辛伐他汀对人低密度脂蛋白氧化修饰影响的实验研究

目的：研究辛伐他汀在体外对低密度脂蛋白血氧化修饰的影响。方法：以低密度脂蛋白氧化修饰为模型，以硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)生成量及相对电泳迁移率(REM)为指标，研究了辛伐他汀对铜离子(Cu^2 )诱导低密度脂蛋白氧化修饰的抑制作用。结果：随辛伐他汀浓度从1μmol／L-10μmol／L的增加，TBARS值分别减少67．3％、73．9％、81．9％，REM值减少48．3％、55.2％、58.6％，呈浓度及时间依赖关系。其中10μmol／L辛伐他汀可几乎完全抑制低密度脂蛋白氧化。结论：辛伐他汀在体外能明显抑制Cu^2 诱导的低密度脂蛋白氧化修饰。     

二甲双胍体外抑制低密度脂蛋白氧化的实验研究

目的氧化型低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)发生的重要危险因素之一。文中旨在探讨二甲双胍(Metformine)对人LDL体外氧化修饰的影响。方法共分为6组(每组6份样品):LDL组;LDL+Cu2+组;LDL+Cu2++二甲双胍组,将加入不同剂量的二甲双胍又分为10μmol/L组;20μmol/L组;50μmol/L组和200μmol/L组。通过体外实验,观察二甲双胍对Cu2+介导LDL氧化后,硫代巴比妥酸反应物(thiobarbituric acid reactive substance,TBARS)含量和电泳迁移率(relative electrophoretic mobility,REM)的变化,分析二甲双胍对LDL脂质过氧化程度的影响。结果 LDL在体外铜离子介导下,24 h后其TBARS含量和相对REM增大,表明铜离子可诱导LDL发生氧化修饰。当加入二甲双胍后,氧化LDL的TBARS含量和相对REM较对照组低,2组相比,P<0.05。不同浓度二甲双胍作用24 h,随二甲双胍浓度增加,其氧化LDL的TBARS含量和相对REM变小,抑制加强,二甲双胍降低LDL的TBARS值以及减慢LDL的REM呈剂量依赖性。结论铜离子在体外能介导LDL氧化,二甲双胍能抑制铜离子介导的LDL氧化,能有效地降低LDL的脂质过氧化程度,具有一定的抗脂质氧化功能。     

异鼠李素及橙皮甙抑制HDL氧化修饰作用的研究

目的 研究异鼠李素及橙皮甙对高密度脂蛋白(HDL)氧化修饰的抑制作用.方法 按一次性密度梯度超速离心法分离人血清HDL,分别加入5.0 μmol/L异鼠李素及橙皮甙温育3 h,然后利用Cu2 介导体外氧化修饰脂蛋白的方法,观察HDL氧化修饰不同时间,其234 nm吸光度(A234)、相对电泳迁移率(REM)、硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)及蛋白质羰基的动力学改变.结果 Cu2 介导HDL氧化修饰2、4、6、8、12及24 h后,其A234、REM、TBARS及蛋白质羰基含量均逐步增加;加入5.0 μmol/L 异鼠李素及橙皮甙的实验组,Cu2 介导HDL的氧化修饰分别延迟2～6 h和2～4 h;其A234、REM、TBARS及载脂蛋白羰基含量较对照组降低,异鼠李素实验组分别降低16.3%～46.9%、0.6%～25.2%、9.2%～28.4%及11.6%～45.2%;橙皮甙实验组降低1.5%～30.0%、1.4%～13.3%、6.6%～18.8%及14.4%～62.0%.结论 异鼠李素及橙皮甙可抑制Cu2 诱导的HDL的氧化修饰,且异鼠李素的抗氧化作用比橙皮甙强.     

Ebselen对Cu2+、Fe2+及巨噬细胞氧化修饰人LDL的抑制作用

目的:研究Ebselen对Cu2+、Fe2+及巨噬细胞氧化修饰人低密度脂蛋白(LDL)的抑制作用及其可能机制.方法:采用紫外分光光度法检测人LDL中硫代巴比妥酸反应物(TBARS)及共轭双烯(CD)的含量来表示LDL的被氧化程度.结果:Cu2+、Fe2+及体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞(MPM)都能氧化修饰人LDL,使其中的TBARS和CD含量显著升高.Ebselen(0.5～4.0 μmol/L)能剂量依赖性降低人LDL中TBARS和CD含量,其中2umol/L的Ebselen能完全抑制Cu2、Fe2+及MPM升高LDL中TBARS含量的作用.单用谷胱甘肽(GSH,0.5 mmol/L)对LDL中TBARS含量没有显著的影响,但GSH能显著增强Ebselen对TBARS生成的抑制作用.结论:Ebselen能抑制Cu2+、Fe2+及MPM氧化修饰人LDL,GSH能明显增强Ebselen的这种抑制作用.     

高密度脂蛋白体外氧化修饰动力学研究

在体外HDL在Cu2+诱导下可发生氧化修饰.为了探讨体外血浆高密度脂蛋白(HDL)氧化修饰中几种产物动力学改变,用Cu2+与HDL保温2～24h,分别观察了HDL氧化修饰过程中硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)、脂氢过氧化物(COOH)、共轭二烯(CD)及相对电泳迁移率(REM)等的变化.结果显示:LOOH和CD两个指标的动力学变化相似,呈现延滞期、扩增期和下降期三个时相.而TBARS和REM动力学变化相似,只见延迟期和扩增期,未见降解期.     

雌激素与内皮细胞凋亡的关系

目的 :观察雌激素 (17β 雌二醇 )对氧化型低密度脂蛋白 (oxLDL)诱导人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)凋亡的影响。方法 :以HUVEC为对象 ,观察不同浓度的 17β 雌二醇 (1μmol/L、10 μmol/L和 10 0 μmol/L)对oxLDL(4 μg/L)诱导的凋亡的影响。结果 :不同剂量的 17β 雌二醇对使用oxLDL诱导的HUVEC凋亡减少 70 %～ 93% ,其抑制呈明显的正向量效关系 ,17β 雌二醇 1μmol/L组细胞凋亡占 6 .98%～ 8.6 3 % ,10 0 μmol/L组细胞凋亡占 2 .94%～ 4.85 %。结论 :17β 雌二醇对oxLDL诱导的HUVEC凋亡有明显的抑制作用 ,且在一定浓度范围内呈正向量效关系 ,有利于减少细胞凋亡的发生。     

抗氧化剂对Cu~(2+)、HOCl及动脉壁细胞诱导的HDL氧化修饰的作用研究

目的 探讨抗氧化剂对高密度脂蛋白(HDL)氧化修饰的抑制机制,为预防HDL的氧化修饰提供实验依据.方法 将体外新鲜制备的人血浆HDL分别用不同浓度的硫酸铜(CuSO_4)、次氯酸(HOCl)处理或与动脉壁细胞共同温育进行氧化修饰,然后分别测定天然未修饰HDL(N-HDL)、氧化修饰HDL(Ox-HDL)的凝胶电泳相对电泳迁移率(REM)、硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)、溶血卵磷脂/卵磷脂比率(LPC/PC)的生成及载脂蛋白成分改变.对比相同条件下,加入抗氧化剂叔丁基甲苯(BHT)、Vit E及Vit C后,以上指标的改变.结果 BHT、Vit E及Vit C均可显著抑制由Cu~(2+)和HOCl诱导的Ox-HDL的REM增加、TBARS的生成、卵磷脂的水解,载脂蛋白AⅠ和AⅡ的改变.动脉壁细胞诱导的Ox-HDL的琼脂糖REM增加、TRARS的生成及卵磷脂水解也可被BHT、Vit E及Vit C显著抑制.但不同抗氧化剂的作用方式各有不同.结论 BHT以及Vit E和Vit C能有效抑制体内外HDL的氧化修饰.     

辛伐他汀对前列腺癌PC-3细胞影响的实验研究

目的:观察辛伐他汀对前列腺癌PC-3细胞增殖、凋亡的影响,探讨辛伐他汀对前列腺癌的作用。方法:MTT比色法检测PC-3细胞的增殖;Hoechst 33258染色后荧光显微镜法观察PC-3细胞凋亡的形态学改变,并计算凋亡核百分率;Annexin V-FITC/PI双染色,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:(1)辛伐他汀可显著抑制PC-3细胞的体外增殖,并呈浓度和时间依赖性(P<0.05)。(2)Hoechst 33258染色显示PC-3细胞经辛伐他汀(20?mol/L)分别处理24h和48h后,细胞出现凋亡,形态学变化表现为凋亡细胞体积缩小,核固缩,镜下细胞核呈致密浓染或碎块状致密浓染。FACS检测结果显示,20?mol/L辛伐他汀处理12h、24h、48h后的凋亡细胞数分别为14.81±1.08%、23.42±2.33%、40.77±4.06%。PC-3细胞分别经10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L辛伐他汀处理48h后,凋亡细胞数逐渐增多,凋亡核百分率计数分别为(11.20±3.33)%,(31.20±3.08)%,(56.24±4.50)%。FACS检测结果显示,10μmol/L、20μmol/L、40?mol/L辛伐他汀处理PC-3细胞48h后的凋亡细胞数分别为17.26±1.44%、32.45±2.56%、60.47±3.98%。结论:(1)辛伐他汀能明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的体外增殖。(2)辛伐他汀可诱导人前列腺癌PC-3细胞发生凋亡。     

辛伐他汀对低氧培养的内皮细胞合成和分泌内皮素-1的影响

目的观察羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-COA)还原酶抑制剂辛伐他汀对低氧培养的内皮细胞合成和分泌内皮素-1(ET-1)的影响。方法低氧培养人脐静脉内皮细胞,采用辛伐他汀以不同浓度(0、1、2.5、5.0、10.0μmol/L)和不同作用时间(12、24、48h)进行干预,并用甲羟戊酸(100μmol/L)调节辛伐他汀的作用。采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测内皮细胞ET-1mRNA的表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测内皮细胞上清液中ET-1蛋白的浓度。结果11μmol/L浓度的辛伐他汀对内皮细胞ET-1mRNA和ET-1蛋白表达没有影响,2.5μmol/L辛伐他汀即可抑制ET-1的表达,但与0μmol/L浓度组相比差异无统计学意义;5μmol/L及10μmol/L辛伐他汀则表现出明显的抑制作用(P<0.01),尤以10μmol/L浓度组明显;2以10μmol/L辛伐他汀干预低氧培养的内皮细胞,低氧12h后,内皮细胞ET-1mRNA和ET-1蛋白表达明显减少,24h后继续降低,48h达到最低;3100μmol/L甲羟戊酸可以阻止辛伐他汀对低氧培养的内皮细胞合成和分泌ET-1的抑制作用。结论辛伐他汀对低氧培养的内皮细胞合成和分泌ET-1具有抑制作用。     

辛伐他汀对ApoA5表达的影响

目的研究辛伐他汀在体外对载脂蛋白A5(ApoA5)表达的调节,从而更好地理解辛伐他汀对血脂的影响。方法以含不同浓度辛伐他汀(1、5、10、25、50μmol/L)的培养液体外培养人肝癌细胞株G2(HepG2)细胞48h,并以0μmol/L辛伐他汀作为对照组,提取各组细胞总RNA和蛋白质,分别采用聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)检测ApoA5的mR-NA和蛋白的表达。结果随着辛伐他汀浓度的不断增加,ApoA5的表达也不断增强(P<0.05),直至辛伐他汀浓度达到25μmol/L时,ApoA5的表达达到最大限度,再增加辛伐他汀的浓度时(50μmol/L),ApoA5表达不再增强,反而较前一浓度(25μmol/L)时的表达有所下降(P<0.05),表明辛伐他汀呈剂量依赖性上调ApoA5基因和蛋白的表达,但存在着一个最高上限浓度。结论辛伐他汀上调ApoA5基因和蛋白的表达。     

Inhibition of Oxidative Modification of Human\= Low Density Lipoprotein by Resveratrol

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＩｎｃｒｅａｓｉｎｇｅｖｉｄｅｎｃｅｓｕｇｇｅｓｔｓｔｈａｔｏｘｉｄｉｚｅｄＬＤＬ（ＯＸ－ＬＤＬ）ｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ（ＡＳ）．Ｐｒｏｔｅｃ...     

Effects of resveratrol on oxidative modification of human low density lipoprotein

Ｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｌｉｐｉｄ ｌａｄｅｎ“ｆｏａｍｃｅｌｌｓ”ｗｉｔｈｉｎｔｈｅｉｎｔｉｍａｏｆａｒｔｅｒｉｅｓｉｓａｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｆｅａｔｕｒｅｏｆａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｌｅｓｉｏｎｓ Ｏｘｉｄａｔｉｖｅｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ (ＬＤＬ)ｉｓａｍａｊｏｒａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｉｎｖｉｖｏ,ｗｈｉｃｈｉｓｔａｋｅｎｕｐｂｙｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｓｃａｖｅｎｇｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒｐａｔｈｗａｙ…     

槲皮素、芦丁及葛根素抑制HDL氧化修饰作用的研究

目的研究槲皮素、芦丁及葛根素等抑制HDL氧化修饰的作用。方法按一次性密度梯度超速离心法分离人血清HDL，分别加5μmol／L槲皮素、芦丁及葛根素与HDL温育3h。然后利用Cu^2 介导体外氧化修饰脂蛋白的方法，观察HDL氧化修饰不同时间，其A234、REM、TBARS及蛋白质羰基的动力学改变，并与不加药物的对照组比较。结果Cu^2 介导氧化HDL修饰时，在2、4、6、8、12及24h后，其A234、REM、TBARS及蛋白质羰基含量均逐步增加；加入5．0μmol／L槲皮素、芦丁及葛根素的实验组，Cu^2 介导HDL的氧化修饰分别延迟2～4h、4h和2～4h。其A234、REM、TNAR及载脂蛋白羰基含量较对照组降低；槲皮素实验组分别降低24．2％～49．0％、3．0％～25．0％、7．9％～34．1％及28．3％～50．4％；芦丁实验组降低9．4％～42．0％、4．0％～20．7％、1．2％～26．8％及18．6％～64．6％；葛根素实验组载脂蛋白羰基含量较对照组降低14．1％～52．1％。而其A234、REM，TBARS虽有降低，但降低幅度不大。结论槲皮素及芦丁可显著抑制HDL的氧化修饰，而葛根索的抑制作用较小。     

花椒挥发油在体外对低密度脂蛋白氧化的影响

目的探讨花椒挥发油能否对抗脂蛋白的氧化。方法采用Cu^2＋介导正常人低密度脂蛋白（LDL）的氧化反应，应用硫代巴比妥酸法测定LDL氧化过程中硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）的变化，采用琼脂糖凝胶电泳测定氧化型低密度脂蛋白的相对电泳迁移率（REM）的变化。结果40mg／mL的花椒挥发油对Cu^2＋介导LDL氧化修饰时TBARS与REM的差异有统计学意义（P〈0．01）。未加花椒挥发油的对照组LDL氧化反应延滞期为1h，在2～4h后TBARS值进入快速增长期，于24h达到高峰并趋于稳定；而在花椒挥发油组（40mg／mL组），LDL的氧化反应延滞期延长到4h左右，快速增长期延长到6～8h；但TBARS最大值无明显降低。结论花椒挥发油能够在体外对抗Cu^2＋介导LDL的氧化修饰。     

低密度脂蛋白经不同方法氧化修饰后理化性质的改变

用Cu~(2+)诱导和小鼠腹腔巨噬细胞(MPM)共同孵育以及紫外线(UV)照射的方法都能够导致LDL的氧化修饰,表现在巴比妥酸反应物质(TBARS)、相对电泳迁移率(REM)、在420nm的荧光强度和经清道夫受体的降解速率等的增加。LDL的脂质过氧化修饰,除用作研究动脉粥样硬化的发生发展的机制外,还是一种研究脂质过氧化损伤和比较抗氧化剂的抗氧化效果及其作用机理的较为理想的模型。     

内源性高甘油三酯血症患者血浆VLDL、LDL及HDL对血小板聚集功能的影响

目的　研究内源性高甘油三酯血症 (HTG)患者血浆极低密度脂蛋白 (VL DL )、低密度脂蛋白 (L DL )及高密度脂蛋白 (HDL )对血小板聚集功能的影响。方法　对 2 1例内源性高甘油三酯血症患者与 2 1例正常对照者用一次性密度梯度超速离心法分离血浆 VL DL、L DL及 HDL。测定这三种脂蛋白的 2 34nm吸光度 (A2 34 )、电泳迁移率 (REM)及硫代巴比妥酸反应物质 (TBARS)含量。分别将这三种脂蛋白加入由正常人新鲜血浆构成的反应系统中 ,用血小板聚集仪分别测定 ADP诱导的血小板 5 min最大聚集率。结果　内源性 HTG患者血浆 TG含量平均升高 2 .73倍 ,HDL - C下降 1.71倍 ,同时 L PO升高 1.2 2倍 ;HTG组 VL DL、L DL及 HDL的 REM、A2 34 、TBARS含量均较对照组显著增加 (P<0 .0 1) ,表明内源性 HTG患者血浆 VL DL、L DL及 HDL均发生了氧化修饰生成Ox- VL DL、Ox- L DL及 Ox- HDL。血小板聚集率在分别加入 HTG组患者的 VL DL、L DL及 HDL后均比加入正常组相应脂蛋白明显增加 (P<0 .0 5及 P<0 .0 1)。相关分析表明 ,HTG- L DL及 HTG- HDL A2 34 、REM及 TBARS含量与血小板聚集率呈正相关 (P<0 .0 1)。结论　 HTG患者血浆 VL DL、L DL及 HDL发生了氧化修饰 ,并使血小板聚集增加     

维生素C对LDL氧化修饰和已受到氧化修饰LDL的作用

本文观察了维生素C(VC)对低密度脂蛋白(LDL)氧化修饰及对已受到氧化修饰LDL的作用。在Cu~(2+)与LDL温育前加入VC,能使硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)的生成及琼脂糖电泳迁移率增加,使荧光物质的强度受到抑制,防止维生素E含量减低。但当Cu~(2+)与LDL温育3h后加入VC,再继续温育24h,与不加VC相比,TBARS 含量和琼脂糖电泳迁移率无明显差异。结果说明VC对LDL氧化修饰有抑制作用,对已受到氧化修饰的LDL(O-LDL)无阻断作用。     

Physicochemical variations of malondialdehyde－and Cu~（2＋）－modified low density lipoprotein

Ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｖａｒｉａｔｉｏｎｓｏｆｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ－ａｎｄＣｕ~（２＋）－ｍｏｄｉｆｉｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＤｉｎｇＺｈｅｎｈｕａ（丁振华）；ＣｈｅｎＹｕａｎ（陈瑗）；ＺｈｏｕＭｅｉ（周玫）；?..