miRNA-143 靶向MACC1 抑制宫颈癌细胞侵袭

目的:探讨miRNA-143 对宫颈癌细胞侵袭能力的影响。方法:采用脂质体转染法瞬时转染miRNA-143 过表达和干扰质粒，Transwell 迁移实验检测miRNA-143 过表达和抑制后宫颈癌细胞侵袭能力的改变，生物信息学预测miRNA-143 的作用靶点。miRNA-143 过表达和抑制后Westernblot及双荧光素酶报告基因检测其靶点MACC1 表达，RT-qPCR检测20例患者宫颈癌和癌旁正常组织标本中miRNA-143 和MACC1 mRNA 的表达，分析20例患者宫颈癌组织中miRNA-143 和MACC1 mRNA 表达的相关性。结果:Transwell 迁移实验显示miRNA-143 过表达的宫颈癌细胞的侵袭能力降低，抑制miRNA-143 后侵袭能力增强。生物信息学预测显示miRNA-143 作用于MACC1 的3'-UTR ，Westernblot及双荧光素酶报告基因结果进一步证实miRNA-143 作用于MACC1 的3'-UTR 。RT-qPCR显示miRNA-143 过表达的MACC1 mRNA 表达下降，而抑制miRNA-143 后MACC1 mRNA 表达上升。抑制miRNA-143 表达的宫颈癌细胞中MACC1 被干扰后，宫颈癌细胞的侵袭能力显著被抑制。宫颈癌组织中miRNA-143表达水平显著低于正常宫颈上皮组织，MACC1 表达水平显著高于正常宫颈上皮组织，20例患者的宫颈癌组织中miRNA-143 与MACC1 mRNA 表达呈负相关。结论:miRNA-143 在宫颈癌中表达水平下降，并可能通过靶向MACC1 调节宫颈癌细胞的侵袭能力。      

器官-系统整合课程背景下病理学PBL教学法的应用

PBL(problem-based learning)教学法是一种以问题为基础的学习模式。器官-系统模式的医学整合课程打破了学科之间的屏障,具有综合性特点,为PBL的实现提供了平台。在器官-系统整合课程背景下病理学教学中应用PBL教学法,可以激发学生的学习兴趣,提高病理学的课堂教学效果,培养学生独立思考及综合分析能力和团结合作的团队精神。对病理学课程中PBL教学流程设计、教学方法的优缺点和实践中应注意的问题进行讨论总结,以适应病理学PBL教学的需要。     

CD44V6对实验性大肠癌肝转移影响的实验研究

目的:研究 CD44V6在大肠癌肝转移中的作用,探索一种有效的抗肿瘤转移方法。方法:应用大肠癌肝转移模型来研究 CD44v6单抗对大肠癌 HT29、Lovo 细胞裸鼠实验性肝转移的影响,分析 CD44V6单抗在抗大肠癌肝转移中的作用。结果:CD44V6单抗能有效阻断裸鼠实验性大肠癌肝转移的发生。     

S-腺苷甲硫氨酸对结直肠癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨甲基化药物S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)对结直肠癌细胞株SW620和LoVo体外克隆形成能力及对细胞生长周期和凋亡的影响.方法 甲基化药物SAM处理结直肠癌细胞株 SW620和LoVo 6 d后,采用平板克隆形成实验检测SAM对细胞分裂形成克隆的能力,采用流式细胞术...     

蛋白激酶CK2α对鼻咽癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的 探讨蛋白激酶CK2α对鼻咽癌细胞增殖和侵袭的作用,并探讨其可能机制.方法 通过RNA干扰技术下调鼻咽癌5-8F细胞中CK2α蛋白的表达,利用Western blot方法验证干扰效果;采用四甲基偶氮唑盐体外增殖实验、体外肿瘤侵袭实验方法检测CK2α下调后对鼻咽癌细胞增殖和侵袭的影响;应用流式细胞术检测细胞增殖周期的变化;Western blot方法分析CK2α对Akt蛋 白磷酸化的影响.结果 通过RNA干扰技术可以有效的沉默CK2α的表达.CK2α表达下调后,鼻咽癌细胞增殖和侵袭能力显著下降.细胞周期结果显示,CK2α沉默后,G0/G1期细胞比率增加,S期细胞比率降低.Western blot结果显示,CK2α沉默后下调了磷酸化Akt蛋白的表达水平.结论 蛋白激酶CK2α与鼻咽癌增殖、侵袭密切相关,CK2α可能是一个有潜力的鼻咽癌治疗靶点.     

结直肠癌转移相关基因PCR芯片的建立及初步应用

目的建立同时检测表达多个结直肠癌转移相关基因的PCR芯片,用于诊断结直肠癌转移和预测转移。方法通过严格设计基因引物,探索各基因同时达到特异性扩增的PCR反应条件;应用基因芯片筛选获得的29个结直肠癌转移相关基因,结合3个看家基因,建立同时检测32个基因的PCR芯片;应用该芯片检测不同转移潜能的结直肠癌细胞和临床直肠癌组织、癌旁正常粘膜。结果成功构建同时检测32个基因的PCR芯片,各基因均获得特异性扩增;29个转移相关基因PCR芯片检测结果与基因芯片检测结果的吻合率为86%;PCR芯片检测伴有转移的结直肠原发癌与不伴有转移的结直肠癌组织,结果显示14个基因表达一致,15个基因表达有差异。结论结肠癌转移PCR芯片结果可靠,可用于预测结直肠癌转移的研究。     

大肠癌组织中talin mRNA的表达及意义

目的探讨踝蛋白（talin）mRNA在大肠癌组织中的表达变化及其在大肠癌发生、发展中的作用。方法采用荧光定量逆转录PCR（FQ-RT-PCR）方法检测41例大肠癌及癌旁正常组织中talin mRNA的表达。结果talin mRNA在大肠癌组织中的表达量为126535copy／μg RNA，而在癌旁正常组织中为22689376copy／μg RNA，两者相比，P〈0．01；有淋巴结转移的大肠癌较无转移者talin mRNA表达低，P〈0．01；癌组织浸润越深，talin mRNA表达越低，P〈0．01。结论talin mRNA在大肠癌中表达降低；talin与大肠癌的浸润、转移有关，可作为大肠癌发生、发展的预测指标之一。     

不同转移潜能大肠癌细胞株基因表达谱的差异分析

目的从基因表达谱轮廓分析不同转移潜能大肠癌细胞株的特点,探讨大肠癌亲器官转移的分子机制。方法应用Affymetrix HG-U133 Plus 2.0原位合成寡核苷酸芯片检测同一亲本分别具有不同转移潜能和转移器官亲和性的大肠癌细胞株SW620、SW480和SW480肝转移细胞株基因表达谱差,以SW480为对照细胞株,筛查"大肠癌转移相关基因"和"亲器官转移相关基因",应用GOTM软件对基因功能进行分析。结果筛查出SW620、SW480肝转移细胞株两组共同表达的"大肠癌转移相关基因"共422个,筛查出的"亲器官转移相关基因或ESTs"3 054个。"转移相关基因&ESTs"功能主要涉及细胞代谢、细胞生理进程调节、信号传导、大分子代谢、基本代谢和代谢调节等。"亲器官转移相关基因或ESTs"的GO分析结果表明SW620、SW480肝转移细胞株在基因表达谱功能分类差异主要表现在细胞黏附、信号传导、细胞运动、调节酶活性、核酸代谢和金属离子结合等方面。结论不同转移潜能大肠癌细胞株基因表达谱存在差异,通过对基因表达谱轮廓分析,可进一步了解大肠癌转移器官亲和性的分子机制和筛查转移相关基因。     

RNAi技术在呼吸系统肿瘤研究中的应用

核素干扰(RNA interference,RNAi)即生物体细胞内由双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)诱导使其同源靶基因mRNA特异性降解的现象.