新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的 探讨新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）增殖和凋亡的影响。方法 用不同浓度的新藤黄酸培养细胞24、48 h后,采用MTT法观察新藤黄酸对细胞生长的抑制作用;倒置显微镜下观察HUVECs细胞形态变化;通过DAPI染色后倒置荧光显微镜观察新藤黄酸对细胞形态学的影响;通过Annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术检测新藤黄酸对HUVECs细胞凋亡率的影响;Western blot检测新藤黄酸对HUVECs中凋亡相关蛋白Caspase-3的表达变化。结果 MTT检测结果显示新藤黄酸能够明显抑制HUVECs的增殖,并呈时效及量效关系;荧光显微镜观察结果显示,新藤黄酸作用HUVECs后出现大量凋亡细胞;流式细胞术结果显示,与空白对照组相比,随着新藤黄酸浓度的增加,细胞凋亡率明显增加;Western blot检测结果表明Caspase-3蛋白表达水平显著增加。结论 新藤黄酸对HUVECs有明显的抑制作用,其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡实现的。     

新藤黄酸对人表皮癌细胞A431增殖和凋亡的影响

目的 观察新藤黄酸（gambogenic acid,GNA）对人表皮癌细胞A431增殖和凋亡的影响.方法 以体外培养的人表皮癌A431细胞株为研究对象,采用甲基噻唑基四唑检测GNA对A431细胞增殖活性的影响;倒置显微镜下观察GNA对A431细胞株细胞形态的影响;荧光显微镜下观察GNA对Hoechst 33342染色的A431细胞凋亡的影响;采用流式细胞仪检测膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素/碘化丙碇双染的A431细胞的凋亡率.结果 随着GNA剂量的增大,GNA对A431细胞增殖活性的抑制作用增强.倒置显微镜和荧光显微镜下观察显示,GNA作用的A431细胞形态发生明显的变化并出现显著的凋亡特征.流式细胞仪检测显示A431细胞凋亡率随着GNA作用剂量的增大而升高.结论 0.75～12.0 μmol/L GNA能够剂量依赖性地抑制A431的增殖.     

冬凌草甲素诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡及对G2/M细胞周期的阻滞作用

目的 探讨冬凌草甲素对胰腺癌PANC-1细胞生长抑制以及促进凋亡的机制.方法 采用MTT还原法检测冬凌草甲素对PANC-1细胞生长的抑制作用;碘化丙啶(PI)染色和Hoechst 33342染色法观察细胞形态学的变化;PI染色流式细胞术检测细胞周期分布;膜联蛋白V(Annexin V)/pI双标流式细胞术测定凋亡细胞比...     

Mithramycin A对肝癌细胞Huh-7增殖的影响

目的研究抗肿瘤抗生素光辉霉素（Mithramycin A,MIT）对人肝癌细胞Huh-7的作用。方法CCK-8比色法观察MIT对Huh-7细胞的生长抑制作用,Hoechst 33342/PI双荧光染色分析细胞凋亡,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率。结果MIT可抑制Huh-7细胞的生长,半数抑制浓度（IC50）为60.12 nmol.L^-1。荧光显微镜观察可见细胞凋亡特征性改变;浓度为5×10^-2μmol.L^-1的MIT作用72 h后,可明显诱导Huh-7细胞凋亡,流式细胞仪检测肿瘤细胞出现典型亚二倍体凋亡小峰。结论MIT对Huh-7细胞有明显的诱导凋亡和生长抑制作用,具有浓度、时间依赖性。     

藤黄酸下调Bcr-Abl蛋白对慢粒细胞株K562增殖和凋亡的影响

目的 研究藤黄酸对人慢性粒细胞性白血病细胞株K562抑制增殖及诱导凋亡的作用,并探讨其可能作用机制。 方法 用藤黄酸处理K562细胞,采用MTS法和台盼兰计数法测定细胞活力及增殖;碘化丙啶(PI)单染荧光显微镜观察细胞形态改变;采用AnnexinV-FTIC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;利用Western blotting检测凋亡相关蛋白及细胞增殖信号通路的变化情况。 结果 藤黄酸对K562细胞的增殖抑制作用呈时间和浓度依赖性(P<0.05)。藤黄酸处理后的细胞,经PI染色,荧光显微镜下观察可见死亡细胞形态发生改变,细胞核红染。流式细胞术检测显示加药处理组细胞以凋亡方式为主,凋亡率比对照组明显升高(P<0.05)。Western blotting检测发现凋亡相关蛋白激活,Bcr-Abl及下游的信号通路受到不同程度的抑制(P<0.05)。结论 藤黄酸对K562细胞具有凋亡诱导和增殖抑制作用,作用机制与caspase系统激活和Bcr-Abl增殖相关通路受抑有关。     

蛇床子素对人肺鳞癌NCI-H520细胞系增殖、凋亡的影响

目的 探讨天然化合物蛇床子素对肺鳞癌NCI-H520细胞增殖及凋亡的影响.方法 采用MTT比色法检测蛇床子素对NCI-H520细胞增殖的影响;流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测诱导细胞凋亡;Hoechst 33342核染色观察细胞核的形态变化.结果 蛇床子素对NCI-H520有明显的增殖抑制作用,且呈现明显时间剂量依赖性;流式细胞仪AnnexinV/PI双染法结果显示蛇床子素可以诱导细胞凋亡,且凋亡率呈剂量依赖性;药物处理组细胞核经Hoechst 33342染色可见染色质边集、核碎裂等典型的细胞凋亡改变,而空白对照组没有相应的变化.结论 蛇床子素可以抑制NCI-H520细胞的增殖、诱导细胞凋亡.     

TRAIL与GX15-070联用诱导卵巢癌细胞凋亡的研究

[目的：探讨联合应用肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）和GX15-070诱导卵巢癌细胞系A2780细胞凋亡的作用及其机制。方法：以联用或未联用GX15-070的TRAIL作用于卵巢癌A2780细胞,采用MTT法检测细胞存活率,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,JC-1染色流式细胞术检测细胞线粒体膜电位（?ψm）,比色测定试剂盒检测caspase-9、caspase-8和caspase-3活性。结果：TRAIL能在一定程度上降低卵巢癌A2780细胞的存活率、诱导癌细胞凋亡、降低?ψm、提高caspase-9、caspase-8和caspase-3活性,而GX15-070能显著增加TRAIL降低卵巢癌A2780细胞的存活率、诱导癌细胞凋亡、降低?ψm、提高caspase-9和caspase-3活性的效应。结论：GX15-070通过凋亡信号通路的内源性途径,促进卵巢癌A2780细胞对TRAIL诱导凋亡效应的敏感性。     

灰树花多糖治疗卵巢癌体外实验观察

目的体外实验探讨灰树花多糖治疗卵巢癌的作用。方法以不同浓度灰树花多糖(终浓度为100、250和500μg/ml)处理人SKOV3细胞,台盼蓝染色和MTT检测对细胞增殖的抑制作用,Annexin V/PI双标记流式细胞术检测与荧光显微镜观察检测细胞凋亡。另设阴性对照组,仅用培养液;10μg/ml顺铂(DDP)作为阳性对照。结果台盼蓝排染和MTT检测证实,灰树花多糖明显抑制SKOV3细胞增殖;Annexin V/PI双染流式细胞术检测显示,灰树花多糖100、250、500μg/ml作用细胞24、48、72 h均能诱导细胞凋亡,凋亡率与时间、剂量存在依赖关系;Annexin V/PI双染荧光显微镜观察检查细胞凋亡率显示了与流式细胞术检测类似结果。结论灰树花多糖显著抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

新藤黄酸对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的研究

目的 观察不同浓度新藤黄酸（gambogenic acid,GNA）对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。方法 倒置光学显微镜下观察不同浓度GNA处理SGC-7901细胞24 h后细胞形态的变化;采用MTT法检测不同浓度（0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0 μmol/L）GNA处理24 h后人胃癌SGC-7901细胞活力的变化;Annexin Ⅴ-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白p53和Caspase-9的表达水平。结果 MTT检测结果表明,GNA对人胃癌SGC-7901细胞的生长和增殖有抑制作用,并随着GNA浓度的增加细胞活力明显下降。流式细胞仪检测结果提示,GNA诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡,随着GNA浓度增加,凋亡率逐渐增加。Western blot表明p53和Caspase-9蛋白表达水平呈浓度依赖性升高。结论 GNA能诱导人胃癌SGC-7901细胞的凋亡。     

针对病毒性心肌炎的细胞凋亡研究

目的 探讨柯萨奇病毒致细胞死亡时是否存在凋亡，以及凋亡百分率。方法 柯萨奇病毒感染心肌细胞和HeLa细胞以后，应用TUNEL原位标记、DNALadder、Hoechst3325B染色和Annexin—V／PI染色观察细胞凋亡发生情况；并通过流式细胞仪分析细胞凋亡发生率。结果 Hoechst33258染色发现病毒感染后的细胞核出现强亮度的蓝色荧光，可观察到凋亡细胞的典型变化；Armexin—V／PI染色可见HeLa细胞膜显强绿色荧光。细胞核显强红色荧光；感染组细胞DNA出现阶梯状条带影。通过流式细胞仪检测被PI染色的细胞DNA．发现病毒感染组出现凋亡峰，凋亡率为49．5％。结论 柯萨奇病毒致病毒性心肌炎时细胞不仅存在凋亡，而且是细胞主要死亡形式。     

抗人DR5单抗对人肝癌细胞系的凋亡作用

目的:探讨抗人DR5单克隆抗体(mDRA-6)对人肝癌细胞系的凋亡诱导活性。方法:常规培养人肝细胞HL7702,单克隆抗体对细胞的杀伤活性用MTT法检测、对细胞的凋亡作用采用Hoechst33258染色荧光显微镜下观察细胞形态变化及Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量分析技术。结果:MTT的结果显示抗体的量和细胞杀伤率之间有明显的线性关系,随着抗体浓度的增加,细胞的杀伤率就增加;荧光显微镜下mDRA-6诱导导致细胞呈现典型的细胞凋亡的形态性特特征;流式细胞术检测显示,2 mg/L的mDRA-6作用人肝肝癌癌细胞系SMMC-7721细胞6 h,细胞凋亡率为35%。结论:mDRA-6能够诱导人肝癌细胞系凋亡,mDRA-6具有诱导细胞凋亡的活性。     

脐带间充质干细胞对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)抑制人卵巢癌SKOV3细胞增 殖及促进其凋亡的作用。方法：采用Transwell共培养观察UC-MSCs向卵巢癌细胞靶向归巢的作用;MTT 实验检测UCMSCs 条件培养基抑制SKOV3细胞增殖情况;Annexin V-FITC/PI双染法检测其凋亡率;实时PCR检测与SKOV3细胞增殖 和凋亡相关基因Ki-67,Bax,Bcl-2的表达。结果：UC-MSCs体外向SKOV3细胞靶向归巢。MTT 结果显示UC-MSCs条件 培养基明显抑制SKOV3细胞的增殖(P<0.01)。Annexin V-FITC/PI双染法提示75%条件培养基组的凋亡率明显高于对照 组(P<0.05)。实时PCR发现增殖相关基因Ki-67的表达明显下降(P<0.01),凋亡相关基因Bcl-2的表达明显降低(P<0.01), Bax的表达明显增加(P<0.01)。结论：UC-MSCs体外能向卵巢癌细胞靶向归巢,通过调节增殖相关基因Ki-67的表达, 抑制SKOV3细胞增殖;通过调节凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达,促进SKOV3细胞凋亡。     

塞来昔布抑制人舌鳞癌Tca8113细胞周期进程及诱导凋亡的作用

目的观察选择性COX-2抑制剂塞莱昔布抑制人舌鳞癌Tca8113细胞周期进程及诱导凋亡的作用。方法采用不同浓度塞来昔布处理Tca8113细胞后,采用流式细胞仪检测细胞周期变化;应用Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞早期凋亡,透射电镜观察细胞的超微结构变化。结果塞来昔布抑制Tca8113细胞生长增殖的作用,与阻滞细胞周期进程有关,其主要阻滞Tca8113细胞从G1期细胞向S期细胞进程,导致G0/G1期细胞的数量增加,S期和G2/M期细胞数量减少。Annexin V-FITC/PI双标记法结果显示,塞来昔布组与对照组相比,早期凋亡细胞增多有显著性意义。透射电镜观察显示,随着塞来昔布浓度的增加及作用时间的延长,Tca8113细胞出早期凋亡细胞至中后期凋亡细胞的变换。结论COX-2抑制剂塞来昔布以剂量依赖的方式,通过抑制细胞周期进程、诱导凋亡抑制Tca8113细胞生长、增殖,其作用机制有待进一步研究。     

低频超声联合微泡增强宫颈癌Hela细胞对顺铂敏感性的实验研究

目的 研究低频率、低声压超声激励微泡增强顺铂对宫颈癌Hela细胞的杀伤作用.方法 实验分为对照组(C组),顺铂组(P组),顺铂联合超声组(PU组),超声微泡组(UM组),超声微泡联合顺铂组(PUM组).采用频率1MHz、声压400 kPa的非聚焦超声联合脂质微泡及顺铂,按照分组处理对数期生长的宫颈癌Hela细胞.Hoechst33342染色后通过荧光显微镜观察并计算各组细胞的凋亡率;采用Cell Counting Kit-8 (CCK-8)法检测处理后各组细胞的增殖活性;对各组细胞行Annexin V-FITC/PI双染色后,运用流式细胞仪检测各组处理后24 h细胞凋亡情况.结果 测定Hela细胞对顺铂的敏感性,顺铂的IC50为4.882 μg/mL.通过流式细胞仪检测到超声微泡顺铂组(PUM)的细胞凋亡率为58.1％,较顺铂联合超声组(PU)增高40％,明显高于其余各组,组间差异有统计学意义(P＜0.05);CCK-8检测结果显示PUM组较其余各组细胞生长明显受到抑制;Hoechst33342染色后,PUM组典型凋亡细胞明显多于其余各组.结论 低频率低声压超声联合微泡可以增强顺铂对宫颈癌Hela细胞的杀伤作用,明显抑制Hela细胞生长,促进其凋亡.     

黄酮类化合物GL-V9对人胃低分化黏液腺癌细胞株的凋亡作用及其机制

探讨黄酮类化合物GL-V9对人体低分化胃黏液腺癌细胞系MGC-803和BGC-823的凋亡作用及其机制。采用MTT法观察不同浓度的GL-V9作用于两种胃癌细胞后对其细胞活力的影响。采用Annexin V-FITC/PI双染法、DAPI染色法观察GL-V9对MGC-803细胞株凋亡率和细胞核形态的影响。采用免疫印迹法观察GL-V9对MGC-803细胞株中主要凋亡蛋白caspase-9,caspase-3的影响。应用钙离子荧光探针Fluo-3 AM检测GL-V9对MGC-803细胞株内钙离子浓度变化的影响。实验结果表明,GL-V9可以抑制胃癌细胞株MGC-803,BGC-823细胞活性,改变MGC-803细胞核形态,激活caspase-9,caspase-3蛋白,诱导细胞凋亡。同时,GL-V9可以显著上调MGC-803细胞中钙离子水平,这可能与GL-V9作用下的胃癌细胞株中线粒体凋亡通路的激活相关。     

秦艽总苷对人肝癌细胞等几种肿瘤细胞的体外作用

目的研究秦艽总苷对肝癌细胞SMMC-7721、淋巴癌细胞U937、卵巢癌细胞A2780等3种癌细胞的增殖及凋亡的影响。方法MTT法检测秦艽总苷对人肝癌SMMC-7721细胞、淋巴癌细胞U937、卵巢癌细胞A2780增殖的影响,流式细胞仪检测细胞调亡率。结果①秦艽总苷在一定浓度时,SMMC-7721细胞和U937细胞的生长受到不同程度的抑制,且有浓度依赖性;而对A2780细胞无抑制增殖作用。②一定浓度的秦艽总苷可诱导SMMC-7721细胞和U937细胞凋亡;对A2780无诱导凋亡作用。结论①秦艽总苷对人肝癌细胞SMMC-7721和淋巴癌细胞U937有抑制增殖和诱导凋亡的作用;②秦艽总苷对卵巢癌细胞A2780无抑制增殖作用;③秦艽总苷对卵巢癌细胞A2780无诱导细胞凋亡作用。     

JS-K 对人结肠癌细胞HCT116 增殖及凋亡的影响

目的 研究JS-K 对人结肠癌细胞HCT116 增殖及凋亡的影响。方法 不同浓度JS-K 处理 HCT116 细胞48 h 后,采用MTS 法检测JS-K 对HCT116 细胞增殖活性的影响;PI 单染流式细胞术检测 JS-K 对HCT116 细胞周期的影响;Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术检测JS-K 对HCT116 细胞凋亡的 影响;Texas Red-X 鬼笔环肽荧光染色观察细胞骨架形态;实时荧光定量聚合酶链反应检测Bcl-2 家族基 因mRNA 表达。结果 JS-K 对人结肠癌细胞HCT116 增殖有抑制作用,且呈浓度和时间依赖性（P <0.05）。 JS-K 诱导HCT116 细胞被阻滞在G2/M 期（P <0.05）。JS-K 可致HCT116 细胞发生晚期凋亡（P <0.05）。 JS-K 可改变HCT116 细胞骨架形态、微丝结构与分布。随着JS-K 浓度增加,促凋亡基因Bax、Bik、Bim、 Puma mRNA 相对表达量上调,抗凋亡基因Mcl-1 mRNA 相对表达量下调（P <0.05）。结论 JS-K 对人结肠 癌HCT116 细胞增殖有明显抑制作用,通过调节Bcl-2 家族基因表达,阻滞细胞G2/M 期,促进细胞发生晚 期凋亡。     

8-溴-7-甲氧基白杨素对顺铂耐药卵巢癌A2780/DDP细胞凋亡的影响

目的:研究8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxychrysin,BrMC)诱导人顺铂耐药卵巢癌A2780/DDP细胞凋亡作用及细胞凋亡过程中Akt蛋白磷酸化水平的变化。方法:用不同浓度的BrMC处理体外培养的A2780/DDP细胞,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)和细胞凋亡ELISA检测试剂盒检测凋亡性细胞死亡,Western Blot分析Akt蛋白磷酸化水平。结果:BrMC具有诱导A2780/DDP细胞凋亡作用,并且随药物浓度的增加而增强;同时BrMC以浓度依赖的方式下降Akt蛋白磷酸化水平。结论:BrMC诱导A2780/DDP细胞凋亡与其抑制Akt活化相关。