异鼠李素及橙皮甙抑制HDL氧化修饰作用的研究

目的 研究异鼠李素及橙皮甙对高密度脂蛋白(HDL)氧化修饰的抑制作用.方法 按一次性密度梯度超速离心法分离人血清HDL,分别加入5.0 μmol/L异鼠李素及橙皮甙温育3 h,然后利用Cu2 介导体外氧化修饰脂蛋白的方法,观察HDL氧化修饰不同时间,其234 nm吸光度(A234)、相对电泳迁移率(REM)、硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)及蛋白质羰基的动力学改变.结果 Cu2 介导HDL氧化修饰2、4、6、8、12及24 h后,其A234、REM、TBARS及蛋白质羰基含量均逐步增加;加入5.0 μmol/L 异鼠李素及橙皮甙的实验组,Cu2 介导HDL的氧化修饰分别延迟2～6 h和2～4 h;其A234、REM、TBARS及载脂蛋白羰基含量较对照组降低,异鼠李素实验组分别降低16.3%～46.9%、0.6%～25.2%、9.2%～28.4%及11.6%～45.2%;橙皮甙实验组降低1.5%～30.0%、1.4%～13.3%、6.6%～18.8%及14.4%～62.0%.结论 异鼠李素及橙皮甙可抑制Cu2 诱导的HDL的氧化修饰,且异鼠李素的抗氧化作用比橙皮甙强.     

花椒挥发油在体外对低密度脂蛋白氧化的影响

目的探讨花椒挥发油能否对抗脂蛋白的氧化。方法采用Cu^2＋介导正常人低密度脂蛋白（LDL）的氧化反应，应用硫代巴比妥酸法测定LDL氧化过程中硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）的变化，采用琼脂糖凝胶电泳测定氧化型低密度脂蛋白的相对电泳迁移率（REM）的变化。结果40mg／mL的花椒挥发油对Cu^2＋介导LDL氧化修饰时TBARS与REM的差异有统计学意义（P〈0．01）。未加花椒挥发油的对照组LDL氧化反应延滞期为1h，在2～4h后TBARS值进入快速增长期，于24h达到高峰并趋于稳定；而在花椒挥发油组（40mg／mL组），LDL的氧化反应延滞期延长到4h左右，快速增长期延长到6～8h；但TBARS最大值无明显降低。结论花椒挥发油能够在体外对抗Cu^2＋介导LDL的氧化修饰。     

辛伐他汀对人低密度脂蛋白氧化修饰影响的实验研究

目的：研究辛伐他汀在体外对低密度脂蛋白血氧化修饰的影响。方法：以低密度脂蛋白氧化修饰为模型，以硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)生成量及相对电泳迁移率(REM)为指标，研究了辛伐他汀对铜离子(Cu^2 )诱导低密度脂蛋白氧化修饰的抑制作用。结果：随辛伐他汀浓度从1μmol／L-10μmol／L的增加，TBARS值分别减少67．3％、73．9％、81．9％，REM值减少48．3％、55.2％、58.6％，呈浓度及时间依赖关系。其中10μmol／L辛伐他汀可几乎完全抑制低密度脂蛋白氧化。结论：辛伐他汀在体外能明显抑制Cu^2 诱导的低密度脂蛋白氧化修饰。     

抗氧化剂对Cu~(2+)、HOCl及动脉壁细胞诱导的HDL氧化修饰的作用研究

目的 探讨抗氧化剂对高密度脂蛋白(HDL)氧化修饰的抑制机制,为预防HDL的氧化修饰提供实验依据.方法 将体外新鲜制备的人血浆HDL分别用不同浓度的硫酸铜(CuSO_4)、次氯酸(HOCl)处理或与动脉壁细胞共同温育进行氧化修饰,然后分别测定天然未修饰HDL(N-HDL)、氧化修饰HDL(Ox-HDL)的凝胶电泳相对电泳迁移率(REM)、硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)、溶血卵磷脂/卵磷脂比率(LPC/PC)的生成及载脂蛋白成分改变.对比相同条件下,加入抗氧化剂叔丁基甲苯(BHT)、Vit E及Vit C后,以上指标的改变.结果 BHT、Vit E及Vit C均可显著抑制由Cu~(2+)和HOCl诱导的Ox-HDL的REM增加、TBARS的生成、卵磷脂的水解,载脂蛋白AⅠ和AⅡ的改变.动脉壁细胞诱导的Ox-HDL的琼脂糖REM增加、TRARS的生成及卵磷脂水解也可被BHT、Vit E及Vit C显著抑制.但不同抗氧化剂的作用方式各有不同.结论 BHT以及Vit E和Vit C能有效抑制体内外HDL的氧化修饰.     

高密度脂蛋白体外氧化修饰动力学研究

在体外HDL在Cu2+诱导下可发生氧化修饰.为了探讨体外血浆高密度脂蛋白(HDL)氧化修饰中几种产物动力学改变,用Cu2+与HDL保温2～24h,分别观察了HDL氧化修饰过程中硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)、脂氢过氧化物(COOH)、共轭二烯(CD)及相对电泳迁移率(REM)等的变化.结果显示:LOOH和CD两个指标的动力学变化相似,呈现延滞期、扩增期和下降期三个时相.而TBARS和REM动力学变化相似,只见延迟期和扩增期,未见降解期.     

高密度脂蛋白的氧化修饰的特征及对低密度脂蛋白氧化的影响

研究高密度脂蛋白（HDL）氧化修饰后对其结构及对低密度脂蛋白（LDL）氧化的影响。在体外用Cu2+氧化人血浆HDL，观察其蛋白和脂质部分的变化，并测定在HDL存在条件下LDL氧化的硫代巴比妥酸值（TBARS）。结果：氧化HDL（OX－HDL）的TBARS值升高，色氨酸残基（Trp）的特征荧光吸收（λ286，335nm）强度降低且λmax（发射）从335nm升至341nm，紫外吸收（λ234nm）增高，琼脂糖凝胶电泳迁移增快。LDL氧化后的TBARS值为13．40±0．42。在HDL或Ox－HDL（50μg和100μg）共存条件下，LDL氧化的TBARS值分别为6．24±0．71，1．43±0．04和12.75±0.47，12.58±0．23。结论：HDL氧化修饰后其脂质和蛋白部分均经历显著变化，HDL氧化导致其抑制LDL氧化能力的丧失。     

内源性高甘油三酯血症患者血浆VLDL、LDL及HDL对血小板聚集功能的影响

目的　研究内源性高甘油三酯血症 (HTG)患者血浆极低密度脂蛋白 (VL DL )、低密度脂蛋白 (L DL )及高密度脂蛋白 (HDL )对血小板聚集功能的影响。方法　对 2 1例内源性高甘油三酯血症患者与 2 1例正常对照者用一次性密度梯度超速离心法分离血浆 VL DL、L DL及 HDL。测定这三种脂蛋白的 2 34nm吸光度 (A2 34 )、电泳迁移率 (REM)及硫代巴比妥酸反应物质 (TBARS)含量。分别将这三种脂蛋白加入由正常人新鲜血浆构成的反应系统中 ,用血小板聚集仪分别测定 ADP诱导的血小板 5 min最大聚集率。结果　内源性 HTG患者血浆 TG含量平均升高 2 .73倍 ,HDL - C下降 1.71倍 ,同时 L PO升高 1.2 2倍 ;HTG组 VL DL、L DL及 HDL的 REM、A2 34 、TBARS含量均较对照组显著增加 (P<0 .0 1) ,表明内源性 HTG患者血浆 VL DL、L DL及 HDL均发生了氧化修饰生成Ox- VL DL、Ox- L DL及 Ox- HDL。血小板聚集率在分别加入 HTG组患者的 VL DL、L DL及 HDL后均比加入正常组相应脂蛋白明显增加 (P<0 .0 5及 P<0 .0 1)。相关分析表明 ,HTG- L DL及 HTG- HDL A2 34 、REM及 TBARS含量与血小板聚集率呈正相关 (P<0 .0 1)。结论　 HTG患者血浆 VL DL、L DL及 HDL发生了氧化修饰 ,并使血小板聚集增加     

高密度脂蛋白氧化修饰对大鼠巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制

研究高密度脂蛋白-3（HDL3）氧化修饰对其介导大鼠腹腔巨噬细胞胆固醇（ch）流出功能影响及细胞Ch流出机制。HDL3和其组分载脂蛋白A－I（ApoA－I）经CU2+氧化修饰后分别与巨噬细胞（Mφ）一起培养，测定细胞ch流出量。结果：牛血清白蛋白（对照组）介导3.98％细胞ch流出，HDL3和氧化HDL3（Ox—HDL3）组分别为41．78％和17．43％，ApoA—I和Ox－ApoA一I分别为40％和17．33％。结论：1．HDL氧化修饰后介导细胞ch流出功能显著降低。2．HDL的这一功能是由其ApoA—I组分介导的。     

培养人动脉平滑肌细胞诱发高密度脂蛋白的氧化修饰

目的：观察高密度脂蛋白（High density lipoprotein,HDL）经与培养人动脉平滑肌细胞（Smooth muscle cell,SMC）保温后发生氧化修饰。方法：HDL组分琼脂糖凝胶脂蛋白电泳，及其共轭二烯（Conjugated diene CD)、硫代巴比妥酸反应物质（Thiobarbituric acid reaction substance TBARS）及脂氢过氧化物（Lipid hydroperoxide LOOH）的测定。结果：HDL经过与人动脉SMC共培养后，与天然HDL（Native HDL N-HDL)比较，其电泳迁移率明显增加，其CD、TBARS及LOOH的含量均显著增加（P＜0．01）。结论：HDL经过与培养人动脉SMC37℃保温48h后可发生氧化修饰。     

枸骨中芦丁和槲皮素含量测定

目的：采用高效液相色谱法测定枸骨不同部位（嫩叶、老叶、枝、青果、红果）及不同采收期枸骨叶中芦丁和槲皮素的含量。方法采用C18色谱柱（250 mm ×4．6 mm ,5μm）,流动相为甲醇－0．5％磷酸水溶液（47∶53）,流速为0．7 ml／min ,检测波长为356 nm ,柱温25℃,测定枸骨中芦丁和槲皮素含量。结果芦丁和槲皮素线性范围分别为0．52～5．2μg和0．34～3．4μg,相关系数 r均为0．9999,平均回收率分别为98．6％和99．2％,RSD分别为1．70％和1．91％（n＝6）。结论枸骨不同部位及不同采收期枸骨叶中芦丁和槲皮素含量有明显差异。     

槲皮素、异鼠李素逆转体外HDL氧化修饰的实验研究

目的观察槲皮素(Quercetir,Que)和异鼠李素(Isorhamnetin,Iso)在体外对已受到Cu2 、Fe2 氧化修饰的人血浆高密度脂蛋白(high density liprotein,HDL)的作用.方法采用一次性密度法分离正常人血浆HDL,用Cu2 ,Fe2 进行体外氧化修饰.抗氧化组在修饰后6h加Que或Iso(100mol/L)作用不同时间(4,8和16 h).分别检测HDL中脂质过氧化物丙二醛(MDA)、维生素E(VitE)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果100μmol/L Que和Iso作用4,8h后可分别明显抵制Fe2 -Ox-HDL,Cu2 -Ox-HDL中MDA生成(P＜0.001).Que和Iso作用8,16 h后可分别提高Cu2 -Ox-HDL,Fe2 -Ox-HDL中SOD活性(P＜0.001);明显延缓VitE含量降低(P＜0.05).结论Que和Iso均对已受到Cu2 ,Fe2 氧化修饰的HDL具有明显的抑制作用,但对Cu2 ,Fe2 氧化修饰的HDL,槲皮素、异鼠李素的作用存在差异.Que和Iso的作用机制可能与其抗自由基氧化有关,提示该类物质是一种良好的抗氧化剂,对As的防治有一定的运用价值.     

Inhibition of Oxidative Modification of Human\= Low Density Lipoprotein by Resveratrol

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＩｎｃｒｅａｓｉｎｇｅｖｉｄｅｎｃｅｓｕｇｇｅｓｔｓｔｈａｔｏｘｉｄｉｚｅｄＬＤＬ（ＯＸ－ＬＤＬ）ｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ（ＡＳ）．Ｐｒｏｔｅｃ...     

Effects of resveratrol on oxidative modification of human low density lipoprotein

Ｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｌｉｐｉｄ ｌａｄｅｎ“ｆｏａｍｃｅｌｌｓ”ｗｉｔｈｉｎｔｈｅｉｎｔｉｍａｏｆａｒｔｅｒｉｅｓｉｓａｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｆｅａｔｕｒｅｏｆａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｌｅｓｉｏｎｓ Ｏｘｉｄａｔｉｖｅｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ (ＬＤＬ)ｉｓａｍａｊｏｒａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｉｎｖｉｖｏ,ｗｈｉｃｈｉｓｔａｋｅｎｕｐｂｙｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｓｃａｖｅｎｇｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒｐａｔｈｗａｙ…     

辛伐他汀对人低密度脂蛋白氧化修饰影响的实验研究

目的研究辛伐他汀在体外对低密度脂蛋白氧化修饰的影响.方法以低密度脂蛋白氧化修饰为模型,以硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)生成量及相对电泳迁移率(REM)为指标,研究了辛伐他汀对铜离子(Cu2 )诱导低密度脂蛋白氧化修饰的抑制作用.结果随辛伐他汀浓度从1～10μmol/L的增加,TBARS值分别减少67.3%,73.9%,81.9%,REM值减少48.3%,55.2%,58.6%,呈浓度及时间依赖关系.其中10μmol/L辛伐他汀可几乎完全抑制低密度脂蛋白氧化.结论辛伐他汀在体外能明显抑制Cu2 诱导的低密度脂蛋白氧化修饰.     

二甲双胍体外抑制低密度脂蛋白氧化的实验研究

目的氧化型低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)发生的重要危险因素之一。文中旨在探讨二甲双胍(Metformine)对人LDL体外氧化修饰的影响。方法共分为6组(每组6份样品):LDL组;LDL+Cu2+组;LDL+Cu2++二甲双胍组,将加入不同剂量的二甲双胍又分为10μmol/L组;20μmol/L组;50μmol/L组和200μmol/L组。通过体外实验,观察二甲双胍对Cu2+介导LDL氧化后,硫代巴比妥酸反应物(thiobarbituric acid reactive substance,TBARS)含量和电泳迁移率(relative electrophoretic mobility,REM)的变化,分析二甲双胍对LDL脂质过氧化程度的影响。结果 LDL在体外铜离子介导下,24 h后其TBARS含量和相对REM增大,表明铜离子可诱导LDL发生氧化修饰。当加入二甲双胍后,氧化LDL的TBARS含量和相对REM较对照组低,2组相比,P<0.05。不同浓度二甲双胍作用24 h,随二甲双胍浓度增加,其氧化LDL的TBARS含量和相对REM变小,抑制加强,二甲双胍降低LDL的TBARS值以及减慢LDL的REM呈剂量依赖性。结论铜离子在体外能介导LDL氧化,二甲双胍能抑制铜离子介导的LDL氧化,能有效地降低LDL的脂质过氧化程度,具有一定的抗脂质氧化功能。     

葛根素、大豆素、槲皮素及芦丁体外抗氧化活性与构效关系研究

目的 比较大豆素、葛根素、槲皮素及芦丁的体外抗氧化活性,初步探讨类黄酮化合物的构效关系。方法 体外培养RAW264.7细胞,分别加入大豆素、葛根素、槲皮素和芦丁对细胞进行处理,4h后加入脂多糖刺激细胞,采用DCFH-DA探针法检测细胞内总活性氧水平,采用Griess试剂法检测细胞上清中NO、MDA的水平。结果 4种类黄酮化合物处理的RAW264.7细胞均可见细胞内总活性氧水平下降,以槲皮素处理效果最为显著;槲皮素可显著降低NO、MDA水平(P<0.01),葛根素可显著降低NO水平(P<0.01),芦丁可显著降低MDA水平(P<0.01),而大豆素对两者均无明显影响。结论 在4种类黄酮化合物中,槲皮素的抗氧化能力强于大豆素、葛根素和芦丁,这可能与槲皮素含羟基数目多、且羟基未成苷的结构特点有关。