转录因子T-bet与哮喘大鼠气道炎症及川芎嗪的干预效应

目的:转录因子T-bet在支气管哮喘的发病中起重要作用,川芎嗪治疗哮喘有效。实验拟观察川芎嗪对哮喘大鼠气道炎症的影响和转录因子T-bet的调控作用。方法:实验于2005-11/2006-06在南京医科大学完成。①实验材料及分组:72只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、川芎嗪小剂量组(20mg/kg)、川芎嗪中剂量组(40mg/kg)、川芎嗪大剂量组(80mg/kg)和地塞米松组,每组12只。实验用磷酸川芎嗪注射液为丽珠集团利民制药厂生产)。②实验过程及评估:以卵蛋白腹腔注射并雾化吸入制备大鼠哮喘模型,末次雾化后24h内麻醉后处死大鼠。观察6组大鼠肺组织形态学变化;测定支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度、嗜酸粒细胞和淋巴细胞数。采用免疫组织化学半定量法测定肺组织T-bet蛋白的表达;进行转录因子T-bet蛋白表达量与气道炎症的相关性分析。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。结果:①哮喘模型组嗜酸粒细胞、淋巴细胞、支气管壁厚度和支气管平滑肌厚度,明显高于正常对照组相应指标(P均<0.01);与哮喘模型组比较,川芎嗪小、中、大剂量组和地塞米松组上述4项指标均减少(P均<0.01)。②哮喘模型组、川芎嗪小、中、大剂量组和地塞米松组的T-bet表达量低于正常对照组(P均<0.01);与哮喘模型组比较,川芎嗪小、中、大剂量组T-bet表达量增加(P均<0.01);随着川芎嗪剂量增加,T-bet表达量亦相应增加,川芎嗪小、中、大剂量组之间两两比较,差异均有统计学意义(P均<0.01)。③相关分析显示哮喘模型组T-bet蛋白表达量与嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润数呈负相关(r=-0.81,-0.85,P<0.01),与支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度呈负相关(r=-0.77,-0.79,P<0.01)。结论:支气管哮喘大鼠存在T-bet低表达;川芎嗪可抑制气道炎症,增加转录因子T-bet蛋白的表达,纠正Th1/Th2失衡,从而治疗支气管哮喘。     

支气管哮喘大鼠转录因子T-bet/GATA-3失衡表达与气道炎症的关系

目的探讨支气管哮喘(简称哮喘)转录因子T-bet/GATA-3表达量比值的变化及其与气道炎症的关系。方法24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、哮喘组,每组12只。用动物肺功能仪测定大鼠气道反应性;用苏木精-伊红染色观察气道病理改变;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素4(IL-4)、IL-5、γ干扰素(IFN-γ)含量;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定法检测肺组织中IL-4、IL-5、IFNγ-、T-bet和GATA-3 mRNA的表达水平;用免疫印迹(W estern b lot)法检测肺组织T-bet和GATA-3蛋白的表达水平。结果用同等剂量氯化乙酰胆碱(20、40、80、160μg/m l)激发时平均呼气阻力哮喘组分别为(6.26±0.85)、(11.55±3.09)、(28.74±5.94)、(3 710.83±197.49)cm H2O.m l-1.s-1,对照组分别为(1.51±0.18)、(2.15±0.36)、(6.08±1.06)、(37.17±6.12)cm H2O.m l-1.s-1,两组不同激素剂量比较差异有统计学意义(P均<0.01);肺组织中嗜酸粒细胞(EOS)、淋巴细胞数,管壁面积/支气管管腔内周长(WA/P i)和支气管平滑肌面积/支气管管腔内周长(ASM/P i)哮喘组分别为(26.0±1.6)个/mm2、(45.2±3.2)个/mm2、12.0±1.4、6.7±0.6,对照组分别为(2.9±1.2)个/mm2、(8.8±1.8)个/mm2、6.4±0.8、2.7±0.5,两组比较差异有统计学意义(P均<0.01);BALF中IL-4、IL-5和IFN-γ含量哮喘组为(23.4±0.7)pg/m l、(24.8±0.5)pg/m l和(21.7±1.1)pg/m l,对照组为(9.3±0.3)pg/m l、(12.5±0.3)pg/m l、(65.8±2.1)pg/m l,两组比较差异有统计学意义(P均<0.01);肺组织中IL-4、IL-5和IFN-γmRNA表达水平哮喘组分别为2.260±0.210、0.510±0.100、0.100±0.020,对照组分别为0.060±0.020、0.160±0.020、0.850±0.260,两组比较差异有统计学意义(P均<0.01)。肺组织中T-bet/GATA-3 mRNA表达量比值对照组为0.73±0.32,哮喘组为0.06±0.09,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);肺组织中T-bet/GATA-3蛋白表达量比值哮喘组为0.09±0.04,对照组为0.75±0.25,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。两组大鼠T-bet/GATA-3蛋白表达量比值与20、40、80μg/m l氯化乙酰胆碱激发时的呼气阻力呈负相关(r分别=-0.959、-0.919、-0.943,P均<0.01);与EOS数、淋巴细胞数呈负相关(r=-0.832、-0.831,P均<0.01);与WA/P i、ASM/P i呈负相关(r=-0.837、-0.863,P均<0.01);与BALF中IL-4和IL-5含量呈负相关(r=-0.921、-0.920,P均<0.01);与IFN-γ含量呈正相关(r=0.934,P<0.01);与肺组织中IL-4、IL-5mRNA表达水平呈负相关(r=-0.964、-0.931,P均<0.01);与IFN-γmRNA表达呈正相关(r=0.983,P<0.01)。结论转录因子T-bet/GATA-3失衡表达与气道炎症密切相关,能客观反应哮喘免疫失衡,很可能是哮喘气道炎症形成的重要原因之一。     

转录因子T-bet/GATA-3表达失衡在支气管哮喘发病机制中的研究进展

支气管哮喘是一种常见病、多发病,近20年来,在世界各地其发病率呈逐年上升趋势.现已明确,支气管哮喘是一种免疫缺陷导致的变态反应性疾病,表现为Th1和Th2细胞亚群失衡,即Th2型优势应答,这是支气管哮喘病理过程形成的始动因素和维持因素.鉴于Th1、Th2是由共同的前体细胞（Th0）分化而来,而转录因子T-bet和GATA-3是特异性调控Th0分化、起着Th1/Th2转换开关作用的关键因子,本文就转录因子T-bet和GATA-3生物学特征、相互调节以及在支气管哮喘发病中的作用作一综述.     

选择性磷酸二酯酶抑制剂罗氟司特在慢性阻塞性肺疾病抗炎作用的研究进展

磷酸二酯酶4(Phosphodiesterase 4,PDE4)、特异性水解环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP),广泛存在于多种炎症细胞及结构细胞中.选择性抑制PDE4使细胞内cAMP浓度增加,呈现抗炎作用.第二代PDE4抑制剂罗氟司特(roflumilast)具有抑制中性粒细胞、T细胞、巨噬细胞等多种炎症细胞及TNF-α、LTB4、活性氧、IFN-γ等多种炎症介质的抗炎作用,成为第一个应用于慢性阻塞性肺疾病临床治疗的PDE4抑制剂.罗氟司特的抗炎效果可能与炎症类型、药物剂量、免疫形式等影响因素有关.     

动态脉氧饱和度相关指标在OSAHS患者压力滴定治疗中的应用价值

目的:探讨在成人阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(obstructive sleep apnea syndrome,OSAHS)患者压力滴定治疗过程中,动态脉氧饱和度相关指标的临床应用价值?方法:选择2013年6月—2015年6月在本院睡眠监测室进行压力滴定的患者124例(男111例,女13例)?所有患者均于PSG监测下进行整夜压力滴定同时进行动态脉氧饱和度监测,对其临床资料进行回顾性分析,分别统计在整夜压力滴定下最低脉氧饱和度(LSaO2)?氧减饱和度指数(ODI4)?脉氧饱和度<90%占整个记录时间的百分比(TIS90%)?自动调压呼吸机(auto-CPAP)自带的压力滴定软件报告的残存睡眠呼吸紊乱指数(T-AHI)与整夜压力滴定后经多导睡眠仪(PSG)监测报告的残存睡眠呼吸紊乱指数(P-AHI)的相关性,寻找能较好反映压力滴定效果的简洁的评价指标 ?结果:ODI4与P-AHI相关性最好(R2 = 0.640,P < 0.001);SIT90%与P-AHI显著正相关(R2 = 0.522,P < 0.001);P-AHI指标与T-AHI呈线性正相关;而P-AHI与LSaO2%无相关性(P=0.98)?结论:在压力滴定治疗过程中,动态脉氧饱和度指标SIT90%?ODI4以及auto-CPAP报告的残存AHI与 PSG监测下报告的残存睡眠呼吸紊乱指数(AHI)具有良好相关性,可作为较好的评估压力滴定治疗的有效性指标,运用夜间动态脉氧饱和度监测技术配合auto-CPAP呼吸机进行压力滴定治疗,方法简便?灵活性强?医疗成本低,尤其适合基层医院开展压力滴定治疗,具有较高的临床推广应用价值?     

肺癌日记——生命质量评估的一种新方法

本文综述了生命质量在肺癌治疗中的重要性，提出肺癌患者生命质量评估的一种新方法－肺癌日记，介绍肺癌日记在肺癌临床治疗中的作用。     

大容量全肺灌洗治疗肺泡蛋白沉积症的疗效分析

目的探讨大容量全肺灌洗治疗肺泡蛋白沉积症的临床疗效。方法回顾性分析大容量全肺灌洗治疗13例次肺泡蛋白沉积症的临床资料。结果经大容量肺泡灌洗后,患者血氧饱和度（SpO2）和动脉血氧分压（PaO2）较灌洗前明显升高（P〈0．05）;且患者在灌洗后呼吸困难改善明显,病灶CT和X线检查吸收较明显。无严重并发症发生。结论大容量全肺灌洗治疗肺泡蛋白沉积症,可提高PaO2,缓解临床症状。     

激素依赖型哮喘患者临床和糖皮质激素受体特征

目的 探讨激素依赖（SD）型哮喘临床特征和单个核细胞（PBMC）糖皮质激素受体（GR）的水平。方法 26例激素依赖型哮喘,口服泼尼松20mg/d,7天,依据肺功能的变化,分为激素敏感（SS）型哮喘11例和激素抵抗（SR）型哮喘15例,比较两型临床、肺功能和PBMC的GR水平。结果 SS型和SR型哮喘在病史、肺功能和血嗜酸粒细胞方面差异无显性,SR型哮喘患PBMC的GR水平明显低于SS型哮喘患（P＜0．002）。结论 激素依赖型哮喘包括SS型和SR型哮喘,SR型哮喘GR水平异常低下是其特征。     

咪喹莫特治疗哮喘作用机制的实验研究

目的：观察咪喹莫特对小鼠哮喘模型气道炎症和肺组织n2型胸腺和活化调节趋化因子（thymus and activation regulated chemokine，TARC）和其受体CCR4表达的影响。方法：建立哮喘模型．自第14天雾化吸入OVA前0．5h．干预组分别雾化吸入咪喹莫特30min及腹腔注射地塞米松。OVA雾化结束后24h，每组小鼠眼球摘除采血收集血清，采用酶联免疫吸附法测定血清中TARC水平；收集肺泡灌洗液进行细胞计数和分类；HE染色观察肺组织炎症改变；用免疫组化方法检测肺组织CCR4和TARC的表达；用逆转录．聚合酶链反应半定量检测肺组织IL-4、IFN-γ、CCR4和TARC mRNA表达水平。结果：①哮喘小鼠HE染色可见气道上皮不完整，黏膜下有大量的炎细胞浸润，以淋巴细胞为主。地塞米松组和咪喹莫特组炎症程度减轻。②哮喘组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及各种炎症细胞较正常组显著增加。眯喹莫特治疗组的嗜酸性粒细胞、单核细胞租淋巴细胞比哮喘组明显减少。③哮喘组小鼠血清TARC水平较正常组升高，咪喹莫特治疗组小鼠血TARC水平较哮喘组降低，与正常组比较差异无显著性。④CR4和TARC均在气道上皮细胞表达．咪喹莫特和地塞米松治疗组能减少CCR4和TARC的表达。⑤哮喘组小鼠肺组织IL-4、CCR4和TARC mRNA表达较正常组增强。咪喹莫特和地塞米松治疗组小鼠肺组织IL-4、CCR4和TARCmRNA表达较哮喘组降低，比正常组表达增加。结论：雾化吸入咪喹莫特可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道炎症。抑制肺组织CCR4和TARC蛋白和mRNA的过度表达。     

川芎嗪对哮喘小鼠干细胞因子的抑制作用

目的:探讨川芎嗪对哮喘小鼠血清干细胞因子(stem cell factor,SCF)表达的影响,及抑制气道炎症的作用.方法:24只雄性BALB/c小鼠按随机数字表法分成正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、小剂量川芎嗪组(C组,40 mg/kg)、大剂量川芎嗪组(D组,80 mg/kg),每组6只.用苏木精-伊红染色观察气道病理改变;用ELISA法检测小鼠血清中SCF含量.结果:小鼠血清中SCF含量哮喘组(114.9±27.3)pmol/L明显高于正常对照组(48.6±11.2)pmol/L(P＜0.01);小剂量川芎嗪组(70.6±7.9)pmol/L与大剂量川芎嗪组(51.4±8.1)pmol/L均明显低于哮喘组(P均＜0.01);肺组织中嗜酸性粒细胞(EOS)和淋巴细胞总数,管壁面积/支气管管腔内周长(WA/Pi)和支气管平滑肌面积/支气管管腔内周长(ASM/Pi)哮喘组分别为(32.6±4.5)个/mm2、(1.196±0.111)mm、(0.292±0.027)mm,正常对照组分别为(6.6±1.2)个/mm2、(0.571±0.057)mm、(0.139±0.014)mm,两组比较差异有统计学意义(P均＜0.01);小剂量川芎嗪组分别为(26.0±2.5)个/mm2、(0.949±0.105)mm、(0.243±0.027)mm,与哮喘组比较差异有统计学意义(P均＜0.05);大剂量川芎嗪组分别为(12.1±1.6)个/mm2、(0.875±0.111)mm、(0.178±0.023)mm,与哮喘组比较差异有统计学意义(P均＜0.05).结论:川芎嗪可能通过抑制血清SCF表达抑制哮喘小鼠气道炎症.