槲皮素、芦丁及葛根素抑制HDL氧化修饰作用的研究

目的研究槲皮素、芦丁及葛根素等抑制HDL氧化修饰的作用。方法按一次性密度梯度超速离心法分离人血清HDL，分别加5μmol／L槲皮素、芦丁及葛根素与HDL温育3h。然后利用Cu^2 介导体外氧化修饰脂蛋白的方法，观察HDL氧化修饰不同时间，其A234、REM、TBARS及蛋白质羰基的动力学改变，并与不加药物的对照组比较。结果Cu^2 介导氧化HDL修饰时，在2、4、6、8、12及24h后，其A234、REM、TBARS及蛋白质羰基含量均逐步增加；加入5．0μmol／L槲皮素、芦丁及葛根素的实验组，Cu^2 介导HDL的氧化修饰分别延迟2～4h、4h和2～4h。其A234、REM、TNAR及载脂蛋白羰基含量较对照组降低；槲皮素实验组分别降低24．2％～49．0％、3．0％～25．0％、7．9％～34．1％及28．3％～50．4％；芦丁实验组降低9．4％～42．0％、4．0％～20．7％、1．2％～26．8％及18．6％～64．6％；葛根素实验组载脂蛋白羰基含量较对照组降低14．1％～52．1％。而其A234、REM，TBARS虽有降低，但降低幅度不大。结论槲皮素及芦丁可显著抑制HDL的氧化修饰，而葛根索的抑制作用较小。     

槲皮素、异鼠李素逆转体外HDL氧化修饰的实验研究

目的观察槲皮素(Quercetir,Que)和异鼠李素(Isorhamnetin,Iso)在体外对已受到Cu2 、Fe2 氧化修饰的人血浆高密度脂蛋白(high density liprotein,HDL)的作用.方法采用一次性密度法分离正常人血浆HDL,用Cu2 ,Fe2 进行体外氧化修饰.抗氧化组在修饰后6h加Que或Iso(100mol/L)作用不同时间(4,8和16 h).分别检测HDL中脂质过氧化物丙二醛(MDA)、维生素E(VitE)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果100μmol/L Que和Iso作用4,8h后可分别明显抵制Fe2 -Ox-HDL,Cu2 -Ox-HDL中MDA生成(P＜0.001).Que和Iso作用8,16 h后可分别提高Cu2 -Ox-HDL,Fe2 -Ox-HDL中SOD活性(P＜0.001);明显延缓VitE含量降低(P＜0.05).结论Que和Iso均对已受到Cu2 ,Fe2 氧化修饰的HDL具有明显的抑制作用,但对Cu2 ,Fe2 氧化修饰的HDL,槲皮素、异鼠李素的作用存在差异.Que和Iso的作用机制可能与其抗自由基氧化有关,提示该类物质是一种良好的抗氧化剂,对As的防治有一定的运用价值.     

槲皮素、异鼠李素对Cu2+介导极低密度脂蛋白氧化修饰的影响

目的　观察槲皮素 (Que)及异鼠李素 (Iso)对 Cu2 +介导的极低密度脂蛋白 (VL DL)氧化修饰的影响。方法　采用一次性密度梯度离心法分离人血浆 VL DL,用 Cu2 +进行体外氧化修饰 ,抗氧化组在温育前加入不同浓度的 Que和 Iso。分别检测脂蛋白中丙二醛 (MDA)、维生素 E(Vit E)及超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果　Que和 Iso可明显降低 OX- VL DL 中 MDA含量 ,延缓 OX- VL DL 中 Vit E含量的减少 ;显著提高脂蛋白中 SOD活性。结论　 Que和 Iso可显著抑制 Cu2 +诱导的 VL DL 的氧化修饰 ,且二者的作用相近 ,这与其抗自由基氧化活性密切相关。     

辛伐他汀对人低密度脂蛋白氧化修饰影响的实验研究

目的研究辛伐他汀在体外对低密度脂蛋白氧化修饰的影响.方法以低密度脂蛋白氧化修饰为模型,以硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)生成量及相对电泳迁移率(REM)为指标,研究了辛伐他汀对铜离子(Cu2 )诱导低密度脂蛋白氧化修饰的抑制作用.结果随辛伐他汀浓度从1～10μmol/L的增加,TBARS值分别减少67.3%,73.9%,81.9%,REM值减少48.3%,55.2%,58.6%,呈浓度及时间依赖关系.其中10μmol/L辛伐他汀可几乎完全抑制低密度脂蛋白氧化.结论辛伐他汀在体外能明显抑制Cu2 诱导的低密度脂蛋白氧化修饰.     

槲皮素、异鼠李素对Cu^2＋介导极低密度脂蛋白氧化修饰的影响

目的 观察槲皮素（Que)及异鼠李素（Iso)对Cu^2 介导的极低密度脂蛋白（VLDL）氧化修饰的影响。方法 采用一次性密度梯度离心法分离人血浆VLDL，用Cu^2 进行体外氧化修饰，抗氧化组在温育前加入不同浓度的Que和Iso，分别检测脂蛋白中丙二醛（MDA）、维生素E（VitE)及超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果 Que和Iso可明显降低OX－VLDL中MDA含量，延缓OX－VLDL中VitE含量的减少，显著提高脂蛋白中SOD活性。结论 Que和Iso可显著抑制Cu^2 诱导的VLDL的氧化饰，且二者的作用相近，这与其抗自由基氧化活性密切相关。     

槲皮素、异鼠李素对Cu2+介导极低密度脂蛋白氧化修饰的影响

目的观察槲皮素（Que）及异鼠李素(Iso)对Cu2+介导的极低密度脂蛋白（VLDL）氧化修饰的影响。方法采用一次性密度梯度离心法分离人血浆VLDL,用Cu2+进行体外氧化修饰,抗氧化组在温育前加入不同浓度的Que和Iso。分别检测脂蛋白中丙二醛（MDA）、维生素E（VitE）及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果Que和Iso可明显降低OX-VLDL中MDA含量,延缓OX-VLDL中VitE含量的减少;显著提高脂蛋白中SOD活性。结论Que和Iso可显著抑制Cu2+诱导的VLDL的氧化修饰,且二者的作用相近,这与其抗自由基氧化活性密切相关。     

高密度脂蛋白体外氧化修饰动力学研究

在体外HDL在Cu2+诱导下可发生氧化修饰.为了探讨体外血浆高密度脂蛋白(HDL)氧化修饰中几种产物动力学改变,用Cu2+与HDL保温2～24h,分别观察了HDL氧化修饰过程中硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)、脂氢过氧化物(COOH)、共轭二烯(CD)及相对电泳迁移率(REM)等的变化.结果显示:LOOH和CD两个指标的动力学变化相似,呈现延滞期、扩增期和下降期三个时相.而TBARS和REM动力学变化相似,只见延迟期和扩增期,未见降解期.     

槲皮素,异鼠李素对Cu^2＋介导的LDL氧化修饰的抑制作用

目的：观察槲皮素（Ｑｕｅ）、异鼠李素（Ｉｓｏ）对Ｃｕ＾２＋介导的低密脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰的影响。方法：采用一次性密度梯度离心法分离正常人血浆脂蛋白,用Ｃｕ＾２＋进行体外氧化修饰,温育前加不同浓度的Ｑｕｅ及Ｉｓｏ。检测脂蛋白中脂质过氧化物（ＬＰＯ）、维生素Ｅ（ＶｉｔＥ）含量及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。结果：在Ｃｕ＾２＋与ＬＤＬ温育前加入Ｑｕｅ、Ｉｓｏ可使ＬＤＬ中ＬＰＯ生成减少,明显延缓 ,Ｖ     

抗氧化剂对Cu~(2+)、HOCl及动脉壁细胞诱导的HDL氧化修饰的作用研究

目的 探讨抗氧化剂对高密度脂蛋白(HDL)氧化修饰的抑制机制,为预防HDL的氧化修饰提供实验依据.方法 将体外新鲜制备的人血浆HDL分别用不同浓度的硫酸铜(CuSO_4)、次氯酸(HOCl)处理或与动脉壁细胞共同温育进行氧化修饰,然后分别测定天然未修饰HDL(N-HDL)、氧化修饰HDL(Ox-HDL)的凝胶电泳相对电泳迁移率(REM)、硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)、溶血卵磷脂/卵磷脂比率(LPC/PC)的生成及载脂蛋白成分改变.对比相同条件下,加入抗氧化剂叔丁基甲苯(BHT)、Vit E及Vit C后,以上指标的改变.结果 BHT、Vit E及Vit C均可显著抑制由Cu~(2+)和HOCl诱导的Ox-HDL的REM增加、TBARS的生成、卵磷脂的水解,载脂蛋白AⅠ和AⅡ的改变.动脉壁细胞诱导的Ox-HDL的琼脂糖REM增加、TRARS的生成及卵磷脂水解也可被BHT、Vit E及Vit C显著抑制.但不同抗氧化剂的作用方式各有不同.结论 BHT以及Vit E和Vit C能有效抑制体内外HDL的氧化修饰.     

异鼠李素对乳腺癌细胞的作用机制

为探讨异鼠李素对乳腺癌细胞中的作用及其机制,以两种乳腺癌细胞株MCF7和BT549作为模型细胞株,通过加入不同浓度的异鼠李素,采用MTT法检测其对细胞增殖活性的抑制作用。在确定增殖抑制作用的基础上,采用流式细胞术测定异鼠李素对细胞周期和凋亡的影响,及采用免疫印迹的方法观察异鼠李素对细胞增殖及凋亡信号通路的影响。实验结果显示,异鼠李素可显著抑制乳腺癌细胞株MCF7及BT-549的增殖,其IC₅₀分别为11.72和8.74 μmol/L;通过流式细胞术检测,发现异鼠李素可引起细胞G₁期的周期阻滞及促进细胞的凋亡,信号通路分析显示异鼠李素可减少细胞增殖通路蛋白AKT和ERK的磷酸化及增殖核抗原Ki67的表达,减少Bcl-2的表达及增加Bax的表达,促进Caspase 3的剪切,从而导致细胞的凋亡。因此,异鼠李素具有显著的抗乳腺癌作用,其作用机制与抑制细胞的增殖通路及促进细胞的凋亡有关。     

内源性高甘油三酯血症患者血浆VLDL、LDL及HDL对血小板聚集功能的影响

目的　研究内源性高甘油三酯血症 (HTG)患者血浆极低密度脂蛋白 (VL DL )、低密度脂蛋白 (L DL )及高密度脂蛋白 (HDL )对血小板聚集功能的影响。方法　对 2 1例内源性高甘油三酯血症患者与 2 1例正常对照者用一次性密度梯度超速离心法分离血浆 VL DL、L DL及 HDL。测定这三种脂蛋白的 2 34nm吸光度 (A2 34 )、电泳迁移率 (REM)及硫代巴比妥酸反应物质 (TBARS)含量。分别将这三种脂蛋白加入由正常人新鲜血浆构成的反应系统中 ,用血小板聚集仪分别测定 ADP诱导的血小板 5 min最大聚集率。结果　内源性 HTG患者血浆 TG含量平均升高 2 .73倍 ,HDL - C下降 1.71倍 ,同时 L PO升高 1.2 2倍 ;HTG组 VL DL、L DL及 HDL的 REM、A2 34 、TBARS含量均较对照组显著增加 (P<0 .0 1) ,表明内源性 HTG患者血浆 VL DL、L DL及 HDL均发生了氧化修饰生成Ox- VL DL、Ox- L DL及 Ox- HDL。血小板聚集率在分别加入 HTG组患者的 VL DL、L DL及 HDL后均比加入正常组相应脂蛋白明显增加 (P<0 .0 5及 P<0 .0 1)。相关分析表明 ,HTG- L DL及 HTG- HDL A2 34 、REM及 TBARS含量与血小板聚集率呈正相关 (P<0 .0 1)。结论　 HTG患者血浆 VL DL、L DL及 HDL发生了氧化修饰 ,并使血小板聚集增加     

高脂膳食诱发家兔血清LPO升高及LDL,VLDL和HDL在活体内的氧化修饰

为探讨高脂膳食对家兔血清过氧化脂质升高和ＬＤＬ、ＶＬＤＬ，特别是ＨＤＬ氧化修饰的影响。正常对照组（ｎ＝８）喂以普通饲料，高脂实验组（ｎ＝８）用高胆固醇饲料（普通饲料加５％猪油，另每只兔加喂０．５ｇ胆固醇）喂养１２周。兔血清ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＨＤＬ用密度梯度超速离心法分离得到。ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＨＤＬ的氧化修复用琼脂糖凝胶电泳、２３４ｎｍ光吸收及ＴＢＡＲＳ荧光检测进行鉴定。结果显示：高脂实验组兔血清     

脂质代谢紊乱患者血清脂蛋白氧化易感性的研究

目的：比较分析脂质代谢紊乱患者血清脂蛋白氧化易感性以及高密度脂蛋白（HDL）对低密度脂蛋白（LDL）氧化抑制能力。方法：采用密度梯度超速离心分离45例肾衰（CRF）、33例心肌梗死（MIS）、33例脑梗死（CI）和53例2型糖尿病（DM）患者的血清脂蛋白组分（VLDL,LDL,HDL）,用硫代巴比妥酸值（TBARS）分析脂（CI）和53例2型糖尿病（DM）患者的血清脂蛋白组分(VLDL,LDL,HDL),用硫代巴比妥酸值（TBARS）分析脂蛋白脂质过氧化程度,A234nm光吸收检测脂蛋白共轭双烯含量分析脂蛋白的氧化易感性,并与正常人（44例）进行了比较。结果：所有患者组VLDL的TBARS值均明显高于对照组,其中MIS组增高程度最为显著（与对照组相比,P＜0.001）;MIS组和DM组LDL、CI组和DM组HDL的TBARX值增高;患者组VLDL、DLD的氧化延滞时间也显著缩短,DM组缩短最为明显;但各组HDL与对照组相比无差异;此外患者组HDL对LDL氧化抑制能力均明显减弱,CRF组和MIS组减弱最为显著。结论：各种脂质代谢紊乱患者体内血浆脂蛋白均发生一定程度的氧化修饰,促进了动脉粥样硬化的发生发展。     

脑梗死患者脂蛋白氧化水平分析

目的 :了解脑梗死患者血清脂蛋白氧化易感性。　方法 :采用密度梯度超速离心分离 38例脑梗死患者的血清脂蛋白组分 (VL DL、L DL、HDL) ,用 A2 34 nm光吸收鉴定脂蛋白氧化易感性 ,硫代巴比妥酸值 (TBARS)分析脂蛋白脂质过氧化程度 ,并与 40例正常人进行了比较。　结果 :脑梗死患者 VL DL 组分脂质过氧化程度明显高于正常人 (P<0 .0 0 1) ,氧化延滞时间明显缩短 (P<0 .0 0 1) ,L DL 组分脂质过氧化程度高于正常人 (P<0 .0 5 ) ,氧化延滞时间缩短 (P<0 .0 5 )。　结论 :脑梗死患者 VL DL、L DL 组分氧化易感性增加     

花椒挥发油在体外对低密度脂蛋白氧化的影响

目的探讨花椒挥发油能否对抗脂蛋白的氧化。方法采用Cu^2＋介导正常人低密度脂蛋白（LDL）的氧化反应，应用硫代巴比妥酸法测定LDL氧化过程中硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）的变化，采用琼脂糖凝胶电泳测定氧化型低密度脂蛋白的相对电泳迁移率（REM）的变化。结果40mg／mL的花椒挥发油对Cu^2＋介导LDL氧化修饰时TBARS与REM的差异有统计学意义（P〈0．01）。未加花椒挥发油的对照组LDL氧化反应延滞期为1h，在2～4h后TBARS值进入快速增长期，于24h达到高峰并趋于稳定；而在花椒挥发油组（40mg／mL组），LDL的氧化反应延滞期延长到4h左右，快速增长期延长到6～8h；但TBARS最大值无明显降低。结论花椒挥发油能够在体外对抗Cu^2＋介导LDL的氧化修饰。     

培养人动脉平滑肌细胞诱发高密度脂蛋白的氧化修饰

目的：观察高密度脂蛋白（High density lipoprotein,HDL）经与培养人动脉平滑肌细胞（Smooth muscle cell,SMC）保温后发生氧化修饰。方法：HDL组分琼脂糖凝胶脂蛋白电泳，及其共轭二烯（Conjugated diene CD)、硫代巴比妥酸反应物质（Thiobarbituric acid reaction substance TBARS）及脂氢过氧化物（Lipid hydroperoxide LOOH）的测定。结果：HDL经过与人动脉SMC共培养后，与天然HDL（Native HDL N-HDL)比较，其电泳迁移率明显增加，其CD、TBARS及LOOH的含量均显著增加（P＜0．01）。结论：HDL经过与培养人动脉SMC37℃保温48h后可发生氧化修饰。     

Oxidative modification of high density lipoprotein induced by cultured human arterial smooth muscle cells

Objective: To observe the oxidative modification of high density lipoprotein (HDL) induced by culturedhuman arterial smooth muscle cells (SMCs). Methods: HDL cocultured with SMCs at 37℃ in 48 h was subjected,and native HDL (N-HDL) served as control. Oxidative modification of HDL was identified by using agarose gel electro-phoresis. Absorbances of conjugated diene (CD) and lipid hydroperoxide (LOOH) were measured with ultravioletspectrophotometry at 234 and 560 nm respectively, and fluorescence intensity of thiobarbuturic acid reaction substance     

Effects of resveratrol on oxidative modification of human low density lipoprotein

Ｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｌｉｐｉｄ ｌａｄｅｎ“ｆｏａｍｃｅｌｌｓ”ｗｉｔｈｉｎｔｈｅｉｎｔｉｍａｏｆａｒｔｅｒｉｅｓｉｓａｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｆｅａｔｕｒｅｏｆａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｌｅｓｉｏｎｓ Ｏｘｉｄａｔｉｖｅｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ (ＬＤＬ)ｉｓａｍａｊｏｒａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｉｎｖｉｖｏ,ｗｈｉｃｈｉｓｔａｋｅｎｕｐｂｙｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｓｃａｖｅｎｇｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒｐａｔｈｗａｙ…