFAP和TH阳性细胞数量明显增多（P〈0．05）。但各组自身各时程比较数量变化无统计学意义（P〉0．05）。结论A组的BMSCs脑内移植有效地改善了PD大鼠模型的旋转行为，提高了移植后TH阳性细胞的数量。     

尾静脉移植骨髓间充质干细胞治疗脑缺血损伤大鼠的研究

目的通过尾静脉途径移植大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)到大脑中动脉闭塞模型(MCAO)的大鼠体内,观察MSCs移植对大鼠缺血性脑损伤后神经功能恢复的作用并探讨其作用机制。方法分离和培养大鼠的MSCs,线栓法制作脑缺血再灌注模型。将48只SD大鼠随机分为对照组和尾静脉移植组2组,移植组在造模7d后尾静脉途径将MSCs植入MCAO大鼠体内,对照组仅造模。比较两组大鼠在不同时间的神经功能评分的差异,免疫组化染色和脑源性神经生长因子(BDNF)分泌的情况。结果移植后1d两组之间无统计学差异;在2w、1m、2m、3m时移植组NSS评分均低于对照组;免疫组化结果发现尾静脉组见到双侧半球均可见较多的Brdu阳性细胞。移植后1m即可见到MSCs分化为Brdu+NSE、Brdu+GFAP免疫组化双阳性细胞。不同时间点移植组的BDNF分泌较对照组明显增高。结论 MSCs可以在体外分离、培养和传代,尾静脉移植的MSCs可在宿主脑内存活和分化并改善神经功能。MSCs移植后可促进脑内BDNF的分泌。     

血管内皮生长因子基因修饰C17.2神经干细胞移植治疗脑梗死的实验研究

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）基因修饰神经干细胞（NSC）移植治疗脑梗死大鼠模型的治疗效果，以及基因的表达情况和神经保护作用。方法 通过移植腺病毒载体介导的VEGF165基因转染的C17-2NSC到大鼠大脑中动脉阻断（MCAO）的局灶性脑缺血模型脑梗死半暗带区，观察移植后大鼠神经功能变化，神经特异性烯醇化酶（NSE）、CD31免疫组化检查观察细胞存活分化和血管新生情况。结果 VEGF病毒组、NSC移植组和VEGF基因修饰NSC组神经功能严重度评分均较对照组显著减少（P〈0．05），以VEGF基因修饰NSC组最为显著（P〈0．05）；NSC移植后NSE阳性细胞数较对照组显著增多（P〈0．05），VEGF基因修饰NSC组更为碌著（P〈0．05）；VEGF病毒组和VEGF基因修饰NSC移植组脑梗死灶周围血管数较对照组显著增多（P〈0．05），以VEGF基因修饰NSC组更为显著（P〈0．05）。结论 转染VEGF基因的C17．2NSC脑内移植治疗MCAO脑梗死模型可促进NSC向神经元分化，可促进新生血管形成，改善神经功能。VEGF基因修饰NSC移植治疗效果优于单纯的C17．2NSC移植或VEGF基因治疗。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗颅脑创伤后神经功能障碍的护理

目的：探索自体骨髓间充质干细胞移植治疗颅脑创伤后神经功能障碍的护理措施。方法选取颅脑创伤后神经功能障碍患者76例,分别实施常规治疗和自体骨髓间充质干细胞移植治疗,通过对比2组患者治疗前、治疗后6个月神经功能缺损程度（NIHSS）和日常生活能力评分（Barthel指数）,评价治疗和护理效果。结果所有患者均治疗成功出院,移植组较对照组术后6个月NIHSS评分显著降低（P＜0.001）,Barthel指数显著升高（P＜0.001）。结论自体骨髓间充质干细胞移植治疗能促进患者神经功能恢复,提高患者生活能力,治疗前心理护理,移植后严密观察病情变化、不良反应,持之以恒的功能康复计划是促进患者康复的重要保障。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用,并探讨其可能的机制。方法经体外培养并纯化BMSCs,移植前以10 mg/L的BrdU进行标记。线栓法制作大鼠MCAO模型,随机分为移植A组、B组及对照C组。在模型建立后7 d,通过尾静脉分别将3×10~6个BMSCs、1×10~6个BMSCs移植入A、B组大鼠体内,C组不作处理。于移植前、后分别进行改良神经损伤严重程度评分(mNSS)及Morris水迷宫测试,并取大鼠脑组织行免疫组织化学染色。结果移植A组与移植B组、C组比较,行为学恢复更为明显,(P0.01);B、C两组相比无显著性差异(P0.05);移植A组大鼠学习和记忆能力较C组明显改善(P0.05)。A、B组大鼠在脑损伤中心及周围区,可见Brdu单染阳性细胞及Brdu+MAP-2、Brdu+GFAP、Brdu+vWF、Brdu+VEGF双染阳性细胞。结论 BMSCs经尾静脉移植至MCAO大鼠体内后,可在大鼠体内存活、分化,并促进大鼠伸进功能恢复。疗效与移植细胞数量相关。     

不同来源成体神经干细胞促进大鼠脊髓损伤功能修复的比较研究

目的 评价大脑、骨髓和脂肪组织3种不同来源的神经干细胞对大鼠脊髓挫伤的治疗效果.方法 选取来源于同一大鼠成体中大脑、骨髓和脂肪的3个部位的组织,分离、诱导分化为不同来源的神经干细胞;应用自由落体损伤模型装置造成大鼠脊髓挫伤.将不同来源的神经干细胞分别移植入大鼠脊髓损伤部位,通过BBB评分比较修复脊髓损伤功能的效果,应用免疫荧光染色检测不同移植细胞在损伤脊髓中的存活、分布、迁移的情况.另设假手术对照组和生理盐水对照组.结果 与假手术对照组和生理盐水对照组比较,3个细胞处理组BBB评分在2～8周开始增加,9周以后更加明显,差异开始有统计学意义(P<0.05).在移植后1周和4周,细胞移植组中脑源性神经干细胞(SVZ-NSs)组Brdu/nestin+>神经元存活的数目明显高于其他2组.但差异没有统计学意义(P>0.05);到了第8周,3组均仅有少量Brdu/nestin+>细胞存活,相互之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 植入来源于大脑、骨髓和脂肪组织的神经干细胞都可以在一定程度上提高脊髓损伤后运动功能恢复,但SVZ-NSs组的脊髓损伤大鼠运动功能恢复要比脂肪来源的神经干细胞(AD-NSs)组及骨髓来源的神经干细胞(BM-NSs)组更好.AD-NSs由于来源广泛和强有力的增殖能力,相比其他来源的神经干细胞,可能是更好的选择.     

大鼠颅脑损伤后脑组织miR-122-5p含量变化及其对神经功能的影响

目的 探讨大鼠颅脑损伤后脑组织miR-122-5p含量变化及其对神经功能的影响。方法 将40只成年SD大鼠随机分为假手术组,TBI模型组,乱序miRNA组,miR-122-5p模拟物组。采用Feeney法制备TBI大鼠模型;乱序miRNA组造模24 h后,立体定向注射乱序miRNA 5 μl（20 μmol/L）;miR-122-5p模拟物组造模24 h后,立体定向注射miR-122-5p模拟物组5 μl（20 μmol/L）。qRT-PCR法检测大鼠脑组织miR-122-5p的表达变化;免疫印迹法法检测p53蛋白表达水平;水迷宫法检测学习记忆功能;TUNEL法检测脑组织细胞凋亡情况;流式细胞术检测脑细胞线粒体膜电位的变化。结果 与假手术组大鼠比较,模型组和乱序miRNA组大鼠脑组织miR-122-5p表达明显减少,p53蛋白显著上调,脑组织细胞凋亡数明显增多,线粒体膜电位下降显著,水迷宫测试大鼠寻找隐形平台时间显著延长;与模型组大鼠比较,miR-122-5p模拟物组大鼠miR-122-5p表达明显增加,并伴随p53蛋白低表达,细胞凋亡水平下降,神经功能障碍得到明显逆转。结论 颅脑损伤后miR-122-5p的表达下调可能导致p53蛋白的表达升高,促进神经细胞凋亡。     

不同时间窗高压氧治疗对脑外伤大鼠认知功能障碍改善的实验研究

目的 研究不同时间窗高压氧治疗对脑外伤大鼠认知功能障碍的治疗效果. 方法 将96只大鼠按随机数字表法分为正常对照组(A组)、液压冲击脑外伤模型组(B组)、液压冲击脑外伤模型+常规治疗组(C组)、液压冲击脑外伤模型+常规治疗+高压氧治疗组(D组),每组24只;D组在模型建立后根据高压氧治疗的时间点(3、12、24、72 h)分为4亚组(D-3 h组、D-12 h组、D-24 h组和D-72h组,每亚组6只).B、C、D组采用大鼠侧位液压冲击构建脑外伤模型后分别进行不同处理.应用水迷宫试验对比评价各组大鼠模型脑外伤后认知功能障碍的改变. 结果 在相同时间点寻找水下平台的潜伏期方面,B组最长,其次为C组、D组、A组,且D组中D.72 h组最长,其次为D-24 h组、D-12h组、D-3h组;在穿过原平台区域的次数方面,A组最多,其次为D组、C组、B组,且D组中D-3 h组最多,其次为D-12 h组、D-24 h组、D-72 h组,与B组比较差异均有统计学意义(p<0.05). 结论 高压氧治疗可以改善颅脑损伤大鼠的学习能力,对神经功能具有保护作用,且这种高压氧治疗的时间最好在损伤后12 h内完成,并且宜尽早实施.     

造血干细胞与神经生长因子联合移植治疗脑梗死

背景：目前采用外周血造血干细胞移植治疗脑缺血方面的研究还比较少,缺乏大量、系统的实验数据。神经生长因子可调控神经元再生所需的微环境,对神经细胞的存活、增殖起重要作用。 目的：观察造血干细胞移植后,神经生长因子对其在脑梗死大鼠脑内的存活、分化及神经功能的影响。 设计：随机对照动物实验。 材料：清洁级成年雄性SD大鼠120只,随机分为3组：单纯细胞移植组、细胞移植+神经生长因子组、模型对照组,40只/组。神经生长因子为北大之路药业有限公司产品。 方法：大鼠颈部皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子后,密度梯度离心法分离培养造血干细胞,移植前行Brdu标记。3组大鼠根据改良Longa线栓法建立大脑中动脉闭塞模型,造模后7 d,大鼠麻醉后暴露前囟,选取注射位点：前囟后方1.2 mm,中线向右旁开3 mm,硬膜下4 mm。单纯细胞移植组缓慢注入1×106个造血干细胞,细胞移植+神经生长因子组注入1×106个造血干细胞+200 ng神经生长因子,模型对照组给予等量磷酸盐缓冲液。 主要观察指标：采用神经功能缺损评分检测神经功能的改善情况,免疫组化染色观察梗死半球Brdu/CD34、Brdu/Nestin、Brdu/NSE、Brdu/vWF双阳性细胞的分布,TCC染色观察梗死体积的变化。 结果：与移植前比较,移植后1,2周仅细胞移植+神经生长因子组神经功能缺损评分均明显下降(P < 0.05),移植后3,4周各组神经功能缺损评分均明显下降(P < 0.05或0.01),且细胞移植+神经生长因子组下降幅度尤为显著(P < 0.01)。移植后1周,细胞移植+神经生长因子组Brdu/CD34、Brdu/Nestin、Brdu/NSE、Brdu/vWF双阳性细胞数明显多于单纯细胞移植组(P < 0.01);第4周两组未见Brdu/CD34双阳性细胞,Brdu/Nestin较1周时减少,Brdu/NSE、Brdu/vWF双阳性细胞均明显增多(P < 0.05),且细胞移植+神经生长因子组明显多于单纯细胞移植组(P < 0.01);模型对照组始终未见Brdu双阳性细胞。 结论：神经生长因子对外源性移植的造血干细胞在局灶性脑梗死大鼠脑内存活、分化以及神经功能的恢复具有明显促进作用。     

缺氧预处理后骨髓源神经干细胞联合脑源性神经生长因子移植治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的研究

目的 研究缺氧预处理后骨髓源性神经干细胞（source n eural s tem c ells o f b one m arrow,BMSCs- NSCs）联合脑源性神经生长因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）立体定向移植治疗大鼠脑缺 血再灌注损伤的疗效,为高原地区脑梗死的细胞移植治疗提供动物实验基础。 方法 72只SD大鼠随机分为缺氧预处理组和常氧组,每组各36只,缺氧预处理组造模前3 d进行低 氧预处理（hypoxic preconditioning,HPC）。两组均制作大脑中动脉阻塞再灌注（middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R）模型。每组分为3个亚组（BMSCs-NSCs+BDNF组、BMSCs-NSCs组和对 照组,每组各12只）,分别梗死灶同侧尾状核内立体定向移植BMSCs-NSCs+BDNF、BMSCs-NSCs和 DMEM/F12培养基。移植后3 d、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d进行神经功能缺损评分,每个时间点每组 取2只大鼠,断头取脑后行免疫组织化学染色,观察5-溴脱氧尿嘧啶（5-Bromo-deoxyuridine,Brdu）阳 性细胞的迁移路径,行CD133、Nestin、微管相关蛋白2（microtubule-associated protein 2,MAP-2）、兔 抗微管蛋白（β-tubulin）、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）、半乳糖神经酰胺 （Galactosylceramidase,Galc）免疫荧光染色,了解骨髓源性神经球分化情况。 结果 常氧BMSCs-NSCs+BDNF组、常氧BMSCs-NSCs组、缺氧预处理BMSCs-NSCs+BDNF组、缺氧预处 理BMSCs-NSCs组7 d、14 d、21 d、28 d和35 d的神经功能评分均显著低于同组3 d时的神经功能评分。移 植3 d时缺氧预处理对照组神经功能学评分显著低于常氧对照组（P =0.040）;移植7 d时缺氧预处理 BMSCs-NSCs+BDNF组神经功能评分显著低于常氧BMSCs-NSCs+BDNF组（P =0.031）。无论缺氧预处 理组还是常氧组,BMSCs-NSCs+BDNF组CD133、Nestin、MAP-2、β-tubulli n、GFAP、Gal c免疫荧光染色光 密度值（integral optical density,IOD）均显著高于BMSCs-NSCs组（均P＜0.001）;BMSCs-NSCs+BDNF组、 BMSCs-NSCs移植组各检测指标IOD均高于对照组（均P＜0.001）。 结论 大鼠缺氧预处理后BMSCs-NSCs联合BDNF立体定向移植可显著提高BMSCs-NSCs的效果。缺氧 预处理并不能促进外源性BMSCs-NSCs分化,但却能明显改善大鼠神经功能。     

Functional recovery and microenvironmental alterations in a rat model of spinal cord injury following human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells transplantation

BACKGROUND: Transplantation of human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells (MSCs) has been shown to benefit spinal cord injury (SCI) repair. However, mechanisms of microenvironmental regulation during differentiation of transplanted MSCs remain poorly understood. OBJECTIVE: To observe changes in nerve growth factor (NGF), brain-derived neurotrophic factor (BDNF), and interleukin-8 (IL-8) expression following transplantation of human umbilical cord-derived MSCs, and to explore the association between microenvironment and neural functional recovery following MSCs transplantation.DESIGN, TIME AND SETTING: A randomized, controlled, animal experiment was performed at the Department of Orthopedics, First Affiliated Hospital of Soochow University from April 2005 to March 2007. MATERIALS: Human cord blood samples were provided by the Department of Gynecology and Obstetrics, First Affiliated Hospital of Soochow University. Written informed consent was obtained. METHODS: A total of 62 Wister rats were randomly assigned to control (n = 18), model (n = 22, SCI + PBS), and transplantation (n = 22, SCI + MSCs) groups. The rat SCI model was established using the weight compression method. MSCs were isolated from human umbilical cord blood and cultured in vitro for several passages. 5-bromodeoxyuridine (BrdU)-labeled MSCs (24 hours before injection) were intravascularly transplanted. MAIN OUTCOME MEASURES: The rats were evaluated using the Basso, Beattie and Bresnahan (BBB) locomotor score and inclined plane tests. Transplanted cells were analyzed following immunohistochemistry. Enzyme-linked immunosorbant assay was performed to determine NGF, BDNF, and IL-8 levels prior to and after cell transplantation.RESULTS: A large number of BrdU-positive MSCs were observed in the SCI region of the transplantation group, and MSCs were evenly distributed in injured spinal cord tissue 1 week after transplantation. BBB score and inclined plane test results revealed significant functional improvement in the transplantation group compared to the model group (P< 0.05), which was maintained for 2-3 weeks. Compared to the model group, NGF and BDNF levels were significantly increased in the injured region following MSCs transplantation at 3 weeks (P < 0.05), but IL-8 levels remained unchanged (P > 0.05).CONCLUSION: MSCs transplantation increased NGF and BDNF expression in injured spinal cord tissue. MSCs could promote neurological function recovery in SCI rats by upregulating NGF expression and improving regional microenvironments.     

胎鼠神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡及凋亡抑制基因Bcl-2表达的影响

目的研究胎鼠神经干细胞(NSCs)移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后神经细胞凋亡及凋亡抑制基因Bcl-2表达的影响。方法 40只SD大鼠随机分为正常对照组(Normal组),脊髓损伤组(SCI组),神经干细胞组(NSC组),神经干细胞标记组(BrdU+NSCs组)。采用电控脊髓损伤打击装置制作模型,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Br-dU)法标记处于对数生长期的NSCs,SCI后即刻进行NSCs移植。免疫组化法观察BrdU标记NSCs的存活、迁移及凋亡抑制基因Bcl-2的表达,TUNEL法标记凋亡细胞(免疫组化及免疫荧光显色),改良Rivlin法观察大鼠后肢运动功能的恢复情况。结果 BrdU+NSCs组在损伤脊髓区域可检测到BrdU标记的阳性NSCs。BrdU+NSC组与NSC组各时间点凋亡阳性细胞数均比SCI组减少(P<0.01),Bcl-2免疫阳性细胞光密度值比SCI组明显增加(P<0.01),且Bcl-2表达高峰延长至伤后7d;移植后7d、14d、28d后肢运动功能评分较SCI组明显升高(P<0.01)。Br-dU+NSC组与NSC组之间比较无明显差异(P>0.05)。结论体外培养的胚胎大鼠NSCs可在脊髓损伤区域存活、迁移,并能通过上调Bcl-2的表达来抑制大鼠脊髓损伤后神经细胞的凋亡,从而促进大鼠瘫痪肢体功能的恢复。     

阿加曲班对大鼠脑出血后脑水肿作用的研究

目的探讨阿加曲班对大鼠脑出血模型脑水肿的作用。方法取雄性SD大鼠32只,体重300~350g,随机分为A、B、C、D,4组,每组8只。大鼠经立体定向分别向右侧尾状核区注入生理盐水60ul、无肝素自体血50ul+生理盐水10ul、生理盐水50ul+阿加曲班生理盐水溶液10ul、无肝素自体血50ul+阿加曲班生理盐水溶液10ul。实验大鼠于术后48小时断头处死,测定脑含水量,HE染色,观察脑组织学变化。结果D组脑组织含水量降低,与B组比较有明显差别(P<0.05);C组脑组织含水量与A组比较无明显差别(P>0.05);HE染色观察:B组可见血肿周围脑组织水肿,炎症细胞渗出,脑组织疏松;D组上述改变减轻;A、C两组未见明显病理学改变。结论阿加曲班可减轻大鼠脑出血后血肿周围脑组织脑水肿。     

PDLLA／NGF复合导管促进周围神经缺损再生的形态学研究

目的探究聚d,L-乳酸,神经生长因子(PDLLA/NGF)可吸收性复合导管桥接对大鼠坐骨神经缺损再生修复的促进作用,为临床上周围神经损伤再生修复提供实验依据。方法60只SD大鼠随机均分4组:自体神经移植(A组),单纯PDLLA导管(B组),PDLLA加一次性给NGF(C组),复合导管(D组)。制作坐骨神经10 mm缺损,按上述分组桥接,手术后1、2、3月每组各取5只修复处组织。行大体观察、三头肌湿重、光镜观察与图像处理、电镜超微结构观察。结果同时间段组间比较,三头肌恢复率A组高,D组次之,C组较差,B组最差(P<0.05)。组织学观察及图像分析显示,D组再生神经的数、质量都显著优于B、C组(P<0.05),接近A组。电镜观察显示A、D组中段神经纤维密度大、直径大、髓鞘厚,内有发育良好的神经丝和微管。B、C组神经稀、直径小、髓鞘薄、无髓神经相对多。结论PDLLA/NGF复合导管具有良好的组织相容性。用该管桥接修复大鼠受损的坐骨神经,能有效地促进其再生。