TRAF6敲低对低氧状态下IL⁃17调控人牙周膜成纤维细胞表达OPG及RANKL的影响

目的：探讨敲低肿瘤坏死因子受体相关因子6（tumor necrosis factor receptor?associated factor 6,TRAF6）对人牙周膜成纤维细胞（human periodontal ligament cells,hPDLCs）在低氧状态经白介素17（interleukin 17,IL?17）刺激表达骨保护素（osteoprotegerin,OPG）及核因子κB受体活化因子配体（receptor activator for nuclear factor?κB ligand,RANKL）的影响。方法：将hPDLCs细胞设为常氧加IL?17组、低氧加IL?17组以及单纯低氧组,每组内分为阴性对照组（TRAF6?NC组）和干扰组（TRAF6?shRNA组）。将靶向TRAF6基因的shRNA慢病毒载体（TRAF6?shRNA）感染hPDLCs,通过倒置显微镜观察病毒感染效率并用RT?PCR方法验证,用Western blot及RT?PCR方法检测分析hPDLCs低氧诱导因子（hypoxia inducible factor?1,HIF?1）、OPG及RANKL的表达变化。结果：低氧加IL?17组RANKL与OPG蛋白相对表达量的比值RANKL/OPG高于常氧加IL?17组及低氧组。在低氧加IL?17条件下,与TRAF6?NC组相比,TRAF6?shRNA组RANKL表达减少,RANKL与OPG相对表达量的比值RANKL/OPG减少。结论：TRAF6参与低氧状态下IL?17刺激hPDLCs表达骨吸收分子的调控,敲低TRAF6可使低氧状态下IL?17诱导的hPDLCs表达骨吸收分子减少。     

白细胞介素-17对人牙周膜成纤维细胞表达RANKL、OPG的影响

目的 研究白细胞介素17(IL-17)水平对人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)中细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)表达的影响,探讨IL-17与正畸牙根吸收的相关性.方法 采用组织块培养法,在体外建立人牙周膜成纤维细胞系.以不同水平(0、5、10、20、40 ng/mL)的IL-17作用HPDLF 24 h.采用RT-PCR和ELISA法,分别检测RANKL和OPG的mRNA、蛋白的表达.结果 (1)在0 ng/mL组中,HPDLF表达RANKL、OPG.(2)0～20 ng/mL各组中,HPDLF中RANKL的mRNA、蛋白表达量与IL-17水平呈正相关性.(3)5～20 ng/mL各组中,OPG的mRNA、蛋白表达量与IL-17水平呈负相关性.(4)0～20 ng/mL组中,RANKL/OPG的mRNA、蛋白的比值与IL-17水平呈正相关性.结论 在无IL-17刺激时,HPDLF可表达RANKL、OPG.IL-17能够促进HPDLF表达RANKL,同时抑制HPDLF表达OPG,上调RANKL/OPG的比值.     

缺氧对人牙周膜细胞OPG和RANKL 基因表达的影响

目的：研究缺氧对人牙周膜细胞骨保护素（OPG）和核因子κb受体活化因子配体（RANKL）基因表达的影响,揭示缺氧在正畸牙移动压力侧骨吸收中的作用。方法采取酶消化法结合组织块法培养人牙周膜细胞。取3～5代细胞,分别在常氧（O2浓度为20％,对照组）和缺氧（O2浓度为2％）状态下培养3、6、12、24 h ,采用RT‐PCR检测OPG、RANKL mRNA的表达情况。采用SPSS15．0软件包,对RT‐PCR数据进行单因素方差分析。结果在培养3、6 h时,缺氧组和对照组OPG、RANKL mR‐NA的表达水平比较差异无统计学意义（P＞0．05）;在培养12、24 h时,缺氧组OPG mRNA 表达水平低于常氧组,而缺氧组RANKL mRNA的表达水平高于常氧组,缺氧组RANKL／OPG的比值较常氧组升高,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论缺氧可以影响人牙周膜细胞OPG、RANKL mRNA的表达,在正畸牙移动压力侧骨吸收中起促进作用。     

人牙周膜细胞骨保护因子和破骨细胞分化因子蛋白的表达及1α,25(OH)2维生素D3的调节

目的:研究人牙周膜细胞骨保护因子(osteoprotegerin,OPG)和破骨细胞分化因子(receptor activator nuclear factor kappa B ligand,RANKL)蛋白的表达,以及骨吸收促进因子1α,25(OH)2维生素D3对OPG蛋白表达的影响.方法:用系列酶消化法体外培养人牙周膜细胞,用免疫细胞化学检测细胞上表达的RANKL蛋白,以酶联免疫吸附实验检测无外源性刺激以及1α,25(OH)2维生素D3诱导2、4、6 d时细胞分泌到培养基中的OPG蛋白.结果:人牙周膜细胞胞膜和胞浆上表达RANKL蛋白,分泌OPG蛋白到培养基中.1α,25(OH)2维生素D3降低OPG蛋白的分泌.结论:人牙周膜细胞表达OPG和RANKL,1α,25(OH)2维生素D3影响OPG的表达,推测其通过OPG/RANKL通路参与骨改建.这一结论为进一步研究牙周膜细胞参与骨改建的机制打下基础.     

TNF-α对人牙周膜成纤维细胞RANKL/OPG mRNA表达的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对人牙周膜成纤维细胞（HPDLFs）的核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）及其饵受体骨保护素（OPG）mRNA表达的影响，了解TNF-α在破骨细胞性骨吸收调节中的作用机制。方法 将体外培养的人牙周膜成纤维细胞用不同浓度的TNF-α处理24h，通过半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）来观察人牙周膜成纤维细胞OPG、RANKL mRNA表达强度变化。结果 TNF-α上调人牙周膜成纤维细胞的RANKLmRNA表达，RANKL／OPG比率呈上升趋势。结论TNF-α通过调节人牙周膜成纤维细胞的RANKL／OPG的比值可间接地调节破骨细胞分化和活性，从而影响骨代谢。     

ERK信号通路对钛合金诱导成骨细胞RANKL、OPG表达的作用

目的 探讨钛合金颗粒对体外培养的小鼠成骨细胞核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)及骨保护素(OPG)基因表达和蛋白分泌的影响,以及细胞外信号调控激酶1/2(ERK1/2)信号通路在其中的作用.方法 体外培养成骨细胞.实验分3组:对照组(A组);钛合金组(B组):给予浓度为0.1 g/L钛合金颗粒干预;抑制剂组(C组):给予钛合金颗粒+ERK信号通路抑制剂PD98059,每组6个样本.采用RT-PCR和ELISA法分别检测成骨细胞RANKL、OPG基因和蛋白表达.结果 3组各个时间点均可见RANKL、OPG的表达;但B组RANKL、OPG mRNA的表达和蛋白分泌量以及RANKL/OPG比值显著高于A组(P<0.01);而C组RANKL、OPG mRNA的表达和蛋白分泌水平以及RANKL/OPG比值的增幅显著小于B组(P<0.01).结论 钛合金颗粒可刺激成骨细胞RANKL mRNA、OPG mRNA的表达并促进RANKL、OPG蛋白的分泌,增加RANKL/OPG比值;ERK信号通路抑制剂PD98059可一定程度抑制RANKL和OPG的表达,降低RANKL/OPG比值,对减少假体周围骨溶解的发生可能起重要作用.     

雷公藤红素对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中RANKL､OPG及炎性因子表达的影响

目的:观察雷公藤红素(Celastrol,Cel)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞系MH7A细胞中核因子κB受体活化因子配体(RANKL)?骨保护素(OPG)?白细胞介素-6(IL-6)?肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素-8(IL-8)表达的影响?方法:以白细胞介素-1β(IL-1β)刺激MH7A,不同浓度的Cel(0.1?0.5?1.0?2.0 μmol/L)干预细胞24 h后,采用real-time PCR和免疫荧光的方法检测RANKL?OPG?IL-6?TNF-α及IL-8的表达?结果:IL-1β刺激MH7A细胞系24 h后,RANKL?OPG?IL-6?TNF-α及IL-8 mRNA及RANKL免疫荧光明显增强,Cel呈剂量依赖性抑制MH7A中IL-1β诱导的RANKL?OPG?IL-6?TNF-α及IL-8 mRNA水平(P < 0.05)和MH7A中RANKL免疫荧光表达,显著上调OPG/RANKL轴比值?结论:Cel能调节滑膜成纤维细胞中OPG/RANKL轴和抑制促炎因子?趋化因子的表达,可能在阻止类风湿关节炎“炎症”和“骨侵蚀”中发挥重要作用?     

慢性间歇低氧对小鼠骨密度和骨代谢的影响

目的：探讨慢性间歇低氧（CIH）对骨密度（BMD）和骨代谢的影响。方法将16只12周龄C57BL/6雄性小鼠按随机数字表法分为慢性间歇低氧组（CIH组）和正常对照组（CON组）,每组8只。CON组小鼠在正常环境下饲养,CIH组小鼠在间歇低氧环境下饲养,低氧暴露时间为每日9：00-17：00,6d/周,共8周。于8周末取血,用ELISA法测定血清抗酒石酸酸性磷酸5b （TRACP-5b）、骨钙素（OC）、白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;取右侧股骨检测其BMD;取左侧股骨观察骨组织形态学改变,并分别采用免疫组化和real- time qPCR法检测骨保护蛋白（OPG）和核因子-κβ受体活化因子配体（RANKL）和其mRNA表达。结果与CON组相比,CIH组小鼠BMD、血清OC水平及OPG/RANKL mRNA比值均明显下降（P＜0.05或0.01）,而血清TRACP-5b、IL-6和TNF-α水平、骨组织内RANKL和mRNA表达均明显升高（P＜0.05或0.01）;但骨组织内OPG和mR-NA表达差异均无统计学意义（均P＞0.05）;小鼠股骨干骺端骨小梁分布稀疏,变细及断裂。血清IL-6水平与BMD呈负相关（P＜0.05）,与骨组织RANKL mRNA呈正相关（P＜0.01）;血清TNF-α水平与BMD呈负相关（P＜0.01）,与骨组织RANKL mRNA呈正相关（P＜0.05）。结论 CIH能导致骨吸收增加、骨形成下降和BMD下降,与低氧以及CIH引起的IL-6、TNF-α水平升高导致RANKL升高有关。     

Effects of Sinomenine on OPG/RANKL and IL-17 in Serum of Collagen-induced Arthritis Rats

目的 探讨青藤碱(SIN)对胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠血清骨破坏因子血清骨保护素(OPG)、核周因子κB受体活化因子的配体(RANKL)、白细胞介素17(IL-17)的作用,了解其治疗的骨保护作用.方法 建立CIA大鼠模型,以炎症指标、X线片证实造模成功;分为对照组、模型组、SIN组、MTX组,用ELISA法分析CIA大鼠血清OPG、RANKL、炎性细胞因子IL-17的水平.结果 与正常组比较,模型组大鼠外周血RANKL、IL-17水平明显升高(P＜0.05),OPG水平明显降低(P＜0.05),OPG/RANKL比值下降.与模型组比较,SIN组外周血OPG水平及OPG/RANKL比值明显升高(P＜0.05);与MTX组比较,SIN组OPG、OPG/RANKL比值无明显差异(P＞0.05).结论 在成功建立的CIA大鼠模型中,青藤碱能够提高外周血OPG/RANKL比值,提示青藤碱对类风湿性关节炎有骨保护作用.     

视网膜疾病误诊球后视神经炎临床特征分析

视神经炎是导致视觉损害的一种常见重要眼病。其中典型性视神经炎与多发性硬化相关联,在急性期大剂量激素冲击有助于加快视力的恢复,并能降低多发性硬化发生的风险。非典型性视神经炎常与中枢神经系统非多发性硬化炎症性疾病有关,该类病人需依靠及时的免疫抑制疗法以促进视力的改善。然而,全身应用大剂量激素或免疫抑制剂,即使在短时间内应用,具有较大毒副作用;此外,视神经炎治疗中有时使用的免疫调节剂如干扰素和免疫球蛋白价格也十分昂贵,因此在治疗前明确球后视神经炎诊断是尤为重要的。由于球后视神经炎患者在发病初期眼底表现正常,临床医生时常将眼底表现正常或有微小改变的视网膜或黄斑疾病误诊为球后视神经炎。在我们临床实践中回顾分析曾被误诊为球后视神经炎的视网膜或黄斑疾病的临床特征及误诊原因,结果发现误诊为视神经疾病的视网膜或黄斑疾病主要病变有急性区域性隐匿性外层视网膜病变、隐匿性黄斑营养不良、视锥和视锥-视杆细胞营养不良、急性黄斑区神经视网膜病变和癌症相关性视网膜病变等,这些疾病与球后视神经炎存在一些相似的临床特征,也是造成误诊的主要原因：单眼或双眼急性或进行性视功能损伤,眼底表现正常或改变轻微,视野和视觉诱发电位异常等。这些视网膜或黄斑疾病往往不需激素或免疫调节剂治疗,当用激素或免疫抑制剂治疗时仅给患者带来全身毒副作用,而无治疗效果。这些疾病的诊断和鉴别主要通过视网膜形态及功能学检查方法进行判断。因此,临床诊疗中,明确球后视神经炎诊断前,进行相关的视网膜形态与功能检查是非常重要的。     

卫生事业管理专业课程体系改革需求的调查研究

【】 本文对三所院校的研究生进行问卷调查,采用SPSS21.0对相关资料进行分析,研究目的：了解当前卫生事业管理专业的生源状况以及培养目标、培养能力与研究课程体系改革的需求,为卫生事业管理专业课程体系改革提供依据。     

Oncol2012: 乳腺癌临床病理分型与个体化治疗

目的 探讨乳腺癌临床病理分型在浸润性乳腺癌个体化治疗中的价值。方法 对2010年1月至12月北京大学第一医院乳腺疾病中心收治的浸润性乳腺癌病人进行回顾性分析。依据2011年St.Gallen乳腺癌分型标准,复检其雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER-2)及Ki-67表达水平,将乳腺癌分为Luminal A、Luminal B、HER-2阳性和三阴型四个亚型,并分析各亚型与TNM分期、病理组织分级的关系。结果 共213例浸润性乳腺癌病人入组,其中Luminal A型53例(24.9％),Luminal B型112例(52.6％),HER-2阳性型22例(10.3％),三阴型26例(12.2％)。Luminal A型病人中病理组织学分级I级39例,占同型病人73.6% (39/53),III级病人0例;Luminal B型病人中I级24例,占同型病人21.4%（24/112）,III级25例,占同型病人22.3%（25/112）;三阴型病人中I级2例,占同型病人7.7%（2/26）,III级17例,占同型病人65.4%（17/26）;HER-2阳性型病人I级仅1例,占同型病人4.5%（1/22）,III级11例,占同型病人50.0%（11/22）。各亚型间病理组织分级存在差异（P﹤0.001）。分析各亚型TNM分期发现,Luminal A型病人I期比例最高,占同型病人54.7%（29/53）。HER-2阳性型III期病例比例最高,占同型病例27.3%（6/22）。不同亚型TNM分期分布具有差异性（P﹤0.001）。结论 不同亚型乳腺癌其病理组织分级及TNM分期具有差异性, 在TNM分期及病理组织分级基础上联合临床病理分型分析是个体化治疗的重要内容。     

体质辨识在慢性阻塞性肺疾病稳定期合并抑郁症中的应用

正慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)所造成的患者心理精神疾病越来越受到关注~([1])。研究~([2-3])显示,COPD患者中抑郁焦虑的患病率高达50%,是普通人群患病率的3~5倍以上,对COPD合并抑郁患者的诊疗显得尤为重要。近年来,以王琦教授为代表的学者在前人的基础上提出中医体质学说~([4]),该学说以中医理论为指导,研究人类各种体质类型的生理病理特点,并以此分析疾病     

乌药醇提物对酒精联合高脂饮食诱导的脂肪肝防治作用研究

目的 观察乌药醇提取物(LREE)对酒精性脂肪肝模型小鼠的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法 32只雄性ICR小鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、易善复组(0.2736 g/kg)和乌药组(1 g/kg),每组8只。采用饮食高脂饲料复合梯度浓度白酒连续灌胃8周复制酒精性脂肪肝模型小鼠,造模的同时给予易善复、LREE进行干预;于第2、4、6、8周采血,全自动生化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平;实验期末,解剖,取肝脏,油红O染色检测肝组织脂肪病变程度,RT-PCR检测肝组织低密度脂蛋白受体(LDLR)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-α)、胰岛素诱导基因1(Insig1)、固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)、固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)mRNA表达水平。结果 LREE和易善复能抑制高脂饮食+酒精诱导的小鼠体质量增加[(38.6±2.9)g、(39.4±2.3)g比(42.3±1.9)g,P<0.05],实验期末,乌药组及易善复组小鼠血清ALT、AST活性显著降低...     

宁波地区幽门螺杆菌耐药谱分析及敏感抗生素的筛选

正幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)是慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃癌及胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤的主要致病因素,而且与多种心血管疾病、缺铁性贫血、原发性血小板减少性紫癜等疾病有关。HP胃炎京都共识提出除非有抗衡因素(如伴存疾病的限制、社区高再感染率、医疗资源优先度安排等),否则所有HP感染者都应该接受根除治疗[1]。我国成年人HP感染率达到40~60%。本研究在胃镜     

以心跳骤停为首发症状的蛛网膜下腔出血共同特征研究

<正>心跳骤停（cardiac arrest,CA）和蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）均是急诊科常见的急危重症,CA可见于多种疾病的各个阶段,复苏成功率不高,甚至造成CA的病因不甚明确。SAH典型表现为剧烈头痛、呕吐、脑膜刺激征,诊断并不困难。而以CA为首发症状的SAH,由于心肺复苏无法常规进行头颅CT检查,给诊断增加了困难。本文通过对16例以CA为首发症状的SAH患者进行回顾性研究,来提高SAH-CA的快速病因诊断,避免漏诊误诊。     

肝癌液体活检的研究进展(综述)

原发性肝癌(PLC)是一种发病率高,死亡率高,手术切除率低,术后易复发转移的恶性肿瘤。液体活检是将人体体液或者血液中的某些微小的成分通过特殊的方法富集,再进行浓缩,扩增和荧光染色等处理后,用专门的设备进行检测,从而了解体液中具有的肿瘤或基因特征的信息,实现了对人体内的肿瘤相关状态从新的角度进行监测的方法。液体活检研究提供了可能早期发现肝癌,评估术后疗效和预后的新途径。液体活检技术主要包括循环肿瘤细胞(CTCs)、循环游离核酸(CFNA)和外泌体(exosomes)检测,它们在检测技术和临床应用方面各有特色,新近的PCR+分子测序技术将有助于此项研究。作者对肝癌液体活检的几种类型和特点进行综述并展望了未来的发展方向。     

单纯后路360度椎管减压并重建治疗伴神经缺损的胸腰段脊柱旋转不稳爆裂骨折

Summary of Background Data Various treatment of neurologically involved unstable thoracolumbar burst fractures have been described, including anterior, posterior and combined anteroposterior surgery. Among these, the combination of anterior and posterior instrumentation provides the most stable reconstruction. However, the use of both approaches on a trauma patient may increase the morbidity. Methods　From March 2005 to January 2007, 6 patients (5 males, 1 females) with thoracolumbar burst fracture in our institution underwent a single stage posterior approach for spinal canal decompression in combination with circumferential reconstruction. The operation technique includes resection of the posterior elements, partial resection of the injured vertebra and disc, reconstruction of the anterior column with Titanium mesh cage, posterior instrumentation with pedicle screws, and posterior spinal fusion. Preoperative and postoperative X-ray films were reviewed and changes of Cobb angle of thoracolumbar spine were documented. Intraoperative, postoperative and general complications were registered. Results　The involved levels were L2 in 1 patient, L1 in 4 patients and T12 in 1 patient. According to the Frankel grading system, 1 patient had complete, 5 patients had incomplete neurologic deficits. The mean follow-up was 21.7±9.1 months (range, 14 to 48 months). The mean operation time was 248 minutes (range, 208-316 minutes), the average volume of intraoperative blood loss was 2453 ml (range, 1800-3480 ml), the average vertebral body height loss at the injured level was 56% (range, 48–70%), and the average Cobb angle in sagittal plane was improved from 39.8° before surgery (range, 34~46°) to 4.8° (range, -2 ~12°) immediately after surgery. Postoperatively, there was an epidural hematoma in one patient. Bony union after stabilization was obtained in all patients, without loosening or breakage of screws. Loss of correction (5°) was seen in 1 patient at the 6th month owing to the subsidence of the Titanium mesh cages into the vertebra. All patients with incomplete neurologic deficits improved at least 1 Frankel grade. Conclusion Single stage posterior vertebra resection in combination with circumferential reconstruction is a new option to manage severe thoracolumbar burst fracture.     

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征对男性患者血清中脂联素和高、低密度脂蛋白水平影响的研究

目的：探讨103例男性阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患者脂联素水平和高密度脂蛋白、低密度脂蛋白的变化情况。