辛伐他汀对人低密度脂蛋白氧化修饰影响的实验研究

目的研究辛伐他汀在体外对低密度脂蛋白氧化修饰的影响.方法以低密度脂蛋白氧化修饰为模型,以硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)生成量及相对电泳迁移率(REM)为指标,研究了辛伐他汀对铜离子(Cu2 )诱导低密度脂蛋白氧化修饰的抑制作用.结果随辛伐他汀浓度从1～10μmol/L的增加,TBARS值分别减少67.3%,73.9%,81.9%,REM值减少48.3%,55.2%,58.6%,呈浓度及时间依赖关系.其中10μmol/L辛伐他汀可几乎完全抑制低密度脂蛋白氧化.结论辛伐他汀在体外能明显抑制Cu2 诱导的低密度脂蛋白氧化修饰.     

金线莲体外抑制LDL氧化的实验研究

目的:探讨金线莲(Anoectoch ilus roxburgh ii)的抗脂质氧化能力。方法:在体外用Cu2+介导低密度脂蛋白(LDL)氧化,加入各种剂量的金线莲乙醇提取液,通过测定LDL氧化过程中产生的共轭双烯含量、硫代巴比妥酸反应物(TBARS)含量和电泳迁移率的变化,分析金线莲对LDL氧化易感性和脂质过氧化程度的影响。结果:金线莲浓度为1μl/m l时,将LDL的氧化延滞时间延长了1.5倍,从(8.8±0.4)m in至(13.0±0.8)m in。随着金线莲浓度的增加,LDL的氧化延滞时间逐渐延长。金线莲降低LDL的TBARS值呈剂量依赖性,同时,显著减慢LDL的电泳迁移率。结论:金线莲能有效地减小LDL的氧化易感性,降低LDL的脂质过氧化程度,具有一定的抗脂质氧化功能。     

Ebselen对Cu2+、Fe2+及巨噬细胞氧化修饰人LDL的抑制作用

目的:研究Ebselen对Cu2+、Fe2+及巨噬细胞氧化修饰人低密度脂蛋白(LDL)的抑制作用及其可能机制.方法:采用紫外分光光度法检测人LDL中硫代巴比妥酸反应物(TBARS)及共轭双烯(CD)的含量来表示LDL的被氧化程度.结果:Cu2+、Fe2+及体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞(MPM)都能氧化修饰人LDL,使其中的TBARS和CD含量显著升高.Ebselen(0.5～4.0 μmol/L)能剂量依赖性降低人LDL中TBARS和CD含量,其中2umol/L的Ebselen能完全抑制Cu2、Fe2+及MPM升高LDL中TBARS含量的作用.单用谷胱甘肽(GSH,0.5 mmol/L)对LDL中TBARS含量没有显著的影响,但GSH能显著增强Ebselen对TBARS生成的抑制作用.结论:Ebselen能抑制Cu2+、Fe2+及MPM氧化修饰人LDL,GSH能明显增强Ebselen的这种抑制作用.     

辛伐他汀对人低密度脂蛋白氧化修饰影响的实验研究

目的：研究辛伐他汀在体外对低密度脂蛋白血氧化修饰的影响。方法：以低密度脂蛋白氧化修饰为模型，以硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)生成量及相对电泳迁移率(REM)为指标，研究了辛伐他汀对铜离子(Cu^2 )诱导低密度脂蛋白氧化修饰的抑制作用。结果：随辛伐他汀浓度从1μmol／L-10μmol／L的增加，TBARS值分别减少67．3％、73．9％、81．9％，REM值减少48．3％、55.2％、58.6％，呈浓度及时间依赖关系。其中10μmol／L辛伐他汀可几乎完全抑制低密度脂蛋白氧化。结论：辛伐他汀在体外能明显抑制Cu^2 诱导的低密度脂蛋白氧化修饰。     

异鼠李素及橙皮甙抑制HDL氧化修饰作用的研究

目的 研究异鼠李素及橙皮甙对高密度脂蛋白(HDL)氧化修饰的抑制作用.方法 按一次性密度梯度超速离心法分离人血清HDL,分别加入5.0 μmol/L异鼠李素及橙皮甙温育3 h,然后利用Cu2 介导体外氧化修饰脂蛋白的方法,观察HDL氧化修饰不同时间,其234 nm吸光度(A234)、相对电泳迁移率(REM)、硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)及蛋白质羰基的动力学改变.结果 Cu2 介导HDL氧化修饰2、4、6、8、12及24 h后,其A234、REM、TBARS及蛋白质羰基含量均逐步增加;加入5.0 μmol/L 异鼠李素及橙皮甙的实验组,Cu2 介导HDL的氧化修饰分别延迟2～6 h和2～4 h;其A234、REM、TBARS及载脂蛋白羰基含量较对照组降低,异鼠李素实验组分别降低16.3%～46.9%、0.6%～25.2%、9.2%～28.4%及11.6%～45.2%;橙皮甙实验组降低1.5%～30.0%、1.4%～13.3%、6.6%～18.8%及14.4%～62.0%.结论 异鼠李素及橙皮甙可抑制Cu2 诱导的HDL的氧化修饰,且异鼠李素的抗氧化作用比橙皮甙强.     

花椒挥发油在体外对低密度脂蛋白氧化的影响

目的探讨花椒挥发油能否对抗脂蛋白的氧化。方法采用Cu^2＋介导正常人低密度脂蛋白（LDL）的氧化反应，应用硫代巴比妥酸法测定LDL氧化过程中硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）的变化，采用琼脂糖凝胶电泳测定氧化型低密度脂蛋白的相对电泳迁移率（REM）的变化。结果40mg／mL的花椒挥发油对Cu^2＋介导LDL氧化修饰时TBARS与REM的差异有统计学意义（P〈0．01）。未加花椒挥发油的对照组LDL氧化反应延滞期为1h，在2～4h后TBARS值进入快速增长期，于24h达到高峰并趋于稳定；而在花椒挥发油组（40mg／mL组），LDL的氧化反应延滞期延长到4h左右，快速增长期延长到6～8h；但TBARS最大值无明显降低。结论花椒挥发油能够在体外对抗Cu^2＋介导LDL的氧化修饰。     

高密度脂蛋白体外氧化修饰动力学研究

在体外HDL在Cu2+诱导下可发生氧化修饰.为了探讨体外血浆高密度脂蛋白(HDL)氧化修饰中几种产物动力学改变,用Cu2+与HDL保温2～24h,分别观察了HDL氧化修饰过程中硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)、脂氢过氧化物(COOH)、共轭二烯(CD)及相对电泳迁移率(REM)等的变化.结果显示:LOOH和CD两个指标的动力学变化相似,呈现延滞期、扩增期和下降期三个时相.而TBARS和REM动力学变化相似,只见延迟期和扩增期,未见降解期.     

低密度脂蛋白经不同方法氧化修饰后理化性质的改变

用Cu~(2+)诱导和小鼠腹腔巨噬细胞(MPM)共同孵育以及紫外线(UV)照射的方法都能够导致LDL的氧化修饰,表现在巴比妥酸反应物质(TBARS)、相对电泳迁移率(REM)、在420nm的荧光强度和经清道夫受体的降解速率等的增加。LDL的脂质过氧化修饰,除用作研究动脉粥样硬化的发生发展的机制外,还是一种研究脂质过氧化损伤和比较抗氧化剂的抗氧化效果及其作用机理的较为理想的模型。     

二甲双胍对骨向分化骨髓基质细胞增殖和分化的影响

目的探讨二甲双胍对骨向分化的大鼠骨髓基质细胞增殖和分化的影响。方法体外分离培养大鼠骨髓基质细胞,对其进行骨向诱导分化,并于实验组添加100μmol/L二甲双胍,应用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶(alkaline phosphate,ALP)活性分析、矿化结节定量、实时定量RT-PCR检测不同组别的细胞骨向分化情况。结果二甲双胍组细胞数目持续高于空白组;该组细胞ALP活性显著,茜素红脱色液光密度值高于空白组;RT-PCR定量分析进一步证明二甲双胍促进骨髓基质细胞骨向分化,成骨特异性基因表达水平显著高于非用药组。结论 100μmol/L二甲双胍对体外培养的骨向分化骨髓基质细胞具有促增殖、促分化作用。     

转铁蛋白对Cu2+,Fe2+介导的LDL氧化修饰的影响研究

目的 :观察转铁蛋白 (transferrin ,Tf)对Cu2 + 、Fe2 + 介导的体外人血浆低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰的影响。方法 :采用一次性密度梯度超离心法分离正常人血浆LDL并与CuSO4 及FeSO4 在 37℃温育不同时间 ,使LDL在体外氧化修饰。抗氧化组在温育前加入不同浓度的Tf。检测各组LDL中脂质过氧化产物丙二醛 (MDA) ,维生素E(VitE)含量及超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果 :①LDL与Cu2 + 或Fe2 + 温育后 ,MDA含量显著升高 (P <0 .0 0 1) ,并呈明显的时间效应。②在Cu2 + 或Fe2 + 修饰前加入不同浓度 (10 0、2 0 0、4 0 0 μg ml)的Tf能使LDL中MDA生成明显减少 ,VitE含量下降明显减缓 ,并显著提高SOD活性 ,呈现一定的浓度依赖性。当Tf浓度为 4 0 0 μg ml时 ,MDA生成抑制率分别为 71.6 5 % ,79.86 % ;SOD活性提高率分别为 14 1.5 5 % ,14 6 .6 9% ;VitE降低减缓率分别为 6 9.5 2 % ,85 .10 %。结论 :Tf对Cu2 + 或Fe2 + 介导的LDL氧化修饰具有明显的抑制作用 ,因而可能参与机体对AS的防治。其作用途径可能与阻断Cu2 + 或Fe2 + 诱导的自由基生成 ,保护内源性抗氧化物质SOD、VitE的活性有关     

Inhibition of Oxidative Modification of Human\= Low Density Lipoprotein by Resveratrol

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＩｎｃｒｅａｓｉｎｇｅｖｉｄｅｎｃｅｓｕｇｇｅｓｔｓｔｈａｔｏｘｉｄｉｚｅｄＬＤＬ（ＯＸ－ＬＤＬ）ｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ（ＡＳ）．Ｐｒｏｔｅｃ...     

Effects of resveratrol on oxidative modification of human low density lipoprotein

Ｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｌｉｐｉｄ ｌａｄｅｎ“ｆｏａｍｃｅｌｌｓ”ｗｉｔｈｉｎｔｈｅｉｎｔｉｍａｏｆａｒｔｅｒｉｅｓｉｓａｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｆｅａｔｕｒｅｏｆａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｌｅｓｉｏｎｓ Ｏｘｉｄａｔｉｖｅｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ (ＬＤＬ)ｉｓａｍａｊｏｒａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｉｎｖｉｖｏ,ｗｈｉｃｈｉｓｔａｋｅｎｕｐｂｙｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｓｃａｖｅｎｇｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒｐａｔｈｗａｙ…     

抗氧化剂对Cu~(2+)、HOCl及动脉壁细胞诱导的HDL氧化修饰的作用研究

目的 探讨抗氧化剂对高密度脂蛋白(HDL)氧化修饰的抑制机制,为预防HDL的氧化修饰提供实验依据.方法 将体外新鲜制备的人血浆HDL分别用不同浓度的硫酸铜(CuSO_4)、次氯酸(HOCl)处理或与动脉壁细胞共同温育进行氧化修饰,然后分别测定天然未修饰HDL(N-HDL)、氧化修饰HDL(Ox-HDL)的凝胶电泳相对电泳迁移率(REM)、硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)、溶血卵磷脂/卵磷脂比率(LPC/PC)的生成及载脂蛋白成分改变.对比相同条件下,加入抗氧化剂叔丁基甲苯(BHT)、Vit E及Vit C后,以上指标的改变.结果 BHT、Vit E及Vit C均可显著抑制由Cu~(2+)和HOCl诱导的Ox-HDL的REM增加、TBARS的生成、卵磷脂的水解,载脂蛋白AⅠ和AⅡ的改变.动脉壁细胞诱导的Ox-HDL的琼脂糖REM增加、TRARS的生成及卵磷脂水解也可被BHT、Vit E及Vit C显著抑制.但不同抗氧化剂的作用方式各有不同.结论 BHT以及Vit E和Vit C能有效抑制体内外HDL的氧化修饰.     

内源性高甘油三酯血症患者血浆VLDL、LDL及HDL对血小板聚集功能的影响

目的　研究内源性高甘油三酯血症 (HTG)患者血浆极低密度脂蛋白 (VL DL )、低密度脂蛋白 (L DL )及高密度脂蛋白 (HDL )对血小板聚集功能的影响。方法　对 2 1例内源性高甘油三酯血症患者与 2 1例正常对照者用一次性密度梯度超速离心法分离血浆 VL DL、L DL及 HDL。测定这三种脂蛋白的 2 34nm吸光度 (A2 34 )、电泳迁移率 (REM)及硫代巴比妥酸反应物质 (TBARS)含量。分别将这三种脂蛋白加入由正常人新鲜血浆构成的反应系统中 ,用血小板聚集仪分别测定 ADP诱导的血小板 5 min最大聚集率。结果　内源性 HTG患者血浆 TG含量平均升高 2 .73倍 ,HDL - C下降 1.71倍 ,同时 L PO升高 1.2 2倍 ;HTG组 VL DL、L DL及 HDL的 REM、A2 34 、TBARS含量均较对照组显著增加 (P<0 .0 1) ,表明内源性 HTG患者血浆 VL DL、L DL及 HDL均发生了氧化修饰生成Ox- VL DL、Ox- L DL及 Ox- HDL。血小板聚集率在分别加入 HTG组患者的 VL DL、L DL及 HDL后均比加入正常组相应脂蛋白明显增加 (P<0 .0 5及 P<0 .0 1)。相关分析表明 ,HTG- L DL及 HTG- HDL A2 34 、REM及 TBARS含量与血小板聚集率呈正相关 (P<0 .0 1)。结论　 HTG患者血浆 VL DL、L DL及 HDL发生了氧化修饰 ,并使血小板聚集增加     

绿原酸抑制低密度脂蛋白非酶糖基化和氧化修饰研究

目的: 研究绿原酸对人体低密度脂蛋白（LDL）非酶糖基化和氧化修饰的抑制作用。方法: 建立LDL非酶糖基化孵育体系,采用紫外-可见分光光度法测定糖基化早期产物（Amodori产物）和中期产物（二羰基化合物）的含量,荧光分光光度计测定糖基化末期产物的含量;建立LDL氧化孵育体系,采用紫外-可见分光光度法测定硫代巴比妥酸反应物（TBARS）和共轭二烯的含量,荧光分光光度法测定色氨酸荧光淬灭强度以及脂褐素、总荧光产物、活性醛和丙二醛的含量,并进一步通过三维荧光等高线特征谱验证。结果: 在LDL糖基化修饰模型中,150 μg/mL和300 μg/mL的绿原酸均能够抑制Amodori产物、二羰基化合物和糖基化末期产物的生成;在LDL氧化修饰模型中,15 μg/mL和25 μg/mL的绿原酸均能够抑制TBARS的生成;5 μg/mL和10 μg/mL的绿原酸对色氨酸荧光淬灭,以及对活性醛、丙二醛、总荧光产物、脂褐素和共轭二烯的生成均有抑制作用。三维荧光等高线特征谱结果与前一致。结论: 绿原酸能够抑制LDL非酶糖基化和氧化修饰。     

The Potential Effect of Puerarin in Preventing Atherosclerosis

Objective:To study the activity of Puerarin (Pue) in scavenging oxygen free radical(OFR) and its inhibitory effect on the oxidative modification of low density lipoprotein (LDL). Methods:Riboflavin-light system was used to generate superoxide anion, and Fenton reaction to generate hydroxylfree radical to study the activity of Pue in scavenging OFR. Hydrogen peroxide-induced hemolysis wasused to study the effect of Pue on erythrocyte hemolysis and malondialdehyde (MDA) production. And ul-traviolet ray and cupric sulfate were used to cause the oxidative modification of LDL for studying the inhib-itory effect of Pue on LDL oxidative modification. Results: (1) Pue could, at concentration of 0.01-1.0mmol/L, scavenge superoxide anion radical and at concentration of 7.5-75μmol/L scavenge hydroxyl rad-ical in a concentration dependent manner. (2) Pue could, at concentration of 0.1-10 mmol/L, inhibit sig-nificantly oxidative hemolysis and MDA production of erythrocyte induced by hydrogen peroxide. (3) Pueof 0.01-1.0 mmol/L could inhibit the oxidative modification of LDL in a concentration dependent man-ner. Conclusion: Pue has an anti-peroxidation effect and shows a potential effect in preventing atherosclero-sis.